Para empezar, somete las plantas a diversas condiciones de estrés como sequía, anegamiento y calor. Transfiera las plantas desde su lugar de cultivo al sistema de fenotipado, conectado a un área de amortiguación de crecimiento para la carga manual de plantas en el sistema. En la plataforma de fenotipado, coloque las macetas en los discos que se mueven automáticamente en una cinta transportadora a intervalos determinados hasta el sensor de imagen.
Etiquete cada planta o bandeja con una identificación única para asegurarse de que los datos medidos se asignen correctamente a la planta respectiva durante todo el experimento. Para optimizar el protocolo de fenotipado utilizando múltiples sensores de imagen, vaya al programador de pantallas de plantas y cree nuevos experimentos. Haga clic en agregar acción y, a continuación, seleccione agregar elemento de protocolo seguido de carga de la bandeja.
Establezca la luz de adaptación, seleccione la medida y haga clic en agregar receta. Seleccione el sensor de imagen requerido y configure los ajustes para medir los parámetros fisiológicos y morfológicos de las plantas. En la plataforma de fenotipado, asegúrese de que las plantas ingresen al sistema a través de un túnel de adaptación.
Primero capture la altura de la planta, luego ajuste la altura de cada sensor en función de una distancia de trabajo fija. Realice la primera ronda de mediciones de fluorescencia de clorofila en plantas adaptadas a la luz utilizando un protocolo de luz corto para diferenciar las respuestas de las plantas a diferentes tratamientos. A continuación, realice imágenes térmicas para medir los parámetros fisiológicos bajo tratamientos de estrés térmico.
En la segunda ronda, mida las respuestas más lentas, como el RGB estructural y las imágenes hiperespectrales. Para la etapa de pesaje y riego, defina el peso de referencia para cada planta, incluido el peso del disco, el inserto ubicado en la cinta transportadora, los soportes azules, las esteras azules, la maceta, la tierra y la biomasa vegetal para permitir el riego y el pesaje automatizados para el tratamiento dado. Utilice el software analizador de datos para la extracción automática, la sustracción de fondo y la segmentación de máscaras de plantas de la tubería de procesamiento de imágenes.
Los rasgos morfológicos, incluyendo el volumen de plantas y la tasa de crecimiento relativo de las plantas de control, aumentaron continuamente. Sin embargo, bajo el calor, el calor combinado, la sequía y el anegamiento, este aumento en el volumen de plantas se redujo claramente. Como las plantas son muy susceptibles al estrés por anegamiento, se produjo una disminución pronunciada en la tasa de crecimiento relativo.
Los rasgos fisiológicos de los datos de fluorescencia de la clorofila mostraron que el anegamiento estaba afectando negativamente la eficiencia fotosintética en cero a cinco y de seis a 10 días de fenotipado. Pero se observó una respuesta de recuperación en 11 a 15 días de fenotipado. Las imágenes térmicas y las plantas anegadas mostraron que la temperatura del delta fue alta en comparación con otros tratamientos en cero a cinco y seis a 10 días de fenotipado, lo que indica una temperatura foliar más alta, pero una ligera disminución a los 11 a 15 días de fenotipado reflejando la fase de recuperación.