JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Capillaroscopy היא לא פולשנית מתודולוגיה, זולה יחסית להמחשת זרימת הדם באופן ישיר. טכניקת זרימת דם הזרוע מספקת מדדים מקובלים לא פולשנית של תפקוד האנדותל.

Abstract

החוקרים נצלו את טכניקות זרימת דם capillaroscopy ואמה לחקור את תפקידו של תפקוד כלי דם בפתוגנזה של מחלות לב וכלי דם. Capillaroscopy היא לא פולשנית מתודולוגיה, זולה יחסית להמחשת זרימת הדם באופן ישיר. גיוס נימי אחוזים מוערך על ידי חלוקת העלייה בצפיפות נימים הנגרמת על ידי (צפיפות postocclusive תגובתי hyperemia נימי מינוס צפיפות נימים בסיסיות) postocclusive תגובתי hyperemia, בצפיפות הנימים המקסימלי (נצפה במהלך חסימת ורידים פסיבית). אחוזי perfused הנימים מייצגות את חלקם של כל נוכחי נימי הperfused (תפקודי פעיל), והוא מחושב על ידי חלוקת צפיפות hyperemia תגובתי postocclusive נימים על ידי צפיפות הנימים המקסימלי. שניהם גיוס ואחוזי נימי נימי אחוזים perfused לשקף את מספר הנימים פונקציונליות. זרימת דם הזרוע (FBF) טכניקת יחסי הציבורovides קבל צעדים לא פולשנית של תפקוד האנדותל: בסיס יחס FBF מקס / FBF מחושב כאומדן להרחבת כלי דם, על ידי חלוקה הממוצעת של הארבעה ערכי FBF את מקס בממוצע של ארבעה ערכי בסיס FBF. התנגדות כלי דם בזרוע התרחבות מקסימלי (FVR מקסימום) מחושבת כלחץ הדם הממוצע (MAP) מחולק בFBF מקסימום. שניהם capillaroscopy וטכניקות אמה הם ברצון מקובלים על חולים וניתן ללמוד במהירות.

תפקוד אנדותל כלי הדם ומודד מתקבל על פי המתודולוגיות המתוארות במאמר זה יכול להיות כלי עזר בעתיד אסטרטגיות לב וכלי דם מטופל קליניות הקטנת סיכון. כפי שכבר פרסמו דוחות שהראו שתפקוד כלי דם ואנדותל נמצאים בשלבים ראשוניים של יתר לחץ דם כולל prehypertension, מדדי תפקוד כלי דם ואנדותל עשויים לסייע בסופו של דבר זיהוי המוקדם, ריבוד סיכון ומניעה של כלי הדם בשלב סופי פתולוגיה, על השלכותיה הקטלניות.

Protocol

מצגת מקרה (חובה, אם רלוונטי): NA, זה עדיין הליך מחקר ניסיוני, עדיין לא בשימוש קליני.

אבחון, הערכה, ותכנית (חובה, אם רלוונטי): NA, זה עדיין הליך מחקר ניסיוני, עדיין לא בשימוש קליני.

הליך (חובה): חלק זה צריך לכלול תיאור צעד אחר צעד של נהלים רלוונטיים, עמידה בהנחיות להלן.

1. מיקרוסקופיה נימים (איור 1)

  1. טכניקת capillaroscopy עובדת מSerne ועמיתיו 1. קריטריון לניפוי הליך זה הוא מחלת כלי דם קולגן, מאז מחלת כלי דם קולגן מייצרת שינויי נימים ידועות 2.
  2. בעקבות מהירות מינימאלית 10-שעתי לילה, 20 דקות של מנוחת ישיבה, מדידות כלי דם נעשות לאחת של חצי שעה בין 7ו 11 בבוקר, בחדר שקט, בטמפרטורה מבוקר (נשמר בין 21.5-22.5 המעלות צלזיוס), עם הנושא בתנוחת ישיבה ויד השמאל בגובה לב.
  3. Nailfold נימים בעור הגבי של האצבע השלישית הם דמיינו באמצעות stereomicroscope (אולימפוס; מרכז עמק, הרשות הפלסטינית), צמוד ל4 אינסייט SPOT מגה פיקסל מצלמה דיגיטלית בצבע אחד (מספר מודל ב- 1400: מכשירי אבחון; הייטס סטרלינג, MI), ומחשב נייד (Dell Latitude D600: Dell; אוסטין, טקסס). כדי להגביל את התנועה, היד והזרוע השמאלית מכוסות באופן רופף בשמיכה מקופלת, ונחו על שמיכה מקופלת אחרת שמוצבת בבסיס של המיקרוסקופ.
  4. תאורת Nailbed מושגת עם מנורת 250-W הלוגן סיבים אופטית (KL 2500LCD: שוט-Fostec; Elmsford, ניו יורק); תאורה נוספת ממקור אור משלים 150W סיבים אופטי הלוגן (מיקרוסקופי לינה וארוחת בוקר, בע"מ, Warrendale, הרשות הפלסטינית) משמשת אצל אנשי פיגמנט כהה.
  5. כדי להמחיש את נימי הדם,3.2x אובייקטיבי (אולימפוס 3.2/0.07) משמש להגדלת מערכת כוללת של 38.4x.
  6. שימוש בתוכנת הדמית SPOT מסופקת עם המצלמה, לעומת זאת אור / חושך בצילומי הנימים מוגברות תוך שימוש באותה פונקצית תוכנת SPOT סטנדרטית (מתיחה של רמות בהירות וכהות) על מנת למקסם את הנראות של נימי הדם בכל מקצועות.
  7. כדי לכמת את צפיפות נימים, photomicrographs הדיגיטלי נלקחים כל 3-5 שניות בכל אחד משלושה שלבים, בתחילת מחקר במנוחה, במהלך hyperemia תגובתי postocclusive, ובמהלך חסימת ורידים. (א) בתחילת המחקר במנוחה, photomicrographs נלקחים על פני תקופה של שלוש דקות כדי לזהות נימי perfused במנוחה. (ב) בhyperemia תגובתי postocclusive, photomicrographs נלקחים לכמת נימי perfused תפקודי (בסיס בתוספת מילואי נימים), כמפורט להלן. ראשית, שרוול חסימה בחלק העליון של הזרוע השמאלי מנופח כדי 40 מ"מ כספי מעל לחץ הסיסטולי למשך 10 דקות. Photomicrographs מכן צולם במהלך הדואר דקה הראשונה מייד לאחר שחרור החסימה בעורק, ולדמיין את כל נימי perfused תפקודי. צפיפות נימים נמוכה בעקבות hyperemia תגובתי מציינת גיוס פונקציונלי נימים לקויות, וקלישות לכן פונקציונלית. (ג) בתקופת photomicrographs ורידים הספיגים נלקחים לכמת צפיפות נימים מקסימלי, הכוללת גם perfused (עם תא פעיל דם אדום (RBC) תנועה) וnonperfused (מלא RBCs עומד, והלא נע) 3 נימים כדלקמן. לאחר 10 דקות של מנוחה לאחר הליך hyperemia תגובתי postocclusive, שרוול הזרוע מנופח עד 60 מ"מ כספי עבור 60 שניות, באופן פסיבי מכריח את דם לכל נוכחי נימי הפטנט וphotomicrographs נלקחו בתקופה זו. מאז צפיפות נימים מקסימלי כוללת את כל הנימים מבניות הנוכחיות, ירידה בצפיפות נימים מקסימליים מציינות קלישה מבנית.
  8. צפיפות נימים מוגדרת כמספר הנימים לכיכר מילlimeter של עור nailfold, ומחושב כממוצע של ארבע מדידות המתקבלות מארבע התמונות הממוקדות בצורה הברורה ביותר, מעוותות לפחות על ידי תנועה. במחקרים שלנו, ערכים אופייניים לספירה (נימי נימים / מ"מ 2) היו 55-80 לנקודת התחלה, 65-90 לפוסט איסכמי, ו90-105 לחסימת ורידים. ערכים לגיוס נימי אחוזים הם בדרך כלל בין 5% ל 25% (כלומר ~ 10-15%) ואחוז perfused נימים בין 70% ו 95% (כלומר ~ 80-90%), עם ערכי לחץ דם, להיות נמוכים יותר בקרב מאשר normotensives. השחזור של הליך הספירה אומת עם שלושה משקיפים שבצעו הערכות ידניות עצמאיות של צילומים של 10 נבדקים שונים (איור 2). המשקיפים היו עיוורים ללחץ דם והזהות בנושאים אלה. לאחר אימון, ספירה שלאחר מכן בצעה באופן עצמאי הראתה רמה גבוהה של הסכמה. ממוצע פערים בין מדרג ותוך rater היו של יורדr של 2-3 נימים / מ"מ 2, ומקדמי מתאם intraclass היו גדולים יותר מכל 0.90. וריאציה לטווח הקצר של אמצעי capillaroscopy הייתה באותו סדר הגודל כמו הבדלים בין מדרג ותוך rater (כ 2 נימים / מ"מ 2), אבל וריאציה ארוכת טווח שנצפתה על פני 2-3 שנים הייתה בסדר גודל גדול יותר (כ 15 נימים / מ"מ 2), מצביע על כך ששינויי אורך ניתן להבחין בקלות מוריאצית מדרג. אמינות של שני מדדי תפקוד הנימים הייתה גם גבוהה (intraclass מקדם מתאם = 0.84 לגיוס נימי אחוזים ו0.82 אחוזים לנימי perfused).
  9. החוקרים כעת לנצל שיטה מבוססת מחשב לכימות צפיפות נימים באמצעות Image-Pro Plus תוכנת הדמיה (גרסה 6.2, מדיה קיברנטיקה, Inc, Bethesda, MD: איור 3). מתאמי פירסון בין תחילת מחקר, לאחר איסכמי, וVenoספירתנו הגודשת לעשות עם תוכנה וספירות ידניות מקבילות ב 10 נבדקים היו 0.78, 0.78, 0.71 ובהתאמה (כל p <0.05), המצביע הסכם סביר בין שתי שיטות. אמינותם של הרוזנים מבוססי מחשב היא מעט נמוכה מזה של ספירה ידנית, אבל עדיין גבוהה (intraclass מקדם מתאם = 0.91 לתחילת מחקר, 0.86 לפוסט איסכמי, ו0.84 לורידי חסימה). יש לנו נתונים שלא פורסמו גם ממחישים את הקשר בין ספירה אוטומטית עם גורמי סיכון קרדיווסקולריים, כוללים יתר לחץ דם מרובים, שאנחנו כרגע מתכוננים לפרסום.

