Para empezar, obtenga alimentos deficientes en ácido fólico o colina de fabricantes comerciales de alimentos para roedores. La dieta especial contiene 0,3 miligramos por kilogramo de ácido fólico, o 300 miligramos por kilogramo de colina por tartrato. Mantenga a un ratón hembra con esta dieta especial durante cuatro a seis semanas.
Más tarde, cuando las crías se desteten de la madre, colóquelas en una dieta deficiente en ácido fólico o colina, así como en una dieta de control. Después de sacrificar a las crías, recoja la muestra de sangre y el tejido hepático para su análisis bioquímico. Agregue la sangre a un tubo recubierto de EDTA y centrifugue el tubo para aislar el plasma sanguíneo y determinar la concentración de metabolitos de un carbono.
Luego, transfiera las muestras de tejido hepático cortado a un tubo de almacenamiento criogénico para congelarlas rápidamente. Los pesos basales y semanales de los ratones hembra con dietas de control, colina o deficientes en ácido fólico durante las cuatro semanas anteriores al apareamiento no mostraron diferencias significativas. Las concentraciones maternas de metabolitos de un carbono fueron ligeramente bajas en el plasma de los ratones sometidos a una dieta deficiente en ácido fólico en comparación con los ratones de control.