Para empezar, fije las extremidades del animal anestesiado con cinta adhesiva. Use una maquinilla de afeitar eléctrica para afeitar el pelaje de la parte inferior del abdomen y alrededor del meato uretral. Bajo el microscopio quirúrgico, use unas tijeras rectas y romas de Metzenbaum para crear una incisión de uno a dos centímetros en la línea media de la piel pélvica abdominal.
Incidir la fascia y los músculos de la línea media para exponer la vejiga a través de la herida incisional. Una vez que la vejiga sea visible a través de la herida, retraiga los órganos o tejidos circundantes, según sea necesario, para obtener una visión clara del campo quirúrgico. Luego, agarre la cúpula de la vejiga y use una sutura de monofilamento no absorbible 5-0 con una aguja de punta cónica para colocar una cuerda de bolso.
Con unas microtijeras, crea una pequeña cistostomía dentro del cordón del bolso y haz un agujero hasta que salga la orina. Ahora, agarre el extremo de la punta redonda del catéter e insértelo a través del orificio. Una vez que la punta del tubo haya pasado a través del orificio, sutura el hilo de la bolsa alrededor del tubo.
Después de eso, tire suavemente del tubo hacia afuera hasta que la punta se sienta debajo de la sutura. Luego, infunda lentamente un mililitro de solución salina desde el otro extremo del tubo para distender la vejiga y verifique si hay fugas alrededor del catéter. Una vez que la solución salina salga de la uretra, retire la solución salina para descomprimir la vejiga.
Use tijeras quirúrgicas para extender la incisión abdominal hasta el suelo pélvico. En línea con la vejiga, mueva los músculos y las membranas a los canales pudendos y localice la uretra y el músculo del esfínter externo. Con la aguja que contiene el electrodo, perfore la piel bilateralmente a un centímetro del meato uretral.
Luego, agarre con cuidado la punta del gancho con pinzas y retire suavemente la aguja de la piel. Con la punta del electrodo, enganche con cuidado el músculo del esfínter uretral externo bilateralmente. Utilice el monofilamento no absorbible 3-0 para suturar los músculos y la piel de la pelvis y el abdomen.
Para fijar los electrodos en su lugar, aplique una capa delgada de pegamento de cianoacrilato en la piel por donde salen los electrodos. A continuación, utilice una micropipeta de 0,5 a 10 microlitros para extraer el líquido acelerador y secar el pegamento. A continuación, añada el líquido acelerador para garantizar una reacción adhesiva adecuada.
Prepare un bote de pesaje de poliestireno invertido, de 4,5 centímetros de largo, ancho y profundidad. Córtalo en forma de triángulo con una base de cuatro centímetros para colocar el meato uretral del ratón en este espacio. Coloque el molde de base desechable debajo del espacio para recoger la orina.
Luego, vuelva a colocar el mouse en una posición prona y muévalo con cuidado sobre una placa hecha a medida equipada con una máscara de gas. Asegúrese de que el meato uretral esté colocado correctamente dentro de la ranura. Sujete suavemente la cabeza y las extremidades del ratón con cinta adhesiva y coloque la placa en una almohadilla térmica hasta que el ratón recupere la conciencia completa.
