Commencez par vaporiser la souris correctement euthanasiée avec de l’alcool à 75% pour désinfecter la peau. Placez ensuite la souris en décubitus dorsal. Soulevez la peau de la région abdominale de l’animal et, à l’aide de ciseaux chirurgicaux, faites-y une petite incision.
Ensuite, à l’aide des ciseaux, séparez carrément la peau et les muscles abdominaux du bassin au cou, le long de la ligne médiane ventrale. Exposez le cœur et les poumons en coupant le diaphragme et les côtes des deux côtés de la ligne médiane. Ensuite, retirez soigneusement le foie, la rate, les intestins et les reins, en évitant d’endommager la paroi intestinale.
Ensuite, retirez les poumons et l’œsophage. Maintenant, soulevez doucement le cœur à l’aide d’une pince tenue dans une main et séparez l’aorte de la colonne vertébrale avec des ciseaux chirurgicaux tenus dans l’autre main. Placez ensuite le cœur et l’aorte dans une boîte de Pétri de 60 millimètres, contenant du PBS supplémenté en antibiotiques.
Récupérez les pinces microchirurgicales et les ciseaux microchirurgicaux de l’alcool et rincez-les dans 25 millilitres de PBS pour éliminer l’excès d’alcool. À l’aide d’un microscope stéréoscopique, prélever le thymus et d’autres tissus du cœur et de l’aorte. Retirez ensuite le cœur, laissant l’aorte avec les tissus adipeux périvasculaires ou TVAP.
Transférez l’aorte avec les PVAT dans une boîte de Pétri propre de 60 millimètres contenant du PBS supplémenté en antibiotiques. À l’aide d’une paire de pinces microchirurgicales, tenez l’aorte et, à l’aide d’une autre paire, retirez les tissus adipeux attachés pour séparer les AVPV de l’aorte. Retirez autant de tissu vasculaire que possible tout en causant le moins de dommages possible aux TVPV.
Enfin, transférez les PVAT collectés dans un tube de microcentrifugation de deux millilitres, contenant un supplément d’antibiotiques, du DMEM, à haute teneur en glucose, placé sur de la glace.
