Commencez la préparation de la plaque de fibrine en mélangeant 25 milligrammes de fibrinogène avec 1,25 millilitre de solution saline physiologique. Ensuite, préparez la solution de thrombine en mélangeant soigneusement 100 unités de thrombine avec 1,05 millilitre de solution saline physiologique. Ensuite, préparez la solution d’agarose en ajoutant 0,5 gramme d’agarose à 22,5 millilitres de tampon acide chlorhydrate de tris 0,02 molaire.
Chauffer la solution d’agarose à 100 degrés Celsius jusqu’à ce qu’elle se dissolve complètement. Refroidir la solution d’agarose à environ 50 degrés Celsius avant d’y ajouter la solution de fibrinogène. Ajouter immédiatement la solution de thrombine, mélanger rapidement et verser le mélange dans un plat de culture de 60 millimètres.
Pour charger l’échantillon, percez des puits de trois millimètres dans les plaques de fibrine à l’aide d’un Boer stérile et remplissez-les de 10 microlitres d’échantillons. Incuber les plaques à 37 degrés Celsius pendant 18 heures avant de mesurer la taille de leurs zones de dégradation et de calculer l’activité fibrinolytique. L’évaluation de l’activité fibrinolytique a montré une zone de lyse de 1,3 centimètre dans le contrôle urokinase, aucune zone de lyse dans le tampon physiologique salin, 2,1 centimètres de la zone de lyse dans le puits de protéines brutes et 1,8 centimètre de diamètre de la zone de lyse dans le puits enzymatique fibrinolytique purifié.
