JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

מטרת הבדיקות התנהגות המוצגת כאן היא לזהות חסרונות פונקציונלי בחולדות לאחר פגיעה מוחית טראומטית. ארבע בדיקות ספציפיות מוצגים המאתרות גירעונות בהתנהגויות כדי לשקף את הנזק לאזורים מסוימים במוח הארכת לפעמים שנה אחת לאחר פציעה.

Abstract

עם השכיחות הגוברת של פגיעה מוחית טראומטית (TBI) באוכלוסיות אזרחיים וצבאיים, TBI נחשב כיום מחלה כרונית; עם זאת, מחקרים מעטים חקרו את ההשפעות ארוכות הטווח של פגיעה במודלים מכרסם של TBI. כאן מוצגות באמצעים התנהגותיים המהווים ומבוססת במחקר TBI פעמים מוקדם לאחר פציעה, כמו שבועיים, עד חודשיים. חלק מהאמצעים בעבר שימשו בתקופות מאוחרות יותר לאחר פציעה, עד שנה אחת, אלא על ידי מעבדות מעט מאוד. השיטות הפגינו כאן הם הערכה נוירולוגית קצר לבדיקת רפלקסים, קרן-איזון לבחון את האיזון, קרן-הליכה מבחן שיווי משקל, קואורדינציה, ואת גרסה זיכרון העבודה של המבוך מוריס מים יכולים להיות רגישים לגירעונות הפניה זיכרון. זכר חולדות שטופלו, מאומנים כדי נוירולוגיות, איזון, קואורדינציה בדיקות לקראת קבלת הפציעה הקשה נוזל parasagittal (FPI) או פציעה של העמדת פנים. חולדות יכול להיבדק על המבדק נוירולוגיות קצר (neuroscore), הקרן-האיזון, הקרן-ההליכה מספר פעמים, תוך בדיקה על המבוך מים יכול להיעשות רק פעם אחת. ההבדל הוא כי חולדות יכול לזכור את הפעילות, ובכך משתנה מתערב התוצאות אם חוזרים עליו בדיקות ניסיון של אותה חיה. לאחר בדיקות מאחד עד שלושה ימים לאחר פציעה, הבדלים משמעותיים זוהו ב כל שלוש הפעילויות הלא-קוגנטיביים. עם זאת, הבדלים בפעילות קרן-הליכה לא היו לזיהוי בנקודות זמן מאוחר יותר (לאחר 3 חודשים). הגירעונות אותרו 3 חודשים באיזון-הקרן וכן ב 6 חודשים neuroscore. לגירעונות זיכרון העבודה של האורחים אותרו ע ל-12 חודשים לאחר פציעה, גירעון זיכרון הפניה הופיע לראשונה בגיל 12 חודשים. לפיכך, בבדיקות שגרתיות התנהגותית יכול להיות שימושי למדידת גירעונות התנהגותיות מתמשכות לאחר FPI.

Introduction

השיטות המובאות כאן נועדו לזהות חסרונות פונקציונלי באזורים מסוימים במוח המושרה על ידי מודל ניסיוני של TBI בחולדה. ארבע בדיקות התנהגות שונה יתוארו. ראשית, ניתן לבצע את ההערכה נוירולוגיות קצר, המכונה של neuroscore, מבלי לדרוש כל ציוד אבל דורשים תרגול; בדיקה זו מגלה גירעונות עניין רפלקסים. שנית, הבדיקה קרן-איזון מזהה גירעונות ביכולת לאזן. משימה זו מחייבת את המטפל להבקיע את החולדה מבוסס בקנה מידה של מספר סידורי ממין ודורש הכשרה של המטפל. הבדיקה קרן-איזון דורש קרן צרה, הוא רגיש גירעונות במערכת שיווי המשקל. המבחן השלישי מעריך vestibulomotor תיאום. בדיקה זו נקראת הפעילות קרן-הליכה, למרות נדרשת הכשרה קדם של העכברוש, ההליך זה אובייקטיבי יותר מאשר השניים הקודמים כמו ההשהיה לחצות את הקרן הוא מדד אובייקטיבי אינו תלוי הבקיע סובייקטיבית. ההבדל הזה נובע נמדד הזמן לעבור קרן צרה כדי להגיע אל הכספת. הבדיקה קרן-הליכה מחייב קרן יותר מאשר את הקורה-איזון, כמו גם קופסת לברוח. בדיקה זו מודדת לגירעונות קואורדינציה ואיזון, ולכן הוא רגיש לנזק המוח הקטן, אזורים מוטוריים במוח קשורים. גירסה זיכרון עבודה של המבוך המים מוריס (עם אמא-WM) בדיקות בעיקר בהיפוקמפוס הפונקציה ושילוב עם קליפת המוח הקדם חזיתית או פונקציה המבצעת. הגירסה של מבוך המים מוריס המוצג יכול לשמש גם כדי לזהות חסרונות הפניה זיכרון1.

שיטות אלה נבחרו בהתבסס על רקורד ומבוססת שלהם בספרות. כל אחד היה יעיל ידיים רבות ממעבדות שונות עם זנים רבים של חולדות במשך שנים רבות של מחקר. עם זאת, בעבר, לאחר פציעה מודד עד שבועיים לאחר פציעה נחשבו נקודות זמן "כרונית". לפיכך, להקים טכניקות התנהגותיות לחקר תופעות כרוניות של TBI מכרסמים, שיטות אלה ידועים זקוק להערכה רגישות לזהות TBI המושרה גירעונות בנקודות זמן ארוך לאחר פציעה. אמנם יש עכשיו מספר מודלים מכרסם של TBI, המודל FPI הוא אחד הנפוצה ביותר, והיא מיושמת במחקר זה. מודל זה פורסם לראשונה ב-19502, מאז, ניירות יותר מ-1,000 המועסקים FPI חולדות3. Neuropathology של סוג זה של פציעה כבר היטב תיאר על ידינו4 , ואחרים5,6,7. בקצרה, פציעה עצביים בהיפוקמפוס הוכח להיות למינון באמצעות פטור-ג'ייד מכתים בזמנים קצרים לאחר פציעה, קרי, 24-48 שעות; תוך כדי ניוון ברוטו, קוויטציה כולל דילול של הקפסולה פנימי, קליפת דווח בגיל שנה לאחר הפציעה6,7.

הייצוג הכי משמעותי של תפקוד המוח מוערך על-ידי שימוש באמצעים התנהגותיים התוצאה לאחר פציעת מוח נסיוני. עם זאת, הרוב המכריע של ניסויים FPI המשתמשות תוצאות התנהגותיות להפוך אמצעים יחסית מוקדם, בדרך כלל בין 1 ל-14 ימים לאחר פציעה. שימוש בשיטות הפגינו כאן, שכמה חסרונות התנהגותיים יכולים להתגלות החוצה ל-12 חודשים לאחר פציעה1. הפונקציה נוירולוגיות, פונקציה vestibulomotor ברוטו, קואורדינציה בסדר היו העריכו בימים לאחר פציעה (Pid) 1-3 ו- 3, 6, ו 12 חודשים לאחר הניתוח, באמצעות הערכה נוירולוגית קצרה (Neuroscore; שונה מ- Schallert8), קרן-איזון פעילות ואת קרן-הליכה פעילות9,10,11. הפניה של זיכרון העבודה היו העריכו באמצעות גירסה זיכרון העבודה של מוריס מים מבוך1,12,13.

Protocol

ניסויים בבעלי חיים כל קודם אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה של האוניברסיטה ענף רפואי טקסס, בגאלבסטון, טקסס כפי שנרשמו על ידי המכון הלאומי של בריאות מדריך על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה (המהדורה השמינית, המועצה הלאומית למחקר).

1. ניתוחים וכלי הקשה נוזלים TBI

  1. להשיג למבוגרים זכר 300 גרם ספראג-Dawley חולדות מיצרן, בית שניים לכל קייג באוכל ומים ad libitum ב ביבר בתנאים קבועים: אור מחזור (h 600 ש 1,800), טמפרטורה (21 ° C עד 23 ° C), ולחות (40-60%).
  2. לפני הניתוח, להתמודד עם החולדות במשך שלושה עד חמישה ימים, ואז רכבת העכברושים עבור Neuroscore, קרן-איזון ופרוצדורות קרן-הליכה מאחד עד שלושה ימים לפני הערכה בסיסית. לנהל את ההערכה הבסיסית יום או בבוקר לפני הניתוח.
    הערה: תמיד הכינו בקרת עכברים, כגון המופעלים באמצעות העמדת פנים או בניתוח חולדות תמים באופן זהה לאלה אשר מקבלים פציעה, או באופן אקראי או באופן מאוזן, קבוצת החולדות לתוך קבוצות הטיפול.
  3. לבצע ניתוח בתנאים אספטי (כלי סטרילי, נקי כירורגי שמלות, כפפות סטריליות, מסכות, כיסויי ראש).
  4. עזים ומתנגד חולדות באמצעות איזופלוריין ב 4% עבור אינדוקציה ו- 1.5-2% לצורך תחזוקה. תצנררו. ותכניסו מכנית לאוורר את החולדות (באמצעות איזופלוריין אוויר: חמצן (70:30) ולהתכונן parasagittal פגיעה נוזל-כלי הקשה כמו בעבר תיאר14,15.
  5. לחדור לפצע אתרים עם 0.10% bupivicane לפני תפירת והכנס הפתילה רקטלי פרצטמול (120 מ"ג/ק"ג) לפני התעוררות מן ההרדמה. לפקח על חולדות במשך 4 שעות לפחות במהלך תקופת ההחלמה, למחרת סימנים של זיהום, פציעה נוירולוגי קשה (למשל שיתוק) או אי נוחות חמורה (למשל מיקום נמנמניים מתמיד).
    הערה: חולדות מפגין אחד מן הסימפטומים הללו צריכים להיות לאללה (4% איזופלוריין ב חדר הרדמה ואחריו עריפת ראש).

