Para empezar, prepare la mesa quirúrgica con el instrumental estéril adecuado. Después de realizar la antisepsia de campo quirúrgico en el animal anestesiado, coloque el paño quirúrgico sobre el penúltimo par de glándulas mamarias inguinales. Con unas tijeras, cree una abertura rectangular en un paño quirúrgico y coloque cuatro pinzas traseras para asegurar el paño quirúrgico sobre la piel del animal.
Con un bisturí, haz una incisión de aproximadamente 10 centímetros de longitud. Lograr la hemostasia de los vasos subcutáneos con pinzas hemostáticas y sutura reabsorbible tamaño dos. Con unas tijeras de punta fina o con los dedos, diseccione el tejido subcutáneo, profundizando la incisión para llegar a la línea alba en la musculatura abdominal.
Con las pinzas Alice, agarre y levante la musculatura para hacer una incisión punzante en la línea alba con un bisturí. Inserte el dedo índice en la incisión para evaluar la presencia de adherencias. Extienda la incisión sobre la línea alba caudal y cranealmente, evitando lesiones a otros órganos y estructuras subyacentes.
Inserte una mano en la cavidad abdominal para localizar y exteriorizar los ovarios. Si se encuentra uno de los cuernos uterinos, sígalo suavemente hasta llegar a la punta del cuerno uterino y al ovario ipsilateral. Después de localizar el ovario, tire suavemente de él y expóngalo con cuidado.
Evaluar la presencia de folículos preovulatorios, cuerpos lúteos hemorrágicos, cuerpos lúteos cíclicos y cuerpos albicans para evaluar si la sincronización de las primerizas es la esperada. Retire suavemente las fimbrias de la trompa uterina que cubre el ovario y desvíe su mucosa para localizar el ósteo de la trompa uterina. A continuación, introduzca con cuidado un catéter Tomcat que contenga los embriones en el ósteo de las fimbrias hasta llegar a la ampolla de la trompa uterina.
Conecte una jeringa de un mililitro al catéter Tomcat para empujar el embrión que contiene líquido hacia la trompa uterina. Cubra el ovario con las fimbrias y devuélvalo a la cavidad abdominal. Si es difícil identificar el osteum, use una aguja de sutura de cuerpo redondo para crear una bolsa en las ampollas del oviducto.
A continuación, inserte el catéter Tomcat que contiene los embriones. A continuación, reposicione las estructuras dentro de la cavidad abdominal. Para evitar adherencias, añadir un litro de solución salina o de lactato de ringer, templada a 39 grados centígrados, en la cavidad abdominal.
A continuación, sutura la musculatura abdominal con sutura reabsorbible tamaño dos en puntos interrumpidos en X. Cerrar la piel con adhesivo de cianoacrilato de etilo. Después de limpiar la herida quirúrgica, aplique rapamicina o ungüento de Pearson y cubra el área con una gasa.
Por último, aplique el adhesivo quirúrgico. Nueve primerizas se sometieron a cirugía con un promedio de 185 embriones clonados transferidos por primeriza, con un total de 1.664 embriones transferidos bilateralmente. Ningún animal mostró signos de dolor intenso después de la cirugía, con una puntuación media de dolor que osciló entre 0,33 y 4,67 en la escala de dolor de cero a 18, realizada durante los tres días postoperatorios para cada una de las primerizas.