Para comenzar, transfiera el ratón anestesiado preparado al área quirúrgica y aísle el sitio quirúrgico con un paño adhesivo. Bajo anestesia profunda, use una hoja de bisturí para hacer una incisión ventral en la línea media en la piel. A continuación, utilice unas tijeras para separar la piel de la capa muscular.
Con la ayuda de una hoja de bisturí, haz una incisión más pequeña en la capa muscular. Una vez visualizados los intestinos, se utilizan pinzas romas para localizar el ciego y exteriorizarlo. A continuación, ligar el ciego con una sutura estéril absorbible de poliglactina 5/0.
Con una aguja de calibre 27, perfore el segun de un extremo a otro permitiendo que el contenido fecal se filtre. Apriete suavemente el segun para exteriorizar el contenido fecal con precaución. A continuación, reubique el secum en la cavidad abdominal y cierre la capa muscular con una sutura estéril absorbible 5/0.
A continuación, utilice una sutura de nailon no absorbible 5/0 para cerrar la piel. Después de eso, proporcione solución salina estéril a través de una inyección subcutánea en la espalda del animal. Después de cuatro días de recuperación de CLP, o cirugía simulada, use cinta de espuma para sujetar la cola de ratón anestesiada a una cadena corta de metal.
Luego sujete la cadena de metal a un gancho conectado a una barra transversal a lo largo del centro de la jaula. Coloque una segunda barra pequeña que pueda moverse a lo largo de la barra transversal para permitir que el animal tenga una mayor capacidad de movimiento. A continuación, ajuste la altura de las extremidades suspendidas para evitar que las patas entren en contacto con los gránulos de comida.
Asegúrese de que los animales puedan moverse a través de sus extremidades delanteras utilizando la rejilla metálica en el suelo de la jaula. Los animales CLP demostraron un aumento de las poblaciones de células inmunitarias en su lavado peritoneal en comparación con los animales simulados. CLP y HLS conducen a aproximadamente el 11,8% de la pérdida de masa corporal.
Se observó una marcada disminución en la masa del sóleo cuando HLS se superpuso con CLP, lo que indica que las fibras más pequeñas comprenden una parte importante de la sección muscular. En comparación con los animales control, CLP-HLS causó un deterioro significativo tanto en las fuerzas absolutas como en las máximas del sóleo.
