Un agradecimiento especial a Cori Sanders en los diseños de Iroc para la preparación de las ilustraciones y Kris Reddi en la UCLA para el establecimiento de cultivo de las muestras para las figuras. Los fondos para este proyecto fue proporcionado por el HHMI (HHMI Grant N º 52.006.944).

<ol>
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No tengo nada que revelar.

La técnica aséptica se refiere a un conjunto de procedimientos de rutina que se practican para evitar soluciones estériles y las culturas se contamine por microorganismos no deseados en el laboratorio. Tales técnicas son esenciales para los experimentos que requieren células en crecimiento. Aunque un entorno de trabajo que es completamente estéril no puede lograrse, procedimientos tales como la desinfección de superficies de laboratorio, la creación de un campo estéril utilizando un mechero Bunsen, limitar la exposición de los cultivos no niveladas y medios para el aire, esterilización de materiales tales como botellas, tubos y pipetas de vidrio, y evitar el contacto de los instrumentos esterilizados con superficies no estériles reduce la posibilidad de contaminar las soluciones y culturas en un experimento. El objetivo es que estos procedimientos de precaución para convertirse en una segunda naturaleza, lo que viene con la formación y la práctica mientras se trabaja en un laboratorio. Las transferencias de volumen con soluciones estériles y culturas que utilizan instrumentos como pipetas serológicas y de microropipettors son uno de los muchos tipos de técnicas de rutina que se practican en un laboratorio. Diferentes aplicaciones experimentales exigen instrumentos capaces de transferir volúmenes distintos, sin embargo, precisos y exactos,. Pipetas serológicas se utilizan en los laboratorios de microbiología para preparar cultivos celulares que requieren la preparación de medios con volúmenes mililitro, mientras que Micropipetas son esenciales para experimentos de biología molecular que necesitan solamente cantidades microlitros de soluciones. Cuando una técnica aséptica se practica con estos instrumentos, se minimiza la contaminación durante la transferencia de volumen sin importar la cantidad de líquido o el tipo de experimento. Aunque no se discute en el presente Protocolo, uno de los medios de otros de uso común para evitar la contaminación es trabajar dentro de una campana de flujo laminar (Figura 10). Este equipo es crítico para el cultivo de tejidos y para experimentos realizados con microorganismos clasificados como BLS-2 o superior. Una campana de flujo laminar contiene un filtro HEPA (alta eficienciapartículas de aire) de filtro que elimina los contaminantes transportados por el aire desde el aire que fluye dentro de la campana al mismo tiempo impidiendo que el aire no filtrado de la sala de la que impregna el espacio de trabajo. Es de destacar que un mechero Bunsen no se puede utilizar dentro de una campana de flujo laminar ya que el calor de la llama interrumpe el flujo de aire esencial para la funcionalidad de la campana. A menudo es útil para comprobar la calidad de su técnica aséptica al realizar experimentos. Para confirmar soluciones y medios de cultivo no se contaminan durante las manipulaciones experimentales, siempre preparar un control negativo. Por ejemplo, si la preparación de los tubos de caldo para el crecimiento de cultivos de bacterias, no inocular un tubo dejando sólo medios estériles. Incubar el medio junto con los tubos inoculados luego inspeccionar tubo sin inocular el control de signos de contaminación, tales como la turbidez del crecimiento de las células no deseadas involuntariamente introducidas en el tubo. Si el tubo de control está contaminado, el tubo experimentals probable están contaminados, así, y el experimento tendrá que ser repetido. Estas medidas cautelares se debe hacer con cada experimento.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del reactivo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios </td></tr><tr><td> LB caldo </td><td> Difco </td><td> 244620 </td><td> Receta disponible también en la referencia 6 </td></tr><tr><td colspan="4"> Tampón TE: </td></tr><tr><td> EDTA disódico dihidrato de la sal </td><td> Sigma </td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-HCl </td><td> Sigma </td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td> Decon Laboratories, Inc. </td><td> 8504 </td><td> Desinfectante </td></tr><tr><td> Etanol </td><td> Fisher Scientific </td><td> A406 </td><td> Para su uso como desinfectante, preparar 70% (v / v) con agua destilada </td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

Los microorganismos están en todas partes - en el aire, el suelo, y el cuerpo humano, así como en las superficies inanimadas, como bancos de laboratorio y teclados de computadoras. La ubicuidad de los microorganismos generan un suministro abundante de posibles contaminantes en un laboratorio. Para asegurar el éxito experimental, el número de contaminantes sobre las superficies del equipo y el trabajo debe ser minimizado. Común entre los muchos experimentos en microbiología son las técnicas que implican la medición y la transferencia de los cultivos que contienen células bacterianas o de partículas virales. Para hacerlo sin ponerse en contacto con superficies no estériles, o la contaminación de los medios de comunicación estériles requiere (1) la preparación de un espacio de trabajo estéril, (2), precisamente, de ajuste y la lectura precisa de los instrumentos para la transferencia de aséptico de líquidos, y (3) correctamente la manipulación de instrumentos, frascos, botellas y culturas tubos dentro de un campo estéril. El aprendizaje de estos procedimientos requiere entrenamiento y práctica. En un primer momento, las acciones deben ser lenta, deliberada y controlada, con el objetivo de ser asépticos para technique para convertirse en una segunda naturaleza, cuando trabajaba en el banco. A continuación les presentamos los pasos a seguir para la medición de volúmenes con pipetas serológicas y Micropipetas dentro de un campo estéril, creado por un mechero Bunsen. Volúmenes desde microlitros (l) a mililitros (ml), dependiendo del instrumento utilizado. Líquidos comúnmente transferidos incluyen caldo estéril o soluciones químicas, así como cultivos de bacterias y las poblaciones de fagos. Siguiendo estos procedimientos, los estudiantes deben ser capaces de: <ul><li> El trabajo en el campo estéril creado por la llama del mechero Bunsen. </li><li> Utilizar pipetas serológicas, sin comprometer la esterilidad del instrumento. </li><li> Aspirar líquidos con pipetas serológicas, precisamente la lectura de volúmenes calibrados alineando el menisco formado por el líquido a las marcas de graduación en la pipeta. </li><li> Mantenga las botellas de cultivo, frascos, tubos y sus respectivas tapas estériles durante la transferencia de líquidos. </li><li> Identificar las diferentes aplicaciones de plástico frente al vidrio de pepita serológicaettes. </li><li> Las limitaciones del Estado de precisión para Micropipetas. </li><li> Precisamente, y establecer con precisión los volúmenes de Micropipetas. </li><li> Sepa cómo utilizar correctamente la primera parada y el segundo en una micropipeta para aspirar y transferir volúmenes correctos. </li></ul>

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Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

Cuando se trabaja en un laboratorio, es imperativo para reducir al mínimo las fuentes de contaminación. La técnica aséptica se refiere a los procedimientos que permiten la transferencia de las culturas y los reactivos, evitando el contacto con superficies no estériles. Pipetas serológicas y Micropipetas se utilizan para medir volúmenes precisos sin comprometer la esterilidad de las soluciones utilizadas en los experimentos.

Técnicas de laboratorio asépticas: Transferencias de volumen con pipetas serológicas y Micropipetas

Microorganisms are everywhere - in the air, soil, and human body as well as on inanimate surfaces like laboratory benches and computer keyboards. The ...

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161.5K vistas.  University of California, Los Angeles. Cuando se trabaja en un laboratorio, es imperativo para reducir al mínimo las fuentes de contaminación. La técnica aséptica se refiere a los procedimientos que permiten la transferencia de las culturas y los reactivos, evitando el contacto con superficies no estériles. Pipetas serológicas y Micropipetas se utilizan para medir volúmenes precisos sin comprometer la esterilidad de las soluciones utilizadas en los experimentos.