Pour commencer, placez trois à six embryons déchorionnés dans une boîte de Pétri contenant du milieu Danios complété par 0,02% de tricaïne. Une fois les embryons anesthésiés, transférez-les dans une boîte à fond en verre de 35 x 15 millimètres avec un minimum de moyen. Ajoutez rapidement 300 à 400 microlitres d’agarose à bas point de fusion contenant de la tricaïne pour créer un dôme.
À l’aide d’une pince, positionnez les embryons de manière à ce qu’ils soient bien droits en contact avec le verre, la face ventrale vers le haut. Ensuite, déposez environ 0,5 microlitre de billes magnétiques sur l’agarose. Ajoutez ensuite une goutte de milieu Danios contenant 0,02 % de tricaïne sur l’agarose et les billes.
En fonction de l’échantillon et de la taille du cœur, sélectionnez la perle appropriée et utilisez une pince à épiler pour la placer sur le jaune de l’embryon. Créez une lésion ou un trou au centre du jaune à l’aide d’un bras de la pince à épiler. Placez la perle dans la lésion et poussez-la doucement vers l’avant jusqu’à ce qu’elle atteigne le pôle veineux.
Si l’aspiration seule ne suffit pas à déplacer le talon, poussez-le doucement vers l’oreillette, en appliquant une pression suffisante pour le guider dans la cavité péricardique. Après avoir greffé les billes magnétiques dans les embryons, ajoutez un à deux millilitres de milieu Danios contenant du PTU dans le plat à fond de verre. Ensuite, à l’aide d’une pince à épiler, cassez doucement l’agarose à bas point de fusion et retirez soigneusement les embryons.
Enfin, à l’aide d’une pipette Pasteur, transférez les embryons dans une nouvelle boîte de Pétri contenant un milieu Danios avec du PTU et laissez-les récupérer et se développer à 28,5 degrés Celsius. La perle magnétique a été correctement positionnée dans l’oreillette du cœur du poisson-zèbre, ce qui a permis une circulation sanguine sans obstruction et aucune hémorragie observée avec les parois cardiaques maintenues.
