Pour commencer, allumez l’extracteur d’aiguille en verre, puis réglez la chaleur sur 280, la vitesse sur 170, le délai sur 250 et la perche sur 30. Biseautez la pointe de l’aiguille de verre capillaire. Ensuite, à l’aide d’une pompe de micro-injection, chargez environ deux microlitres de solution d’ARN double brin d’homologie de la chaîne lourde de ferritine dans l’aiguille d’injection.
Transférer la plaque de gélose contenant des pupes de Trichogramma dendrolimi sur la platine du microscope composé. Insérez soigneusement l’aiguille d’injection dans l’abdomen d’une chrysalide à un angle d’environ 30 degrés et injectez progressivement cinq nanolitres de solution d’ARN double brin d’homologie de la ferritine à chaîne lourde. Incuber environ 700 pupes par traitement à 25 degrés Celsius pendant 24 ou 48 heures.
Extraire la teneur en ARN de 100 pupes par répétition. À partir d’environ 50 pupes par traitement, observez l’émergence des guêpes. Enfin, enregistrez le taux d’émergence des guêpes et le taux de déformation.
Les pupes de T. dendrolimi injectées avec une homologie de chaîne lourde de ferritine double brin ont montré un taux d’émergence significativement plus faible que celles injectées avec une GFP double brin ou sans injection. Chez les guêpes émergées, 51,85 % des guêpes T. dendrolimi soumises à une homologie de chaîne lourde de ferritine double brin ont développé de petites ailes déformées. Cette déformation était absente chez les guêpes injectées avec de la GFP double brin ou celles sans injection.
De plus, les pupes de T. dendrolimi injectées avec une homologie de chaîne lourde de ferritine double brin ont montré un mélanisme, indiquant un métabolisme anormal du fer. La mélanine n’a pas été observée chez les guêpes injectées avec de la GFP double brin ou celles sans injection.
