Pour commencer, placez les solvants dilués à 60 % pour l’extraction assistée par micro-ondes sur la plate-forme de travail. Pesez 0,67 gramme de la peau argentée du café et mélangez avec 20 millilitres de solvant d’extraction dans un rapport de un à 30 dans un récipient de réaction. Ajoutez une barre d’agitation magnétique dans le récipient pour assurer une distribution uniforme de la chaleur et du solvant dans l’échantillon.
Fermez fermement le récipient à l’aide d’un outil spécial et placez-le dans la chambre d’extraction assistée par micro-ondes. Pour configurer la méthode, cliquez sur l’icône de la boîte à outils dans la barre supérieure du moniteur et sélectionnez le rotor SK eT dans la section des accessoires. Cliquez ensuite sur le remuer et tapez 20% pour régler le taux d’agitation.
Cliquez sur le secteur de la serrure de la porte et réglez-le pour qu’il s’active à des températures supérieures à 80 degrés Celsius. Cliquez ensuite sur l’icône du tableau dans la barre supérieure et réglez le gradient de température T1 sur une durée d’extraction de 10 minutes. Puissance micro-ondes jusqu’à 1800 watts et température jusqu’à 120 degrés Celsius.
Pour activer l’agitation, cliquez sur le bouton d’agitation et attendez que le voyant vert apparaisse. Réglez la vitesse du ventilateur sur le niveau trois. Pour maintenir le temps d’extraction, sélectionnez la température d’extraction souhaitée T2 en réglant la durée d’extraction sur 15 minutes, la puissance du micro-ondes sur 1800 watts et la température sur 120 degrés Celsius.
Maintenant, cliquez sur le bouton de refroidissement dans le coin inférieur gauche de l’écran et sélectionnez le temps de refroidissement de 10 minutes. Cliquez sur l’icône Enregistrer dans le coin supérieur droit de l’écran. Démarrez le processus d’extraction en choisissant le nombre de récipients utilisés.
Après l’extraction, la centrifugeuse extrait à 9072 g pendant 15 minutes à quatre degrés Celsius. Prélevez le surnageant à l’aide d’une pipette en verre de 10 millilitres et stockez-le à moins 20 degrés Celsius. Diluez dix fois les extraits de peau d’argent de café avec de l’eau distillée dans une plaque à 96 puits.
Mélangez 10 microlitres de l’échantillon dilué avec 20 microlitres de réactif folin-ciocalteu non dilué, et laissez-les réagir pendant trois minutes. Ensuite, ajoutez 100 microlitres de solution de carbonate de sodium à 7,5 % au mélange dans chaque puits d’une plaque à 96 puits. Préparez différentes concentrations pour la plage de concentration standard d’acide gallique en diluant avec de l’eau distillée.
Mélangez-les avec 20 microlitres de réactif folin-ciocalteu, et laissez-les réagir pendant trois minutes. Ensuite, ajoutez 100 microlitres de solution de carbonate de sodium à 7,5 % au mélange dans chaque puits d’une plaque à 96 puits. Incuber la réaction pendant 30 minutes dans l’obscurité à température ambiante.
Sur un lecteur de microplaques, mesurez l’absorbance du mélange réactionnel à 765 nanomètres. Tracez la courbe d’étalonnage de l’étalon à l’aide des concentrations de l’étalon et de l’absorbance à 765 nanomètres. Exprimer les résultats en milligrammes d’équivalent acide gallique par gramme d’échantillon.
L’extraction aqueuse à l’hexanediol 1,2 a donné la teneur totale en phénolique la plus élevée et l’extraction à l’eau a donné la plus faible. L’extraction aqueuse à l’hexanediol 1,2 a donné la teneur totale en flavonoïdes la plus élevée et l’extraction aqueuse à l’isopentyldiol a donné la plus faible. L’extraction aqueuse à l’hexylène glycol a montré la valeur de dosage DPPH la plus élevée et l’extraction aqueuse à l’éthanol a montré la plus faible.
L’extraction aqueuse au pentylène glycol a donné la valeur de dosage ABTS la plus élevée et l’extraction à l’eau a donné la valeur la plus basse. L’extraction aqueuse à l’hexylène glycol a montré la valeur FRAP la plus élevée et l’extraction à l’eau a montré la plus faible.
