מעבדה לגידול של אחרים Muscoid Diptera והזבובים יציב

Summary

הליך לגידול יציב זבובים (Stomoxys calcitrans) מוצג. ההליך משתמשת בחומרים זמינים באופן מקומי עבור רכיבי תזונה, ציוד ואספקה.

Abstract

זבובים יציבה, Stomoxys calcitrans, הם מזיקים רציני של בעלי חיים, בני אדם, חיות מחמד וחיות ברחבי העולם. במהלך השנים האחרונות 20 + שינויים בשיטות אגרונומית הביא התפרצויות רציניות של זבובים יציב במספר מדינות. התפרצויות אלו משובשות רעייה ונופש האנושית וכתוצאה מכך דרישות הציבור להגברת מאמצי מחקר וניהול של המזיק הזה. הליך פשוט וזול לגידול זבובים יציב במחקרי מעבדה מוצג. ההליך משתמש רכיבי תזונה מקומי זמין, ציוד ואספקה. ההליך יכול להתאים לגידול שאר הזבובים muscoid כולל הפנים זבוב (זבוב רפואי), זבוב הורן (Haematobia irritans) של זבוב הבית (זבוב דומסטיקה). ההליך מייצרת puparia לטוס יציב ממוצע של 12.5 מ"ג ו ~ 35% ביצה להישרדות למבוגרים. זבובים כ 3000 מיוצרים כל פאן.

Introduction

זבובים יציבה, Stomoxys calcitrans (ל'), הם זבובים hematophagous עקיצות מכאיבות אשר לשבש את התנהגות רועה צאן, לגרום לכאב, סבל כדי בת זוג בעלי חיים וכן לשבש פעילויות פנאי בני אדם ברחבי העולם. זבובים יציב ילדותי להתפתח ההתססה עניין וגטטיבית, מזוהם לעתים קרובות עם פסולת בעלי חיים. שינוי שיטות האגרונומי של יבולים יצרו התפרצויות רציניות של זבובים יציב יבול משקעים, ירקות אוסטרליה¹, קני סוכר ברזיל², ואננס קוסטה ריקה³. למרות 14 זבובים יציבה לכל בעלי חיים נחשבים הסף כלכלית⁴, תצפיות של יותר מ-2,000 זבובים לכל חיה שנעשו במהלך התפרצויות האחרונות⁵. רמות התפשטות להפחית את הפרודוקטיביות המארח כדי קרוב לאפס והוא יכול לגרום לתמותה⁶. בעקבות התפרצויות agronomically המשויך, זבובים יציב מקבלים עניין מחודש, הביקוש מעבדה מושבות גדל באופן דרמטי.

לגבי כל holometamorphic חרקים, זבובים יציב להשיג את כל החומרים המזינים הדרושים לצמיחה במהלך השלב לא בשלה או זחל. לכן, מרכיב חשוב של מערכת rearing הוא זחל דיאטה או המצע. הזחלים לטוס יציב נצפו פיתוח במגוון רחב של סובסטרטים ב השדה⁷ והם תלויים הקהילה מיקרוביאלית של המצע^8,9. מצעים זחל טבעי מורכבים בעיקר מפרקים או ההתססה חומרים וגטטיבי לעיתים קרובות מזוהם עם פסולת חנקני.

לגידול מעבדה, יציב סובסטרטים זחל לטוס מורכבים בדרך כלל וגטטיבי בחומר, מקור נוסף חנקן. חומרים רבים שימשו דיאטות זחל לטוס יציב. תזונת הזחל הראשונה חיקה מצעים טבעיים וכללה ההתססה שיבולת שועל קש ו סוס או פרה זבל^10,11. מקורות פחמימות כוללים חיטה סובין^12,13,14, אספסת ארוחה^12,13,14 , ניסוח המסחרי שפותחה על ידי התמחויות כימי יצרני האגודה (CSMA, 33% סובין חיטה, ארוחה אספסת 27%, 40% קבלת שמרי בגרגרים)^13,14,15,16. מקורות חנקן כוללים שמרים ההשעיה¹², קמח דגים, אמוניום ביקרבונט¹⁷. חומרים אינרטיים bulking כלולים לעיתים קרובות דיאטות כולל קליפות שיבולת שועל¹², פסולת¹³, ורמיקוליט¹⁶,^13,שבבי עץ¹⁸ ו מגורען קליפות בוטנים¹⁴.

אחת ממטרותיהם העיקריות מעבדה לגידול היא לייצר מוצר דומה גם פיזיולוגית "סוג הפרוע" ככל האפשר כדי בכך שמוכר יפיקו תוצאות שיקוף של אוכלוסיות שדה. פעולה זו דורשת כי ב מטלטלין ומבחר ניתן למזער לשמור גנטי גיוון ומשאבים תזונתי להיות דומות לאלה בשטח. מטרות משניות הם כדי למזער את העבודה והוצאות. רכיב מרכזי של צמצום הוצאות הוא השימוש של רכיבי תזונה מקומי זמין. הזבוב יציבים לגידול מערכת הציג פותחה כדי עונים על קריטריונים אלה.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

1. אוסף ביצי (איור 1)

1. הכנת כוס מדרבן, מניחים בקצה אחד של בד ~ 500 מל הספל מלא במים חמים (~ 40 ° C). חופפים את צידי הכוס ותקן עם גומייה. מקפלים את קצוות הבד לקצה האחורי של הגביע.
2. המקום מדרבן גביע בכלוב של בת 8-10 יום זבובים עבור הנקבה Gravid ה ~ 2 יציבה זבובים oviposit על הבד.
3. הסר גביע מדרבן ביצי הכלוב ולשטוף את הבד egging לתוך סיר קטן עם בקבוק לחיץ לשטוף.

2. מכינים פאן לגידול זחל

1. להכין בינוני (כמויות פאן לגידול 1)
   1. לשלב סובין חיטה (500 גרם), שבבי עץ (200 גרם), ארוחה דגים (115 גרם) במחבת צלחת פלסטיק 10 L ומערבבים היטב.
   2. להוסיף מים (~ 25 ° C, 1600 mL) אמוניום ביקרבונט (50 גרם) ומערבבים עד התפרקה.
   3. להוסיף מים פתרון החומרים היבשים ולערבב להבטיח שום חומר unwetted. רמה בינונית בסיר אבל לא לדחוס.
2. להוסיף ביצים לטוס יציב
   1. להפוך פארו רדוד בינוני אורך המחבת.
   2. להפקיד 1 מ"ל של ביצי זבוב יציב (~ 8,000 ביצים) בפארו עם ביצה פיפטה (איור 2).
      הערה: ביצה פיפטה שנעשו על ידי חיתוך של פיפטה בוגר פלסטיק בנקודה הרצויה, הוספת 100 mesh מסך והדבקה פיפטה שוב ביחד.
   3. מכסה ביצים עם שכבה דקה של המדיום כדי למנוע לייבוש.
   4. לכסות את המחבת עם הכריות, לסגור עם גומייה, תווית. מניחים סירים בחדר זחל (23 ± 2 ° C, 30%-50% RH, 12:12 [L:D] h photoperiod).
      הערה: התפתחות הזחל לוקח 10-14 ימים ממועד ההטלה.

3. הגולמי עיבוד, הזחלים העבר אל הקצה של המדיום 7 – 9 ימים לאחר ההטלה ואת Pupariate לפי ימים 13 או 14

1. Puparia סקופ, נמצא בעיקר בקצוות של שניקית את הקרום מתפתח על פני השטח של המדיום, את והניח במחבת נקייה.
2. למלא פאן, puparia, ½ ל ¾ מלאה במים. לשבור את הגושים של puparia, בינוני. סובין חיטה ורכיבים חלבון של המדיום לשקוע תוך כדי puparia > לצוף יום בן¹⁹.
3. הסרת חומרים צפים, puparia ורכיבים מסוימים בינונית עם מסננת, שטיפת דרך סדרה של הנפות (מס ' 5, #7, #12, #20) כדי להסיר בינוני הנותרים. המסננת #12 אוספת את puparia ושומר #20 פסולת מוצקה מלהיכנס לטמיון. לשטוף puparia בין הנפות עם ריסוס הכיור.
4. לשטוף puparia, בתוך המסננת #12, לתוך מחבת נקייה. למלא את המחבת ½ מלא במים. שופכים puparia צף לתוך מסננת ולאפשר את המים העודפים לנקז.
5. העברת גמע puparia למסך ייבוש עם מאוורר ולהשאיר עד יבש (איור 3).

4. הגולמי מדף, שיטה חלופית עבור איסוף Puparia הוא עם מדף הגולמי¹⁸

הערה: המדף עשוי פיסת פלסטיק גזור מהקצה של מחבת מאכל 10 L (10.2 ס מ גובה x 10.2 ס מ x 31.9 ס מ).

1. להכין בינוני כפי שמתואר 2.1. להתחדד בינונית במחבת מקצה אחד עמוק על ס"מ ~2.5 ס"מ ~7.5 עמוק בצד השני.
2. במקום מדף על בינוני במים הרדודים של פאן לגידול, הקלטת כדי למנוע את הזחלים זוחל לצד המדף (איור 4).
   1. עיתוני ספוג (~14.5 x 9.0 x 4.5 ס מ³, תאית regenerated) לעטוף אותו מטלית ספוגה מים (30.5 x 42 ס מ², כותנה) ובמקום על המדף בערך חצי סנטימטר של המדיום.
3. להוסיף ביצים, כמתואר ב- 2.2 והמשך כמו קודם.
   1. בדוק מחבתות מדי יום כדי להבטיח הספוג יישאר לח.
4. שטיפה puparia מן המדף, ספוג בד לתוך תבשיל נקי במחבת ויוצקים לתוך מסננת 14 ימים לאחר ההטלה.

5. בקרת איכות

1. שוקלים כל puparia מיוצר פאן (wt סה כ.).
2. לבודד 100 puparia, שוקל והניח 9 ס מ פטרי.
3. מבוגרים רוזן וסקס ~ 5 – 8 ימים מאוחר יותר כדי לקבוע שיעור הופעתה ואת יחס. חנות צלחות פטרי עם הבוגרים במקפיא לספירת במועד מאוחר יותר אם יש צורך. זבובים מחולקים למינים לפי הצורה של העיניים שלהם ואת הרוחב של צלחת fronto-מסלולית²⁰ או איברי המין תחת הגדלה נמוכה.
4. משקל סה כ רשומות, במשקל של 100 puparia, ומספר המתגלים מהזכרים הבוגרים.

6. הכנת דם

1. לאסוף דם טרי שור מטבחיים המקומי בדליים 19 L המכיל 70 גר' נתרן ציטראט tribasic וגופרית והרכבו של 500 מ ל מים. מערבבים דם נמרצות למשך 5 – 10 דקות וחזר אל המעבדה.
2. זן דם דרך מסננת כדי להסיר קרישי ומחולק לתוך מיכלים 2 ל', תווית עם התאריך של אוסף וחנות במקפיא (-20 ° C).
3. הסר מיכל מן המקפיא ומקום במקרר 2 ימים לפני הצורך. דם יכול לשמש עבור ~ 2 שבועות פעם הקרת, המאוחסן במקפיא עד 1 שנה.

7. בוגר תחזוקה

1. להכין את הכלובים, הקו התחתון כלוב עם קצבים כדי להקל על ניקוי.
2. מקום 50 גר' יבש הגלמים לטוס יציב (~ 3,500) בכל כלוב. מבוגרים eclose כמה שעות עד כמה ימים לאחר העיבוד הגולמי.
3. המקום דם טרי ספוג מפית נשית על גג הכלוב כל האכלה. להתחיל האכלה בתוך 24 שעות של וגיחתו למבוגרים וחזור מדי יום עד יום לפני ההטלה (9 – 10 ימים לאחר הופעתם).
4. לאחר ההטלה (סעיף 1), למקם את הכלוב במקפיא במשך 4-8 h, לנקות לאחר מכן על ידי הסרת את הנייר, שטיפה frass מן הצדדים קומה עם מים חמים, קרצוף כל המשטחים עם אבקת כביסה, כלור. לשטוף את הכלובים עם מים חמים, אפשר להתייבש.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

הזחלים pupariate 10-14 ימים, מבוגרים להגיח 14 – 16 ימים לאחר ההטלה. משך דור, ביצה, הוא ~ 24 ימים. גידול נתונים עבור מאי 2013 עד ינואר 2017 עם שלושה סוכנים bulking שונים, אוחדו שתי המושבות מוצגים באיור5. קוטונווד נתן את התשואה הטובה ביותר, 3867 ±1442 (

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

זבובים יציבה ניתן למצוא פיתוח במגוון רחב של סובסטרטים בטבע והתחנכו יכולים להיות סוגים רבים של מדיה במעבדה. השתמשנו שבבי עץ, ורמיקוליט כמו bulking סוכנים. ורמיקוליט עבד, אבל עשה הפרדת puparia של גידול בינוני קשה, היה יקר (~$0.60/pan). אולי בגלל הקשיחות נוסף של הפרדת puparia של המדיום, וגיחתו היה גם נמוך עם ור...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Diamalt	Premier Malt Products, Inc., Saddle Brook, NJ	2540
CSMA Fly media	Purina Animal Nutrition, Arden Hills, MN	5S6Z
Thin Maxi Pad	The Tranzonic Co., Cleveland, OH, USA	5001M
Calf Manna	MannaPro, Chesterfield, MO, USA	Manna Pro
Ammonium Bicarbonate	Spectrum Chemical Manufacturing Corp, Gardena, CA	A1125
Wheat bran, Coarse	Siemer Milling Company, Teutopolis, IL
Wood shavings	Tractor Supply Company, Brentwood, TN	502770699
Fishmeal	Consumer Supply Distributing, North Sioux City, SD	F1550
Adult cages	All Aluminum Window Company, Lincoln, Ne	Custom	45 × 45 × 45 cm, 18 × 16 mesh aluminum screen, stockinette access
9 × 28 cm black cotton cloth	Robert Kaufman Fabrics, Los Angeles, CA	K040-114	Egging cloth
10 L plastic dish pans	Rubbermaid, Saratoga Springs, NY	FG2951ARWHT	Larval pans
Stockinette, Cotton, 12 inch x 25 yard roll	Tex-Care Medical Company, Burlington, NC	91311-225