הרכב הגוף וניתוח מטבולית שכולאת בעכברים פד שומן גבוה

Summary

פרוטוקול זה מתאר את השימוש מנתח בהרכב הגוף ומערכת חילוף החומרים בעלי חיים ניטור לאפיין הרכב הגוף ופרמטרים מטבולית בעכברים. מודל השמנת יתר הנגרמת על ידי האכלה עתירי שומן משמש כדוגמה עבור היישום של טכניקות אלה.

Abstract

שינויים על הרכב הגוף (מסה שמנה או רזה), מטבולית פרמטרים כגון צריכת חמצן לכל הגוף, ההוצאה האנרגטית, וסילוק המצע, והתנהגויות כגון צריכת מזון, פעילות גופנית יכולה לספק מידע חשוב בנוגע המנגנון הבסיסי של המחלה. בהתחשב בחשיבות של הרכב הגוף וחילוף החומרים להתפתחות של השמנת יתר, sequelae הבאים שלה, זה הכרחי להפוך מידות מדויקות של פרמטרים אלה בהגדרת מחקרים קליניים. ההתקדמות הטכנולוגית במהלך העשורים האחרונים הפכו אותה אפשר להפיק אמצעים אלו דגמים מכרסמים בצורה לא פולשנית האורך והרוחב. כתוצאה מכך, אמצעי מטבולית אלה הוכיחו שימושי בעת הערכת התגובה של מניפולציות גנטיות (לדוגמה נוקאאוט או הטרנסגניים עכברים, נגיפי דפיקה למטה או ביטוי של גנים), תרופה ניסיונית/מתחם ההקרנה, תזונה, התערבויות התנהגותיות או לפעילות גופנית. במסמך זה, אנו מתארים את הפרוטוקולים למדידת הרכב הגוף ופרמטרים מטבולית באמצעות חיה ניטור המערכת בעכברים צ'או-fed וגבוה השמן דיאטה-fed.

Introduction

חילוף החומרים בבסיס היבטים רבים של סלולארי רגיל, עוגב ו פיזיולוגיה לכל הגוף. כתוצאה מכך, בהגדרה של פתולוגיות שונות, שינויים ל חילוף החומרים עשוי לתרום ישירות התנאי הבסיסי או עשויים להיות מושפעים לרעה כמו תופעת לוואי של המחלה. באופן מסורתי, מחקר מטבולית ולימודי לתוך איזון האנרגיה כבר התרכזו בשדה של השמנת יתר, תנאים נלווים כגון עמידות לאינסולין, סוכרת טרום, סובלנות גלוקוז, מחלות לב וכלי דם וסוכרת. מחקר זה היא מוצדקת בהתחשב השכיחות המחריף של תנאים ברחבי העולם ואת הפרט, החברתיות, עלויות כלכליות לגרום בתנאים אלה. ככזה, הפיתוח של אסטרטגיות מניעה ו הרפוי חדש היעד השמנת-יתר היא מטרה המשך במעבדות מחקר ברחבי העולם, העכבר פרה מודלים הם בכבדות ההסתמכות על מחקרים אלו.

בעוד שקילה עכברים מספק הערכה אמינה של עלייה במשקל או אובדן, אינה מספקת פירוט של הרכיבים השונים המרכיבים את הרכב לכל הגוף (מסת שומן, מסה רזה, מים חינם כמו גם רכיבים אחרים כגון פרווה וטפרים). שקילת רפידות השמן בסיום הלימודים, ברגע העכבר המנוח מספק מדד מדויק של המחסנים שומן שונה אך רק יכולה לספק נתונים עבור נקודת זמן יחיד. כתוצאה מכך, יש לעיתים קרובות צורך לרשום מספר גדודים לחקור את התפתחות עודף משקל לאורך זמן, באופן משמעותי מדגרת בעלי חיים, זמן ועלויות. השימוש absorptiometry רנטגן כפול-אנרגיה (הצג) מספקת גישה כדי להעריך את תוכן שמנה ולא רזה רקמות הגוף ומאפשר החוקר לקבל נתונים בצורה אורכית. עם זאת, התהליך מצריך עכברים להיות מורדם¹, התקפי חוזרים ונשנים של הרדמה שעשויות להשפיע ההצטברות של רקמת שומן או השפעה על היבטים אחרים של רגולציה חילוף החומרים. EchoMRI מנצל relaxometry תהודה מגנטית גרעינית כדי למדוד את מסת שומן ודל, מים חינם ומים הכולל תוכן. . זה בר השגה עקב יצירת קונטרסט בין הרכיבים רקמות שונות, עם הבדלים משך, משרעת ו התפוצה המרחבית של תדרי רדיו שנוצר מאפשר תיחום של כימות של כל סוג הרקמה. טכניקה זו יש יתרון שזה לא פולשנית, מהירה, פשוטה, לא דורש הרדמה או קרינה,, חשוב חיובי אומתה נגד ניתוח כימי².

אחד מהשיקולים המרכזיים של השמנת יתר, מחקרים בנושא הוא משוואת מאזן האנרגיה. בעוד הצטברות שומן מורכב יותר מאשר גרידא אנרגיה (צריכת מזון) לעומת אנרגיה החוצה (ההוצאה האנרגטית), הם גורמים חיוניים כדי שניתן יהיה למדוד. ההוצאה האנרגטית היומית הוא הסכום של ארבעה מרכיבים שונים: (1) ההוצאה האנרגטית הבזליים (נח קצב חילוף החומרים); (2) הוצאות אנרגיה בגלל ההשפעה לייזר של צריכת מזון; (3) האנרגיה הדרושה עבור הומיאותרמיות; ו- (4) האנרגיה בילה על פעילות גופנית. כפי ההוצאה האנרגטית יוצר חום, מדידת חום הייצור על ידי חיה (המכונה calorimetry ישירה) ניתן להשתמש כדי להעריך את ההוצאה האנרגטית. לחלופין, מדידה של השראה של שפג תוקפם ריכוזי O₂ ו CO₂, מתן אפשרות לקביעת צריכת₂ O לכל הגוף וייצור₂ CO, יכול להיות מנוצל כמו דרך למדוד באופן עקיף (indirect calorimetry) חום הייצור, כתוצאה מכך לחשב את ההוצאה האנרגטית. צריכת המזון עלייה או ירידה בהוצאות האנרגיה predispose עכברים על עלייה במשקל, תצפיות על שינויים בפרמטרים אלו יכול לספק מידע שימושי של מנגנון סביר פעולה מסוימת דגמים של השמנת יתר. פרמטר מטבוליות הקשורות עניין הוא היחס החילוף הנשימתי (RER), מצביע על חלקם של סובסטרט/דלק (קרי, פחמימות או שומן) אשר נמצא בתהליך חילוף החומרים, מנוצל כדי לייצר אנרגיה. כתוצאה מכך, מדידה של צריכת המזון (האנרגיה הנצרכת) בשילוב עם פעילות גופנית רמות O צריכת₂ , ה-RER, ההוצאה האנרגטית יכול לספק הבנה רחבה של פרופיל מטבולי של אורגניזם. אחת השיטות לאיסוף נתונים כאלה היא להשתמש חיית מעבדה מקיף פיקוח על המערכת (צדפות), אשר מבוססת על שיטת calorimetry עקיף כדי למדוד את ההוצאה האנרגטית יש את היכולות שנוספו קביעת רמות פעילות גופנית (קרן הפסקות), צריכת המזון באמצעות סולמות שולבו לתא המדידה.

ב פרוטוקול זה אנו מספקים תיאור ישר קדימה של השימוש של מנתח בהרכב הגוף כדי להעריך את הרכב הגוף בעכברים ובבני מערכת ניטור מטבולית בעלי חיים כדי למדוד את ההיבטים של חילוף החומרים. שיקולים ומגבלות על טכניקות אלה יידונו כמו גם שיטות הציע ניתוח, פרשנות וייצוג נתונים.

Protocol

כל הניסויים המתוארים אושרו על-ידי אלפרד רפואי מחקר חינוך התחנה חיה ועדת האתיקה (AMREP AEC), עכברים נמסרו לטיפול הומאני בקו הבריאות הלאומיים של המועצה למחקר רפואי (NHMRC) של הנחיות אוסטרליה ניסויים בבעלי חיים. בעלי החיים היו מנוהל שלהם שנקבעו דיאט ומים ad libitum ובו שכנו בסביבת טמפרטורה מבוקרת (~ 21-22 מעלות צלזיוס) עם 12 שעות אור, מחזור 12 h-כהה. בשבוע 7 עכברים זכרים הישן (על רקע C57Bl/6J) קיבלו גם דיאטה רגילה צ'או נורמלי (אנרגיה תוכן 14.3 MJ/kg, בהיקף של 76% kJ פחמימות, 5% שומן, 19% חלבון; ראה טבלה של חומרים) או עבור הקבוצה גבוהים האכלה שומן, שומן גבוהה דיאטה ((HFD) אנרגיה תוכן 19 MJ/kg, בהיקף של 36% פחמימות, 43% שומן, חלבון 21%, הזנות המומחיות של kJ) למשך 3 שבועות. משקל הגוף ומדידות בהרכב הגוף באמצעות מכשיר EchoMRI נעשו שבועי בזמן הניתוח הפיקוח מטבולית התקיים צדפות לאחר 3 שבועות של הדיאטה.

1. גוף הרכב מנתח הליך

הערה: לפעול בצורה אופטימלית, EchoMRI 4-in-1 בשימוש פרוטוקול זה צריך להיות מוכלת בתוך חדר שבו טמפרטורת האוויר יציב, לא משתנים. אידיאלי זה צריך להיות פיקוח מתמיד. הזזת של המכונה, הפרעות לשלטון יש גם להימנע במידת האפשר. אם הזרם הופרעה, יש להפעיל מחדש המערכת, אפשר לפחות 2-3 h עבור המכונה להתחמם לפני השימוש בו שוב. לפני שתתחיל, ודא שאת לובשת ציוד מגן אישי המתאים.

1. לפני סריקת עכברים, לבצע בדיקה מערכת במחשב מנתח הרכב הגוף. זה כרוך באמצעות תקן כיול (המכונה לדוגמה מבחן (עלויות) מערכת שמן קנולה) כדי לבדוק את מידת הדיוק של המכשיר, כדי להבטיח שהיו לא להיסחף רמת הדיוק שלה.
   1. פתח את תוכנת המערכת, לאחר מכן לחץ על לחצן סרגל הכלים בדיקת המערכת או הקשה על Alt + Y"בו זמנית.
   2. לפני בדיקת המערכת מתבצעת על ידי המחשב, המתן תזכורת לאמת העלויות הנכונות (במקרה זה העלויות העכבר ספציפיים) הושם בתוך תושבת של המערכת ( איור 1). ברגע אישר כי זהו אכן המצב, לקבל כדי להמשיך הבדיקה, אשר יעביר דקות אחדות עד להשלמתו.
2. לאחר בדיקת המערכת כבר חלפו, להמשיך קדימה עם סריקה.
   1. אם בדיקת המערכת נכשל, לחזור על בדיקת המערכת.
   2. אם המכונה ממשיכה להיות מחוץ לטווח (המציין שאירעה חריגה), כיול ייתכן שיהיה צורך לתקן את המצב. השלם זה על-ידי ביצוע ההנחיות או כפי שמתואר במדריך למשתמש שסופקו בזמן הרכישה. אם הבעיה נמשכת, לבדוק ידנית³ או לדווח על הבעיה לצוות התמיכה של היצרן, לחפש עוד הוראה.
3. מקום העכברים בעל הדגימה בעלי חיים קטנים (גליל ארוך) כדי בזמן במכונה. כדי לעשות זאת, מציין את מיקום אופקית, הרם את העכבר, להכניס אותו לתוך הפתח של הראש גליל קודם. לאט ובזהירות להביא בעל המיקום האנכי כך העכבר בחלק התחתון של גליל, מוכן לניתוח.
4. פעם אחת בתוך המחזיק, הכנס מפריד מסוג כדי להגביל את תנועת העכבר במהלך תקופת המדידה. בנסיבות מסוימות, עם עכברים פעילים במיוחד, ייתכן צורך להחזיק את המפריד במקום עם קצה האצבע שלך.
   הערה: להכיר את העכברים השמה בעלי הדגימה לפני ניתוח הראשוני שלהם כדי להפחית את הלחץ. השימוש של בעל הדגימה בעלי חיים בצבע אדום יכול גם להפחית את תגובת המתח פוטנציאליים, כמו העכברים מרגיש שהם בחושך.
5. בתוך התוכנה, בחר תיקיה (תיקיית סרגל כלים) כדי לשמור את הנתונים וליצור שם קובץ.
6. במידת הצורך, להפחית את כמות רעש אקראי במידות שמנה ולא רזה על ידי הגדלת מספר ראשי הצטברויות של הסריקה. ברגע התוכנה תופעל, הצטברויות ראשי מוגדר ערך ברירת מחדל המומלצת לשימוש יומיומי כללי; אלא אם כן יש סיבה ספציפית כדי לשנות פרמטרים אלה, הגדרות ברירת המחדל ייתן הנדרשת לרמת דיוק למשתמשים.
7. אם אתם לא מעוניינים בקבלת נתונים עבור מים חינם ומים הכולל, לבטל את הבמה מים על-ידי בחירה בכרטיסיה לסרב. כך להפחית באופן משמעותי את משך הסריקה וכן לשפר את התפוקה.
8. ליזום את הסריקה על-ידי בחירת 'התחל סריקת' או על-ידי לחיצה על F5 במקלדת. הזן את כל המידע הדרוש על החיה (למשל, חיה מזהה, מסת הגוף, וכו.) ולחץ על "אישור" או F5 כדי להתחיל את הסריקה, אשר יעביר כ- 1 דקות.
9. לאחר הנתונים הושגו, להסיר את המחזיק בעלי חיים המכיל את העכבר מהמכונה ולמקם האחורי חיות בכלוב שלו. לאחר כל החיות נסרקו, לייצא את הנתונים עבור ניתוח נוסף ואיסוף.
10. לפני ואחרי השימוש, ניקוי יסודי בעלי חיים לפי ההוראות של היצרן. כמו מחזיקי אלה בנויים פלסטיק אקרילי, איזופרופיל אלכוהול, אתיל אלכוהול יש להימנע ככל שהם יכולים לגרום פיצוח של בעלי ו/או ההתדרדרות המהירה של בעל, ובכך מגדיל את הסיכוי של שבירה. במקום זאת, להשתמש בפתרון מים חמים שטיפת כלים או, אם חיטוי נוסף נדרש, השתמש F10 (ב דילול 1:125) או אחרים תרסיסי חיטוי או ניקוי (ראה טבלה של חומרים) ולאחר מכן לנגב.

2. מטבולית חיה ניטור מערכת הליך

הערה: המערכת דורשת ~ 2 h כדי לחמם ולייצב. אם המחשב כבוי, זה חייב להיות דלוק כדי לאפשר את התא זרקוניה להיות מחומם כדי 725 ° C. גם אנחנו בדרך כלל מקום עכברים במנתח בהרכב הגוף לכהן יום להזנת החיה מערכת ניטור כדי למנוע בעיות עם איפוק מתח.

1. ודא שהמחשב מחובר למערכת ניטור בעלי חיים מופעלת לפתוח את התוכנית שליטה. בחר באפשרות "השירות Oxymax" ' מתפריט ' כלי ' כדי להפעיל את המשאבות.
2. למלא בקבוקי מים במים המתאימה, שוקל, לבחון את בריאותו של העכברים, ולארגן מזון. אם מדידת צריכת המזון במערכת, שקול powdering המזון. למלא משליכים מזון על ידי מדכא את האוכל הקופצני של פלטפורמת ואת קצהו לתוך הופר. ודא הופר מזון ואת בקבוק מים מלא כדי להבטיח כי יש מספיק אוכל ומים שיספיקו שהזמן המוקצב ניסיוני.
3. לבדוק את מצב drierite/הסופג; אם באמצעות מחוון צבע, זה צריך להיות כחול, לכן יבש, אך אם זה ורוד/סגול, יש לו ספיגת לחות משמעותיים, צריך להיות מוחלף או ולמלא.
4. לבדוק את המצב של השמנה אמוניה, סודה לימון והחלפה במידת הצורך. אם המלכודת אמוניה מחובר שניים באותו זמן, כאשר המלכודת השני מציג סימנים של שינוי צבע, להחליף את הראשון. עלייה ההיסט₂ CO יכול גם מרמזים על הצורך להחליף את סודה לימון.
   הערה: סופג לחות יכול להיות מיובש בתנור, שימוש חוזר, אולם אנו את ההמלצות של היצרן של המערכת כדי להשתמש טרי בכל פעם.
5. להרכיב את הצ'יימברס. כדי לעשות זאת, למקם את הופר מזון על האיזון ולאחר מכן מקם את התא עליון עם פלטפורמת מחורר הופך להיות הרצפה של החדר מוכנס. בזהירות למקם העכבר בתא, לצרף את המכסה של המערכת עם החזית, קליפים וכן מאובטח לפני מיצוב בקבוק המים ואת והידק. כאמצעי זהירות, לבדוק מחדש כל המכסים קאמרית, עכברים, ומים (איור 2 א-ד).
   הערה: בהתאם לגודל של העכברים נבחנות, ייתכן צורך לכוונן את גובה הרווחים מעל הופר מזון כך העכברים יש גישה האוכל אבל לא מספיק שטח שבו הם יכולים לישון ישירות מעל במזין.
6. כמו זה מומלץ כי החיישן גז סלסלות לפני ניסוי, לכייל את המערכת.
   1. השתמש גז של הרכב ידוע (0.5% CO₂, 20.5% O₂, מאזן חנקן). להתחבר למיכל הדלק כיול המערכת באמצעות הרגולטור ואת הצינור. הפעל ולהבטיח הלחץ פלט מיכל קורא 5-10 psi.
      הערה: חלק ממערכות יהיה טנק השנייה, הצינור, הרגולטור לשימוש של חנקן טהור גז "היסט". המערכת שאנו פועלים מנצל במקום סודה לימון ליצירת CO₂ אוויר חופשי.
   2. בצע את ההליכים כדי לכייל את O₂ והן CO₂ חיישנים. בחרו "כיול" מתפריט כלים, ברצף לכייל את O₂ והן CO₂. לפני כיול לוודא 1) הדגימה, הפניה הם 0.400 LPM. 2) זרקוניה O₂ חיישן הטמפרטורה היא 725 ° C (± 1 ° C), 3) לדוגמה, הפניה הברגה, משאבות אוויר, גז כיול 4) מחובר ומופעל.
   3. במידת הצורך, כאשר כיול חיישן₂ O, לתקן במקצת את הפקד נגדי על החלק הקדמי של זרקוניה חיישן חמצן כדי להשיג ערך יחס של₂ O של 1.0000 (± 0.0002). זה כדי להבטיח שזה לא חרגו מהמגבלות (מסומן ירוק גופן הצג תוכנה על גבי מסך המחשב).
   4. לאחר O מוצלחת₂ CO₂ חיישן כיול, לבטל את בלון גז כיול ונתק את הצינור של הרגולטורים. לאחר כיול, O₂ הפניה אוויר (האטמוספירה) צריך לקרוא 20.92 (± 00.02). אם הכיול מגבולות העמידות, חוזר, עיין צרות הירי מדריכים מהיצרן. נכשל זה, פנה ליצרן לקבלת הוראות נוספות.
7. להמשיך עם הגדרת ניסיוני. בחר "פתח קובץ ניסיוני" מתוך תפריט הניסוי. בחר את התבנית המתאימה (למשל, עכבר). תחת "הגדרת" בתפריט ניסוי להגדיר את הפרמטרים של הניסוי צריך לתיעוד (למשל, זיהוי העכבר, משקל, קבוצה, וכו ') ב'אל צ'יימברס לא בשימוש ובחר את המיקום עבור הניסוי להינצל.
8. ודא המאזניים יש כבר tared אם מדידת צריכת המזון ולהתחיל את לכידת נתונים על-ידי בחירת "הפעל" בתפריט הניסוי. לכידת הנתונים שונים לפרקי זמן בהתאם פנוטיפ, המוסדיים הנחיות הבידוד בעלי חיים, ואת השימוש במערכת.
   הערה: בידיים שלנו, הניסוי באופן שגרתי מנוהלת במשך 48 שעות, עם 24 השעות הראשונות משמש ולהקדיש את הסביבה החדשה, ה 24 השני המשמש לניתוח נתונים. תקופת איסוף הנתונים מבוסס על מה זמן החוקר מבקש לשמור שלהם עכברים ביחידים שוכנו ותלוי אתיקה בעלי אישור. לחלופין, אם קיימות הוראות, עכברים עשוי להיות ירעדו בלשכה לפני שיוצבו לתוך המערכת ומחובר. אחד נמדד כ פעם אחת בכל 13 דקות כאשר מערכת קאמרית 12 נמצאת בשימוש.
9. באופן קבוע לבדוק ולעקוב אחר התוצאות שמושגות בזמן העכברים במערכת כדי להבטיח את רווחת וכי הנתונים המתאימים נאסף. כל בעיה תוכל להיות שזוהו בשלב זה ולא לתקן. לבדוק כל עכבר מדי בוקר וערב, כאשר הם בתוך המערכת.
10. בדוק את הכרטיסיה מטבולית בחלק העליון של הדף קובץ נתונים עבור הנתונים שנאספו בזמן אמת עבור כל עכבר לגבי ההוצאה הצריכה, ה-RER ואנרגיה חמצן. בינתיים, קרן מעברי, נתוני צריכת מזון יכול להיות ממוקם הכרטיסיות פעילות ומזונות, בהתאמה. בדוק "O₂ ב" קורא סביב 20.90-20.94, "CO₂ ב" הוא סביב 0.040 - 0.050,-RER הוא בין 0.7 ל-1, קצב הזרימה הוא קבוע ב- 0.5 - 0.6 L/min.
11. במרווחי זמן קבועים, בדוק כי העכברים יש גישה למזון ולמים, כי הם צורכים כל אחד. ודא שהם הם לא מפגין סימנים של מצוקה כגון לחפור ריצוף מחורר. כמו כן, מעקב אחר תוצאות אשר מוצגים.
12. בתום הזמן שהוקצה ניסיוני, בחר "stop" מתוך תפריט ניסוי ולייצא את התוצאות (כמו קבצי CSV, קובץ > ייצוא > ליצור נושא של CSV) לצורך ניתוח.
13. בדוק את בריאותו של העכברים, לשקול אותם ולאחר מכן להחזיר לכלובים שלהם הביתה.
    1. עכברים עשוי להיות עוין אחד כלפי השני לאחר ההפרדה, לפקח אז ברגע שהם מוחזקים ביחד שוב.
    2. לפרק את הכלובים, להסיר עודפי מזון hoppers, עצה החוצה כל צואה, שתן, מזון מן הכלובים. להטביע בקבוקים, הלקוחות בפתרון T-bac מדולל, משרים, ולנקות את הרכיבים האחרים בפתרון אקונומיקה מדוללת. לשטוף עם מים נקיים, יוצאים לאוויר יבש.
14. חישוב פרמטרים מטבולית עם התוכנה. התוכנה משתמשת במספר משוואות כדי לספק את הפלט הסופי נתונים⁴.
    עבור חישוב צריכת חמצן וייצור פחמן דו-חמצני: צריכת חמצן: VO₂ (LPM)_{= Vאני}O_2i - V_oO_2o; פחמן דו-חמצני הפקה: מתנד מבוקר מתח₂ (LPM)_{= Vo}CO_2o-V_אניCO_2i
    איפה: V_אני = את קצב אוורור קלט (LPM), V_o = שיעור אוורור פלט (LPM), O_2i = ריכוז₂ O-O קלט,_2o = ריכוז₂ O-פלט, CO_2i = הדו חמצני₂ הריכוז-CO קלט,_2o = ריכוז₂ CO-פלט.
    לחישוב ה-RER: ה-RER = מתנד מבוקר מתח₂ / VO₂. שימו לב כי חמצון החלבון לא נמדדה, לכן לא הותאם ל- RER בשביל זה.
    לחישוב ההוצאה האנרגטית: ההוצאה האנרגטית: CV = 3.815 + 1.232* ה-RER
    חום (קק ל/h)) = CV * VO_2- איפה: CV הוא הערך קלוריים (היחס בין חום הנפח של צריכת חמצן). זה נגזר "אלמנטים מדע של התזונה" המכונה השולחן לאסק, מורכבת על ידי גרהאם Lusk.

תוצאות

התוצאות ראה באיור 3 להציג שינוי אופייני בפרמטרים בהרכב הגוף בעת האכלה שומן גבוהה, כפי שהיא נמדדת באמצעות EchoMRI. ההתחלה לא היה הבדל בכל פרמטר נמדד (איור 3 א-F). עם זאת, אחרי רק 1 בשבוע של שומן גבוהה האכלה, היה עלייה משמעותית במשקל הגוף, מס...

Discussion

שלבים קריטיים

הפרוטוקולים המפורטים להלן מספקים דוגמה דרכים שבה הרכב הגוף למדוד פרמטרים מטבוליים שונים בעכברים באמצעות מנתח בהרכב הגוף חיה מטבולית מערכת ניטור. בשתי הטכניקות, זה חשובה ביותר על מנת להבטיח כי המכונות עובדים בצורה אופטימלית, כדי לעשות זאת, זה הכרחי כ?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
4 in 1 system	EchoMRI	4 in 1 system	Whole body composition analyser
Canola oil test sample (COSTS)	EchoMRI	Mouse-specific (contact company for cat number)
Animal specimen holder	EchoMRI	103-E56100R
Delimiter	EchoMRI	600-E56100D
12 chamber system	Columbus Instruments	Custom built	Metabolic Caging System; includes control program
Drierite	Fisher Scientific	238988	CLAMS consumable
Calibration gas tank	Air Liquide	Mixed to order	Gas calibration (0.5% CO2, 20.5% O2, balance nitrogen).
Normal chow diet	Specialty Feeds	Irradiated mouse and rat diet
High fat diet	Specialty Feeds	SF04-001
Balance	Mettler Toledo	PL202-S	Balance for weighing mice
TexQ Disinfectant spray	TexWipe
Hydrogen Peroxide cleaning solution	TexWipe	TX684