JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

מאמר זה מפרט כיצד Elvax 40W יכול לשמש כשיטת שחרור איטי לאספקת סמים לרשתית החולדה הבוגרת. הפרוטוקול להכנה, טעינה, ומספקים מורכב סמים שרף לעין מתואר.

Abstract

מחלות של הרשתית הן קשות לטיפול כרשתית נמצאת עמוק בתוך העין. שיטות פולשניות של משלוח סמים פעם נדרשות לטיפול במחלות אלה. מחלות רשתית כרוניות כגון בצקת או neovascularization רשתית בדרך כלל דורשות זריקות תוך עיניות מרובות כדי לטפל במצב בצורה יעילה. עם זאת, הסיכונים הכרוכים בזריקות אלה יגדלו עם משלוח חוזר ונשנה של התרופה. לכן, שיטות משלוח חלופיות צריכה להיות הוקמו כדי למזער את הסיכונים של reinjection. כמה חקירות אחרות פיתחו שיטות לאספקת תרופות לאורך זמן ממושך, באמצעות חומרים המסוגלים שחרור כימיקלים לאט לתוך העין. בחקירה זו, אנו מתארים את השימוש בElvax 40W, שרף קופולימר, לפעול ככלי להעברת תרופות לרשתית החולדה הבוגרת. השרף הוא עשה ועמוס בסמים. מורכב סמים השרף מושתל אז לתוך חלל הזגוגית, שבו היא תשחרר לאט את התרופה מעל tiשלי. שיטה זו נבדקה באמצעות 2-אמינו-4-phosphonobutyrate (APB), אנלוגי גלוטמט שחוסם את תגובת האור של הרשתית. זה הודגם כי APB שוחרר לאט מהשרף, והיה מסוגל לחסום את תגובת הרשתית על ידי 7 ימים לאחר השתלה. זה מצביע על כך משלוח סמים שחרור איטי באמצעות שרף קופולימר זה הוא יעיל לטיפול ברשתית, ויכולים לשמש טיפולי עם בדיקות נוספות.

Introduction

הטיפול במחלות כרוניות כמו סוכרת ולחץ דם גבוה מציבה בפנינו אתגרים רבים, כמו מחלות אלה בדרך כלל דורשים טיפול לתקופות ממושכות של זמן, לעתים קרובות לכל חיים. זה נקרא לפיתוח מערכות למתן תרופות שחרור האיטי, המקטין את הצורך במינון תכוף. יעילותן של שיטות שחרור איטיות אלה הודגמה באמצעות הפיתוח של משאבות אינסולין, כדי להפחית את מספר זריקות אינסולין הנדרש לטיפול בסוכרת. מחלות כרוניות של העין, במיוחד אלה המשפיעים על השכבות הפנימיות שלה, דורשים את המתן התכוף של תרופות באמצעות הליכים פולשניים. מחלה כרונית אחת כזו המשפיעה על העין האנושית היא ניוון מקולרי גיל קשור (AMD). זה משפיע על הרשתית המרכזית, שהיא שכבה של רקמה עצבית הממוקמת בחלק האחורי של העין אחראית על ייזום חזון. AMD הוא הגורם המוביל לעיוורון בעולם המערבי 1. אתגר מיוחד בטיפול מחדשהמחלות tinal היא שנדרשת לתרופה להגיע שכבה עמוקה זו בעיניים, אשר לעתים קרובות דורשת שיטות פולשניות של משלוח. תרופות בדרך כלל מנוהלות לתא הזגוגית והרשתית באמצעות זריקות זגוגית. עם זאת, עם כל זריקה יש סיכון לסיבוכי postinjection, כולל אנדופתלמיטיס, היפרדות רשתית, קטרקט והדימום זגוגי 2. סיכון זה מוכפל עם כל reinjection של התרופה.

הקטנת הצורך של זריקות מרובות תהיה יתרון עיקרי בטיפול בAMD. לטיפול בצורה הרטובה של AMD, שבו צמיחת כלי חדשה היא סימן היכר, האסטרטגיה הטיפולית שהוקמה היא למקד את גורמי אנדותל הצמיחה (VEGF) באמצעות מעכבי VEGF 3. נכון לעכשיו, אלה מועברים באמצעות זריקות זגוגית חוזרות ונשנות. באופן דומה, בטיפול בבצקת מקולרית, סיבוך שכיח של רטינופתיה סוכרתית, סטרואידים מועברים באמצעות זריקות חוזרות ונשנות 4. משלוח של תרופות אלה באמצעות שיטות שחרור איטיות אכן יכול להפחית את הסיכון לסיבוכי postinjection.

הרעיון של מערכת אספקת הסמים שחרור איטית תואר לראשונה שימוש ברכב גומי סיליקון, כדי לספק מולקולות קטנות לתוך הרקמות של בעלי חיים 5. מאז, שיטות שחרור איטיות אחרות פותחו כדי לספק מולקולות גדולות יותר, כמה מהם נבדקו בעין. ספקי חלקיקים, כגון microspheres מתכלה, poly-lactide-CO-glycolide חלקיקים (PLGA) ושלפוחית ​​פוספוליפידים (יפוזומים) יכולים להיות שימושיים ככלי רכב משלוח 6,7. חלקיקי PLGA ויפוזומים כבר הושוו בסביבה במבחנה ליכולת שלהם לספק סוכנים אנטי סרטניים על פני לובן העין לאורך זמן 7. שני כלי הרכב היו יעילים בשחרור לאט הסמים. עם זאת, המחקר נערך רק בסביבה במבחנה. Bochot et al. (2002) 8 נבדקוהיעילות של יפוזומים להחדיר מולקולות לרשתית in vivo. הם הוכיחו כי ליפוזומים לספק בהצלחה oligonucleotides הקטן ברשתית עין הארנב. המחברים טען כי ליפוזומים יכולים להיות מועילים בטיפול במחל רשתית 8. עם זאת, הטבע של שלפוחית ​​אלה לצוף בזגוגית אומר שסביר להניח שהם לטשטש או לפגוע בראייה 9.

Okabe et al. (2003) 10 להשתמש בדיסקי פולימר מתכלה שאינם מורכבים מ33% אצטט אתילן ויניל ליישם beta-methasone בארנבות. הם מושתלים דיסקים לתוך כיס scleral והפגינו לשחרור היעיל של התרופה לתוך הזגוגית והרשתית לעד חודש 10. עם זאת, בפרוטוקול ספציפי זה, השתל היה גדול יחסית ונוקשה, ונדרש הליך כירורגי מורכב יותר הכוללים חתך scleral גדול ותפירה.

מחקר מוקדם יותר נחקר tissuתגובת דואר לכלי רכב פולימר שונים על ידי השתלה אותם לתוך הקרנית של עיני ארנב, ומצאה כי קופולימרים אצטט אתילן ויניל נשטפו באלכוהול לא לגרום לדלקת או גירוי. מתחמים אלה הוצגו כדי לקיים את המסירה של תרכובות גדולות יותר לרקמות של בעלי חיים לתקופות ממושכות של זמן, כמה עולה עד 100 ימים תלויים בתרופה 11. סוג אחד כזה של שרף קופולימר פותח תעשייתי בצורה של Elvax 40W (40% על ידי תוכן comonomer אצטט משקל אתילן ויניל עם תוסף אמיד 'W' כדי לשפר את הטיפול גלולה). שרף קופולימר זה חומר אינרטי שהוא יציב בשני חדרים וטמפרטורת גוף. זה לא הוכח לגרום לאלרגיות או רעיל ברקמות ביולוגיות. שרף זה למעשה סיפק מגוון גדול של תרופות במודלי ניסויים שונים שיחקרו את הפונקציות של מערכות שונות, כגון מערכת החלב ductal 12, שמיעתי הקליפה העיקרית 13,14 </ Sup>, וצפרדע מערכת ראייה 15. שרף זה שימש גם בעין, כדי לספק תרופות לפיתוח צב 16,17, עובר עוף 18,19, וחמוס מבוגר רשתיות 20. במערכת העצבים המרכזית החולדה, השרף יש רק שימש במוח 21-23, אך השימוש בו בעין של החולדה לא תועד.

היתרונות של שימוש בשרף קופולימר זה כדי לספק תרופות לאט לרשתית על פני שיטות אחרות, הוא שזה הוא תרכובת יציבה שאינו גורם לדלקת או גירוי בעין. בניגוד למנשא חלקיקים, מורכב סמים השרף לא לפגוע בראייה לאחר השתלה, כפי שבדרך כלל נשאר באתר של משלוח במקום צף בזגוגית. זה רק היה דורש תהליך השתלה פשוט לתוך חלל הזגוגית הקרוב לימבוס של העין, ולא דורש תפירה לאחר השתלה. לאחרונה, חלה עלייה במספר מערכות אספקת רומן, כגוןטכנולוגיית תא במארז (ECT) 24,25, הידרוג 26, ומיקרופילמים 27. עם זאת, השיטה ששמשה במחקר הנוכחי להכנה ואספקה ​​מורכבת סמים שרף היא גם קלה לעקוב ולא יקר, ובכך להיות יתרון נוסף לשימוש בסביבת מחקר בסיסית. האתגר של שימוש מורכב זה כדי לספק טיפולים תרופתיים לטווח הארוך הוא לקבוע את הריכוז האופטימלי של התרופה שיהיה למקסם את היתרונות הטיפוליים שיש זריקות זגוגית פחות.

מאמר זה נועד להדגים את השימוש במתחם הסמים השרף לטיפול לטווח ארוך של רשתית החולדה הבוגרת. היעילות של מצב של משלוח זה נבדקה באמצעות 2-אמינו-4-phosphonobutyrate האנלוגי גלוטמט (APB) כתרופה. בלוקים APB תגובת האור של התאים דו קוטביים על ידי חיקוי גלוטמט, מוליך עצבי אנדוגני ב28 הרשתית. כאשר APB מתחרה עם גלוטמט לרצפטור שלו, חוסם את הניהול התאורהתגובה לא. APB נעשה שימוש במחקרים פיסיולוגיים לשליטה בתפקוד רשתית ולמדוד את השפעתו תוך שימוש בשיטות אלקטרו כגון electroretinography (ERG). במחקרים קודמים, APB היה בשימוש כבר הקצר טווח 29 וטיפול לטווח הארוך של הרשתית המתפתחת; האחרון מעורב נותן מנה אחת באמצעות הזרקה תוך עינית יומית ל30 ימים 30. אותה הכמות של APB (0.092 מ"ג בתמיסת מלח סטרילית, בריכוז של 50 מיקרומטר) שימשה לכל הזריקות כפי שהוצעה ב28,29,31 עבודה קודמות. בחרנו APB לבדוק מורכב סמים שרף ככלי בשחרור איטי, כדי לספק תרופות לעין. השיטות שתוארו במחקר זה דומות לשיטות שתוארו קודם לכן היו מעורבות בהכנה של תרופות השרף המורכב 16,32; עם זאת אנו גם פירוט את השימוש בו באופן ספציפי בעין של החולדה הבוגרת. לאחר השתלה כירורגית של השרף הטעון APB לתוך העין, ERG בוצע כדי לקבוע אם APB מבטל את rתגובת אור etinal, ולכן אם APB כבר פורסם בהצלחה לתוך הזגוגית ורשתית.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

כל הניסויים שנערכו היו בהתאם להצהרת ארוו לשימוש בבעלי חיים ברפואת עיניים וחזון מחקר, ובאישור של אוניברסיטת ועדת בעלי החיים Aquila L'אתיקה והוועדה הניסויים בבעלי החיים באוניברסיטה הלאומית של אוסטרליה האתיקה. חולדות מבוגרות (P100-200) שמשו במהלך מחקר זה.

