Établissement d’un arrêt circulatoire hypothermique profond chez le rat

Résumé

Ce protocole présente l’établissement d’un arrêt circulatoire hypothermique profond chez le rat, qui peut être appliqué pour étudier le syndrome de réponse inflammatoire systémique, les lésions d’ischémie / reperfusion, le stress oxydatif, la neuroinflammation, etc.

Résumé

L’arrêt circulatoire hypothermique profond (DHCA) est couramment appliqué lors des chirurgies pour les cardiopathies congénitales complexes et la maladie de l’arc aortique. La présente étude vise à fournir une méthode pour établir le DHCA chez le rat. Pour évaluer l’impact du processus DHCA sur les signes vitaux, un modèle de rat-pontage cardiopulmonaire (CPB) à température normale sans arrêt circulatoire a été utilisé comme témoin. Comme prévu, le DHCA a entraîné une diminution significative de la température corporelle et de la pression artérielle moyenne. L’analyse des gaz du sang a indiqué que le DHCA augmentait les niveaux d’acide lactique mais n’influençait pas le pH sanguin et les concentrations d’hémoglobine, d’hématocrite, de Na+, de Cl⁻, de K⁺ et de glucose. De plus, par rapport aux rats CPB à température normale, les résultats de la microscopie électronique à transmission ont montré une légère augmentation des autophagosomes hippocampiques chez les rats DHCA.

Introduction

L’arrêt circulatoire hypothermique profond (DHCA) est utilisé en chirurgie cardiaque depuis 1953¹_. La DHCA consiste à réduire la température centrale du patient à des niveaux profondément hypothermiques (15-22 °C) avant d’interrompre globalement le flux sanguin vers le corps². L’arrêt circulatoire peut fournir un champ opératoire relativement sans effusion de sang. L’hypothermie profonde diminue le métabolisme, en particulier dans le cerveau et le myocarde, ce qui est une méthode efficace de protection contre l’ischémie³. Le DHCA est couramment appliqué lors de chirurgies pour les cardi....

Protocole

Les protocoles ont fait l’objet d’un examen institutionnel et ont reçu l’approbation du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux, Hôpital Fuwai, Académie chinoise des sciences médicales (FW-2021-0005). Toutes les procédures expérimentales ont été effectuées conformément au Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire publié par les National Institutes of Health.

REMARQUE : Les rats Sprague-Dawley mâles (poids : 500-600 g, âge : 12-14 semaines) ont été gardés dans des conditions de laboratoire standard avec un accès libre à la nourriture et à l’eau. Les rats ont été répartis au hasard en deux groupes (n = ....

Résultats

En tant que groupe témoin, les rats CPB (NtCPB) à température normale sans arrêt circulatoire ont montré une pression artérielle moyenne (MAP) et une température corporelle stables pendant toute la procédure, tandis que la MAP des rats DHCA a diminué pendant l’arrêt cardiaque (p < 0,01, Figure 3A). La température des rats DHCA a chuté rapidement pendant la phase de refroidissement et s’est rétablie progressivement pendant la phase de réchauffement. Lors du sevrage .......

Discussion

La canulation est la procédure la plus fondamentale pour établir le DHCA chez le rat. Avant la canulation, tremper l’artère avec 0,5 mL de lidocaïne à 2 % facilitera la canulation. Après canulation, une héparinisation avec 500 UI/kg d’héparine via la veine jugulaire externe est nécessaire pour éviter la formation de microthrombus¹⁷. Nous avons constaté à plusieurs reprises que cette dose d’héparine peut atteindre l’objectif d’un temps de coagulation activé (ACT) >4.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Heat Exchanger	Xi’an Xijing Medical Appliance Co., Ltd	Animal-M
Membrane Oxygenator	Dongguan Kewei Medical Instrument Co., Ltd.	Micro-M
Monitor	Chengdu Techman Co., Ltd	BL-420s
Roller Pump	Changzhou Prefluid Technology Co.,Ltd	BL100
SD Rat	HFK Bioscience Co.,Ltd.	/
Sevoflurane	Maruishi Pharmaceutical Co. Ltd	H20150020
Shaver	Hangzhou Huayuan Pet Products Co.,Ltd.	/
Vaporizer	SPACECABS	/
Ventilator	Shanghai Alcott Biotech Co., Ltd	ALC-V8S
Water Tank	Maquet Critical Care AB	Jostra HCU20-600