JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

Abstract

הדגם עכברוש של השתלת כבד orthotopic (OLT) חיוני למחקר השתלות. זה מודל בעלי חיים מאוד מתוחכמים ודורש עקומת למידה תלולה. המבוא של הטכניקה השרוול על השקה של וריד שער הכבד (PV), infrahepatic הנבוב העליון (IHVC) פישטה משמעותית בניתוח השתלה אצל חולדות. עם זאת, בשל הקיר הקדמי קצר של הנמענים suprahepatic הנבוב העליון (SHVC), הטכניקה השרוול הוא קשה מאוד לשימוש מחדש של SHVC. רוב החוקרים בתחום זה עדיין להשתמש בטכניקה היד-תפר SHVC שיקום, מה שהופך אותו השלב צוואר בקבוק בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. הטכניקה השקה מגנטי (קרי, magnamosis) היא שיטת חיבור שתי ספינות באמצעות הכוח אטרקטיביים בין שני מגנטים. מחקר שנערך שלנו הראו כי הטכניקה השקה מגנטי עדיפה טכניקת היד-תפר SHVC שחזור בחולדות. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים. במודל זה, השחזור של PV, IHVC בוצע על ידי טכניקה סטנדרטית קאף, בזמן השחזור של המרה (BD) בוצע על ידי טכניקה סטנט. Arterialization מחדש הכבד לא בוצעה. הטכניקה השקה מגנטי עשוי שחזור SHVC הרבה יותר קל וקיצור משמעותי השלב anphepatic. אחרי עקומת למידה סבירה, אפילו חוקרים ללא מיומנויות השתלה מתקדמות יכול לייצר תוצאות לשחזור ואמין באמצעות מודל זה עכברוש של OLT.

Introduction

הדגם עכברוש של השתלת כבד orthotopic (OLT) חיוני עבור השתלה מחקר1,2. העכברוש הראשון OLT תוארה על ידי Lee. et al. ב 19733. במודל זה, כל כלי שוחזרו על ידי טכניקת היד-תפר. הטכניקה ' היד-תפר דורש מיומנויות השתלה מתקדמות, אשר מגביל משמעותית את הניצול. מאז, למגוון שינויים בפרוטוקול המקורי של עכברוש OLT דווחו. ביניהם, הטכניקה השרוול על השקה של וריד שער הכבד (PV), infrahepatic vena cava (IHVC) שדווחו על-ידי קמהדע. et al. ב-1979 נחשב על שיפור משמעותי מודל זה, כמו זה לפשט באופן משמעותי את ההליכים שחזור4 . עם זאת, בשל הקיר הקדמי קצר של הנמענים suprahepatic הנבוב העליון (SHVC), הטכניקה השרוול הוא קשה מאוד לשימוש מחדש של SHVC. רוב החוקרים בתחום זה עדיין להשתמש בטכניקה היד-תפר SHVC שיקום, מה שהופך אותו השלב צוואר בקבוק ב עכברוש OLT5,6,7.

הטכניקה השקה מגנטי (קרי, magnamosis) היא שיטת חיבור שתי ספינות או מבנים צינורי אחרים באמצעות הכוח אטרקטיביים בין שני מגנטים8,9,10,11. הכוח המגנטי בהדרגה דוחס, remodels הרקמה לתוך12,השקה חזק, sutureless13. השקה דחיסה זה הוכח כיעיל בני14,15. עיצבנו זוג טבעות מגנטי במיוחד עבור ההשקה של SHVC אצל חולדות. מחקר שנערך שלנו הראו כי הטכניקה השקה מגנטי עדיפה טכניקת היד-תפר שיקום SHVC חולדה OLT16. מטרת מאמר זה היא לספק פרוטוקול מפורט, צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

Protocol

הפרוטוקול בוצע בהתאם להנחיות על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה, אושרה על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים בניסויים של שיאן אוניברסיטת ג'יאוטונג של, שיאן, מחוז שאאנשי, סין.

הערה: אף הליכים לפי פרוטוקול זה בוצעה תחת מיקרוסקופ כירורגי.