.1 מכינים את פלטות שרף קופולימר

  1. הנח 20 כדורי Elvax 40W לתוך כוס זכוכית קטנה בארון קטר.
  2. מלא את הכוס עם 100% אתנול להבטיח לכסות את כל כדורים.
  3. כסה את הכוס עם Parafilm, ולספוג את כדורים ב100% אתנול בטמפרטורת חדר למשך 7-10 ימים. הערה: משלב זה ואילך, לא משתמש במתכת או פלסטיק כדי לטפל או לאחסן את השרף.

2 הכן את פתרון הסמים לטעינה

  1. ממיסים את תרופת בחירה ב0.1% sulfoxide דימתיל (DMSO). הפוך את פתרון הסמים עד 40 μl בנפח.טען את השרף עם שלוש פעמים את הריכוז של התרופה שתינתן במנה אחת.

.3 להכין וטען את קומפלקס סמים שרף

  1. העבר את 20 כדורים שטפו למשנהו כוס זכוכית קטנה. ממיסים את כדורים בdichloromethane 4 מ"ל ל45 כ דקות. כסה את הכוס עם Parafilm בעוד כדורים הולכים ומתפוגגים.
  2. הכן פתרון של גרין המהיר FCF על ידי המסתו בDMSO 0.1% לריכוז של 0.001 מ"ג / מ"ל.
  3. קח פיפטה אחד, ולהכין 40 μl של פתרון התרופה שהוכן קודם לכן. לטעון פיפטה אחרת עם 40 μl של פתרון ירוק מהיר.
  4. הוספת שני הפתרונות בו זמנית לתוך הכוס. מיקס במהירות באמצעות זכוכית ערבוב מוט עד הצבע הירוק מפוזר באופן אחיד לאורך כל התערובת.
  5. מייד להעביר את הכוס על קרח יבש ל10 דקות לצום להקפיא את השרף.
  6. הגדרה "תא אידוי" להתאדות הממס. מלאמיכל עד גדול יותר לשליש עם חלוקי נחל סידן גופרתי. צור גם בחלוקי הנחל, ולמקם בזהירות את הכוס בכל כך טוב שהחלוקים להגיע עד למחצית הכוס, כדי לייצב את הכוס בחדר.
  7. כסה את המכל מחוץ גדול יותר עם Parafilm.
  8. העבר את תא האידוי למקפיא. שמור ב-20 מעלות צלזיוס למשך 2-3 שבועות.

.4 הכן את קומפלקס סמים שרף להשרשת כירורגי

  1. הסר את תא האידוי מהמקפיא. מעבירים את גוש סמים שרף המוצק לצלחת זכוכית כל הזמן על קרח.
  2. בעזרת מיקרוסקופ או זכוכית מגדלת, לחתוך חתיכה כ 0.05 מ"מ קוטר ו0.1 מ"מ אורך מהגוש באמצעות כלי מקדחה או אגרוף.
  3. לעטוף את שארית הבלוק בחומר הקפאת הוכחה (למשל, נייר אלומיניום) ולשמור ב-20 ° C עד נדרש.

.5 כירורגי של השתל מורכב סמים שרף לתוך העיניים של העכברוש

  1. הכן את החיה לניתוח. הרדימי באמצעות זריקת intraperitoneal של תערובת של קטמין (100 מ"ג / קילוגרם משקל גוף) ו xylazine (מ"ג 12 / קילוגרם משקל גוף). שים לב לבעלי החיים עד שהרדמה מלאה מושגת. הערה: בעלי החיים צריכים להיות אובדן של תנועות (פרט לנשימה), ואובדן הרפלקסים קמצוץ של קרנית ואת הבוהן.
  2. מעבירים את החיה בהרדמה המלאה לשולחן הניתוחים. mydriaticum השימוש (לדוגמא, סולפט אטרופין), והרדמה מקומית (לדוגמא, hydrochloride tetracaine) יורדים על העין (ים) שעברה ניתוח. החל דמעות מלאכותיות כדי לשמור על הקרנית לחה במהלך ניתוח. משתמש במחטים חד פעמיות וכלים סטריליים לאורך כל הניתוח.
  3. לייצב את העין בעזרת זוג מלקחיים מעוקלים בוטים אחרי שהתלמיד הוא פתיחה מלאה. השתמש במיקרוסקופ כדי להפוך את פצע עומק מלא כדי להגיע לכ -2 מ"מ זגוגי, מימבוס באמצעות מחט 25 G.
  4. הכנס את פיסת t מוכנההוא מורכב סמים שרף לתוך הפצע בעזרת זוג מלקחיים בסדר, מחודדים (לדוגמא, פינצטה) כי הם מסוגלים לחדור לאתר לנקב.
  5. כטיפול מונע לזיהום חיידקים, חל משחה אנטיביוטית לעין, כדי למנוע דלקת, כמו גם מניעת יובש בקרנית בעוד החיה מתאוששת.
  6. שים לב לבעלי החיים עד להחלמה מלאה. אל תשאיר את בעל החיים ללא השגחה עד שהוא חזר להכרה. אל תחזרו בעלי החיים לחברתם של בעלי חיים אחרים, עד שהתאוששו באופן מלא. אם בעל החיים מראה סימנים של מתח או אי נוחות, יש להשתמש במשככי כאבים על פי הפרוטוקול שאושר על האתיקה.
  7. בצע את הליכי ניסוי הרגילים לאיסוף וניתוח של הרקמה.
  8. בסיום ניסויים, להרדימו עם זריקת intraperitoneal של pentobarbital (60 מ"ג / קילוגרם משקל גוף) 2% פתרון hydrochloride לידוקאין.

הערה: Lignocaine הידרוכלוריד דקותimizes אי נוחות מקומית.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

electroretinography שדה מלא (ERG) שימש כדי לזהות את ההשפעה של APB על הרשתית. לפרטים כיצד ERG בוצע, מתייחס ללימודי 33,34 הבאים. בקיצור, אחרי הרדמת בעלי החיים, אלקטרודה זהב הונחה על הקרנית של העין, ואת האלקטרודה ההתייחסות הוצבה בקרקפת הקדמית בין העיניים, כדי להקליט את הפעילות החשמל?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

מאמר זה מדגים את השימוש בתרופה מורכב שרף עבור משלוח השחרור האיטי של תרופות לרשתית. אנחנו אמורים להציג את שיטה שבה היא זול יחסית וקל ליישום במודל של בעלי חיים קטנים.

בהתחשב בכך שהפונקציה של APB היא לפעול כאנלוגי גלוטמט, זה יחסום את ת?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

המחברים אין לגילוי.

Acknowledgements

This research was supported by the Australian Research Council through the ARC Centre of Excellence in Vision Science (CE0561903), the National Health and Medical Research Council (1049990), and Progetto regionale speciale multiasse 'Reti per l'Alta Formazione' - PO FSE Abruzzo 2007-2013 - Azione 4.II.iii.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Elvax 40W PelletsDu Pont, DE, USA
Dimethyl sulfoxide (DMSO)Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA
2-amino-4-phosphonobutyric acid (APB)Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USAA1910
DichloromethaneSigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA34856
Fast Green FCFSigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA
Drierite, calcium sulfateSigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA238910
Ketamine, Ilium KetamilTroy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia
Xylazine, Ilium Xylazil-20Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia
Atropine sulphate, Minims eye dropsBausch & Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia
Tetracaine hydrochloride, Minims eye dropsBausch & Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia
Chloramphenicol, Chlorsig ointmentAspen Pharma Pty. Ltd., NSW, Australia
Pentobarbital, LethabarbVirbac Australia Pty. Ltd., NSW, Australia
Lidocaine hydrochloride, Ilium Lignocaine-20Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia
Uni-Core Punch ToolWorld Precision Instruments Inc., FL, USA
Curved ForcepsWorld Precision Instruments Inc., FL, USA
Operating Microscope, Zeiss OPMI 99Zeiss, West Germany
25 G Insulin needleTerumo Corp., Tokyo, Japan
Dumont tweezersWorld Precision Instruments Inc., FL, USA

References

  1. Access Economics, The global economic cost of visual impairment. AMD Alliance International. , 26-27 (2010).
  2. Jager, R., Aiello, L., Patel, S., Cunningham, E. Risks of intravitreous injection: A comprehensive review. Retina. 24 (5), 676-698 (2004).
  3. Rosenfeld, P. J., et al. Ranibizumab for neovascular age-related macular degeneration. New England Journal of Medicine. 355 (14), 1419-1431 (2006).
  4. Cunningham, M. A., Edelman, J. L., Kaushal, S. Intravitreal steroids for macular edema: The past, the present, and the future. Survey of Ophthalmology. 53 (2), 139-149 (2008).
  5. Folkman, J., Long, D. M. The use of silicone rubber as a carrier for prolonged drug therapy. Journal of Surgical Research. 4 (3), 139-142 (1964).
  6. Herrero-Vanrell, R., Refojo, M. F. Biodegradable microspheres for vitreoretinal drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 52 (1), 5-16 (2001).
  7. Kim, E., et al. Human scleral diffusion of anticancer drugs from solution and nanoparticle formulation. Pharmaceutical Research. 26 (5), 1155-1161 (2009).
  8. Bochot, A., et al. Intravitreal delivery of oligonucleotides by sterically stabilized liposomes. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43 (1), 253-259 (2002).
  9. Bochot, A., Fattal, E. Liposomes for intravitreal drug delivery: A state of the art. Journal of Controlled Release. 161 (2), 628-634 (2012).
  10. Okabe, K., Kimura, H., Okabe, J., Kato, A., Kunou, N., Ogura, Y. Intraocular tissue distribution of betamethasone after intrascleral administration using a non-biodegradable sustained drug delivery device. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (6), 2702-2707 (2003).
  11. Langer, R., Folkman, J. Polymers for the sustained release of proteins and other macromolecules. Nature. 263 (5580), 797-800 (1976).
  12. Silberstein, G. B., Daniel, C. W. Elvax 40P implants: Sustained, local release of bioactive molecules influencing mammary ductal development. Developmental Biology. 93 (1), 272-278 (1982).
  13. Smith, A. L., et al. An investigation of the role of auditory cortex in sound localization using muscimol-releasing Elvax. European Journal of Neuroscience. 19 (11), 3059-3072 (2004).
  14. Anomal, R., De Villers-Sidani, E., Merzenich, M. M., Panizzutti, R. Manipulation of BDNF signaling modifies the experience-dependent plasticity induced by pure tone exposure during the critical period in the primary auditory cortex. PloS one. 8 (5), e64208(2013).
  15. Tu, S., Butt, C. M., Pauly, J. R., Debski, E. A. Activity-dependent regulation of substance P expression and topographic map maintenance by a cholinergic pathway. The Journal of Neuroscience. 20 (14), 5346-5357 (2000).
  16. Sernagor, E., Grzywacz, N. M. Influence of spontaneous activity and visual experience on developing retinal receptive fields. Current Biology. 6 (11), 1503-1508 (1996).
  17. Leitch, E., Coaker, J., Young, C., Mehta, V., Sernagor, E. GABA type-A activity controls its own developmental polarity switch in the maturing retina. The Journal of Neuroscience. 25 (19), 4801-4805 (2005).
  18. Park, C. M., Hollenberg, M. J. Basic fibroblast growth factor induces retinal regeneration in vivo. Developmental Biology. 134 (1), 201-205 (1989).
  19. Whitsel, A. I., Johnson, C. B., Forehand, C. J. An in ovo chicken model to study the systemic and localized teratogenic effects of valproic acid. Teratology. 66 (4), 153-163 (2002).
  20. Prusky, G. T., Ramoa, A. S. Novel method of chronically blocking retinal activity. Journal of Neuroscience Methods. 87 (1), 105-110 (1999).
  21. Colonnese, M. T., Constantine-Paton, M. Chronic NMDA receptor blockade from birth increases the sprouting capacity of ipsilateral retinocollicular axons without disrupting their early segregation. The Journal of Neuroscience. 21 (5), 1557-1568 (2001).
  22. Oliveira-Silva, P., et al. Matrix metalloproteinase-9 is involved in the development and plasticity of retinotectal projections in rats. Neuroimmunomodulation. 14 (3-4), 144-149 (2007).
  23. Trindade, P., et al. Evidence for a role of calcineurin in the development of retinocollicular fine topography. Neuroscience Letters. 487 (1), 47-52 (2011).
  24. Kauper, K., et al. Two-year intraocular delivery of ciliary neurotrophic factor by encapsulated cell technology implants in patients with chronic retinal degenerative diseases. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53 (12), 7484-7491 (2012).
  25. Birch, D. G., Weleber, R. G., Duncan, J. L., Jaffe, G. J., Tao, W. Randomized of ciliary neurotrophic factor delivered by encapsulated cell intraocular implants for retinitis pigmentosa. American Journal of Ophthalmology. 156 (2), 283-292 (2013).
  26. Rauck, B. M., et al. Biocompatible reverse thermal gel sustains the release of intravitreal bevacizumab in vivo. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (1), 469-476 (2014).
  27. Liu, Y. C., Peng, Y., Lwin, N. C., Venkatraman, S. S., Wong, T. T., Mehta, J. S. A biodegradable, sustained-released, prednisolone acetate microfilm drug delivery system effectively prolongs corneal allograft survival in the rat keratoplasty model. PloS one. 8 (8), e70419(2013).
  28. Slaughter, M. M., Miller, R. F. 2-amino-4-phosphonobutyric acid: a new pharmacological tool for retina research. Science. 211 (4478), 182-185 (1981).
  29. Bodnarenko, S., Jeyarasasingam, G., Chalupa, L. Development and regulation of dendritic stratification in retinal ganglion cells by glutamate-mediated afferent activity. The Journal of Neuroscience. 15 (11), 7037-7045 (1995).
  30. Deplano, S., Gargini, C., Maccarone, R., Chalupa, L. M., Bisti, S. Long-term treatment of the developing retina with the metabotropic glutamate agonist APB induces long-term changes in the stratification of retinal ganglion cell dendrites. Dev Neurosci. 26 (5-6), 396-405 (2004).
  31. Horton, J., Sherk, H. Receptive field properties in the cat's lateral geniculate nucleus in the absence of on-center retinal input. The Journal of Neuroscience. 4 (2), 374-380 (1984).
  32. Smith, A. L., Cordery, P. M., Thompson, I. D. Manufacture and release characteristics of Elvax polymers containing glutamate receptor antagonists. Journal of Neuroscience Methods. 60 (1), 211-217 (1995).
  33. Gargini, C., Bisti, S., Demontis, G. C., Valter, K., Stone, J., Cervetto, L. Electroretinogram changes associated with retinal upregulation of trophic factors: observations following optic nerve section. Neuroscience. 126 (3), 775-783 (2004).
  34. Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).
  35. Tsai, T., Bui, B., Vingrys, A. Dimethyl sulphoxide dose-response on rat retinal function. Documenta Ophthalmologica. 119 (3), 199-207 (2009).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

91Elvax 40WAPB

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved