Installez une pièce calme avec une température contrôlée de 21 degrés Celsius dans un cycle de lumière de 12 heures et d’obscurité de 12 heures. Placez délicatement chaque souris dans une chambre en PMMA posée sur un support de sol en maille de cinq millimètres carrés. Laissez les souris s’acclimater pendant 30 minutes avant d’évaluer les seuils mécaniques de base et expérimentaux.
Ajustez ensuite le support de sol en maille à une hauteur confortable afin que les souris puissent être évaluées de tous les côtés, et que leur abdomen et leurs quatre pattes soient facilement accessibles à travers les ouvertures du sol en maille. Couvrez la surface sous les chambres avec un matériau absorbant pour gérer la miction et la défécation. Assurez-vous qu’il y a suffisamment d’espace pour les bras sous les chambres lors de l’utilisation de l’appareil EVF.
Après avoir configuré l’appareil EVF pour les évaluations de seuils mécaniques, effectuez des mesures de l’abdomen en divisant l’abdomen de la souris en trois sections virtuelles. Pour obtenir les mesures de base, 48 heures avant l’infection, placez les souris dans les chambres, et une demi-heure après la mise en place de l’appareil EVF, stimulez le tissu désigné en élevant progressivement la sonde avec les deux mains. Maintenant, appliquez une pression progressive sur le tissu jusqu’à ce que la souris présente un comportement nociceptif.
Pour évaluer la patte arrière droite, surveillez des actions telles que la rétraction, le léchage de patte ou le saut à quatre pattes. Pour une évaluation viscérale, observez une rétraction abdominale soudaine, un léchage ou un grattage immédiat de la zone sondée ou un saut à quatre pattes. Enregistrez ensuite la valeur enregistrée dans l’appareil électronique désigné à l’aide du programme EVF ou documentez-la dans un carnet.
Réinitialisez l’affichage à zéro. Sondez cinq fois chaque souris dans la chambre adjacente, calculez leurs valeurs moyennes individuelles et réévaluez les mesures de base après 24 heures.