1. הכנה לפני הניתוח

  1. העיצוב והצורה של טבעות מגנטי (איור 1)
    1. להרכיב את המכשיר השקה מגנטי על ידי התאמת זוג טבעות מגנטי-בורון ניאודימיום ברזל.
    2. עיצוב הטבעות לפי הפרמטרים של עכברוש SHVC עם קוטר ציר מרכזי, קוטר ציר קטין, עובי, משקל של 8 מ"מ, 5.5 מ מ, 1 מ מ, 0.5 g, בהתאמה.
    3. עקומת את הטבעות כדי לצורה הרצויה על-ידי טכניקה חיתוך-אלקטרודות, ואז להרגיע את הטבעות שהושג במברשת תחמוצת טיטניום, לחטא עם 500 mg/L אתילן אוקסיד-55-60 מעלות צלזיוס במשך 6 שעות.
  2. האזיקים (איור 2)
    1. היכונו שהקפל השקה של IHVC, PV על ידי חיתוך צינור פוליאתילן. להבטיח כי הגוף השרוול הוא 5 מ מ ארוך עם סיומת השרוול 2 מ מ.
      הערה: הקוטר הפנימיים והחיצוניים של השרוול PV הינם 1.8 ו- 2.1 מ מ, בעוד אלה של השרוול IHVC הם 2.6 ו- 2.8 mm, בהתאמה.
  3. סטנט (איור 2)
    1. הכן סטנט על השקה של BD באמצעות חיתוך 24-G בצינורית תוך ורידי באורך של 5 מ מ כדי לייצר שיפוע בשני קצותיו.
  4. חיות ניסוי
    1. השתמש חולדות ספראג Dawley זכר שוקל בין 250 ו- 280 g כמו תורמים הנמענים. ודא כי הנמען משקל זהה או מעט כבד יותר (< 10 גרם) מאשר התורם.
    2. שמור את החולדות מבוקר אקלים חדרים עם גישה חופשית מזון ומים לפני הניתוח.

2. התורם המבצע

  1. להזריק הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) subcutaneously בתור מקבל 1 שעה לפני הניתוח.
  2. עזים ומתנגד העכברוש התורם באמצעות אינהלציה איזופלוריין. שימוש 5 vol איזופלוריין % בקצב הזרימה של 1.5 ליטר/דקה בתוך קופסת פרספקס עבור אינדוקציה הרדמה, vol 2% איזופלוריין בספיקה 0.6-0.8 L/min בקונוס מסיכה לשם קיום הרדמה. לאשר עומק ההרדמה על-ידי ביצוע קמצוץ הבוהן, קמצוץ העור.
  3. לגלח כולו בעור בטן של העכברוש באמצעות מכונת גילוח חשמלית כדי לאפשר חשיפה מנקה. לחטא את העור המתאים עם פתרון povidone יוד.
  4. פתיחת חלל הבטן דרך חתך בצורת צלב באמצעות מספריים כירורגיים מהשורש של הפין הארכת עד 1 ס מ מעל xiphisternum לאורך לינאה אלבה, מן האמצע של החתך האורך. מרחיב אל קו טוב. Exteriorize של מערכת העיכול משמאל, לכסות את זה עם גזה רטוב.
  5. מלחציים ומשוך את xiphisternum לכיוון הראש באמצעות מלקחיים hemostatic. לנתח רצועה falciform, אל הרקמות סביב הכבד. לבודד, מאתרים ומפסיקים את הווריד השמאלי הסרעפת נחות בתפר משי 6-0.
  6. הכנסת סטנט המרה.
    1. מלחציים BD ממש מעל הנקודה שבה הווריד gastroduodenal מצטרף וריד שער הכבד, ומשוך אותו כדי לשמור על מתח קטן באמצעות microforceps. לאחר מכן לבצע חתך "V" של 1 מ מ אורך על הקיר הקדמי proximal המפגש בכיס המרה כ- 5 מ"מ על ידי מספריים מיקרו.
    2. הכנס סטנט לתוך לומן של המרה באמצעות של microforceps מעוקל. ודא כי לפחות מחצית השקרים סטנט מחוץ המרה.
    3. לאבטח סטנט בתפר משי 6-0. חותכים קצה אחד של התפר. תשמור על השני לקיים במהלך השקה מאוחר יותר. Transect המרה מתחת סטנט וודא שהמרה יכול לצאת סטנט.
  7. לבודד את IHVC עד לרמת וריד הכליה השמאלית. לפנות את IHVC של הרקמות הסובבות anterior ואת לרוחב על-ידי דיסקציה באד כותנה עד IHVC זה skeletonized. נפרדים, מאתרים ומפסיקים את הווריד יותרת הכליה, את הווריד כליות בדיוק בתפר משי 6-0.
  8. Heparinize העכברוש ב-50 שהזרקת U של הפארין מעורבבת עם 2 מ ל תמיסת רגילה דרך הווריד הגבי של הפין.
  9. Perfuse הכבד.
    1. לבודד את. העורק הראשי מתחת וריד הכליה השמאלית. להכניס צנתר 22-G אבי העורקים.
    2. לבצע ניקור, תהדק את העורקים החזי באמצעות של microforceps.
    3. Perfuse הכבד התורם דרך הקטטר באבי העורקים עם 20 מ ל תמיסת מלח רגיל המכיל 25 U של הפארין (4 ° C) בקצב של 3 mL/min עם משאבת אינפוזיה. בינתיים חותכים את הווריד הנבוב מתחת הווריד כליות נכון לאפשר את הפתרון זלוף לזרום מתוך הכבד.
    4. Transect את SHVC יחד עם חלק הסרעפת ואת IHVC ברמה של הווריד הכליה השמאלית של הכבד התורם הפכה החיוור.
  10. לנתח את רקמת החיבור המקיף PV על ידי מלקחיים מיקרו שני. מאתרים ומפסיקים ולחלק את הוורידים מולדת בתפר prolene 8-0. Transect PV ברמה של הווריד של הטחול. לסלק את הכבד התורם, לשטוף אותו עם תמיסת מלח רגיל קר. מקום זה בתוך תמיסת מלח קר אמבטיה 4 ° C.

3. להשתיל הכנה

הערה: כל הפרוצדורות להכנת השתלת כבד מתבצעות בתוך אמבט מלוחים קרים ב 4 º C.

  1. לצרף מגבון IHVC של התורם (איור 3).
    1. הכנס את IHVC לתוך השרוול שלה עם הסיומת השרוול והצביע לעבר הכבד. מקם את הסיומת השרוול על הקיר האחורי של IHVC. תיקון הסיומת השרוול את IHVC עם microforceps מעוקל עצמו מחובר באמצעות קליפ קובץ המכל מרחץ.
    2. אוורט בקצה הדיסטלי של IHVC מעל הגופה השרוול באמצעות מלקחיים מיקרו שני.
    3. אבטח את הקצה בתפר משי 6-0. ודא ש-IHVC זה לא מעוות בתהליך.
  2. חזור על שלב 3.1 ב- PV לצרף מגבון PV של התורם.
  3. לצרף טבעת מגנטית SHVC של התורם (איור 4).
    1. משוך את הסרעפת דרך ארבע המלקחיים, לקצץ את SHVC.
    2. עוברים את SHVC דרך טבעת מגנטית עם המלקחיים סגסוגת טיטניום מיקרו.
    3. מעל הטבעת, אוורט בקצה הדיסטלי של SHVC.
    4. אבטח את הטבעת 6-0 בתפר משי. ודא ש-SHVC זה לא מעוות בתהליך.
    5. הסר את הסרעפת עודף סביב הכבד.
  4. לטבול הכבד התורם באמבט מלוחים נורמלי קר ולאחסן ב 4 º C.

4. הנמען מבצע

הערה: הסכימה של ההשתלה שתל בחולדה הנמען מוצג באיור5.

  1. להזריק הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) subcutaneously בתור מקבל 1 שעה לפני הניתוח. עזים ומתנגד העכברוש התורם באמצעות אינהלציה איזופלוריין. שימוש 5 vol איזופלוריין % בקצב הזרימה של 1.5 ליטר/דקה בתוך קופסת פרספקס עבור אינדוקציה הרדמה, vol 2% איזופלוריין בספיקה 0.6-0.8 L/min בקונוס מסיכה לשם קיום הרדמה.
  2. לגלח את כל המעטפת בטן של העכברוש. לחטא את העור המתאים עם פתרון povidone יוד.
  3. פתח את חלל הבטן דרך חתך קו האמצע 4 ס מ. מקם את רטרקטורים בטן. משוך את הצלעות הכי רחוקים ככל האפשר מן האמצע.
  4. מלחציים ומשוך את xiphisternum לכיוון הראש באמצעות מלקחיים hemostatic. לנתח את רקמות החיבור והרצועות סביב הכבד. מאתרים ומפסיקים ולחלק רצועה hepato-הוושט. מאתרים ומפסיקים ולחלק את עורק הכבד בתפר prolene 8-0.
  5. לבודד את צינור המרה מן הכבד הפורטל הראשון. מקום suture משי 6-0 סביב צינור המרה מתחת חלוקתה, מאתרים ומפסיקים את צינור המרה.
  6. לנתח את IHVC למטה הווריד כליות. מאתרים ומפסיקים ולחלק את הווריד יותרת הכליה. מקום רצועה SHVC של הכבד.
  7. תהדק את IHVC מעל הווריד כליות עם קטעי microvessel. תהדק את PV ברמה של הווריד מולדת עם קטעי microvessel.
    1. לשטוף את הדם בכבד, לאט לאט להחדיר 2 מ ל תמיסת מלח דרך PV. גרור את הכבד על ידי משיכת הרצועה הקודם שמוקם. מהדק את SHVC וחלק הסרעפת עם סטינסקי.
    2. Transect את IHVC קרוב parenchyma של PV-hepatis פורטה. לסלק את הכבד על-ידי transecting את SHVC מעל הכבד. הסר את הכבד הנמען במהירות.
  8. לצרף טבעת מגנטית SHVC של המטופל.
    1. הכנס SHVC הנותרים של הנמען טבעת מגנטית.
    2. לתקן את טבעת מגנטית על סטינסקי על-ידי משיכה מגנטית.
    3. אוורט את SHVC מעל הטבעת מגנטי עד הספינה מכסה את הקצה של הטבעת.
  9. מקום orthotopically השתלת כבד את התורם, לכסות את זה עם גזה רטוב קר.
  10. למלא לומן של SHVCs של התורם, של המטופל עם תמיסת מלח רגיל. הסר את בועות האוויר ביסודיות כדי למנוע. תסחיף אוויר. סיום השחזור SHVC על-ידי התאמת הטבעות מגנטי מוטבע SHVC של התורם של המטופל יחד באמצעות כוח מגנטי.
  11. לשחזר את PV.
    1. בדרכי הענף הימני והשמאלי של PV של המטופל על ידי מושכים התפירות prolene של 8-0 כדי לשמור על המתח של PV.
    2. להעביר את המלחציים של המטופל PV למטה הווריד השוער לוריד הטחול על מנת לחשוף את הווריד באופן מלא.
    3. פצעים וחתכים בקיר הקדמי של הנמען. למלא לומן של PV עם תמיסת מלח רגיל.
    4. החזק את הסיומת השרוול של PV של התורם עם מלקחיים מעוקל.
    5. הכנס את הגוף השרוול של PV של התורם PV של הנמען בזמן לשמור על שטיפה לומן PV עם תמיסת מלח.
    6. . אבטחו עם במבניו קשירה משי 6-0 ליצור מחדש את זרימת הדם אל הכבד השתל על ידי שחרור את התפסים על PV ו SHVC.
  12. חזור על שלב 4.11-IHVC לשחזר את IHVC.
  13. לשחזר את צינור המרה על ידי הטכניקה סטנט.
    1. פצעים וחתכים "V" על הקיר הקדמי של צינור המרה הנמען.
    2. הכנסת סטנט התורם לומן של הנמען BD ולתקן את זה 6-0 בתפר במבניו משי. משוך התפרים על שני צינורות המרה יחד, לקשור את התפרים להביא BD קרובים אחד לשני.
    3. לעטוף omentum רקמות סביב האתר anastomotic למניעת דליפת מרה.
  14. להשקיית הבטני עם תמיסת מלח רגיל חמים. סגור החתך בבטן בשתי שכבות עם רציפה תפירה נספגים 3-0.
  15. לנהל הספורוקסים 16 מ"ג/ק"ג (אנטיביוטיקה), 0.05 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין (מקבל) בזריקה תת עורית אחרי הניתוח באופן מיידי.
  16. מקם את החולדה בתוך כלוב נקי ולא לאפשר למזון ומים ad libitum.
  17. מזריקים הספורוקסים (16 מ"ג/ק"ג), הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) לתוך חלל הבטן כל 12 שעות במשך 3 ימים.

תוצאות

לאחר כ 10 ניסיונות, הטכניקה השקה מגנטי עבור שחזור SHVC היה mastered בהצלחה ע י חוקר שהיה לו שום הכשרה השתלה מוקדמת. השחזור של SHVC לקח פחות מ 2 דקות. השלב anhepatic של החולדות הנמען היה כ- 10 דקות. אין פקקת, דימום או angiostegnosis נצפתה ב 1, 5 ו 30 ימים לאחר פגיעה reperfusion באתר anastomotic SHVC. Cavography vena נחות בו?...

Discussion

רבים קליני מתקדם השתלת כבד ניתן לייחס מחקרים שנעשו בבעלי חיים. עכברוש OLT הוא מודל נפוץ ומקובל גם במחקר של שימור איברים, השתלת אימונולוגיה, פיזיולוגיה, פתולוגיה. עם זאת, היא גם הליך מורכב מאוד, דורש מיומנות השתלה מתקדמות. למרות שיפורים רבים בהליך של עכברוש OLT, והחיבור SHVC נותרו צעד מאתגר. במאמר ...

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים משרד של החינוך חדשנות צוות פיתוח תוכנית של סין (מס ' IRT16R57), הלאומית למדע הטבע של סין (מספר 81470896), מחקר קרן עבור צעירים כישרון גיוס תוכניות של שיאן ג'יאוטונג של האוניברסיטה (RW).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Anesthesia MachineHarvard tabletopAnimal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm SystemPerlong MedicalPLX7000BIt is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe PumpMindrayBeneFusion SP5intravenous infusion
IsofluraneRWD life Science Co.anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexolShanghai General Pharmaceutical Co intravascular contrast media  
heparin sodium injectionSPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD  prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime Glaxo Operations UK Limited an antibiotic
buprenorphine TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltdan analgesic
curved microforcepsShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.W40350surgical tool
hemostatic forceps(straight)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J31010surgical tool
hemostatic forceps(curved)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J31020surgical tool
Satinsky clampShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.XEC050surgical tool
needle holderShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J32010surgical tool
microneedle holderShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WBA040surgical tool
notched forcepsShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J42010surgical tool
tissue forceps(with hook)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J41010surgical tool
tissue scissorShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Y00040surgical tool
surgical scissorsShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Y00030surgical tool
micro scissorsShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.MR-S121Tsurgical tool
microvessel clipsShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.XEC240surgical tool
straight microforceps(titanium alloy)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WCC010surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WCC020surgical tool

References

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al. The value of microsurgery in liver research. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).
  3. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  4. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  5. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).
  6. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376 (2013).
  7. Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat. PloS one. 10, e0145662 (2015).
  8. Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques. Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).
  9. Pichakron, K. O., et al. Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy. Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).
  10. Gonzales, K. D., et al. Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques. Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).
  11. Wall, J., et al. MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery. Endoscopy. 45, 643-648 (2013).
  12. Xue, F., et al. Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?. World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).
  13. Yan, X., et al. Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique. PloS one. 8, e76873 (2013).
  14. Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening. Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).
  15. Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia. BMJ case reports. , (2014).
  16. Shi, Y., et al. Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

133OrthotopicSuprahepatic

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved