The authors would like to acknowledge the work of Annemarie Baars and Jos&#233; Lozeman-van &#8216;t Klooster in performing, assisting and teaching experiments using the mHB set-up.

NOTA: Los experimentos han sido aprobados por el Comité de Experimentación Animal de la Universidad del Centro Médico de Utrecht y la Universidad de Utrecht, Países Bajos. Por otra parte, los experimentos con animales siguieron los Principios de cuidado de los animales de laboratorio y se refieren a las Directrices para el Cuidado y Uso de los Mamíferos en Neurociencia y Comportamiento de Investigación. 25 1. experimental NOTA: El aparato estándar MHB consiste en una caja de PVC gris experimental (100 x 50 x 50 cm) separado de un compartimiento adicional (50 x 50 x 50 cm) en las que los compañeros de grupo del animal experimental se pueden colocar durante el período de pruebas por un proceso transparente, división perforada 1. Si la presencia de compañeros de grupo no es deseado o si los animales alojados individualmente se ponen a prueba, reemplace la partición transparente de una partición hecha de PVC gris (Figura 1;. Consulta Ohl et al (2001) 1). El MHB (with mediciones diferentes) utilizados para las pruebas cognitivas se describe en la sección 5 del protocolo. <ol><li> Coloque el tablero (60 x 20 x 0,5 cm; de PVC gris) en el centro de la caja. NOTA: La tarjeta puede contener 20 cilindros (ᴓ 1,5 cm) 14 tambaleó en dos líneas o 23 cilindros (ᴓ 3 cm) 8 escalonados en tres líneas. </li><li> Divida el área alrededor de la junta por líneas negras en 10 rectángulos (20 x 15 cm) y 2 plazas (20 x 20 cm). </li><li> Coloque una luz de la etapa anterior del tablero para crear un contraste mayor en intensidad de luz entre la junta (que representa un área no protegida comparable con el centro de un campo abierto o en el compartimento de la luz de una prueba de la transición de luz-oscuridad) y la caja (área protegida) a fin de aumentar el carácter aversivo de la placa de 4,8. </li><li> La Casa de los animales en un 12 hr invierte ciclo día-noche (por ejemplo, las luces apagadas a las 7:00 AM y las luces encendidas a las 7:00 PM). NOTA: Sin embargo, el MHB también puedeUtilícese bajo la programación de luz convencional (véase la discusión sobre las posibles deficiencias) 1,6. </li><li> Realice la prueba de comportamiento en la fase más activa de los animales (por ejemplo, de 10:00 am y 2:00 pm) 4,15. </li><li> Mantener un periodo de habituación de 2 semanas después de la llegada de los animales en las instalaciones. Durante este período tienen la misma persona que realiza el experimento conductual manejar los animales cuatro veces a la semana e incluyen todos los procedimientos de manejo que se deben realizar durante las pruebas reales. Manejar los animales exclusivamente durante el tiempo del día cuando los animales serán expuestos a las pruebas más adelante. </li><li> Registre los experimentos para el almacenamiento de datos en el vídeo y con el fin de optimizar los resultados y reducir la variabilidad entre observadores, practicar el scoring de comportamiento mediante una grabación de vídeo de experimentos anteriores 2. Asegúrese de estandarizar todas las acciones y procedimientos ejecutados por el observador. </li></ol> 2. BehaPrueba vioral - Sin la presencia del grupo Mates <ol><li> Realizar las pruebas de comportamiento en la sala de los animales se alojan regularmente (para evitar posibles efectos del traslado a un centro de exámenes) e instalar todo el equipo de prueba antes de la llegada de los animales en las instalaciones (para habituar a los animales a la presencia de los equipos). </li><li> Recoge al animal por la base de la cola de su jaula y directamente colocarlo en el MHB. </li><li> Colocar cada animal en el aparato en la misma esquina frente a la pared (como se indica en la Figura 1). </li><li> Deje que el animal para explorar libremente el MHB por un período de tiempo (a menudo 5 min 1,6,16-18). </li><li> Tienes un observador experimentado puntuación en vivo los parámetros de comportamiento que utilizan el software de puntuación de comportamiento. Utilice los parámetros indicados en la Tabla 1. NOTA: Algunos parámetros de comportamiento (por ejemplo, motorizado y el comportamiento exploratorio) podrían ser calificados automáticamente como por ejemplo, </em&gt; Discutido por Henry et al. (2010) 19 tras necesario un ajuste de la MHB. </li><li> Limpie el aparato con agua del grifo y una toalla de papel después de cada ensayo con el fin de evitar un sesgo basado en señales olfativas. NOTA: Los posibles efectos de pruebas de orden al probar los animales alojados socialmente deben mantenerse en mente 17,20. </li></ol> 3. Pruebas de Comportamiento - en la Presencia del Grupo Mates <ol><li> En el caso de alojamiento en grupo, medir la interacción con el animal experimental y sus compañeros de jaula durante las pruebas. <ol><li> Coloca los compañeros de grupo en el compartimiento de grupo antes de la prueba de que el animal experimental para permitir la habituación (principalmente 10-30 min 1,12). NOTA: Las pruebas en condiciones de estrés social es posible colocando una jaula compañero dominante en el compartimiento del grupo cuando se prueba un individuo socialmente derrotado 13. </li><li> Colocar el animal experimental en el compartimiento de la prueba y deje que se liberaly explorar el MHB como se describe en la sección 2. NOTA: Los posibles efectos de pruebas de orden al probar los animales alojados socialmente deben mantenerse en mente 17,20. </li><li> Tienes un observador experimentado puntuación en vivo los parámetros de comportamiento que utilizan el software de puntuación de comportamiento. Utilice los parámetros indicados en la Tabla 1. </li><li> Limpie el aparato con agua del grifo y una toalla de papel después de cada ensayo con el fin de evitar un sesgo basado en señales olfativas. </li></ol></li></ol> 4. novela objeto de reconocimiento y la Alimentación Consumo de inhibición <ol><li> Familiarizar a los animales con un objeto (por ejemplo un dado o una bola de comida) en su jaula hogar 2 días antes del experimento. </li><li> Coloque el objeto familiarizado en el aparato 2 cm aparte de un objeto novedoso (por ejemplo un perno o comida desconocida) en la esquina a través del punto de partida. </li><li> Mida el tiempo que el animal necesita para acercarse a la novela y familiar objeto / comida. Utilice los parámetros &lt;strong&gt; Tabla 1. </li><li> Limpie el aparato con agua del grifo y una toalla de papel después de cada ensayo con el fin de evitar un sesgo basado en señales olfativas. </li></ol> 5. Prueba Cognitiva <ol><li> Coloque una tabla más pequeña (35 x 22 x 1 cm) con 10 cilindros en el centro de la caja (Figura 1) Para el ensayo ratas 3,22. Reducir el cuadro en tamaño a 50 x 50 cm para el ensayo de los ratones 21 mediante la inserción de una partición hecha de PVC gris. </li><li> Perfumar todos los cilindros con un sabor animales se sienten atraídos por (por ejemplo, vainilla) y cebo todo con una recompensa (por ejemplo, un trozo de almendra, una recompensa muy apetecibles para los ratones y ratas) debajo de una rejilla para que los animales no pueden eliminarlo. </li><li> Cilindros Cue (a menudo tres) con un anillo de color (en contraste con el PVC gris) y los de cebo con una recompensa extraíble (por ejemplo, 0,05 g pedazo de almendras). </li><li> Familiarizar a los animales con el premio a diario en los 2 días antes del experimento ensu jaula hogar, ofreciendo con pinzas y asegurarse de que los animales comen. </li><li> Tienes un observador experimentado puntuación en vivo los parámetros de comportamiento que utilizan el software de puntuación de comportamiento. Medir los parámetros enumerados en la Tabla 2, además de los parámetros de comportamiento mencionadas en la sección 2 (Tabla 1) con la excepción de los parámetros relacionados con la inhibición objetar el reconocimiento o la ingesta de alimentos. </li><li> Etapa 1: Con cada animal, realizar cuatro ensayos todos los días con un intervalo entre ensayos constante (por ejemplo, 30 a 60 min) hasta que una constante de tiempo para terminar un juicio que se alcance (es decir, cuando se han recogido las tres piezas de almendras). </li><li> Etapa 2: Cue y cebo tres cilindros diferentes y colocan los animales en la configuración de cuatro ensayos para probar la capacidad de aprendizaje de reversión. </li><li> Limpie el aparato con agua del grifo y una toalla de papel después de cada ensayo con el fin de evitar un sesgo basado en señales olfativas. </li></ol>

<ol>
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The authors have nothing to disclose.

El paradigma MHB se puede utilizar para medir múltiples dimensiones de comportamiento no condicionado. El protocolo puede ser alterada ligeramente dependiendo del propósito del experimento. En este protocolo se discuten los ajustes, los tiempos y las mediciones generalmente utilizados en nuestro laboratorio. Sin embargo, ligeras desviaciones a las mediciones del aparato se han utilizado en el pasado y también la cantidad de los cilindros sobre la placa 3 puede variar. A menudo, los estudios emplean un tiempo de prueba de 5 min por el juicio, pero otras veces pruebas también pueden ser apropiados, es decir, poniendo fin a la prueba tan pronto como una prueba cognitiva se ha completado con éxito o en la ampliación de tiempo de prueba si los animales son extremadamente ansioso o discapacitados físicos. Se seleccionó la hora del día de la prueba para estar bajo condición de luz roja ya que los roedores son animales nocturnos y son más activos en la fase oscura temprana. Roedel et al. (2006) muestra los efectos de la luz en las pruebas de fase oscura en el rendimiento conductual y cognitivoen ratones DBA en el MHB 16. Otros estudios han realizado experimentos MHB bajo condiciones de luz blanca 1,6, sin embargo, debe tenerse en cuenta que las pruebas bajo condiciones de luz blanca puede inducir inhibición de la conducta y trastornos cognitivos (como se muestra en ratones DBA) 16. Tablas 1 y 2 contienen una gran cantidad de parámetros de comportamiento que se desea medir. Durante el análisis de datos esto puede llevar a algunos parámetros que indican un aumento significativo de por ejemplo &#39;latencia a la primera placa de entrada », pero no en otros parámetros del mismo sistema de motivación (en este caso&#39; Evasión &#39;). En algunos casos, esto puede dar lugar a resultados no concluyentes. Guilloux et al. (2011) introdujo las puntuaciones z de comportamiento integrados al fenotipado conductual en ratones 24. Con el uso de las puntuaciones z de comportamiento integrados los múltiples parámetros pueden combinarse en una sola puntuación z describe una motivatio particular,sistema nal. Las puntuaciones z posteriores pueden a su vez ser más fácil en comparación a través de pruebas de comportamiento y experimentos. Además de las características descritas de este paradigma, un uso más profunda se hizo evidente en el estudio de Salomons et al. (2012). La habituación a la novedad de dos cepas de ratón (BALC / cJ y 129P3 / J) en el MHB se comparó, mostrando una diferencia en la flexibilidad de comportamiento que indica un perfil de comportamiento no adaptativo de la 129P3 / J ratones 4, reflejando deteriora la capacidad de adaptación y, probablemente, incluso ansiedad patológica. Concluyendo, la MHB permite la medición de múltiples dimensiones de comportamiento en un solo experimento. Mediante la combinación de características de un tablero tradicional agujero y prueba de campo abierto, el comportamiento condicionado, la interacción social, la cognición y la capacidad de adaptación, es decir, el bienestar puede ser investigado. Esto puede probar, por ejemplo, se utiliza para evaluar los cambios del comportamiento debidos al pharmacological- y / olas manipulaciones genéticas, la cría selectiva y la capacidad de adaptación. En comparación con las baterías de pruebas clásicas, el número de animales necesarios se reduce claramente y el estrés experimentado por los animales durante la prueba es extremadamente bajo.

La placa de orificio modificado (MHB) se utiliza para evaluar múltiples dimensiones de comportamiento no condicionado, principalmente en ratones y ratas 1. Una serie de pruebas ampliamente utilizados medir un único parámetro de comportamiento que no cubre completamente todo el fenotipo de una dimensión de comportamiento. El MHB fue desarrollado basado en el concepto de que los roedores pueden mostrar su rico repertorio conductual sólo en un entorno de prueba rica 2 y por lo tanto permite observaciones etológicas complejos. La puesta en marcha comprende las características de la placa de orificio tradicional y la prueba de campo abierto, resultando en un único paradigma complejo que supera las desventajas de una batería de pruebas (es decir, en la reducción del número de animales utilizados 1,3,4, eludir la posibles efectos de la orden de la prueba 5, y reducir el tiempo de efectos y costos 6). En contraste con la mayoría de las pruebas de comportamiento (por ejemplo, Hånell y Marklund, 2014) 7 &lt;/ Sup&gt;, una ventaja de la MHB es que los animales no necesitan ser privados de alimentos con el fin de aumentar la motivación para resolver la tarea. Además, el aislamiento social se puede evitar durante la prueba mediante la colocación de compañeros de grupo del animal experimental en un (grupo-) compartimento separado del compartimiento de ensayo por un tabique perforado transparente, lo que permite visual, auditiva y olfativa de contactos de 8,9. El MHB ha sido (farmacológicamente) validado para ratas y ratones 1,6. Una amplia gama de comportamientos se puede medir, por ejemplo, el comportamiento de evitación, la evaluación de riesgos, la excitación, la exploración, la actividad locomotora, la habituación, la afinidad social y la cognición 2,8-10. Además, el MHB se puede combinar con un ensayo de inhibición de la ingesta de alimentos, así como novela objeto prueba de reconocimiento 10,11. Finalmente, el MHB también se puede utilizar para llevar a cabo experimentos de estrés social mediante pruebas animales socialmente vencidos mientras que la colocación de un individuo dominante enel compartimiento del grupo 12,13. Este protocolo para los ratones y las ratas le dará una visión general de las múltiples aplicaciones de la MHB.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="843">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:133px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:380px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="254">
			<td height="254" style="height:255px;width:211px;">Standard mHB apparatus</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:380px;">The standard mHB apparatus consists of a grey PVC experimental box (100x50x50 cm) separated from a group compartment (50x50x50 cm) by a transparent, perforated partition. If the presence of group mates is unwanted or if individually housed animals are tested, the transparent partition is replaced by a partition made of grey PVC. The board (60x20x0.5 cm; made of grey PVC) is placed in the middle of the box and can contain 20 cylinders (&#7443; 1.5 cm) staggered in two lines or 23 cylinders (&#7443; 3 cm) staggered in three lines positioned on the board. The area around the board is divided by black lines into 10 rectangles (20x15 cm) and 2 squares (20x20 cm).</td>
		</tr>
		<tr height="210">
			<td height="210" style="height:210px;width:211px;">Cognitive mHB apparatus</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>The box for cognitive testing is 50x50 cm by inserting a partition made of grey PVC in the standard mHB. A smaller board (35x22x1 cm) with 10 cylinders is placed in the middle of the box. All cylinders are scented with a flavor animals are attracted to (e.g. vanilla) and all are baited with a reward (e.g. a piece of almond) beneath a grid so the animals cannot remove it. Cylinders (often three) are cued with a colored ring (contrasting with the grey PVC) and are baited with a removable reward (e.g. 0.05 g piece of almond).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Vanilla flavor</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Vanilla flavor dissolved in water (0.02%)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Camera</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Camera that generates sufficient quality output to rescore the behavior from video.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Stage light</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>A theather light that allows to adjust the light intensity and the dimensions of the surface that is lit.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="88">
			<td height="88" style="height:88px;width:211px;">Behavioral scoring software</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Behavioral scoring software.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the modified hole board - measuring behavior, cognition and social interaction in mice and rats

Este protocolo describe la junta agujero modificado (MHB), que combina las características de un tablero agujero tradicional y campo abierto y que está diseñado para medir múltiples dimensiones de la conducta condicionada en pequeños mamíferos de laboratorio (por ejemplo, ratones, ratas, musarañas y pequeños primates). Este paradigma es una alternativa valiosa para el uso de una batería de pruebas de comportamiento, ya que un amplio espectro de comportamiento de perfil de comportamiento de un animal se puede investigar en una sola prueba. El aparato consiste en una caja, que representa el área &quot;protegido&quot;, separado de un compartimiento de grupo. A bordo, en la que pequeños cilindros están escalonadas en tres líneas, se coloca en el centro de la caja, que representa el área &#39;sin protección&#39; de la configuración. Las habilidades cognitivas de los animales se pueden medir por hostigamiento algunos cilindros en el tablero y la medición de la memoria de trabajo y de referencia. Otro comportamiento condicionado, como activity-Related-, ansiedad Related- y el comportamiento social, se puede observar el uso de este paradigma. Flexibilidad de comportamiento y la capacidad de habituarse a un nuevo entorno, además, pueden ser observados por someter a los animales a múltiples ensayos en el MHB, revelando una idea de la capacidad de adaptación de los animales. Debido a las pruebas de los efectos de orden en una batería de pruebas de comportamiento, los animales no tratados previamente se deben utilizar para cada experimento. Al probar múltiples dimensiones de comportamiento en un solo paradigma y de ese modo eludir este problema, se reduce el número de animales experimentales utilizados. Además, al evitar el aislamiento social durante la prueba y sin la necesidad de alimentos privar a los animales, la MHB representa un sistema de prueba de comportamiento, la inducción de si los hay, muy baja cantidad de estrés.

La gran cantidad de parámetros que se pueden medir en la MHB hacer esta configuración especialmente adecuado para medir numerosas dimensiones de comportamiento. Un ejemplo es la identificación de la adaptación del comportamiento a un ambiente nuevo por la exposición repetida a la prueba. . Salomons et al (2010) estudiaron la habituación de dos cepas puras de ratones (BALB / cJ y 129P3 / J) a la MHB bajo dos condiciones de luz diferentes (luz roja: el contraste entre la caja y cartón: 45 lux vs. luz blanca: contrastar entre la caja y cartón: 115 lux (véase también la sección de protocolo 1.3)) 4. Ratones BALC / cJ muestran una (habituar) latencia decreciente hasta la primera entrada de planchar (véase la Tabla 1) en condiciones de luz roja como se muestra en la Figura 2A. En contraste, 129P3 / J ratones no muestran signos de habituación más de los ensayos. Figura 2B muestra el experimento bajo condiciones de luz blanca. Ratones BALB / cJ muestran de nuevo una disminución de la latencia a la primera entrada tablero sobre ensayos aunque que la unanimals muestran un patrón habituación más lento en comparación con las condiciones de luz roja. Ratones 129P3 / J no sólo muestran una vez más deteriorados habituación, pero también una tendencia hacia la sensibilización bajo la condición de luz blanca. Del mismo modo, en un estudio realizado por Salomons (2012) 129P2 / OlaHsd ratones mostraron un deterioro de la flexibilidad conductual en respuesta a la comparación de la novedad a BALB / cOlaHsd ratones 23. La diferencia en la capacidad de habituación por lo tanto se hace evidente entre dos cepas puras de ratones cuando se probó en el MHB 4. La versión cognitiva de la MHB puede por ejemplo ser usado para medir los deterioros cognitivos en ratones. Van der Kooij et al. (2010) utilizaron este set-up para medir el funcionamiento cognitivo de los ratones C57BL / 6J con hipoxia-isquemia cerebral leve (45 min de hipoxia; HI-45), HI grave (75 min de hipoxia; HI-75) y sham- ratones de control 9. La posibilidad de completar los ensayos (es decir, encontrar los agujeros cebados a menos de 5 minutos) se muestra en la Figura 3A. </strong&gt; El número de errores de memoria a corto plazo (vuelve a visitar a un agujero con cebo), errores de memoria a largo plazo (visitas a un agujero no con cebo) y errores de omisión (no hay visita a un agujero con cebo) se muestran en la Figura 3B-D respectivamente. Con el fin de confirmar que el grupo de HI-45 no tuvo ningún deterioro cognitivo, este grupo se ensayó frente a los controles simulados en una tarea de reversión. Los tres agujeros cebados fueron nombrados para tres cilindros diferentes y los animales fueron probados para 4 ensayos. El efecto de reversión se hace evidente cuando se compara la última prueba de la primera etapa con la primera prueba de la fase de reversión. La duración para completar los cuatro ensayos de reversión da una indicación en el rendimiento global. La figura 4 muestra la latencia para completar la prueba para ambos grupos y un efecto del tratamiento general clara es evidente. Esto significa que en la tarea de reversión en efecto, hay un deterioro en la flexibilidad cognitiva (re-learning) en el grupo de HI-45, que sea<html> llegó detectable mediante el MHB 9. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig1.jpg" /> Figura 1. Esquema general de la junta agujero modificado. (A) La puesta en marcha consiste en un compartimiento de ensayo (caja) con en el medio de la (sin protección) tablero indica con líneas en zigzag y el compartimiento del grupo. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig5.jpg" /> = Novela objeto, <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig6.jpg" /> = Objeto familiar, <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig7.jpg" /> = Punto de partida. (B) Esquema general de la versión cognitivo de la junta agujero modificado para ratones. (C) Vista lateral de un cilindro, como se usa en la versión cognitivo de la junta agujero modificado. Un pedazo de almendras se coloca debajo de la rejilla de todos los cilindros.target = &quot;_ blank&quot;&gt; Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig2.jpg" /> Figura 2. La luz roja o condiciones de luz blanca. (A) de latencia hasta la primera entrada de planchar (media ± SEM) de BALB / cJ y ratones 123P3 / J medidos bajo condiciones de luz roja (cuadro 0-5 lux y tabla 45 lux). Un ANOVA de medidas repetidas con ajuste Huyn-Feldt revelaron una cepa (P = 0,025), ensayo (P &lt;0,001) y el ensayo de interacción x cepa (P &lt;0,001) Efecto análisis post hoc:. Entre cepas: * = p &lt;0,0026, entre dos ensayos consecutivos: $ = P &lt;0,0026 (BALB / cJ) (B) La latencia de la primera entrada de planchar (media ± SEM) en condiciones de luz blanca (cuadro 0-5 lux y cartón 120 lux).. Un ANOVA de medidas repetidas con ajuste Huyn-Feldt revelaron una cepa (P = 0,031), ensayo (P &lt;0,001) y el ensayo de interacción x cepa (P &lt;0,001) efe. ct análisis post hoc: entre cepas: * = p &lt;0,0026, entre dos ensayos consecutivos: $ = P &lt;0,0026 (BALB / cJ) y T = P &lt;0,0026 (123P3 / J). Esta cifra ha sido modificado desde Salomons et al. 2010 4. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig2highres.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a> <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig3.jpg" /> Figura 3. Las pruebas cognitivas en el MHB (etapa 1). Todas las figuras muestran la media ± SEM. (A) La latencia para completar la prueba (s) de los ratones de control simulado, HI-45 y HI-75. (B) Número de errores de omisión, visitas agujero (C) no cebados y (D) revisita para agujeros cebados. * = P &lt;0,05, ** = p &lt;0,01, *** = p &lt;0.001 vs. farsa HI-75, # = P &lt;0,05, ## = P &lt;0,01, ### = P &lt;0,001HI-45 vs. HI-75. Esta cifra ha sido modificado de Van der Kooij et al. 2010 9. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig3highres.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a> <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig4.jpg" /> Figura 4. Reversión tarea de aprendizaje (etapa 2). Latencia para completar un ensayo (seg) en la tarea de aprendizaje inverso (media + SEM). Efectos del ensayo: # = P &lt;0,05, ## = P &lt;0,01 (primera tarea reversión juicio vs. juicio anterior). El efecto del tratamiento: * = p &lt;0,05, ** = p &lt;0,01 (HI-45 vs simulacro). Esta cifra ha sido modificado de Van der Kooij et al. 2010 9. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Sistema </td><td> La Actividad </td><td> Magnitud de medición </td></tr><tr><td> Avoyo bailo </td><td> Entrada Junta </td><td> Frecuencia, latencia (s), la duración (%) y la duración media (s) en el tablero </td></tr><tr><td> Evaluación de riesgos </td><td> Asiste estirados </td><td> Frecuencia y latencia (s) de posturas corporales estiradas (incluyendo las patas traseras) </td></tr><tr><td> Excitación </td><td> Grooming </td><td> Frecuencia, latencia (s), la duración (%) y la duración media (s) de auto-aseo </td></tr><tr><td></td><td> Defecación </td><td> La frecuencia y la latencia (s) de boli producido </td></tr><tr><td></td><td> Micción </td><td> La frecuencia y la latencia (s) de micciones </td></tr><tr><td> Exploración Dirigida </td><td> Visitas Hole </td><td> Frecuencia y la latencia (s) de las visitas de los cilindros </td></tr><tr><td></td><td> Exploración de objetos Novela </td><td> Frecuencia, la latencia (s), la duración (%) y la duración media (s) explorando el objeto novedoso </td></tr><tr><td> Exploración no dirigido </td><td> Alzar el cuadro &lt;/ Td&gt; <td> La frecuencia y la latencia (s) de crias en el cuadro (patas delanteras no tocar la pared) </td></tr><tr><td></td><td> Tablero de Crianza </td><td> La frecuencia y la latencia (s) de crias en el tablero </td></tr><tr><td></td><td> Exploración Agujero </td><td> La frecuencia y la latencia (s) de exploraciones cilindros </td></tr><tr><td> Memoria </td><td> Exploración objeto familiar </td><td> Frecuencia, la latencia (s), la duración (%) y la duración media (s) explorando el objeto familiar </td></tr><tr><td> Afinidad Social </td><td> La interacción del grupo </td><td> Frecuencia, la latencia (s), la duración (%) y la duración media (s) que interactúa con el compartimiento grupo </td></tr><tr><td> La actividad locomotora </td><td> Cruce de la Línea </td><td> La frecuencia y la latencia (s) de los cruces de línea </td></tr></tbody></table> Tabla 1: Lista de parámetros de comportamiento <table border="0" cellpadding="0" cellspacing = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td> Sistema de memoria </td><td> Parámetro </td><td> Descripción </td></tr><tr><td> La memoria a largo plazo </td><td> Elección equivocada </td><td> Visita al cilindro no con cebo; nariz debajo del borde </td></tr><tr><td> La omisión de error </td><td> La omisión de un cilindro con cebo </td><td> Ninguna visita a un cilindro con cebo </td></tr><tr><td> Memoria a corto plazo </td><td> Elección repetida </td><td> Vuelve al cilindro con cebo; nariz debajo del borde </td></tr><tr><td> El rendimiento global </td><td> El tiempo total de ensayo </td><td> Tiempo hasta que se han visitado todos los cilindros con cebo </td></tr></tbody></table> Tabla 2: Lista de parámetros cognitivos

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The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

La Junta Agujero Modificado - Medición de Comportamiento, Cognición e interacción social en ratones y ratas

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

the-modified-hole-board-measuring-behavior-cognition-social

Research

JoVE Journal

Behavior

17.6K vistas.  Utrecht University. This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities. 

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The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones. Handley, Mithani and File et al. performed the first studies on the plus-maze design we use today, and in 1987 Lister published a design for use with mice. 
Time spent on, and entries into, the open arms are an index of anxiety; the lower these indices, the more anxious the mouse is. Alternatively, a mouse that spends most of its time in the closed arms is classed as anxious. 
One of the problems of the plus-maze is that, while time spent on, and entries into, the open arms is a fairly unambiguous measure of anxiety, time in the central area is more difficult to interpret, although time spent here has been classified as &#x201C;decision making&#x201D;. In many tests central area time is a considerable part of the total test time.
Shepherd et al. produced an ingenious design to eliminate the central area, which they called the &#x201C;zero maze&#x201D;. However, although used by several groups, it has never been as widely adopted as the plus-maze. 
In the present article I describe a modification of the plus-maze design that not only eliminates the central area but also incorporates elements from other anxiety tests, such as the light-dark box and emergence tests. It is a linear series of four alleys, each having increasing anxiogenic properties. It has given similar results to the plus-maze in general. Although it may not be more sensitive than the plus-maze (more data is needed before a firm conclusion can be reached on this point), it provides a useful confirmation of plus-maze results which would be useful when, for example, only a single example of a mutant mouse was available, as, for example, in ENU-based mutagenesis programs.

The plus-maze measures anxiety-like behaviour in rodents. There are two opposite closed and two opposite open arms; anxious rodents avoid the open arms. The central area is neither completely open nor closed, so time spent here is ambiguous and difficult to interpret. Here a modification of the plus-maze protocol eliminating this area is described.

Los callejones de prueba sucesiva de ansiedad en ratones y ratas

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

Investigación

Comportamiento

Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several independent laboratories have demonstrated robust alterations in the social behavior of rodents exposed to alcohol during brain development across a wide range of exposure durations, timing, doses, and ages at the time of behavioral quantification. Prior work from this laboratory has identified reliable alterations in specific forms of social interaction following moderate prenatal alcohol exposure (PAE) in the rat that persist well into adulthood, including increased wrestling and decreased investigation. These behavioral alterations have been useful in identifying neural circuits altered by moderate PAE1, and may hold importance for progressing toward a more complete understanding of the neural bases of PAE-related alterations in social behavior. This paper describes procedures for performing moderate PAE in which rat dams voluntarily consume ethanol or saccharin (control) throughout gestation, and measurement of social behaviors in adult offspring.

The goal of the protocol presented here is to describe procedures to expose rats to moderate levels of alcohol during prenatal brain development and to quantify resulting alterations in social behavior during adulthood.

Moderada exposición prenatal al alcohol y cuantificación de la conducta social en ratas adultas

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several ...

Assessment of Social Cognition in Non-human Primates Using a Network of Computerized Automated Learning Device (ALDM) Test Systems

Fagot &#38; Paleressompoulle1 and Fagot &#38; Bonte2 have published an automated learning device (ALDM) for the study of cognitive abilities of monkeys maintained in semi-free ranging conditions. Data accumulated during the last five years have consistently demonstrated the efficiency of this protocol to investigate individual/physical cognition in monkeys, and have further shown that this procedure reduces stress level during animal testing3. This paper demonstrates that networks of ALDM can also be used to investigate different facets of social cognition and in-group expressed behaviors in monkeys, and describes three illustrative protocols developed for that purpose. The first study demonstrates how ethological assessments of social behavior and computerized assessments of cognitive performance could be integrated to investigate the effects of socially exhibited moods on the cognitive performance of individuals. The second study shows that batteries of ALDM running in parallel can provide unique information on the influence of the presence of others on task performance. Finally, the last study shows that networks of ALDM test units can also be used to study issues related to social transmission and cultural evolution. Combined together, these three studies demonstrate clearly that ALDM testing is a highly promising experimental tool for bridging the gap in the animal literature between research on individual cognition and research on social cognition.

Assessment of Social Cognition in Non-human Primates Using a Network of Computerized Automated Learning Device ALDM Test Systems

Fagot &#38; Paleressompoulle1 have published an automated learning device (ALDM) aimed at testing individual cognitive abilities in semi-free ranging monkeys. The main goal of our protocol is to use a network of ALDM test units to study social cognition in non-human primates.

Evaluación de la cognición social en primates no humanos mediante una red de Computarizado Dispositivo Automatizado Learning Systems (ALDM) prueba

Fagot &#38; Paleressompoulle1 and Fagot &#38; Bonte2 have published an automated learning device (ALDM) for the study of cognitive abilities of monkeys ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

La dimensión social del estrés: Manipulaciones experimentales de Apoyo Social e Identidad Social en el Trier Social Estrés Prueba

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Un método para evaluar las propiedades reforzantes de etanol en ratas sin privación de agua, la sacarina o el desvanecimiento de Formación Extended Access

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

El examen de recuperación de memoria en la infancia y la niñez Uso de la imitación provocada Paradigma

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

La prueba de roedores psicomotor Vigilancia (rPVT): Un método para evaluar el rendimiento neuroconductual en ratas y ratones

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two behavioral components: a reluctance to avoid humans (passive tameness) and a motivation to approach humans (active tameness). To quantify these components in mice, we previously developed behavioral tests for active tameness, passive tameness, and the willingness to stay on a human hand, each designed to be completed within 3 min. The data obtained were used for selective breeding, with a large number of mice analyzed per generation. The active tameness test measures the movement of the mouse toward a human hand and the contact it engages in. The passive tameness test measures the duration of time that a mouse tolerates human touch. In the stay-on-hand test, a mouse is placed on a human hand and touched slowly using the thumb of that hand; the duration of time that the animal remains on the hand is measured. Here, we describe the test set-up and apparatus, explain the procedures, and discuss the appropriate data analysis. Finally, we explain how to interpret the results.

Tameness in animals includes a reduction of avoidance responses to humans (passive tameness) and an increase in active approaches to humans (active tameness). Here, we describe detailed protocols for three behavioral tests (active tameness, passive tameness, and stay-on-hand tests) to separately measure the active and passive tameness of mice.

Medición activa y pasiva mansedumbre por separado en ratones

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two ...

A High-performance Liquid Chromatography Measurement of Kynurenine and Kynurenic Acid: Relating Biochemistry to Cognition and Sleep in Rats

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite kynurenic acid (KYNA), an antagonist at both N-methyl-d-aspartate (NMDA) and &#945;7 nicotinic acetylcholine (&#945;7nACh) receptors, has been implicated in cognitive processes in health and disease. As KYNA levels are elevated in the brains of patients with schizophrenia, a malfunction at the glutamatergic and cholinergic receptors is believed to be causally related to cognitive dysfunction, a core domain of the psychopathology of the illness. KYNA may play a pathophysiologically significant role in individuals with schizophrenia. It is possible to elevate endogenous KYNA in the rodent brain by treating animals with the direct bioprecursor kynurenine, and preclinical studies in rats have demonstrated that acute elevations in KYNA may impact their learning and memory processes. The current protocol describes this experimental approach in detail and combines a) a biochemical analysis of blood kynurenine levels and brain KYNA formation (using high-performance liquid chromatography), b) behavioral testing to probe the hippocampal-dependent contextual memory (passive avoidance paradigm), and c) an assessment of sleep-wake behavior [telemetric recordings combining electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) signals] in rats. Taken together, a relationship between elevated KYNA, sleep, and cognition is studied, and this protocol describes in detail an experimental approach to understanding function outcomes of kynurenine elevation and KYNA formation in vivo in rats. Results obtained through variations of this protocol will test the hypothesis that the KP and KYNA serve pivotal roles in modulating sleep and cognition in health and disease states.

Alterations in the kynurenine pathway (KP) neuroactive metabolites are implicated in psychiatric illnesses. Investigating the functional outcomes of an altered kynurenine pathway metabolism in vivo in rodents may help elucidate novel therapeutic approaches. The current protocol combines biochemical and behavioral approaches to investigate the impact of an acute kynurenine challenge in rats.

Una medida de la cromatografía líquida de alto rendimiento de quinurenina y ácido quinurénico: relacionados con la bioquímica cognición y sueño en ratas

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Un protocolo de preferencia de lugar condicionada para medir la incubación de antojo en ratas

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...