Ce modèle d’insuffisance cardiaque porcine, induit par le blocage de l’artère circonflexe gauche et le rythme rapide, peut être utilisé pour évaluer les effets de l’injection directe de cellules souches intramyocardiques sur la régénération cardiaque. Notre modèle d’insuffisance cardiaque de colonie porcine est tout à fait stable. La nouvelle taille infarctus de ce modèle est d’environ 16% du ventricule gauche et de l’infarctus gauche d’injection de ventricule réduit d’au moins 40% de la ligne de base.
Avec le porc expérimental fixé dans la position supine, localisez l’artère carotide droite et la veine de jongleur dans le triangle carotide, et utilisez des forceps hémostatiques et la technique aseptique pour isoler l’artère carotide droite et la veine jugulaire. Ligate l’extrémité distale de l’artère carotide droite et la veine jongleuse et utiliser une angiocath pour cannuler la veine du jongleur droit. Après l’insertion d’un plomb stimulateur cardiaque dans le ventricule droit sous guidage aux rayons X utiliser des forceps pour isoler les muscles sternocleidomastoid et scalene antérieur et connecter le stimulateur cardiaque au plomb.
Implantez ensuite un stimulateur cardiaque entre les deux muscles. Puis fermez les deux muscles avec de la soie 2-0. Pour évaluer des changements dans la fonction gauche de ventricule, isolez l’artère fémorale droite et la veine fémorale dans le triangle fémoral, et calculez l’artère fémorale droite avec une angiocath.
Placez un fil de guidant dans la veine fémorale par l’intermédiaire de l’angiocath et retirez l’angiocath. Cannulate une gaine de 12 Français dans la veine fémorale sous la direction du fil de guidage et enlever le fil de guidage. Cannulate l’artère fémorale droite avec une gaine Français neuf comme juste démontré.
Et insérez un cathéter ballon à travers les 12 Français gaine dans le cava vena intérieur sous la direction de rayons X. Calibrer un cathéter de sept Français de volume de pression dans la solution saline isotonique avec un processeur de signal de volume de pression et insérer le cathéter dans l’apex ventricule gauche à travers la gaine de neuf Français sous la direction des rayons X. Suspendre la ventilation et utiliser le processeur de signal de volume de pression pour mesurer le dérivé de pression maximale et négative du ventricule gauche, ainsi que la pression systolique et mettre fin aux pressions diastoliques.
Puis redémarrez la ventilation. Pour l’induction d’infarctus du myocarde, administrer cinq milligrammes par kilogramme d’amiodarone et 1,5 milligramme par kilogramme de lidocaïne bolus par voie intraveineuse plus d’une heure pour prévenir les arythmies ventriculaires avant de calculer l’artère carotide droite avec une gaine de huit Français comme démontré. Effectuez l’angiographie coronaire à travers une gaine de six Français sur le fil guidant le cathéter par l’intermédiaire de la gaine placée guidée par fluoroscopie standard de bras C.
Occlude à l’artère coronaire circonflexe gauche distal à la première branche marginale obtus avec l’inflation transluminale percutanée de cathéter de ballon de dilatation de coronaire sous la conduite de rayon X. Chargez un millilitre de 700 micromètres de micromètres éponge microsphères mélangés avec sept millilitres d’iohexol dans une seringue de 10 millilitres et injecter le mélange à travers le cathéter ballon pour bloquer l’artère coronaire circonflexe gauche. Puis dégonfler le ballon et effectuer une angiographie pour confirmer l’occlusion.
Huit semaines après la charge d’induction d’infarctus deux fois 10 à la huitième cellule souche mésenchymale induite par l’homme et dérivée de cellules souches dans deux millilitres de solution saline normale dans une seringue de cinq millilitres et stériliser 10 centimètres autour de la zone apex beat de l’animal expérimental anesthésié. Utilisez un rétracteur pour effectuer une thoracotomie gauche à l’espace intercostal de quatre ou cinq et effectuer une péricoardiotomie pour exposer la paroi latérale infarctus. Lorsque les zones infarctus visibles, effectuer cinq à huit injections intra-myocardiques d’environ 300 microlitres de cellules par injection avant de fermer l’espace intercostal avec du fil de fer et de fermer la couche musculaire avec des sutures de soie 2-0 et les tissus sous-cutanés et les couches de la peau avec sutures vicryl 2-0.
Pour évaluer l’inducibilité de la tachythmie ventriculaire après thérapie cellulaire, insérez un cathéter électrophysiologique de six Français dans l’apex ventriculaire droit par la veine fémorale et affichez les enregistrements intracardiaques avec l’électrocardiogramme de surface leas I, II et III sur le système d’enregistrement électrophysiologique à une vitesse de 200 millimètres par seconde. Utilisez un stimulateur pour fournir une largeur d’impulsion de deux millisecondes à deux fois le seuil diastolique et fournir un train de stimulation de huit stimuli à une durée de cycle d’entraînement de 200 millisecondes et une longueur de cycle d’entraînement de 300 millisecondes suivie d’un ou deux stimuli supplémentaires prématurés. Puis séquentiellement raccourci les intervalles de couplage jusqu’à ce que la période réfractaire efficace ventriculaire de l’arythmie soit induite, notant la présence d’une tachyarrhythmie ventriculaire soutenue inducible.
Dans cette expérience représentative, l’examen échocardiographique périodique a prouvé que la fraction gauche d’éjection de ventricule a sensiblement diminué de la ligne de base tandis que la dimension end-diastolique gauche de ventricule et la dimension systolique de fin ont sensiblement augmenté à huit semaines après induction d’infarctus du myocarde. En revanche, la fraction gauche d’éjection de ventricule a sensiblement augmenté et la dimension systolique de fin a remarquablement diminué dans le groupe de transplantation cellulaire huit semaines après administration. Le dérivé de pression négatif et la relation systolique de volume de pression de fin ont sensiblement diminué de la ligne de base à huit semaines après induction de l’infarctus du myocarde tandis que l’administration intramyocardique des cellules souches mésenchymales a eu comme conséquence une augmentation de ces fonctions.
La mesure de l’épaisseur gauche de mur infarctus de ventricule dans cinq à sept sections périodiques d’un centimètre d’épaisseur de chaque animal a indiqué un pourcentage d’infarctus gauche de ventricule d’approximativement 16%Il n’y avait aucune survie cellulaire autour du site d’injection dans la région infarctus huit semaines après transplantation. Mais un petit nombre des cellules souches injectées survivantes étaient visibles dans la zone périinfarcte. Les incidents des tachyarrhythmias ventriculaires soutenus inductibles pourraient être facilement augmentés chez les animaux avec l’insuffisance cardiaque.
De noter que la transplantation de cellules souches n’a pas modifié de manière significative le substrat myocardique sous-jacent pour réduire la susceptibilité à la tachyarrhythmie ventriculaire. Comme le blocage gauche de l’artère coronaire circonflexe peut induire une arythmie. Assurez-vous de surveiller l’ECG et d’utiliser immédiatement le défibrillateur biphasique externe pour rétablir les sinus au besoin.
Cette méthode fournit un modèle animal stable et reproductible cliniquement pertinent de l’insuffisance cardiaque grande pour tester l’efficacité des thérapies à base de cellules souches.
