Para empezar, use equipo de protección personal adecuado. Antes del procedimiento, pesa a la rata para determinar la dosis correcta para los medicamentos basados en el peso y la configuración del ventilador. Después de anestesiar a la rata, colócala en posición prona.
Para confirmar la profundidad de la anestesia, use fórceps para presionar suavemente la almohadilla del pie de la extremidad trasera y verifique la ausencia de una respuesta de retirada. Ahora aplica un ungüento a base de petróleo aprobado por un veterinario en los ojos de la rata para prevenir la sequedad. Observe la frecuencia respiratoria y evalúe las respuestas de abstinencia como se muestra anteriormente.
Luego, con una tijera, afeita la extremidad trasera de la rata. Use cinta adhesiva para colocar la extremidad con el tobillo fijo a 90 grados de dorsiflexión, la rodilla en extensión y la cadera en abducción. A continuación, inserte un par de agujas monopolares aisladas de calibre 28 para estimular el nervio ciático con el cátodo colocado en la región de la extremidad posterior proximal y el ánodo colocado más proximalmente dentro del tejido subcutáneo, superponiendo el sacro.
A continuación, coloque un electrodo de tierra desechable en la extremidad posterior contralateral o en la cola. Inserte con cuidado un electrodo de aguja de autoclave de 25 milímetros y calibre 27, diseñado específicamente para la electromiografía de fibra única en el músculo gastrocnemio derecho. Inserte el electrodo de aguja de electromiografía de una sola fibra en paralelo con las fibras musculares del gastrocnemio para capturar el potencial de acción de una sola fibra.
Aplique estimulación de corriente constante al nervio ciático derecho a una frecuencia de 10 hercios, utilizando un rango de intensidad de 0,3 a 10 miliamperios y una duración del pulso de 0,1 milisegundos. Ajuste la ganancia de 200 microvoltios a 1000 microvoltios por división para mejorar la visualización del potencial. Configure la velocidad de barrido para que sea de 500 microsegundos por división.
Para clasificar una respuesta como SFAP, debe exhibir un tiempo de aumento inferior a 500 microsegundos, una amplitud mínima de 200 microvoltios y demostrar un comportamiento total o nulo. Calcule la fluctuación de fase o la variabilidad de la latencia SFAP entre descargas consecutivas después de al menos 50 estimulaciones utilizando la ecuación dada. Evaluar y cuantificar el bloqueo.
Después de evaluar 10 sinapsis de cada animal, calcule la fluctuación y determine los valores promedio por animal. Al registrar potenciales que muestran un bloqueo intermitente, aumente la intensidad del estímulo para confirmar que el fracaso del SFAP no se debe a una estimulación submáxima. Durante la administración de rocuronio, la EMG de fibra única mostró una mayor variabilidad de la transmisión y el bloqueo de la unión neuromuscular en comparación con los individuos sanos.
