Pour commencer, transférez la souris anesthésiée préparée dans la zone chirurgicale et isolez le site chirurgical avec un champ adhésif. Sous anesthésie profonde, utilisez une lame de scalpel pour faire une incision médiane ventrale dans la peau. Ensuite, utilisez des ciseaux pour séparer la peau de la couche musculaire.
À l’aide d’une lame de scalpel, faites une incision plus petite dans la couche musculaire. Une fois les intestins visualisés, utilisez des pinces émoussées pour localiser le caecum et l’extérioriser. Ensuite, ligaturez le cæcum avec une suture stérile résorbable en polyglactine 5/0.
À l’aide d’une aiguille de calibre 27, perforez le sécum de part en part pour permettre au contenu fécal de s’échapper. Pressez doucement le secum pour extérioriser le contenu fécal avec prudence. Ensuite, déplacez le sécum dans la cavité abdominale et fermez la couche musculaire avec une suture stérile résorbable 5/0.
Utilisez ensuite une suture non résorbable en nylon 5/0 pour fermer la peau. Après cela, fournissez une solution saline stérile par injection sous-cutanée dans le dos de l’animal. Après quatre jours de convalescence après une CLP, ou une chirurgie simulée, utilisez du ruban adhésif pour attacher la queue de souris anesthésiée à une courte chaîne métallique.
Attachez ensuite la chaîne métallique à un crochet relié à une barre transversale le long du centre de la cage. Fixez une deuxième petite barre qui peut se déplacer le long de la barre transversale pour permettre à l’animal une plus grande capacité de mouvement. Ajustez ensuite la hauteur des membres suspendus pour éviter que les pattes n’entrent en contact avec les granulés de chow.
Assurez-vous que les animaux peuvent se déplacer par leurs membres antérieurs à l’aide de la grille métallique sur le sol de la cage. Les animaux CLP ont montré une augmentation des populations de cellules immunitaires dans leur lavage péritonéal par rapport aux animaux fictifs. La CLP et le HLS entraînent environ 11,8 % de la perte de masse corporelle.
Une diminution marquée de la masse soléaire a été observée lorsque le HLS était superposé à la CLP, indiquant que les fibres plus petites constituent une partie majeure de la section musculaire. Comparativement aux animaux témoins, le CLP-HLS a causé une altération significative des forces absolues et maximales du soléaire.