Pour commencer, placez un bloc pulmonaire en cœur de rat fraîchement excisé sur une feuille de gaze sur de la glace. Disséquez l’excès de graisse autour de l’aorte. Coupez ensuite l’aorte, en laissant environ trois à cinq millimètres pour la canulation.
Faites une incision d’un à deux millimètres de long dans l’artère pulmonaire. Placez le bloc cœur-poumon coupé sur de la glace directement sous les canules. Ensuite, utilisez une pince de tube de contrôle de débit pour régler le débit du côté Langendorff pour la canulation de l’aorte.
Canulez soigneusement l’aorte sur la canule gauche. Tenez-le avec une pince noire et attachez-le avec une suture en soie 2/0. Ouvrez complètement la pince de tubulure de contrôle de débit pour augmenter le débit de la perfusion Langendorff.
Ouvrez ensuite la pince de postcharge. Commencez à surveiller l’activité cardiaque à l’aide d’un logiciel. Ajustez le bloc cœur-poumon de manière à ce que la surface antérieure des poumons fasse face à l’opérateur.
Attachez le lobe pulmonaire gauche avec une suture en soie 2/0. Attachez les lobes pulmonaires restants en un seul coup avec une suture en soie 2/0. Ensuite, tournez le cœur de manière à ce que les poumons attachés soient vers l’arrière.
Avec une paire de petits ciseaux vannas. Coupez une section de deux à trois millimètres de l’appendice auriculaire gauche pour créer une petite ouverture dans les oreillettes. Canulez soigneusement l’appendice auriculaire gauche à la canule gauche.
Tenez-le avec une pince noire et attachez-le avec une suture en soie 2/0. Ajustez l’enveloppe d’eau de la chambre cardiaque de manière à ce que le cœur se trouve au centre de la chambre. Ouvrez maintenant le transducteur de pression à l’air.
Sélectionnez la pression aortique dans le logiciel. Cliquez ensuite sur le pont ampli, suivi de zéro et OK pour mettre à zéro le transducteur de pression. Perfuser le cœur en mode Langendorff pendant 10 minutes.
Ensuite, transférez la pierre à air du réservoir tampon Langendorff Krebs-Henseleit dans le réservoir tampon Krebs-Henseleit en activité. Ouvrez le taraud à trois voies menant au perfusat de travail. Fermez la grande pince menant à la canule aortique et ouvrez le flux menant à l’appendice auriculaire gauche pour passer en mode de travail.
Perfuser le cœur en mode de fonctionnement pendant 15 minutes. Remplissez une chambre de cardioplégie avec 50 millilitres de la solution de préservation cardiaque désignée. Abaissez la chemise d’eau et fermez le robinet à trois voies du côté du mode de fonctionnement.
Fermez la pince pour arrêter l’écoulement vers la canule auriculaire gauche. Ouvrez ensuite le flux vers la canule aortique. Fermez maintenant la pince du côté de Langendorff et sur la postcharge.
Ouvrez la pince à partir de la ligne de cardioplégie. Rincez 15 millilitres de la solution pour cardioplégie de la conduite de pression. Rincer le cœur avec une cardioplégie via la canule aortique et recueillir l’effluent coronaire.
Au bout de trois minutes, fermez la pince de cardioplégie et la petite pince bleue menant à la canule aortique. Placez une pince bouledogue sur la canule aortique et une autre pince bouledogue sur la canule gauche. Débranchez le bloc de canule cardiaque du circuit et placez-le dans un bécher contenant la cardioplégie dans une glacière.
Pour reperfuser le cœur après un stockage statique à froid, fixez soigneusement le bloc pulmonaire cardiaque après un stockage à froid sur le circuit de perfusion. Utilisez une seringue à bout émoussé de calibre 18 remplie de tampon Krebs-Henseleit pour évacuer l’air de la canule. Connectez d’abord la canule aortique.
Ouvrez ensuite la pince à tube du côté Langendorff. Rebranchez la canule gauche et assurez-vous que l’air a été évacué de la canule avant de la connecter au circuit de perfusion. Gardez la pince côté travail fermée jusqu’à ce qu’il soit temps de passer du mode Langendorff au mode de travail.
Un écoulement aortique de 14 à 22 millilitres par minute a permis d’obtenir un bon écoulement de Langendorff. Lorsqu’il est passé en mode de travail, un flux aortique d’au moins 30 millilitres par minute facilite le stockage cardiaque. Malgré de bonnes traces de base, certains cœurs n’ont pas bien récupéré après un stockage statique prolongé à froid.
