Proceda a realizar la prueba de exposición. Una vez que se hayan recolectado suficientes células para lo mismo, golpee suavemente la pared del matraz que contiene las células para distribuirlas uniformemente y transfiera las suspensiones celulares a un tubo de centrífuga de 15 mililitros. Diluir la suspensión celular con DMEM en combinación con citometría para lograr la densidad celular deseada.
Golpee suavemente la pared del matraz para asegurar una distribución uniforme de las células. A continuación, agregue 100 microlitros de PBS a los pocillos exteriores de la placa de 96 pocillos para evitar que el medio de cultivo se evapore debido al efecto de borde. Agregue 100 microlitros de la suspensión celular a los pocillos izquierdos de la placa y déjela reposar durante 10 minutos.
Incubar las células a 37 grados centígrados con 5% de dióxido de carbono durante 48 horas. Después de retirar la placa de 96 pocillos de la incubadora, deseche el medio de cultivo. Para establecer un grupo de metabolitos de plaguicidas, agregue 100 microlitros de las diferentes soluciones preparadas de exposición a residuos de plaguicidas a cada pocillo designado.
Luego agregue 100 microlitros de las diferentes soluciones de exposición a plaguicidas originales preparadas a cada pocillo designado para compararlo y establecer un grupo de plaguicidas principales. Para configurar un control en blanco, agregue 100 microlitros de DMEM que contengan 0.3% de DMSO a cada pocillo designado. Incubar las células a 37 grados centígrados con 5% de dióxido de carbono durante 24 horas.