2. Neuroscore הדרכה ובדיקות

  1. אימון Neuroscore
    1. הדרכה על חולדות ידוע להיות השפעול תמימה, לעבור את המבחנים לפי הסדר הבא (צעדים 2.2.1-2.2.5) מההתחלה ועד הסיום, לחזור הביתה כלוב עבור 1 דקות, ולאחר מכן לחזור עד מושגת תוצאה של אפס.
    2. מארק ציונים על הסדין ניקוד עבור רשומה של הניסויים הדרכה עבור כל עכברוש. לאחר הכשרה, לבצע הפעלה בדיקה אחת (ראו להלן) ביום זהה או הבאים.
      הערה: אם המושב בדיקת אינו מייצר ציון אפס עבור התוכנית הבסיסית, הדרכה ובדיקות ניתן לחזור או החולדה עשויה שתהייה לניסוי הלא-התנהגות.
  2. בדיקת Neuroscore
    הערה: לעבור את המבחנים לפי הסדר הבא, לחזור הביתה כלוב עבור 1 דקות, ולאחר מכן לחזור פעמיים על סכום כולל של שלוש פעמים.
    1. בדיקת כיפוף forelimb
      1. הרם את החולדה בזנב והחזק על 6-12 סנטימטרים מעל פני השטח בטבלה.
      2. שים לב אם החולדה מרחיב או הגמשת forelimbs. ציון הנוכחות של כיפוף (1) או היעדרות (0).
        הערה: כיפוף הוא חריג. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (סה כ האפשר = 3).
    2. בדיקת כיפוף Hindlimb
      1. הרם את החולדה בזנב והחזק על 6-12 סנטימטרים מעל פני השטח בטבלה.
      2. שים לב אם החולדה מרחיב או הגמשת hindlimbs. ציון הנוכחות של כיפוף (1) או היעדרות (0).
        הערה: כיפוף הוא חריג. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (אפשרי מצטבר הכולל = 6).
    3. מבחינה ויזואלית מופעלות מבחן מהצבת
      1. הרם את החולדה בזנב.
      2. הורידו לאט את החולדה כלפי הקצה של השולחן עד האף הוא כ- 10 ס מ מהקצה.
      3. להזיז את העכבר באיטיות כלפי הקצה (אינם מאפשרים את שפם לגעת בקצה).
      4. שים לב אם החולדה מגיעה והוא משתרע forepaws לכיוון השולחן. ציון נוכחות (0) או היעדרות (1) של הרחבת forepaws.
        הערה: להגיע עבור הטבלה בתגובה ברמזים חזותיים הוא נורמלי. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (אפשרי מצטבר הכולל = 9).
    4. מגע מופעל מבחן מהצבת
      1. החזק העכבר, עם הגוף ביד, במקביל לקצה השולחן וחופשית הרגליים הקדמיות.
      2. הורידו את החולדה כלפי הקצה של טבלה לאט עד נכון בצד אחד לגעת בקצה של השולחן.
      3. שים לב אם החולדה מרחיב את forelimb באותו צד כמו שפם כי הם נוגעים השולחן לכיוון השוליים השולחן ברגע נכון לגעת.
        הערה: ההתמחרות של תגובה זו לוקח אימון רב, חוקרים צריכים להיות מאומן היטב כדי לבצע בדיקה זו באופן עקבי.
      4. ציון נוכחות (0) או היעדרות (1) להגיע אל השולחן.
        הערה: להגיע בתגובה גירוי חוש המישוש הוא נורמלי. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (סה כ האפשר = 12).
      5. חזור על צעדים 2.2.4.1-2.2.4.4 עבור הצד הנגדי. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (אפשרי מצטבר הכולל = 15).
    5. בדיקת רפלקס אוחז Hindpaw
      1. החזק את החולדה ביד אחת באגודל ובאצבע סביב החזה מתחת forelimbs.
      2. לגעת בעדינות בכף hindpaw אחד עם השני והעבה.
      3. שים לב אם החולדה תופס והעבה. ציון נוכחות (0) או היעדרות (1) בתפיסת.
        הערה: אוחז הוא נורמלי. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (סה כ האפשר = 18).
      4. חזור על צעדים 2.2.5.1-2.2.5.3 עבור הצד הנגדי. הציון האפשרי של 1 x 3 = 3 (סה כ האפשר = 21).
    6. הניקוד
      1. לסכם את התוצאות עבור סכום מצטבר אפשרית של 7 x 3 = 21. ציון של אפס הוא נורמלי.

3. אימון קרן-איזון ובדיקות

  1. ציוד
    1. שימוש קרן 60 ס מ אורך, 1.75 ס"מ רוחב, 4.0 ס מ גובה, להגדיר 90 ס מ מהרצפה, עם מחסום 30 ס מ גובה, 30 ס מ רוחב. לאבטח את קרן לטבלה עם המכשול מחובר אז זה 50 ס מ של הקורה בולטת המכשול, מן השולחן.
    2. מקם תיבה בטיחות מרופד תחת הקורה כדי לרכך את ההשפעה של חולדות ליפול.
  2. קרן-איזון אימון
    1. ב- 24-48 שעות לפני הניתוח, למקם את החולדה על הקורה למשפט s 60.
    2. אם החולדה אינו מצליח לאזן בכוחות עצמו, לאפשר את החולדה ליפול לתוך תיבת בטיחות.
    3. מתחילים תזמון כאשר העכברוש ימוקם בצורה מאובטחת על הקורה.
    4. להתבונן העכברוש עבור תקופת s 60 ו קצב הביצועים שלו מבוסס על קנה המידה הבאות: 1 = מראה שיווי משקל יציב (שארוחה, הליכות, מנסה לטפס על הגדר), 2 = איזון רעוע מראה (אוחז צידי הקורה ו/או יש תנועות לא יציב), 3 = ומנסה לאזן אבל o שוברי r ספינים על הקורה, נתקע על מאת מחבק את הקרן, 4 = נסיונות איזון, אבל נופל אחרי 10 s, 5 = נתקע או מן הקורה והמפלים את מתחת לגיל 10 s, 6 = פולס, עושה כל מאמץ כדי לאזן או להחזיק הקרן.
    5. להקליט את הציון בגליון העבודה.
    6. לאפשר את החולדה לנוח במשך 15 s בכלוב הביתה, ואז חזור על צעדים 3.2.1-3.2.5 עד העכברוש משיגה שלושה ציונים של 1 או 2. העכברוש נחשב אז מאומן.
    7. לבצע הערכה קדם אחד 24 שעות או ביום של הניתוח לפני הניתוח.
  3. קרן-איזון בדיקות
    1. החל 24 שעות לאחר הניתוח וממשיכים עד 4 ימים, לבדוק את החולדות מדי יום.
      1. מקם את החולדה על הקורה ולהתחיל את הטיימר. להתבונן העכברוש מקרוב עבור רשומה ס' 60. התוצאה בגליון העבודה.
      2. להחזיר את החולדה לכלוב הביתה במשך תקופת מנוחה קצרה (1-3 דקות).
      3. חזור על צעדים 3.3.1.1-3.3.1.2 עבור סכום כולל של שלוש בדיקות.

4. קרן-הליכה הדרכה ובדיקות

  1. ציוד
    1. השתמש עץ שאכסן 100 ס מ אורך, 2.5 ס מ רוחב, ו- 4.0 ס"מ גובה.
    2. הכנת לכוונון על טבלת מתכווננת, ארבע יתדות, 2 ס מ גובה, שער שחור תיבת 28 ס"מ אורך 18 ס מ גובה, 18 ס מ רוחב, עם פתיחה על אחד סוף גדול מספיק בשביל העכברוש לעבור.
    3. לצרף בסיום היעד של הקרן הצד פתוח תיבת המטרה אשר מונחת על השולחן מתכוונן. מקם את הגנרטור רעש לבן ואור בהיר ליד הקצה ההתחלתי של הקרן. סוף ההתחלה של הקורה קבוע לדוכן מתכווננת כך הקרן ואת תיבת הן באותה רמה, 1 מ' מעל הרצפה.
  2. קרן-הליכה אימון
    1. להתחיל להתאמן 24-48 שעות לפני הניתוח.
    2. מקם את החולדה בתיבת המטרה עבור 1 דקות. לאחר 1 דקות, להסיר את החולדה ולהתחיל את המשפט.
    3. כדי להפעיל את המשפט, להדליק את האור ואת רעש לבן למקם את החולדה על הקורה במיקום של החור פג הקרוב לתיבה המטרה ומאפשרים את החולדה הזן את המטרה.
    4. כאשר הרגליים הקדמי של החולדה לחצות את הסף של תיבת המטרה, לבטל מיד את מקורות האור והרעש (זהו הסוף של משפט אחד).
    5. לאפשר את החולדה לנוח בתיבת המטרה עבור 30 s בין בכל ניסוי.
    6. חזור על הפעולות ב 4.2.3-4.2.5 צעד פעמיים על כל מיקום יתד וממנו נקודת ההתחלה. הכנס את היתדות החורים ולהפעיל קרן-ההליכה להשלים אחת עם היתדות במקום.
    7. לרוץ שלושה ניסויים קרן-הליכה מתוזמן.
      1. הסר את החולדה מהתיבה המטרה. תדליק את האור ואת רעש לבן ולהתחיל כשהסטופר בעת הנחת העכבר על הקורה. . תעצרי את השעון להפסיק מיד כאשר הרגליים הקדמי של החולדה לחצות את הסף של תיבת המטרה ולאחר מכן מיד לכבות את האור ואת רעש
      2. רשום את הזמן בגליון העבודה.
      3. חזור על צעדים 4.2.7.1-4.2.7.2 עד העכברוש השיגה שלוש פעמים מתוך 5 s או פחות. העכברוש נחשב כיום מיומן.
  3. קרן-הליכה הערכה בסיסית
    1. יום או בבוקר לפני הניתוח, לעשות שלושה ניסויים מתוזמן עם יתדות במקום.
    2. התחל על-ידי הצבת העכברוש בתיבת המטרה עבור הסרה ס' 30 העכברוש מן המטרה תיבת הפעלה על רעש לבן, אור. למקם את החולדה בקצה התחלה של הקורה ולהתחיל בו זמנית לעצור את השעון. כאשר הרגליים הקדמי של החולדה לחצות את הסף של תיבת המטרה, מיד לכבות את מקורות האור והרעש, לעצור את שעון העצר.
    3. רשום את הזמן בגליון העבודה. לאפשר את החולדה להישאר בתיבה מטרת עבור 30 s.
    4. חזור על צעדים 4.3.2-4.3.3 עד שלושה השהיות ארוכות יותר נרשמים בגליון העבודה. להחזיר את החולדה לכלוב הביתה לאחר השלמת שלושה ניסויים מתוזמן.
  4. קרן-הליכה בדיקות
    1. בדוק את החולדות מדי יום מתחילים 24 שעות לאחר הניתוח וממשיכים עד 4 ימים. לבצע שלושה ניסויים מתוזמן כמו צעדים 4.3.

5. עובד מבוך המים זיכרון

  1. ציוד
    1. שימוש בטנק מלא במים עד גובה 28 ס מ ומתוחזק -26 ± 1 ° C.
    2. השתמש משטח זכוכית שקוף זה 10 ס מ קוטר על דוכן 26 ס מ גובה.
      הערה: המשטח העליון של פלטפורמת צריך להיות מצופה סיליקון בצורת עיגול עם X לעבר זה. זה מאפשר את החולדות לטפס על הפלטפורמה, נותן להם המתיחה. כך שהם לא להחליק.
    3. אסוף סטופר, מנורת חימום, מגבות חד פעמיות, רפידות סופגות, כלובים נוספת ו דג אקווריום קטן, ידית ארוכה נטו. השתמש וידאו ממוחשבת מערכת המחובר מצלמת וידאו כדי לשלוח את הנתונים למחשב ולהקליט השחייה עכברוש המעקב. שמור את הסרטונים ואת הנתונים במחשב לניתוח בשלב מאוחר יותר.
  2. עובד הזיכרון מבוך בדיקות מים
    1. לתת החולדות ארבעה זוגות של ניסויים בכל יום במשך חמישה ימים רצופים, למקם את הפלטפורמה בכל אחד מהם ארבעה חלקי ולהתחיל העכברושים מכל נקודות המוצא ארבע (N, S, E, W) כפי שמתואר להלן.
    2. תחילה להגדיר את זוגות פלטפורמות מיקום ההתחלה כדי לשמש לאורך כל הניסוי.
      הערה: הסדר הרביעים פלטפורמת ממוקם ואיפה נקודת המוצא נהג צרכים להיות בסדר שונה עבור כל אחד בחמשת הימים של שחייה, אך זהה עבור כל עכברוש.
      1. ארבע נקודות המוצא (N, S, E או W) ולהשתמש פלטפורמה ארבע סניפים (הגזרות 1, 2, 3 או 4; איור 1). לדוגמה, (N, 2; E, 4; S, 1; W, 3; ראה איור 1). תוכנית הוראה מאוזנת (לא אקראי) כדי להימנע כנקודות התחלה קרוב מדי כדי הפלטפורמות (לא נקודת ההתחלה היא באותו אזור כמיקום פלטפורמה). הגדר את גליון הנתונים באמצעות את הגזרות פלטפורמה ארבע נקודות המוצא.
      2. לכתוב פרוטוקול עבור וידאו מעקב תוכנה כדי להשתמש על מנת הסרטונים העכברושים שחייה, כדי לאסוף את הנתונים שצוינו (למשל, משך לשחות, מהירות, מרחק נסע לפני מציאת הפלטפורמה).
        הערה: תוכנת מעקב יעצור אוטומטית הקלטה לאחר משך הזמן שצוין. הפרוטוקול לאפשר לציון היכן הרציף מושם, כמה ניסויים לרוץ לכל בעל חיים, ו כמה בעלי-חיים ייבדק בכל הפעלה, גם משך הזמן המרבי המותר (למשל, 120 s).
      3. מבחן 4-6 חולדות בכל הפעלה.
        הערה: חולדות 6 יותר ליצור עניין התזמון בין חולדות, יכול להוביל השגיאה על-ידי המטפל. בתיבות התחממות כדור הארץ גם להיות צפוף.
    3. משפט 1
      1. לפתוח את הסרטון תוכנת מעקב וטען הפרוטוקול הנכון כולל המפה מבוך מים.
      2. מקם את הפלטפורמה במיקום שהוקצה (למשל, 2; איור 1) וסמנו שהוא תואם את המפה בתוכנה. להכין תוכנת מעקב כדי להתחיל החולדה מזין את שדה הראייה של מצלמת הוידאו.
      3. המקום העכברוש במיכל מופנות לקיר במיקום שהוקצה (למשל, N; איור 1) ולהתחיל מיד את הטיימר.
      4. לאפשר ה s עכברים 120 למצוא את הפלטפורמה. כאשר העכברוש מוצא את הפלטפורמה, לעצור את שעון העצר, לרשום את הזמן בגליון העבודה. אם החולדה לא יצליח למצוא את הפלטפורמה, להוביל אותו אל הרציף בעבודת יד ולהקליט אפשר ס' 120 ה s עכברים 15 להישאר על הבמה.
    4. משפט 2
      1. בדוק לכך שהתוכנה מוכנה משפט 2. מקם את החולדה בתוך המיכל-נקודת ההתחלה זהה (N). חזור על שלב 5.2.3.4.
    5. לאחר משפט 2, למקם את החולדה במתחם מחוממת עבור 4 דק להזיז הפלטפורמה המיקום השני (4; איור 1), ולבדוק שהוא תואם את המפה בתוכנה.
    6. 1 משפט חוזר והליכי 2 (צעדים 5.2.3-5.2.4) עד שארבעת החל מיקום/פלטפורמה זיווגים יושלמו.

6. ניתוח נתונים

  1. Neuroscore
    1. באופן ידני להעביר את התוצאות בכתב יד גיליון אלקטרוני במחשב.
    2. לסכם את התוצאות עבור כל ניסיון להשיג שלושה ציונים לכל עכברוש בכל יום.
    3. לעצב את הנתונים לניתוח סטטיסטי (גם בפורמט רחב או ארוך בהתאם ההעדפה תוכנה).
      הערה: הפורמט יש עמודה בודדת לטיפול (במקרה זה, עם "תמים", "שם", או "TBI"), עמודה אחת ליום (במקרה זה "0", "1", "2" או "3"), ועמודה יחידה למשפט ("1", "2" או "3"). התבנית רחב יש עמודה בודדת עבור כל שילוב של רמות פקטור (כך עמודה בודדת עבור תמימה, יום 0, 1 במשפט, עמודה נוספת עבור תמימה, יום 0, 2 למשפט, וכו)
    4. ממוצע הציון עבור כל חיה בכל יום. מכיוון שהיו שלושה ניסויים נעשה בכל יום יתקיימו שלושה ערכים עבור כל חיה לכל יום.
    5. להעריך אם הנתונים מופצים בדרך כלל. שימוש ש-nonparametric סטטיסטי (למשל, Kruskal-איי ווליס) מבחן כדי לנתח אם התוצאה בכל יום שונה בין הקבוצות. במקרה זה, מאחר נתונים אלה אינם רציפים, הם לא בדרך כלל מופצים.
    6. כדי לקבוע היכן ההבדלים לשקר, לעשות פוסט-הוק בחינות, הניתוח של Tukey פוסט-הוק .
      הערה: כאן, את חבילת תוכנה סטטיסטית R16, הפונקציה Kruskal.test() והפונקציה posthoc.kruskal.nemenyi.test בתוך ה-17 של Pairwise מרובים השוואה של מתכוון הדרגות החבילה (PMCMR) היו בשימוש.
    7. בנוסף, בדיקה כדי לראות אם קיימים ההבדלים בין ימים בתוך כל קבוצה.
      הערה: לדוגמה, כדי לראות אם בעלי החיים המזויפים לנהוג אחרת ביום 0 לעומת 1 יום, יום 2 או 3 יום. כדי לעשות זאת, הפעל של אמצעים חוזרות חד-כיווני אנובה. זה יכול להתבצע באמצעות הפונקציה ezANOVA שבחבילה ez R.
    8. כדי להפעיל אמצעים חוזרות ונשנות של אנובה, בדוק תחילה את ההנחה על sphericity.
      הערה: כאן, הנתונים מצביעים על כך בתוך פגוש אינה פקטור (יום) ההנחה sphericity תמים, העמדת פנים, אך לא עבור TBI. לכן, תיקון אין צורך תמים או העמדת פנים. לשימוש הנתונים TBI, התיקון חממה-Geisser.
    9. אם נמצאו הבדלים משמעותיים, להפעיל מבחן פוסט-הוק כדי לקבוע היכן ההבדלים לשקר. זו מושגת באמצעות ה- tpairwise R-מבחן תפקוד. להתוות את התוצאות כמו מזימה תיבת, כפי שניתן לראות את התוצאות נציג (איור 2).
  2. קרן-איזון
    1. באופן ידני העברת הציונים בכתב יד גיליון אלקטרוני במחשב. לעצב את הנתונים לניתוח סטטיסטי (גם בפורמט רחב או ארוך בהתאם ההעדפה תוכנה). ראה הערה בשלב 6.1.3.
    2. ממוצע הציונים עבור כל עכברוש בכל יום כך כל חולדה יהיה ניקוד אחד ליום. כדי לבדוק אם הציון בכל יום הוא שונה בין תמים, דמה TBI, להעריך אם הנתונים מופצים בדרך כלל.
      הערה: במקרה זה, מכיוון שהנתונים אינם רציפים, נתונים אלה אינם בדרך כלל מופצים. לכן, להשתמש מבחן סטטיסטי nonparametric (למשל, הבדיקה Kruskal-איי ווליס).
    3. כדי לקבוע היכן ההבדלים לשקר, לבצע בדיקות פוסט-הוק , למשל, ניתוח פוסט-הוק של Tukey. כדי לבדוק את ההבדלים בין ימים בתוך כל קבוצה לטיפול, הפעלה חוזרת בכיוון אחד מודד ANOVA (ראה שלב 6.1.7). בדוק את ההנחה על sphericity.
      הערה: במחקר זה, הנתונים מצביעים על כך בתוך פקטור (יום) אינה עומדת ההנחה sphericity עבור כל הקבוצות, תיקונים המשכיות אז בשימוש. השתמש את התיקון המשכיות חממה-גריר.
    4. להתוות את התוצאות על מגרש תיבת כמוצג בתיבה על התוצאות נציג (איור 3).
  3. קרן-הליכה
    1. באופן ידני העברת תוצאות בכתב יד גיליון אלקטרוני במחשב. ממוצע של השהיות קרן-הליכה 3 עבור כל בעל חיים עבור כל יום. לעצב את הנתונים לניתוח סטטיסטי (ראה שלב 6.1.3).
    2. להעריך אם הנתונים בדרך כלל מופצת.
      הערה: במקרה זה, הנתונים הוא רציף, ומופץ בדרך כלל. לפיכך, משתמשים חד-כיווני אנובה כדי לקבוע אם ההשהיה בכל יום שונה בין תמים, דמה TBI.
    3. כדי לראות אם יש הבדל כלשהו בין ימים בתוך קבוצת הטיפול, להפעיל אמצעים חוזרות חד-כיווני אנובה. בדוק תחילה את ההנחה על sphericity.
      הערה: במחקר זה, הנתונים מצביעים על כך בתוך פקטור (יום) אינה עומדת ההנחה sphericity מכל הקבוצות שלנו, אז המשכיות תיקונים משמשים. השתמש את התיקון חממה-גריר.
    4. להתוות את התוצאות על מגרש תיבת כמוצג בתיבה על התוצאות נציג (איור 4).
  4. עובד מבוך המים זיכרון
    1. להעביר את הנתונים מ תוכנת המעקב של גליון העבודה או המחשב לגיליון אלקטרוני. בחר את התוצאות כדי להיות מנותח.
      הערה: תוצאות אפשריות רבות זמינות עבור ניתוח של מעקב אחר תוכניות המחשב. דוגמאות של תוצאות שנבחרו עבור ניתוח עשויים לכלול: השהיה, אורך נתיב, thigmotaxia, לשחות במהירות. הכי נפוץ דיווח תוצאות השהיה, משמש בדוגמה שסופקו.
    2. לעצב את הנתונים לניתוח סטטיסטי (גם בפורמט רחב או ארוך בהתאם ההעדפה תוכנה).
      הערה: הפורמט יש עמודה בודדת לטיפול (במקרה זה, עם "תמים", "שם", או "TBI"), עמודה אחת ליום (במקרה זה "1", "2", "3", "4", או "5") ועמודה יחידה במשפט (או "1", "2", "3", "4", "5" "6", "7" או "8"). אנו זקוקים גם עמודה נוספת כדי לזהות את הניסיון ("1" או "2"). בפורמט רחב כולל עמודה בודדת עבור כל שילוב של רמות פקטור (כך למשל, עמודה בודדת עבור תמימה, יום 1, ניסיון ניסיון 1, 1, עמודה נוספת עבור תמימה, יום 1, 2 ניסיון, ניסיון 2). בנוסף, ההבדל בין משפט 1 משפט 2 יכול להיות מחושבת עבור כל מושב וניתח כמו ניקוד ההבדל.
    3. כדי למצוא אם יש הבדל הכולל בין הקבוצות פציעה, בצע את השלבים הבאים.
      1. קודם כל, ממוצע ההשהיה מבוך מים עבור כל חיה במשך היום.
        הערה: היו ארבעה טיפולים בכל יום, אז ממוצע של הערכים ארבעה לכל בעל חיים עבור כל משפט 1 ומשפט 2. תעשה חישוב זה עבור הימים הנותרים גם כן.
      2. כדי לבדוק אם ההבדלים פציעה הכללית, להפעיל אמצעים חוזרות דו-כיווני ANOVA. ישנם שני גורמים, פציעה ויום. פציעה הוא בין קבוצה גורם היום הוא בתוך קבוצה פקטור. הערה: כאן R שימשה.
      3. אם התוצאות מצביעות על הבדל משמעותי בעקבות פציעה, לאחר מכן להפעיל מבחן פוסט-הוק של Tukey כדי לראות איפה ההבדלים לשקר.
    4. למצוא בחוץ אם יש הבדלים בין הקבוצות פגיעה בימים ספציפיים בצע את השלבים הבאים.
      הערה: יום 1 משמש כדוגמה ולאחר הניתוח באותו שצריך לעשות במשך כל הימים הבאים. כמו כן, ניתוח זה מתבצע במספר דרכים, קודם כל על משפט 1 בלבד, עבור משפט 2 בלבד, והשלישי על ההבדל בין משפט 1 משפט 2. משפט 1 משמש כדוגמה; באותם השלבים צריך לשמש עבור הניתוחים האחרים.
      1. קודם כל, ממוצע ההשהיה מבוך מים עבור כל חיה במשך היום. מאז היו ארבע חזרות על "משפט 1" בכל יום, ממוצע של ארבעה ערכים עבור כל חיה.
      2. להעריך אם הנתונים בדרך כלל מופצת.
        הערה: במקרה זה, הנתונים הוא רציף, ומופץ בדרך כלל. לכן, להשתמש את חד-כיווני אנובה כדי לקבוע אם ההשהיה מבוך מים 1 יום שונה בין תמים, דמה TBI. חבילת תוכנה סטטיסטית R והפונקציה aov() שימשו כאן.
      3. השתמש 5% לרמה של משמעות. אם וכתוצאה מכך p-ערך נמצא במרחק של פחות מ- 0.05, ואז ישנם הבדלים משמעותיים בין הקבוצות.
      4. כדי לקבוע היכן מהשוני לשקר, השתמש במבחן של Tukey פוסט-הוק . זוהי הפונקציה TukeyHSD() ב ר
    5. כדי לברר אם יש הבדלים בין ימים בתוך קבוצות טיפול, בצע את הפעולות הבאות.
      1. תחילה, הפעל אמצעים חוזרות חד-כיווני אנובה. זה יכול להתבצע באמצעות הפונקציה ezANOVA שבחבילה ez R.
      2. לפני הפעלת אמצעים חוזרות ונשנות של אנובה, בדוק תחילה את ההנחה על sphericity.
        הערה: בתוך פקטור (יום) פוגש את ההנחה sphericity עבור כל הקבוצות, כך שאין צורך להשתמש המשכיות תיקונים.
      3. אם נמצאו הבדלים בין ימים (p-ערכים פחות מ- 0.05), לאחר מכן להפעיל מבחן פוסט-הוק כדי לקבוע בדיוק איפה ההבדלים לשקר. שלב זה מושגת באמצעות הפונקציה pairwise.t.test R.
    6. גרף את התוצאות באמצעות גרפים קו (איור 5). כמו כן, משפט 1-משפט 2 יכול להיות בגרף.

תוצאות

תוצאות ההליך neuroscore (איור 2) מדגימים את פוטנציאל חיובי כוזב (המזויפים וקבוצות TBI ביום 0) והן את הרגישות של הבדיקה הזו כדי לזהות הבדלים קטנים. תוצאות חיוביות שגויות עלולות להתרחש כאשר העכברוש הוא טוב בלתי להליך, אז זה לא רגוע לחלוטין. יום 0 הוא לפני הניתוח, כל כך אידיאלי שכל העכברושים. אמורים להגיע לקריטריון ציון 0 מיציאתם מחקר. ימים 1-3 מדגימים את הרגישות של הבדיקה כדי לזהות שינויים קטנים על הציון. אמנם יש פוטנציאל ניקוד גבוה ככל 21, ציונים גבוהים יותר מ- 3 הם יוצאי דופן במודל זה. בדוגמה זו, חזר על אמצעים ANOVA חשף אין כל הבדל בין יום תמים (p = 0.78) או העמדת פנים (p = 0.09); עם זאת, עבור הקבוצה TBI היו ההבדלים בין ימים (p < 0.05). השוואה pairwise פוסט-הוק ציינו כי יום 0 שונה באופן משמעותי בימים 1, 2 ו- 3. תוצאה זו ממחישה כי הפגיעה המיוצר שינויים קטנים אך משמעותיים הערכה נוירולוגית.

ניתוח נוסף באמצעות מבחן Kruskal-איי ווליס לעומת תמימה, העמדת פנים, TBI בכל יום, ואחריו של Tukey פוסט-הוק ניסיון לקבוע בדיוק איפה ההבדלים לשקר. ליום 0, הנתון הסטטיסטי הבדיקה הייתה 13.37, p = 0.001, שאם היה שונה באופן מהותי מן תמימה (p = 0.008). באופן אידיאלי, צריך להיות אין הבדלים בין קבוצות ביום 0, כפי כבר מנוהל ללא טיפולים או נהלים. במקרה זה, החולדות צריך עוד יותר בלתי להליך, או הועבר מחקר התנהגות שאינם. יום 1, הנתון הסטטיסטי המבחן היה 32.39, p = 9.75e-8, עם המבחן פוסט-הוק , דמה של TBI היו שונה באופן מהותי מן תמימה (p = 0.002, p = 5.9e-7, בהתאמה). יום 2, הנתון הסטטיסטי המבחן היה 23.39, p = 8.34e-6, ואת דמה TBI, היו שונים מכל תמימה (p = 0.002, p = 6.8e-5). ביום השלישי, הנתון הסטטיסטי המבחן היה 38.4, p = 4.59e-9, שוב, העמדת פנים, TBI היו שונה באופן מהותי מן תמימה (p = 0.001, p = 2.1e-8, בהתאמה). תוצאות אלה מצביעים על העובדה כי ההכנה המזויפים מייצרת גם כמה חסרונות של הערכה נוירולוגית בזמנים מוקדם לאחר פציעה.

נציג קרן-איזון תוצאות (איור 3) מדגימים את הרגישות של הבדיקה קרן-איזון כדי גירעונות זמן קצר לאחר פציעה (איור 3, שמאלה), בנקודת הזמן כבר לאחר פציעה (איור 3, ימין). הרגישות של הבדיקה קרן-איזון להשפעות של פגיעה מוחית פוחתת עם הזמן, כי כפי שציווית החולדות גיל במשקל, הם הגדילו את הקושי איזון על הקורה. בנקודות זמן מאוחר יותר, הקרן פועלת כך החולדות הן איזון בצד הרחב של הקרן. ובכל זאת, על ידי 6 חודשים לאחר פציעה, בדיקה זו אינו רגיש להשפעות של פציעה כמו גיל ו/או משקל לבלבל את היכולת לבצע את המשימה (איור 3, ימין). לחלופין, ריפוי ייתכן שאירעה במערכת שיווי המשקל, נתונים אלה לשקף באופן מדויק היכולת של החולדות לאזן מגיע באותה רמה כמו קבוצות שליטה.

בהשוואה בין תמים, העמדת פנים, TBI בכל יום, השתמשנו במבחן Kruskal-איי ווליס. התוצאות עבור נקודות זמן מוקדם לאחר פציעה מוצגים באיור 3, עזב. ביום 0, הבדיקה Kruskal-איי ווליס מצא את הערך של הנתון הסטטיסטי הבדיקה להיות 6.81, p = 0.033. היה הבדל משמעותי בין הקבוצות, עם בדיקת פוסט-הוק של Tukey להראות את זה נאיבי קבוצה שונה דמה (p = 0.038); עם זאת, כל שלוש הקבוצות היה אמצעי מתחת 2.0, המציין כי כל העכברושים פגש את הקריטריונים כדי להמשיך. זה עדיף על אין הבדלים בין קבוצות ביום 0, אך מאז כל קבוצות מתחת 2, הם יכולים להמשיך במחקר. PID 1, הנתון הסטטיסטי מבחן Kruskal-איי ווליס היה 69.72, p = 7.25e-16. מבחן פוסט-הוק של Tukey הראה כי הקבוצה TBI היה שונה באופן משמעותי מקבוצות תמימה והן דמה (p = 4.9e-14, p = 9.1e-08, בהתאמה). ביום 2, הנתון הסטטיסטי מבחן Kruskal-איי ווליס היה 62.84 ו- p = 2.26e-14, עם הבדיקה פוסט-הוק מציג TBI שונה ותמימה. ואת דמה (p = 1.0 e-10, p = 2.1e-10 בהתאמה). יום 3, הנתון הסטטיסטי מבחן Kruskal-איי ווליס היה 62.69 ו- p = 2.44e-14. פוסט-הוק הבדיקה הראתה TBI שונה ותמימה. ואת דמה, (p = 9.6e-12, p = 1.7e-08, בהתאמה). הסתכלנו בנוסף כדי לראות אם היו ההבדלים בין ימים בתוך כל קבוצה. שימוש חוזר ונשנה של מודד ANOVA, עבור תמימה, היו אין הבדלים בין ימים (p = 0.367). העמדת פנים, TBI היו ההבדלים בין ימים (p = 0.002, p = 3.90e-29, בהתאמה). פוסט-הוק השוואות pairwise חשף המזויפים יום 1 הוא שונה באופן מהותי מן היום 2 ו- 3 ביום (p = 0.001, p = 0.01, בהתאמה), ועבור TBI, יום 0 היא צורה שונה באופן משמעותי בימים 1, 2 ו- 3 (p < 2e-16, p = 5.5e-16, ו- p = 2.7e-13, בהתאמה). יום 1 הוא גם שונה באופן מהותי מן היום השלישי (p = 0.036).

בגיל 6 חודשים לאחר פציעה, השוואות בין תמים, דמה TBI נעשו בכל יום באמצעות מבחן Kruskal-איי ווליס (איור 3, ימין). ביום 0, הערך של הנתון הסטטיסטי המבחן היה 3.36 ו- p = 0.187, כך היו ביום 0 אין הבדלים. כל האמצעים היו מתחת 2, המציין כי כל החולדות וקבוצות עמדו בקריטריונים להמשיך במחקר. PID 1, הנתון הסטטיסטי המבחן היה 6.11, p = 0.047; עם זאת, ניתוח פוסט-הוק באמצעות מבחן פוסט-הוק של Tukey הראה כי אף אחד הקבוצות היו שונים באופן משמעותי כאשר החשבונאי מספר השערות. ביום 2, היה סטטיסטי המבחן 4.09, p = 0.13, ns, על יום 3, הנתון הסטטיסטי המבחן היה 2.91, p = 0.23, ns. לפיכך, היו אין הבדלים בין הקבוצות פגיעה בכל יום.

בנוסף, מסתכל על ההבדלים בין יום בתוך קבוצות הטיפול, אמצעים חוזרות ANOVA חשפו הבדלים משמעותיים בין יום תמים, דמה של TBI (p = 0.0003, p = 2.61e-5, p = 5.59e-7, בהתאמה; איור 3, ימין). פוסט-הוק בדיקות הפגינו את ההבדלים הבאים. יום 0 תמים, היה שונה באופן מהותי מן בימים 1, 2 ו- 3 (p = 0.002, p = 0.044, p = 0.004, בהתאמה). עבור המזויפים, כל הימים היו שונים באופן משמעותי אחד מהשני: יום 0 היה שונה באופן מהותי מן בימים 1, 2 ו- 3 (p = 0.0006, p = 0.001, p = 0.0006, בהתאמה); יום 1 היה שונה באופן מהותי מן 2 ימים ו- 3 (p = 0.031, p = 0.0006, בהתאמה); ביום השני היה שונה באופן מהותי מן היום השלישי (p = 0.044). עבור TBI, יום 0 שונה באופן משמעותי בימים 1, 2 ו- 3 (p = 0.0005, p = 0.0008, p = 0.0005, בהתאמה).

התוצאות של הבדיקה קרן-הליכה יוצגו בנקודות זמן שני (איור 4). בדומה הקרן-האיזון, בדיקה זו מזהה גירעונות מוקדם לאחר פציעה (איור 4, שמאל). עם זאת, על ידי 6 חודשים לאחר פציעה, ישנם אין הבדלים משמעותיים בין הקבוצות (איור 4, מימין), רומז ריפוי אירעה בקבוצה פצועים. תוצאה זו עשויה לשקף ההשפעות של גיל מתקדם יותר משקל מוגבר.

כדי להשוות בין תמים, העמדת פנים, TBI בכל יום מוקדם לאחר פציעה, ANOVA בכיוון אחד היה בשימוש. היו שם אין הבדלים ביום 0 (F = 0.859, p = 0.426) כל השהיות ארוכות יותר היו מתחת 5 s, המציין כי כל העכברושים עמדו בקריטריונים להמשיך במחקר. PID 1, היה נתון סטטיסטי המבחן משמעותית של 15.36, p = 1.18e-6. מבחן פוסט הוק של Tukey ציינו הבדל משמעותי בין TBI תמימה (p = 0.000004) TBI ואת דמה (p = 0.0001). ביום 2, היה הבדל משמעותי בין הקבוצות (F = 9.49, p = 0.0002). פוסט-הוק בדיקות חשפו הבדלים בין TBI תמימה (p = 0.0002) TBI ואת דמה (p = 0.005). יום 3, הנתון הסטטיסטי הבדיקה הכוללת שווה 6.27, p = 0.0025, המציין ישנם הבדלים בין הקבוצות. מבחן פוסט-הוק של Tukey הראו שוב, TBI היה שונה ותמימה. ואת דמה (p = 0.003, p = 0.035, בהתאמה).

באמצעות מדד חוזרות חד-כיווני אנובה, היו חקר את ההבדלים בין יום בתוך קבוצות הטיפול. תחילה נבדקה ההשערה של sphericity עבור כל קבוצה. בתוך פקטור (יום) לא מימש את ההנחה sphericity לקבוצות תמים או העמדת פנים, ולכן התיקון המשכיות, חממה-גריר היה מוחל על קבוצות אלה. עבור המזויפים, היו אין הבדלים בין ימים (p = 0.066), תמים TBI היו (p = 0.006, p = 2.89E-7, בהתאמה). פוסט-הוק השוואות הראה עבור תמימה, ההבדל הוא בין יום 0 ו- 1 יום (p = 0.003). TBI, היו ההבדלים בין יום 0 ימים 1, 2 ו- 3 (p = 9.2e-6, p = 0.0005, p = 0.002, בהתאמה), ולא היה הבדל בין יום 1 ו- 3 ביום (p = 0.018).

בגיל 6 חודשים לאחר פציעה, היו שם אין הבדלים משמעותיים בין תמים, דמה או TBI בכל יום (יום 0, F = 0.315, p = 0.732; יום 1, F = 0.336, p = 0.717; יום 2, F = 0.5, p = 0.61; יום 3, F = 1.17, p = 0.322; איור 4, נכון). בעת השוואת הבדלים בין ימים בתוך כל קבוצה, היה הבדל משמעותי בקבוצה TBI (p = 0.026), עם יום 0 להיות שונה בימים 1, 2 ו- 3 (p = 0.026, p = 0.002, p = 0.002). היו אין הבדלים בין כל יום תמים או העמדת פנים (p = 0.104, p = 0.063, בהתאמה).

יכול להיות בגרף הנתונים מהגירסה זיכרון העבודה של מבוך המים מוריס במגוון דרכים. כאן אנחנו מוכיחים את התוצאות במשך 3 חודשים (איור 5, שמאלה), 12 חודשים (איור 5, נכון) לאחר פציעה משתמשים הן קויים לייצג את משך הזמן, וחלקות תיבת לספק של סיכום הכולל הנתונים (איור 5, התחתון). שאנו יכולים ואז לדמיין משפט 1 בהשוואות של משפט 2 באופן עצמאי על כל יום, כמו גם הבדלים הכוללת בעקבות פציעה. משפט 1 השהיות ארוכות יותר מייצגים זיכרון הפניה, משפט 2 השהיות ארוכות יותר מתארים את זיכרון העבודה.

הנתונים של חולדות 3 חודשים לאחר פציעה מוצגים באיור 5, שמאלה. עבור ניסוי 1 (איור 5, בפינה השמאלית העליונה), בהשוואת תמימה, העמדת פנים, TBI, רק ביום הרביעי הראו הבדל משמעותי בין הקבוצות (F = 4.12, p = 0.025), עם המבחן של Tukey פוסט-הוק המציין כי TBI היה שונה תמים (p = 0.019). משפט 2 (איור 5, האמצעי שמאלה), היה הבדל משמעותי על יום 1 (F = השקיעו 5.93, p = 0.006), עם ניתוח פוסט-הוק המציין כי TBI היה שונה דמה (p = 0.005). בצעדים חוזרים ונשנים ANOVA לא מצא של ההבדל הכללי בין פציעה קבוצות ב- 3 חודשים (p = 0.56). תוצאות אלו מראים כי החולדות האלו יש גירעונות קטן אך משמעותי הפניה, כמו גם זיכרון העבודה בגיל 3 חודשים לאחר פציעה.

12 חודשים לאחר פציעה, השוואה בין משפט 1 תמים, העמדת פנים, TBI (איור 5, נכון), חזר אמצעים ANOVA הפגינו הכולל אפקט משמעותי של פגיעה (F = 3.94, p = 0.03). השוואות pairwise חשף כי TBI היה שונה באופן מהותי מן תמימה והן דמה (p = 0.043 ו- p = 0.006., בהתאמה) (איור 5, הימנית התחתונה). בנוסף, על ידי השוואת קבוצות פגיעה בכל יום, שימוש חד-כיווני אנובה, הבדל משמעותי זוהה על יום 3 (F = 7.28, p = 0.003). פוסט-הוק השוואה חשף כי TBI היה שונה דמה (p = 0.0018) (איור 5, הימנית העליונה). 2 משפט, בצעדים חוזרים ונשנים ANOVA נמצא הבדל משמעותי בעקבות פציעה (F = 3.97, p = 0.029), עם השוואות pairwise פוסט-הוק מזהה את ההבדל בין TBI דמה (p = 0.017) (איור 5 , הימנית התחתונה). חד-כיווני אנובה בכל יום מצאו הבדלים משמעותיים על 2 ימים ו- 4. ביום 2 (F = 4.02, p = 0.028), של Tukey פוסט-הוק הבדיקה מצאה כי TBI היה שונה דמה (p = 0.023). ביום הרביעי (F = 4.12, p = 0.026), ניתוח פוסט-הוק מצא הבדל בין TBI דמה (p = 0.025) (איור 5, התיכון נכון).

figure-results-11974
איור 1. דיאגרמה של המבוך מים. תרשים זה מדגים את מיקומי פלטפורמה אפשרית (1, 2, 3, 4) ואת נקודות המוצא (N, S, E, W) עבור המבוך המים מוריס של זיכרון העבודה. חולדות מותרים בשני ניסויים של זיווג המוצא בכל מיקום/פלטפורמה. יש 15 s מרווח בין משפט, 4 דקות מנוחה בחדר ההתחממות בין זוגות של ניסויים עבור סכום כולל של 4 זוגות ניסויים עבור כל מושב מדי יום. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

figure-results-12628
באיור 2. תוצאות בדיקה neuroscore כל העכברושים אומנו משימות פשוטות רפלקס בדיקה לפני יום 0 (ראה טקסט לקבלת פרטים על הדרכה, בדיקות והניקוד). התוצאות יוצגו חציון (קו שחור), רביעונים הראשון והשלישי (הגבולות של התיבה), ו- 10בתאנון ו-th 90 percentiles (קווי שגיאה). הממוצע הוא גם כמוצג על-ידי קווים אדומים ונקודות המינוריים של נקודות שחורות. הנתונים מוצגים עבור יום 0 בסיסית ולאחר פציעה ימים 1-3. התוצאות של ה- t פוסט-הוק-לבדוק כל נקודת זמן מוצגים על הגרפים: * p < 0.001 vs יום TBI 0; ^ p < 0.001 vs באותו יום תמים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

figure-results-13496
איור 3. תוצאות בדיקה קרן-איזון כל העכברושים הוכשרו לאזן על הקורה עד שהם יכולים לאזן 60 s עבור שלושה ניסויים עוקבים (ראה טקסט לקבלת פרטים על הדרכה, בדיקות והניקוד). על בדיקות עוקבות, חולדות היו הבקיע בסולם של 1-6 עם 1 המסמלת איזון רגיל ו- 6 המסמלת שום ניסיון להישאר על הקורה. התוצאות יוצגו חציון (קו שחור), רביעונים הראשון והשלישי (הגבולות של התיבה), ו- 10בתאנון ו-th 90 percentiles (קווי שגיאה). הממוצע הוא גם כמוצג על-ידי קווים אדומים ונקודות המינוריים של נקודות שחורות. הנתונים מוצגים עבור הבסיס יום 0 ניקוד, לאחר פציעה ימים 1-3 (משמאל) ו 6 חודשים לאחר פציעה (מימין). התוצאות של ה- t פוסט-הוק-לבדוק כל נקודת זמן מוצגים על הגרפים. ימים 0-3: * p < 0.001vs יום TBI 0; ^ p vs < 0.001 באותו יום תמים; @ vs < 0.001 p באותו יום המזויפים. במשך 6 חודשים: * p < 0.001vs יום TBI 0; # p < 0.001 vs יום תמים 0; & p < 0.001 vs יום דמה 0. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

figure-results-14717
באיור 4. תוצאות בדיקה קרן-הליכה כל העכברושים הוכשרו לחצות את הקורה תוך אריגה בין ההודעות כדי לברוח לתוך תיבת בטיחות. הם הוכשרו עד שפגשו הקריטריונים של ≤ 5 s על שלושה משפטים רצופים (ראה טקסט לקבלת פרטים על הדרכה, בדיקות והניקוד). בדיקה בסיסית הושלמה ביום 0, חולדות נבדקו לאחר מכן בימים 1-3 לאחר פציעה (משמאל). תת-קבוצה של חולדות היה מחדש גם בגיל 6 חודשים לאחר פציעה (מימין). התוצאות מוצגים בגרף חציון (קו שחור), רביעונים הראשון והשלישי (הגבולות של התיבה), ו- 10בתאנון ו-th 90 percentiles (קווי שגיאה). הממוצע גם מציינים את הקווים האדומים ואת הנקודות המינוריים של נקודות שחורות. התוצאות של הבדיקות פוסט-הוק עבור כל נקודת זמן מוצגים על הגרפים. ימים 0-3: * p < 0.001vs יום TBI 0; ^ p vs < 0.001 באותו יום תמים; @ p < 0.001 vs באותו יום דמה; במשך 6 חודשים: * p < 0.001vs TBI יום 0- אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

figure-results-15880
איור 5. תוצאות של זיכרון עבודה מוריס מים מבוך. התוצאות יוצגו עבור קבוצות נפרדות של חולדות בגיל שלושה חודשים (עמודה שמאלית) ו- 12 חודשים (עמודה ימנית). הלוחות העליון להראות הממוצע השהיות ארוכות יותר (זמן לקח העכברושים למצוא פלטפורמה מוסתרים) על הניסויים הראשונים של שני-משפט הזיווג עבור כל אחד בחמשת הימים הבדיקה. הלוחות האמצעי מציגים את השהיות הממוצע של הניסויים השנייה בכל יום. התוצאות של ניתוח פוסט-הוק יוצגו על הגרפים (* לעומת < 0.05 p באותו יום דמה; ^ p < 0.05 vs באותו יום תמים). הלוחות התחתון מסכמים את התוצאות מראה חציון (קו שחור), 25th ו-th 75 percentiles (הגבולות של התיבה), ו 10בתאנון th 90 percentiles (קווי שגיאה). הממוצע הוא גם כמוצג על-ידי קווים אדומים ונקודות המינוריים של נקודות שחורות. התוצאות של ניתוח פוסט-הוק יוצגו על הגרפים (* לעומת < 0.05p באותו משפט שאם, ^ p < 0.05 vs באותו משפט תמים). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Discussion

כאשר עורכים בכל סוג של בדיקה התנהגותית, זה קריטי להיות עקבי. פרט זה כולל שיקולים רבים נראים חסרי חשיבות, אך יש השפעה גדולה על התגובה של החיה. שלב חשוב זה לא ניתן להתעלם היא בעזיבה של בעלי חיים כדי המצב הבית-כלוב/הדיור שלהם לפני כל ניסוי. הכנת מפחית את ההשפעות של תגובת המתח פיזיולוגיים החיה, אשר יכול לשנות תוצאות התנהגותיות18. באופן דומה, זה חיוני כי נעשה כל מאמץ כדי להתמודד עם כל בעלי החיים באופן זהה. עקביות זו כוללת, כפי שצוין קודם לכן, להתאקלמות לדיור וגם להתאקלמות טיפול, תחבורה בין חדרים לפני אימון או בדיקות. לא ניתן להפריז המושג הזה. מרושל לטיפול בבעלי חיים הוא אסון בכל בדיקה התנהגותית19. באופן דומה, כל מאמץ צריך להיעשות כדי לבדוק חיות באותו זמן של יום, אם במהלך המחזור שלהם כהים או בהירים. לצורך בדיקות שנדונו כאן, בדיקות בשלב בהיר או כהה הוא מקובל, כל עוד הבדיקות מבוצעות באופן עקבי. בדיקה לעשות בזמנים שונים במהלך מחזור היממה הוכח לשנות תוצאות התנהגותיות18,20. בנוסף, המטפל, כמו גם את החיה צריך להיות במצב חופשי, רגוע מתח כדי למקסם את הדיוק של התוצאות.

במיוחד במקרה של, Neuroscore תוצאות חיוביות שגויות. ותשלילים הם נפוצים. תוצאות חיוביות שגויות מתרחשות בדרך כלל כאשר חיה היא בלתי באופן מלא כדי טיפול ובדיקה. החיה חייב להיות רגוע לחלוטין אז התגובה שנצפה הוא רפלקסיבי, לא בשל השרירים הידוק ממנו להגיב החוצה של מתח או פחד. עוזר מתוחה יכול להשפיע על התוצאות על ידי שידור מתח לחיה. לכן, מחזיק את החולדה חזק מדי או משוחרר מדי יכולים להיות בעייתי. בנוסף, אם המטפל הוא עצבני, זה יכול לבלבל התגובה של החולדות. יש גם הסיכון כי משקיף לא מנוסה מפסיקה התגובה של החולדה. אימון טוב, אימון רב חיוניים להצלחת ו עקביות של Neuroscore.

באופן כללי, דאגתו עם בדיקות אלה היא חוסר הבדל גדול, לפעמים אין הבדל, בין קבוצות הטיפול. מאז בעלי חיים יכול להגיב אחרת מטפלים שונים, רעשים, פעמים ביום, באופן פוטנציאלי, עונות21, יש לבצע כל מאמץ כדי להפחית את כל הגורמים מבלבלים אפשריים.

התוצאות של קרן-איזון של קרן-הליכה הפעילויות המוצגות כאן מדגימים כי בדיקות אלה שימושיים מוקדם לאחר פציעה כדי לזהות חסרונות בפונקצית vestibulomotor. גירעונות אלה לפתור בדרך כלל מעל הזמן1,14. במודל זה, על ידי 6 חודשים אחרי הפציעה, הגירעונות הנוצרות על-ידי פגיעה שהעניין נפתר. התוצאות של נקודת הזמן 6 חודש מציינים כי אין הבדלים בין נאיבי, דמה, או חולדות פצוע; אולם, כל העכברושים היה מרגיע בכלובים שלהם הביתה במשך 6 חודשים, הזדקנות ולעלות במשקל. לפיכך, עד שהם מחדש שנבדקו בגיל 6 חודשים לאחר הניתוח (או שווה ערך במקרה של תמים), הם בעצם הופכים להיות זקנה, שמנה, לכן כל הקבוצות אינם מבצעים כמו גם הם בהשוואה הבסיסית שלהם יום 0 תוצאות.

שיקול חשוב נוסף הוא המבחן התנהגות המשמש המבחן הנכון. לדוגמה, הבדיקות המועסקים כאן הם חשבו לייצג את הפונקציה של אזורים ספציפיים במוח. דוגמה אחת היא מערכת שיווי המשקל, וזה חשוב לאיזון. אזורים במוח המעורבים פונקציית sensorimotor, כגון קליפת המוח כולל קליפת sensorimotor, תלמוס, הנוירונים corticospinal, בגרעיני הבסיס, nigro-סטריאטום, שם כמה, הם כולם מעורבים בתיאום vestibulomotor. לפיכך, גירעונות קרן-איזון או קרן-הליכה מצביעים על פוטנציאל גירעונות באזורים אלה. יתר על כן, היפוקמפוס, קליפת המוח הקדם חזיתית מעורבים בלמידה ובזיכרון פונקציות נבדק על ידי המבוך מים של זיכרון העבודה. גם כאשר המבחן הנכון נבחר, המגבלות של הבדיקות אשר מועסקים חייב להישמר בראש. לדוגמה, אף אחד המוצגים כאן רגישים גירעונות במצב רוח, כגון דיכאון, חרדה, או אינטראקציות חברתיות כגון תוקפנות, קבלת החלטות או אימפולסיביות. לחזור ולהדגיש, זה הכרחי כדי לבחור את המבחן המתאים לאזור התנהגות והמוח להערכה.

פרשנות וניתוח של נתונים התנהגותיים יש לגשת בזהירות. מומלץ לכלול ניתוח הכוח של כל סוג של מבחן בנפרד, כי היא בעזרת תוצאה התנהגותית כאמצעי של גרעון עצבית, מעצם טיבו, מדד גולמי של אפקט עדין. יתר על כן, בדיקות שונות דורשות סוגים שונים של ניתוחים סטטיסטיים. לדוגמה, הבדיקות Neuroscore ואיזון קרן תיאר תלויות הפרשנות של משקיף מיומן כדי להבקיע את התנהגות באמצעות סולם סודר. סוגי נתונים אלה אינם רציפים, סטטיסטיקה לא יופץ בדרך כלל, אז nonparametric אמור לשמש, כגון המבחן Kruskal-איי ווליס, כפי שמתואר בסעיפים 6.1 ו- 6.2. לחלופין, קרן-הליכה ובדיקות עבודה זיכרון המים מבוך לייצר נתונים אינם רציפים, סטטיסטיקה יופץ בדרך כלל, אז פרמטרית יכול לשמש, כגון חד-כיווני אנובה או חוזר על עצמו-אמצעים ANOVA דו-כיווני, הפגינו סעיפים 6.3 ו- 6.4.

הפעילויות התנהגותיים שהוצגו כאן עמד במבחן הזמן ולתת תוצאות לשחזור, במיוחד כאשר יחד עם דגם FPI בחולדות, למרות שיטות רבות אחרות של בדיקה התנהגותית של פגיעה מוחית קיימות. Neuroscore הוא הערכה קצרה הופיע עם מינימום של ציוד. בדיקות אחרות של רפלקסים וכוח הינם זמינים, יכול לשלב הערכה נוירולוגית, כגון הפעילות pulsion לרוחב, הבדיקה akinesia, מישור משופע בדיקת חוזק אחיזה (ראה פוג'ימוטו. et al. 22 ו זהב. et al. 23)-הן פעילויות קרן-איזון של קרן-הליכה תיאר מדדים של גירעונות vestibulomotor לאחר פציעה. תיאום Vestibulomotor יכול להיחשב מדד אחד התנהגות גינקולוגיות ברוטו, ואילו אמצעים אחרים של גירעונות גינקולוגיות ברוטו כוללים את Rotarod, הקוטב מסתובב, ולפתוח שדה פעילות. היכולת לשחות, הנמדדת לשחות במהירות במהלך המבוך מים, הוא גם מעיד על קואורדינציה ברוטו22,23. הפעילות מבוך מים זיכרון עבודה משלים ערכת בדיקות על-ידי זיהוי שניהם הפניה גירעונות זיכרון (שצוין על-ידי המשפט 1) ועבודה גירעונות זיכרון (מסומן על-ידי משפט 2 או ההבדל בין משפט 1 משפט 2). אמצעים אחרים של תפקוד קוגניטיבי כוללים המבוך רדיאלי הזרוע שמונה, המבוך בארנס, מבחן ההכרה אובייקט הרומן ו וריאציות שונות של המבוך מים. וריאציות אלה כוללים מבוך המים מוריס המקורי, המבוך לאשלי השלישי (שוב ראה פוג'ימוטו. et al. 22 ו זהב. et al. 23)-סוללת מבחנים זו הוכיחה להיות שימושי מוקדם לאחר פציעה, בדרגות בחוץ כדי 12 חודשים לאחר פציעה1.

בנוסף, ניתן להשתמש את הפעילויות המודגמות כאן עם זנים שונים, מין בגילאים של חולדות; עם זאת, ייתכן חדרי אירוח חייבים להיעשות לגדלים שונים וכן במקרים של חולשה גדולה יותר. לדוגמה, מבוגר יותר, כבדים יותר, חולדות צריך קרן רחב יותר כדי להפוך את פעילות קרן-איזון חולדות בגילאי, שברירית, אולי צריך משך קצר יותר פעמים לשחות במים מבוך. לפיכך, יש מקום עבור גמישות המבחנים האלה, פוטנציאל להתפתחות של בדיקות חדשות שיתאימו למצבים שונים וכן השערות.

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

אנו מודים איאן הדגשה על סיוע כירורגי הכנת אליזבת סאמנר והנושאים לעריכה קפדנית שלה. מחקרים אלה הושלמו כחלק צוות במימון פרויקט מודי Translational לחקר פציעה טראומטית של המוח.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Sprague-Dawley ratsCharles Rivers Laboratories
251 Ballardvale St
Wilmington, MA 01887-1096
Phone: 800-522-7287		CD-IGS rats, strain code 001male, albino, 300-350g at arrival
NameCompanyCatalog NumberComments
Beam-Balance
Beamhome builtwood, 25" l x 1" h x 3/4" w sealed with polyurethane varnish
C-clampHome Depot1422-C2 1/2"
barrierHome Depotstyrofoam, 18" x 17 1/2"
table (for both BB & BW)generic office supply37" h x 30" w x 60" l
NameCompanyCatalog NumberComments
Beam-Walk
Beamhome builtwood 38-1/2" l x 1-3/4" h x 1" w sealed with polyurethane varnish (~ 37" off floor)
escape boxhome builtwoodpainted black 12 1/2 " l x 9" h x 7-1/4" w
nails (pegs)2"
hinges
clamps
white noise machineSan Diego Instruments
9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121
Phone: (858)530-2600		http://www.sandiegoinstruments.com/libraries/misc/datasheets/whitenoise.pdf
lightHome Depot
NameCompanyCatalog NumberComments
Morris Water Maze
fiberglass poolmanufacturer unknown
(similar to one made by SDI)San Diego Instruments7000-072372" diameter x 30" deep (~ 500 gal)
plexiglass platformhand-made by Maggie Parsley10 cm diameter, 26" tall with silicone applied to the surface of the platform to provide a gripping surface
(similar to one made by SDI)SDI7500-0272
plexiglass animal boxes w/ lidsUTMB Machine Shop2 boxes, 10" w x 16" L x 9" h
spot lights/ heat lampsHome Depot3 around pool, 2 over boxes to dry animals
AnyMazeSan Diego Instruments
9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121
Phone: (858)530-2600		/9001http://www.sandiegoinstruments.com/any-maze-video-tracking/

References

  1. Sell, S. L., Johnson, K., DeWitt, D. S., Prough, D. S. Persistent Behavioral Deficits in Rats after Fluid Percussion Injury. J Neurotrauma. 34 (5), 1086-1096 (2017).
  2. Gurdjian, E. S., Lissner, H. R., Webster, J. E., Latimer, F. R., Haddad, B. F. Studies on experimental concussion: relation of physiologic effect to time duration of intracranial pressure increase at impact. Neurology. 4, 674-681 (1954).
  3. Anonymous. US National Library of Medicine. , (last accessed Jan. 9, 2018) www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/$term=fluid+percussion+injury+rat (2017).
  4. Hellmich, H. L., Capra, B., Eidson, K., Garcia, J., Kennedy, D., Uchida, T., et al. Dose-dependent neuronal injury after traumatic brain injury. Brain Research. 1044, 144-154 (2005).
  5. Bramlett, H. M., Detrich, W. D. Long-Term consequences of Traumatic Brain Injury: Current Status of Potential Mechanisms of Injury and Neurological Outcomes. J. Neurotrauma. 32, 1-15 (2015).
  6. Pierce, J. E. S., Smith, D. H., Trojanowski, J. Q., McIntosh, T. K. Enduring cognitive neurobehavioral and histopathological changes persist for up to one year following severe experimental brain injury in rats. Neuroscience. 87 (2), 359-369 (1998).
  7. Smith, D. H., Chen, X. H., Pierce, J. E. S., Wolf, J. A., Trojanowski, J. Q., Graham, D. I., McIntosh, T. K. Progressive atrophy and neuron death for one year following brain trauma in the rat. J Neurotrauma. 14 (10), 715-727 (1997).
  8. Schallert, T. Behavioral tests for preclinical intervention assessment. NeuroRx. 3 (4), 497-504 (2006).
  9. Sell, S. L., Avila, M. A., Yu, G., Vergara, L., Prough, D. S., Grady, J. J., DeWitt, D. S. Hypertonic resuscitation improves neuronal and behavioral outcomes after traumatic brain injury plus hemorrhage. Anesthesiology. 108 (5), 873-881 (2008).
  10. Hamm, R. J. Neurobehavioral assessment of outcome following traumatic brain injury in rats: an evaluation of selected measures. J Neurotrauma. 18 (11), 1207-1216 (2001).
  11. Feeney, D. M., Gonzalez, A., Law, W. A. Amphetamine, haloperidol, and experience interact to affect rate of recovery after motor cortex injury. Science. 217, 855-857 (1982).
  12. Hamm, R. J., Temple, M. D., Pike, B. R., O'Dell, D. M., Buck, D. L., Lyeth, B. G. Working memory deficits following traumatic brain injury in the rat. J Neurotrauma. 13, 317-323 (1996).
  13. Morris, R. G., Hagan, J. J. Allocentric spatial learning by hippocampectomised rats: A further test of the "Spatial Mapping" and "Working Memory" Theories of hippocampal function. The Quart J of Exp Psych. 38 (4), 365-395 (1986).
  14. Dixon, C. E., Lyeth, B. G., Povlishock, J. T., Findling, R. L., Hamm, R. J., Marmarou, A., Young, H. F., Hayes, R. L. A fluid-percussion model of experimental brain injury in the rat. J. Neurosurg. 67, 110-119 (1987).
  15. DeWitt, D. S., Smith, T. G., Deyo, D. J., Miller, K. R., Uchida, T., Prough, D. S. L-arginine and superoxide dismutase prevent or reverse cerebral hypoperfusion after fluid-percussion traumatic brain injury. J. Neurotrauma. 14, 223-233 (1997).
  16. R Core Team. R: A Language and Environment for Statistical Computing. , R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria. (2017).
  17. Pohlert, T. The Pairwise Multiple comparison of Mean Ranks Package (PMCMR) R package. , http://CRAN.R-project.org/package=PMCMR (2014).
  18. Verma, P., Hellemans, K. G., Choi, F. Y., Yu, W., Weinberg, J. Circadian phase and sex effects on depressive/anxiety-like behaviors and HPA axis responses to acute stress. Physiol Behav. 99, 276-285 (2010).
  19. Schallert, T., Woodlee, M. T., Fleming, S. M. Experimental Focal Ischemic Injury: Behavior-Brain Interactions and Issues of Animal Handling and Housing. ILAR J. 44 (2), 130-143 (2003).
  20. Ruis, J. F., Rietveld, W. J., Buys, J. P. Properties of parametric photic entrainment of circadian rhythms in the rat. Physiol Behav. 50, 1233-1239 (1991).
  21. Ferguson, S. A., Maier, K. L. A review of seasonal/circannual effects of laboratory rodent behavior. Physiol Behav. 119, 130-136 (2003).
  22. Fujimoto, S. T., Longhi, L., Saatman, K. E., McIntosh, T. K. Motor and cognitive function evaluation following experimental traumatic brain injury. Neurosci & Biobehav Reviews. , (2004).
  23. Gold, E. M., Su, D., Lopez-Velazquez, L., Haus, D. L., Perez, H., Lacuesta, G. A., Anderson, A. J., Cummings, B. J. Functional assessment of long-term deficits in rodent models of traumatic brain injury. Regen. Med. 8 (4), 483-516 (2013).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

131neuroscore

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved