Preparación de tiras de inmunoensayo de flujo lateral, operación de ensayo y su evaluación cuantitativa

Para comenzar, prepare la línea de prueba y la solución de recubrimiento de la línea de control. Diluir el anticuerpo de captura de proteína C reactiva y la inmunoglobulina G anti-conejo de cabra con tampón de fosfato. A continuación, coloque correctamente la placa de cloruro de polivinilo y retire el papel protector ubicado a 25 milímetros del borde de la placa.

Alinee y adhiera la membrana de nitrocelulosa a lo largo del borde inferior del papel protector restante a la placa de cloruro de polivinilo. Dispense la línea de prueba y las soluciones de recubrimiento de la línea de control sobre la membrana de nitrocelulosa, asegurándose de que esté colocada a 20 milímetros de distancia del borde superior, formando una línea de prueba. Para el secado, coloque la membrana de nitrocelulosa en condiciones con una humedad inferior al 30% y un rango de temperatura de 18 a 26 grados centígrados.

Para preparar la almohadilla conjugada, sumerja la almohadilla conjugada en la solución de tratamiento de la almohadilla conjugada, luego coloque la almohadilla conjugada empapada en un horno de secado para el tratamiento de secado durante la noche. Diluya la solución conjugada de anticuerpo QD nano bead preparada con la solución conservante y dispense en la almohadilla conjugada. Para la preparación de la almohadilla de muestras.

Sumerja la almohadilla de muestra en la solución de tratamiento de la almohadilla de muestra. A continuación, coloque la almohadilla de muestra empapada en un horno de secado a 45 grados centígrados y séquela durante 24 horas. Sucesivamente, coloque el papel absorbente, la almohadilla conjugada y la almohadilla de muestra en la placa de cloruro de polivinilo con la membrana de nitrocelulosa.

Pipetear 10 microlitros de muestra de plasma o solución de calibrador en un mililitro de tampón A PBS que contiene 0,1% entre 20. A continuación, transfiera 100 microlitros de la muestra diluida preparada a la almohadilla de muestra de la tira reactiva. Después de una ejecución de 15 minutos, observe las señales fluorescentes de la línea de prueba y la línea de control bajo la exposición a la luz ultravioleta para obtener resultados cualitativos.

Inserte la tarjeta de tiras en un lector de ensayo de flujo lateral fluorescente para obtener las intensidades de fluorescencia para el análisis cuantitativo.