Pour commencer, utilisez l’IRM multi ou biparamétrique pour localiser la tumeur et sa position dans la prostate avant la chirurgie. Ensuite, préparez le patient avec l’accès abdominal, l’insufflation et la mise en place du port de chimiothérapie. Réglez le pneumopéritoine à 12 millimètres.
Faites une incision sur le péritoine pour libérer la vessie et disséquer l’espace périrectal. Maintenant, ouvrez le fascia pelvien de chaque côté et effectuez une dissection complète des aspects antérieurs et latéraux de la prostate et de la vessie. Ouvrez le col de la vessie et identifiez l’urètre proximal.
Sectionnez l’urètre proximal pour accéder aux aspects postérieurs de la prostate et de la vessie. Ensuite, disséquez les vésicules séminales et l’espace rectumal, puis les aspects latéraux de la prostate. Disséquez l’apex.
Ensuite, sectionnez l’urètre distal. Complétez ensuite l’anastomose vésico-urétrale. Extrayez la prostate, puis suturez l’incision.
Placez la prostate fraîchement prélevée dans un récipient sec. Pour traiter la prostate pour le prélèvement d’échantillons, sélectionnez d’abord les zones ciblées en fonction des informations de l’IRM. À l’aide d’une aiguille automatique jetable, récupérez des échantillons cylindriques dans les zones sélectionnées.
Ensuite, identifiez la zone extérieure du cylindre et fixez-la à l’aide d’une pince à tissus. Placez le cylindre sur une diapositive et marquez la zone extérieure avec de l’encre pour tissu. Placez les cylindres collectés horizontalement sur un disque porte-échantillon rempli de milieu d’enrobage de cryostat et transférez-les sur une plaque de refroidissement de microtome pour la découpe.
Ensuite, fixez le disque du porte-échantillon au mandrin de l’échantillon. Utilisez le composé OCT pour intégrer l’échantillon de tissu avant la section. À l’aide d’un microtome cryostat, coupez l’échantillon à 25 degrés Celsius.
Prélever de fines sections de tissu en forme de cylindre sur des lames de microscope traitées. Fixez les lames dans de l’éthanol à 96%, puis hydratez-les dans de l’eau distillée. Teintez les sections avec de l’hématoxyline Harris pendant une minute.
Traitez maintenant les lames avec de l’hydroxyde d’ammonium à 30 % pour rendre l’hématoxyline bleue. Ensuite, colorez les lames lavées avec de l’éosine pendant 30 secondes. Ensuite, déshydratez les lames avec des titrages croissants d’alcool, puis clarifiez-les avec 100% de xylène.
Montez les lames avec GPX et placez une lamelle de recouvrement sur le tissu coloré. Utilisez un microscope optique pour analyser l’échantillon coloré, en discriminant les zones atteintes de carcinome et en déterminant le score de Gleason de la tumeur. Marquez des zones tumorales précises sur les lames.
Ensuite, à l’aide de la lame chirurgicale, macro-microdissection les zones de l’échantillon marquées sur la lame à l’intérieur du disque OCT. Lorsque le tissu d’enrobage commence à décongeler, soulevez le tissu à l’aide d’une paire de pinces et placez-les dans des cryotubes correctement étiquetés. Cette technique a permis d’obtenir du matériel tumoral dans 61% des cas étudiés.
Sur les 16 prostates où l’acquisition de la tumeur a échoué, 10 avaient une charge tumorale inférieure à 10% et aucune ne dépassait 20%Une analyse de la courbe ROC a montré une aire sous la courbe de 0,843, indiquant que cette méthode peut donner des résultats satisfaisants en matière d’acquisition de tumeurs. La corrélation histopathologique de l’échantillon de prostatectomie radicale par rapport à la biopsie cylindrique traitée a été réalisée à l’aide d’une coloration à l’hématoxyline et à l’éosine. Différents motifs histologiques ont été trouvés le long du cylindre, tels que le motif de Gleason 3, qui montrait de petites glandes bien formées tapissées de cellules cancéreuses.
Des glandes de forme irrégulière avec des cellules atypiques élargies ont été observées dans les sections du motif Gleason 4. Les échantillons de néoplasie intra-épithéliale de la prostate ont montré des cellules encombrées dans les espaces canalaires.
