מודל פרכת העכבר הסחת דעת

Summary

אנו מציגים מודל פרכת הסחת דעת הטיביאלי העכבר פותח באמצעות של distractor בהזמנה אישית. השימוש של עכבר בתור מטרה ניתוח הוא יתרון לקידום המחקר.

Abstract

הארכת עצמות (DO) היא הליך כירורגי הכרוך התחדשות רקמות השלד ללא השתלת תא. מודל דו מורכב מהפעולות הבאות שלושה שלבים: שלב החביון לאחר osteotomy והמיקום של distractor חיצוניים; שלב הסחת דעת, שבו קצות העצם מופרדים בהדרגה ובאופן רצוף ודעתם מוסחת; שלב איחוד. זה distractor בהזמנה אישית משמש לעשות מורכבת שתי טבעות לא שלמה שרף אקרילי של בורג הרחבה. התהליך היה ביוזמת ללקיחת תבנית סיליקון הרושם החומר ולאחר מכן יצירת את distractor בהזמנה אישית. שרף שיניים נשפך לתוך טפסות עשוי מחומר סיליקון רושם, זה לא הותר פולימריזציה ליצירת הטבעות לא שלמה שרף הדרושות את distractor בהזמנה אישית. טבעות אלו היו קבוע עם בורג הרחבה באמצעות שרף שקוף. Distractor בהזמנה אישית שנוצרו באמצעות גישה זו צורפה עצם השוקה של עכברים. עצם השוקה היה קבוע להתקן באמצעות זוג אחד של 25 גרם מחטים הציר הקרוב, זוג אחד של מחטים 27 G. רחוק, שרף אקרילי. לאחר תקופה זמן השהיה של 5 ימים, הסחת הדעת היה יזם בשיעור של 0.2 מ מ/12 שעות. הארכת המשיך במשך 8 ימים, נוצר פער מוחלט של 3.2 מ מ. העכברים הוקרבו 4 שבועות לאחר הסחת דעת. היווצרות העצם בנקיק הסחת דעת אושר באמצעות רדיוגרפיה והן היסטולוגיה.

Introduction

הארכת עצמות (DO) היא שיטת טיפול הוקמה עבור מגוון רחב של הפרעות השלד, כגון אי-התאמות אורך האיבר, עצם פגמים איבר מומים¹. אסטרטגיית טיפול ייחודי זה מבוסס על "עקרון מתח-מתח" המוצע על ידי מרפי. השיטה דורשת מספר ימים השהיה, מספר שבועות עבור active הסחת דעת של מספר חודשים עבור איחוד עד העצם בוגר הוא בנוי².

התנאים ובשפתיים המקומי עקב חסימה של^3,זרימת דם⁴ ו-^5,גירוי מכני⁶ חשובים במיוחד בתהליך ההחלמה של האם. היפוקסיה-induced אנגיוגנזה נושא חמצן, חומרים מזינים, גורמים מסיסים ותאים הדרושים לתיקון רקמות מקומית דרך זרם הדם. גירוי מכני על ידי הרחבת הפעולה גורמת לתגובות ביולוגיות כגון בידול של גזע mesenchymal, היווצרות העצם, הסתיידות, שיפוץ. טיפול דו טורי מאפשרת היווצרות של רקמות קשה אלא גם רקמות רכות, כולל העצבים, שרירים, כלי דם, רקמות העור, ללא צורך השתלת תא גזע. לכן, מודל דו נחשב להיות מודל מצוין עבור ניתוח ולחידוש רקמות שונות.

ארנבים, כלבים הם החיות הנפוצה ביותר במחקר בסיסי לעשות; עם זאת, יש כמה כלי ניתוח זמינים עבור בעלי חיים אלה. השימוש העכבר לעשות מודל מקלה על ניתוח מפורט יותר. . זה מתאים במיוחד עבור ניסויים שימוש בעכברים נוקאאוט. עם זאת, בעת שימוש בעכבר כחיה ניסיוני, ליצור התקן הרחבה. כאן, אנו מציגים עכבר הטיביאלי מודל פותח באמצעות של distractor בהזמנה אישית שנוצרו באמצעות הכלי מעבדת שיניים טכניקה, אשר שימש במחקר הקודם.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

כל הניסויים בוצעו על פי פרוטוקולים אושרה על ידי חיה אכפת שימוש הוועדה של מוסדנו. לעקר את כל הכלים לפני ההליך.

1. הכנת תבנית ליצירת את Distractor בהזמנה אישית

1. להפוך שתי טבעות לא שלם (הקוטר החיצוני, 20 מ מ; הקוטר הפנימי, 10 מ מ), אשר הם חלק distractor, עם גיליון אחד של פרפין (145 מ"מ x 74 מ"מ) באמצעות קארבר שעווה של אוונס.
   1. להפוך את 4 החלקים אותו. השתמש במרית שעווה מחוממת עם מבער גז. מחסנית של ארבע טבעות עבור עובי של 5 מ מ. לספק שטח הרחבה בורג, מחט, 8 מ"מ x 2 מ"מ ו 5 מ"מ x 2 מ"מ בהתאמה עם שעווה אוונס המבתר (דמויות 1A, 1B).
2. להטביע שעווה תבניות סיליקון הרושם החומר וליצור תבנית עבור הטבעות שרף (איור 1C).
3. לאחר ריפוי החומר הרושם סיליקון (כ 5 דקות בטמפרטורת החדר), הסר את דפוסי שעווה.

2. הפקת Distractor בהזמנה אישית

1. להחיל וזלין דק וגם באופן שווה בתבנית סיליקון. לערבב דור 3 של שרף שיניים פלמור, ומיד שופכים אותו לתבנית סיליקון. להגדיר עבור 5 דקות בטמפרטורת החדר (RT).
2. להסיר את הטבעת שרף polymerized כייר ולהבריק אותו עם בר קרביד, עם micromotor שיניים כדי להסיר את בר (בערך 1 דקות). שתי טבעות שרף נדרשים עבור כל distractor בהזמנה אישית.
   1. חזור על התהליך כדי ליצור את המספר הנדרש של שרף טבעות (איור 1D).
3. השאר פער של-2 מ מ כדי לתקן את הטבעות שרף עם שעווה השירות ולאבטח החיצוני של הבורג הרחבה לחלוטין עם שרף שקוף. להגדיר את השרף במשך 5 דקות ב- RT. עם השלמת פלמור, להסיר את הידית בורג הרחבה (איור 1E).

3. ניתוח פרוטוקול

1. השתמש עכברים זכרים בת שבוע 8.
2. לגרום הרדמה עם זריקה בקרום הבטן של medetomidine הידרוכלוריד-0.3 מ"ג/g, midazolam ב 4 מ"ג/ק"ג, butorphanol tartrate ב 5 מ"ג/ק"ג משקל גוף.
   1. בזהירות לגלח לחטא את האזור הכירורגי עם 10% יוד פתרון ו ואז לנהל 0.5% הידרוכלוריד לידוקאין-האיבר הימני התחתון.
3. עושים אורכית העור חתך (כ 15 מ מ אורך) הנכון להוריד את הרגל עם איזמל מס 15. בלשון בוטה להפריד בין השרירים המשמשים כבסיס, מטפל לא כדי להסיר את כל קרום העצם. הגישה מבחוץ להגיע בקלות אל השוק. חותכים את השוק עם מספריים.
4. לתפוס את הקרסול עם מלקחיים סטרילי דק וצר, והשתמש מחט סטרילית 27 G לעשות חור העצם כ 5 מ מ העקב. המחט צריך לחדור את העור, עצם ועור לפי הסדר הזה. כאשר המחט חודרת, לחתוך את העצה ושורש עם אוחז כך המחט הוא כ- 15 מ מ.
   1. לעשות חור נוסף באותו אופן, מקורב בסביבות 2-3 מ"מ. להחזיק מסביב לקרסול ולהעביר שתי מחטים 25 גרם מתחת לברך באופן זהה. לאחר לחדור המחטים, לחתוך את עצות ושורשים עם אוחז (איור 1F).
5. מניחים את distractor בהזמנה אישית כך הוא מקביל לכיוון הרחבה. לתקן את המחטים ואת המכשיר עם שרף שיניים מספיק הפילמור למלא את החריצים של המכשיר. לחכות הפילמור להשלמת (כ- 5 דקות) (איור 1G).
6. להיזהר לא לפגוע הרקמות הסובבות. חותכים באמצע diaphysis של עצם השוקה באמצעות דיסק חיתוך דק מאוד תוך יישום של תמיסת מלח (1 – 2 מ"ל).
7. לסגור את הפצע בתפר ניילון 4-0.
8. לתת זריקות תת עורית של הבופרנורפין (0.1 מ"ג/ק"ג) נגד כאבים מיד לאחר הניתוח. המשך הבופרנורפין כל 12 שעות לאחר הניתוח היום 7 ונחוץ גם לאחר מכן.

4. פרוטוקול הסחת דעת

הערה: ישנם דיווחים שונים על השהיית קצב תקופת של הסחת דעת, אבל כאן, נציג פרוטוקולים מוצגים.

1. לאחר תקופה זמן השהיה של 5 ימים, להתחיל הסחת דעת בשיעור של 0.2 מ מ/12 שעות. סיומת, שימוש ה-pin המצורפת את הבורג ההתרחבות המהירה. להזיז את הסיכה בכיוון החץ הצהוב קשורה הבורג סיומת (איור 1E).
2. הרדמה אין צורך בתקופת הארכה. שתחזיק את הזנב עם האצבע הקטנה, דקל, לתקן את המכשיר הרחבה עם לאצבע ואת האגודל.
3. לבצע הרחבה (0.2 מ"מ עבור התור 1/4). המשך הארכת במשך 8 ימים, אשר יניבו רווח כולל של 3.2 מ מ.

5. ניתוח

1. רדיוגרפיה ניתוח: לאחר סיומו של הרחבה, להעריך את התחדשות העצם עם טומוגרפיה בהרדמה כללית על ידי שימוש איזופלוריין 2.0%.
   הערה: אם יש להגדיר את הוקדשה לגבי המיקום של המכשיר סיומת, זה אפשרי להעריך את זה עם רדיוגרפיה פשוטה אפילו עם המכשיר מחובר.
2. ניתוח היסטולוגית: להסיר את המנגנון בזהירות כדי לא לגרום שבר הסחת דעת אתר במהלך הדגימה. לתקן את הדגימה בפורמלין במאגר נייטרלי 10% במשך 24 שעות בטמפרטורת החדר. Decalcify לילה עם הפתרון של מורס (10% סודיום ציטרט, 20% חומצה פורמית) ב 4 º C.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

דמויות 1A ו- 1B להציג טבעות לא שלם (החיצוני קוטר, 20 מ מ הפנימי קוטר, 10 מ"מ; עובי, 5 מ מ) פרפין. שתי תבניות שעווה הוטבעו בחומר הרושם סיליקון, נוצרה תבנית עבור הטבעות שרף (איור 1C). שרף polymerized נשפך מיד לתוך זה עובש, שרף טבעות התקבלו (

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

כאשר חיה גדולה משמשת כמודל ניסויי, ניתן להשתמש בהתקן הרחבה מוכנות מראש, קל להשיג קיבוע טוב ולהעריך את פעולת ההרחבה עצמו ואת הסכום סיומת. עם זאת, כאשר עכבר משמשת כמודל ניסויי, יש צורך לפתח חלק או את כל הציוד. . Isefuku et al. , טיי. ואח הפך המכשיר ויצרו העכבר מודל^7,

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Paraffin wax	YAMAHACHI DENTAL MFG. CO.	-	For preparation a mold for resin rings
Labocone putty	GC Corporation	-	For preparation a mold for resin rings
Utility wax	GC Corporation	-	For preparation a mold for resin rings
Expansion screw	Ortho Dentaurum	600-301-30	Component of custom-made distractor
Unifast III	GC Corporation	-	Immediate polymerization resin Component of custom-made distractor
Ortho Crystal	NISSIN	-	Transparent resin Component of custom-made distractor
25 G needle	TERUMO	NN-2516R	For custom-made distractor
27 G needle	TERUMO	NN-2719S	For custom-made distractor
ICR mouse	Chubu Kagaku Shizai Corporation	-	Experimental animal
Somnopentyl	Kyoritsu Seiyaku	-	Pentobarbital sodium salt
Isoflurane	FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation	099-06571	Isoflurane inhalation solution