  10. טבלה 1 מסכמת את מדידות צפיפות נימים וחישובים. גיוס נימי אחוזים מוערך על ידי חלוקת העלייה בצפיפות נימים הנגרמת על ידי hyperemia postocclusive תגובתי (צפיפות postocclusive תגובתי hyperemia נימים מינוס צפיפות נימים בסיסיות), על ידי צפיפות הנימים המקסימלי (נצפה במהלך פסיבי Venoחסימתנו). אחוזי perfused הנימים מייצגות את חלקם של כל נוכחי נימי הperfused (תפקודי פעיל), והוא מחושב על ידי חלוקת צפיפות hyperemia תגובתי postocclusive נימים על ידי צפיפות הנימים המקסימלי. שניהם גיוס ואחוזי נימי נימי אחוזים perfused לשקף את מספר הנימים פונקציונליות. ערכים נמוכים יותר לצעדים אלה מצביעים על קלישת נימים פונקציונלית.

2. הערכת תפקוד האנדותל

  1. תפקוד האנדותל הוא נבדק לפני ואחרי hyperemia תגובתי postocclusive, באמצעות מדידות plethysmography לא פולשנית של זרימת דם זרוע, על פי השיטה של Sivertsson, 4 אשר מנצלת את גירוי האנדותל התלוי של hyperemia תגובתי לגרום התרחבות.
  2. עם הנושא בתנוחת הישיבה לאחר 10 דקות של מנוחת פרקדן, כספית במד מתח גומי שנמתח עד 10% מאורכו המנוחה שלו הוא כרך arounד 5 הסנטימטר לזרועו של הנושא בהמשך הפוסות antecubital.
  3. המתח-המד מחובר לplethysmograph (EC-4: DE Hokanson, Inc; לוויו, וושינגטון), אשר בתורו מחובר לדופלר מקליט (CW-1; DE Hokanson, Inc; Belleveue, וושינגטון).
  4. שרוול חסימת זרוע עליונה מוחל, והזרוע מושעה בנוחות בגובה לב באמצעות תחבושת קלע מחוברת לוריד מוט מתכוונן. הסיסטולי ולחץ דם דיאסטולי וקצב לב מתקבלים עם שרוול Dinamap ProCare 100 אוטומטי BP (GE Healthcare, Piscataway, ניו ג'רזי) הניח על היד הנגדית.
  5. שרוול ילדים סביב פרק ​​כף היד הוא מנופח עד 200 מ"מ כספי כדי לחסום זרימה לכף היד. שרוול הזרוע העליונה הוא מנופח למ"מ כספי 50, מנוכה תמורת 1.5 שניות, ולאחר מכן נפח מחדש-במהירות לפני כל מדידת אמת זרימת דם, שהושגה באמצעות רחבה של מד המתח ממוקם סביב הזרוע.
  6. זרימת דם בזרוע (FBF) נמדדה בתחילת המחקר נח (FBF בסיס) ושובt התרחבות postocclusive hyperemia המושרה מקסימלי (FBF מקסימום). למדידות זרימת דם בנקודת התחלה, ארבעה פיתולי FBF רצופים מתקבלים בתוך 30 שניות (FBF בסיס).
  7. אז שרוול החסימה הוא מנופח ל40 מ"מ כספי מעל לחץ הסיסטולי למשך 10 דקות. בעקבות שחרורו של חסימת עורקים (hyperemia תגובתי postocclusive), ארבעה פיתולי FBF רצופים מתקבלים בתוך 30 השניות הראשונות של זרימה (FBF מקסימום).
  8. בסיס יחס FBF מקס / FBF מחושב כאומדן להרחבת כלי דם, על ידי חלוקה הממוצעת של הארבעה ערכי FBF את מקס בממוצע של ארבעה ערכי בסיס FBF. התנגדות כלי דם בזרוע 5 בהרחבת כלי דם מקסימלי (FVR מקסימום) מחושבת כ מתכוון לחץ דם (MAP) מחולק בFBF מקסימום. FBF מקסימום במהלך hyperemia תגובתי קשור ישירות לFBF לאחר עירוי מקסימאלי של אצטילכולין תוך עורקים, אנדותל vasodilator תלוי. 6 בהתאם, FBF מקסימום ויחס בסיס FBF מקס / FBF מתקבלים אמצעים בלתי חודרניים של תפקוד האנדותל. 6-8 בנוסף, שני FBF המקסימום וFVR המקסימום משקפים שינויים מבניים עורקי התנגדות (יחס גדל קיר / לומן) 9.

תוצאות

הבדלים במראה של microvasculature בין יחידים normotensive ויתר לחץ הדם הם ברורים ממבט ראשונים על ידי השוואת נתונים 4 ו 5. איור 4 מראה את הרשת הטיפוסית של נימי דם ישר בשורות מאורגנות היטב באדם normotensive. לעומת זאת, באיור 5 מדגים דפוס יותר פרוע של מכווצים, נימים מ?...

Discussion

Capillaroscopy (מיקרוסקופיה נימים) הנו אמצעי שאינו סטנדרטי של מבנה נימים. עם זאת, כיום, אין שיטות מקובלות להערכה ישירה של structure.Furthermore נימים, מיקרוסקופיה נימים כבר בשימוש נרחב להערכה הישירה של capillarydensity בגוף גדול והצומח של עבודה שפורסמה 12, 13, 10, 11, 14-18 . בנוסף, יש לנו תוקפים ...

Disclosures

המחברים אין לה סכסוך כספי של עניין הנוגע להתנהגותו או הפרסום של עבודה זו לחשוף.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי מספרי הפרס להעניק R01HL096593 וK23HL72825 מהלאומי ללב, ריאות ודם מכון. התוכן הוא באחריות בלעדית של אוניברסיטת תומס ג'פרסון, ואינו מייצגים בהכרח את עמדתה הרשמית של המכון הלאומי ללב, ריאות ודם מכון או המכונים הלאומיים לבריאות.

References

  1. Serne, E. H., Gans, R. O., ter Maaten, J. C., ter Wee, P. M., Donker, A. J., Stehouwer, C. D. Capillary recruitment is impaired in essential hypertension and relates to insulin's metabolic and vascular actions. Cardiovasc. Res. 49, 161-168 (2001).
  2. Bollinger, A., Fagrell, B. . Clinical Capillaroscopy: A guide to its use in clinical research and practice. , (1990).
  3. Antonios, T. F., Rattray, F. E., Singer, D. R., Markandu, N. D., Mortimer, P. S., MacGregor, G. A. Maximization of skin capillaries during intravital video-microscopy in essential hypertension: comparison between venous congestion, reactive hyperaemia and core heat load tests. Clin. Sci. (Lond). 97, 523-528 (1999).
  4. Sivertsson, R. The hemodynamic importance of structural vascular changes in essential hypertension. Acta. Physiol. Scand. Suppl. 343, 1-56 (1970).
  5. Raitakari, O. T., Celermajer, D. S. Testing for endothelial dysfunction. Ann. Med. 32, 293-304 (2000).
  6. Tousoulis, D., Antoniades, C., Stefanadis, C. Evaluating endothelial function in humans: a guide to invasive and non-invasive techniques. Heart. 91, 553-558 (2005).
  7. Higashi, Y., Sasaki, S., Nakagawa, K., Matsuura, H., Kajiyama, G., Oshima, T. A noninvasive measurement of reactive hyperemia that can be used to assess resistance artery endothelial function in humans. Am. J. Cardiol. 87, 121-125 (2001).
  8. Higashi, Y., Yoshizumi, M. New methods to evaluate endothelial function: method for assessingendothelial function in humans using a strain-gauge plethysmography: nitric oxide-dependent and independent vasodilation. J. Pharmacol. Sci. 93, 399-404 (2003).
  9. Lind, L., Sarabi, M., Millgard, J. Methodological aspects of the evaluation of endothelium dependent vasodilatation in the human forearm. Clin. Physiol. 18, 81-87 (1998).
  10. Cheng, C., Diamond, J. J., Falkner, B. Functional capillary rarefaction in mild blood pressure elevation. Clinical and Translational Science. 1, 75-79 (2008).
  11. Cheng, C., Daskalakis, C., Falkner, B. Capillary rarefaction in treated and untreated hypertensive subjects. Therapeutic Advances in Cardiovascular Disease. 2, 79-88 (2008).
  12. Antonios, T. F., Singer, D. R., Markandu, N. D., Mortimer, P. S., MacGregor, G. A. Rarefaction of skin capillaries in borderline essential hypertension suggests an early structural abnormality. Hypertension. 34, 655-658 (1999).
  13. Noon, J. P., Walker, B. R., Webb, D. J., et al. Impaired microvascular dilatation and capillary rarefaction in young adults with a predisposition to high blood pressure. J. Clin. Invest. 99, 1873-1879 (1997).
  14. Antonios, T. F., Rattray, F. M., Singer, D. R., Markandu, N. D., Mortimer, P. S., MacGregor, G. A. Rarefaction of skin capillaries in normotensive offspring of individuals with essential hypertension. Heart. 89, 175-178 (2003).
  15. de Jongh, R. T., Ijzerman, R. G., Serne, E. H., et al. Visceral and truncal subcutaneous adipose tissue are associated with impaired capillary recruitment in healthy individuals. J. Clin. Endocrinol. Metab. 91, 5100-5106 (2006).
  16. de Jongh, R. T., Serne, E. H., Ijzerman, R. G., de Vries, G., Stehouwer, C. D. Free fatty acid levels modulate microvascular function: relevance for obesity-associated insulin resistance, hypertension, and microangiopathy. Diabetes. 53, 2873-2882 (2004).
  17. de Jongh, R. T., Serne, E. H., RG, I. J., Stehouwer, C. D. Microvascular function: a potential link betweensalt sensitivity, insulin resistance and hypertension. J. Hypertens. 25, 1887-1893 (2007).
  18. Ijzerman, R. G., Voordouw, J. J., Van Weissenbruch, M. M., et al. TNF-alpha levels are associated withskin capillary recruitment in humans: a potential explanation for the relationship between TNF-alpha and insulin resistance. Clin. Sci. (Lond). 110, 361-368 (2006).
  19. Yvonne-Tee, G. B., Rasool, A. H., Halim, A. S., Rahman, A. R. Noninvasive assessment of cutaneous vascular function in vivo using capillaroscopy, plethysmography and laser-Doppler instruments: its strengths and weaknesses. Clin. Hemorheol. Microcirc. 34, 457-473 (2006).
  20. Wilkinson, I. B., Webb, D. J. Venous occlusion plethysmography in cardiovascular research: methodology and clinical applications. Br. J. Clin. Pharmacol. 52, 631-646 (2001).
  21. Thijssen, D. H., Bleeker, M. W., Smits, P., Hopman, M. T. Reproducibility of blood flow and post-occlusive reactive hyperaemia as measured by venous occlusion plethysmography. Clin. Sci. (Lond). 108, 151-157 (2005).
  22. Leslie, S. J., Attina, T., Hultsch, E., et al. Comparison of two plethysmography systems in assessment of forearm blood flow. J. Appl. Physiol. 96, 1794-179 (2004).
  23. James, M. A., Tullett, J., Hemsley, A. G., Shore, A. C. Effects of aging and hypertension on the microcirculation. Hypertension. 47, 968-9674 (2006).
  24. Debbabi, H., Uzan, L., Mourad, J. J., Safar, M., Levy, B. I., Tibirica, E. Increased skin capillary density in treated essential hypertensive patients. Am. J. Hypertens. 19, 477-483 (2006).
  25. Serne, E. H., Gans, R. O., ter Maaten, J. C., Tangelder, G. J., Donker, A. J., Stehouwer, C. D. Impaired skincapillary recruitment in essential hypertension is caused by both functional and structural capillary rarefaction. Hypertension. 38, 238-242 (2001).
  26. Carpentier, P. H. New techniques for clinical assessment of the peripheral microcirculation. Drugs. 58, 17-22 (2001).
  27. Shore, A. C. Capillaroscopy and the measurement of capillary pressure. Br. J. Clin. Pharmacol. 50, 501-513 (2000).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

71capillaroscopy

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved