JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פרוטוקול זה מודד מרחבי למידה וזיכרון באמצעות המבוך בארנס. פרדיגמה עלמה במצוקה הרומן משמשת להערכת פעילות גינקולוגיות והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים.

Abstract

המבוך בארנס הוא מדד אמין של מרחבי למידה וזיכרון שאינה דורשת הגבלת מזון או חשיפה לגירויים מלחיצים ביותר. המבוך בארנס יכול גם להעריך התנהגויות העכבר אחרות, כגון מוטיבציה כדי להימלט מן המבוך פלטפורמה לניתוח התנהגות. המבוך בארנס יכול למדוד אם מוטציה גנטית או משתנה סביבתי יכול להשפיע על רכישה ומכירה השמירה של זיכרונות המרחבי, כמו גם לספק מידע אודות האסטרטגיה חיפוש מועסק על ידי העכברים. כאן אנו משתמשים המבוך בארנס כדי לזהות גרעון הזיכרון בעכברים מבוגרים בעקבות אירוע חשיפה אתנול התפתחותית יחיד. הפרדיגמה עלמה במצוקה שתואר לאחרונה חושף עכבר זכר נקבה לעכבר לכוד בתוך חדר בשטח הפתוח ' מרכז ' ארנה. הוא מספק הזדמנות עבור העכבר חברתית להגיב הנקבה לכוד, שהפגינו התנהגות פרוסוציאלית. הפרדיגמה עלמה במצוקה יכול לשמש גם כדי לבחון התנהגות העכבר בפעילות הרומן ארנה ולמדוד גינקולוגיות. המבוך בארנס והן את הפרוטוקולים עלמה במצוקה לדרוש השקעה פיננסית מינימלית, רוב ההיבטים של הבדיקות ניתן לבנות מהאספקה מעבדה נפוץ. כלים אלה גמישים ונגישים יכולים לשמש גם כדי לזהות שינויים התנהגותיים במהלך הפיתוח.

Introduction

המטרה של פרוטוקול זה נועד למדוד המרחבי בלמידה ובזיכרון בעכברים באמצעות מבוך בארנס, כמו גם התגובה החברתית ומכניקה באמצעות הפרדיגמה עלמה במצוקה. נפוץ מרחבי למידה וזיכרון בדיקות עבור מכרסמים כוללים את המבוך זרוע רדיאלית, אשר מודד את היכולת של עכבר למצוא סמויות למזון ביד אחת של מנגנון מולטי-spoked, מבוך מים מוריס, שממקם עכבר גדול או בריכת מים, מעריך כמה זמן לוקח למצוא פלטפורמה מוסתר מתחת למים. בדרך כלל, אימונים אלו פרדיגמות משתרע על פני מספר ניסויים ומאפשרת מדידת שניהם למידה רכישה המחירים ושמירה דרך לטווח קצר וניסויים זיכרון לטווח ארוך.

למרות רדיאלי מסעדים מבוך של מבוך המים מוריס דרכים אמין לבדוק זיכרון מכרסמים, הם מציגים סיבוכים יש חוקרים. שני מבוכי להשתמש קיפוח או גירויים aversive חזק כמו חיזוק1. מבוך זרוע רדיאלית משתמש מניעת מזון כדי להבטיח כי מכרסמים מוטיבציה למצוא גמול מזון. במבוך המים מוריס, ההשפעות של הלחץ הנגרם על ידי שחייה בכפייה עשוי לשנות תוצאות עכברים2.

המבוך בארנס הוא משימה אלטרנטיבית סדנאות והרצאות הדורשת מכרסמים ללמוד את המיקום של חור כדי לברוח מבוך בהיר, פתוח משטח3. גירוי aversive חלש (אור או קול) מוחל אז כדי להגדיל את הסבירות עכברים ימלט מן הרציף. המבוך בארנס לא דורשת מניעת מזון, אז הסכום של הכנת בעלי חיים הוא פחות מבוך זרוע רדיאלית. זה יכול לשמש ללא התנגשות על-ידי החוקרים לחקור התנהגויות או מולקולות הקשורים אכילה, ויסות הורמונלי או מסלולים ההיפותלמוס.

המבוך בארנס יש גם יתרונות על פני מבוך המים מוריס. . זה פחות מלחיצה המבוך המים מוריס, גורם רמות גבוהות פחות של corticosterone עכברים4. בנוסף, זה הרבה יותר פשוט להרכיב ודורש שטח ייעודי פחות במהלך הליך בדיקה, אחסון.

עלמה במצוקה וזמינותו היא בניסוי שני חלקים פשוט זה יכול להעריך פעילות גינקולוגיות ואחריו התנהגות פרוסוציאלית. עלמה במצוקה וזמינותו נועד להעריך התנהגויות גישוש ואת ההיענות החברתית של מכרסם זכר בתגובה מכרסם הנשי כלואה. שיטה הנפוצה להערכת גדושה (כמו גם העדפה לחדשנות חברתית) הוא השימוש של הבדיקה 3-הקאמרית גדושה של קראולי, הבודק את הבחירה החופשית של עכבר לבלות קרוב או רחוק אחרים עכברים5.

בדומה הבדיקה 3-הקאמרית גדושה של קראולי, וזמינותו עלמה במצוקה גם מודד הבחירה החופשית לגבי איך לבלות בנוכחות אחר העכבר, אבל הוא מספק גם מידות עבור היבטים עמוקים יותר של תפקוד חברתי: 1), עלמה במצוקה assay, העכבר הנשי לכוד מתקיים במרכז שדה פתוח, אז סלידה פוטנציאלי של הזכר שדה פתוח הוא מגולענים נגד את הכונן שלו מבחינה חברתית לחקור או לחקור אישה במצוקה conspecific. 2) דגם עלמה במצוקה מספק גם דרך להערכת התנהגות פרוסוציאלית אמפתי בתגובה העכבר לכוד, אשר לא היה לעתים קרובות חקר בעכברים.

אמפתיה בבעלי חיים הוא בהחלט הנצפה וניתנת למדידה, אבל לא הרבה פרדיגמות קיימות למטרה זו. לדוגמה, אצל חולדות, זוג הלכודים בכלוב יכול לגרום למצב של מוטיבציה פרוסוציאלית, איפה חולדות יפעלו כדי לשחרר את החיה לכודה. למעשה, חולדות בוחר לעזור החיה לכודה אפילו לפני פתיחת מיכל דומה המכיל חטיף שוקולד, ואז לגשת השוקולד ולשתף אותו עם עכברוש עתה פריד6.

מדדים של אמפתיה בעכברים כרוך בדרך כלל על גרימת כאב; אכן, עכברים, לצפות אחרים עכברים מכאבים רגישים יותר לכאב עצמם7,8. מתח איפוק הוא תופעה מאופיין מכרסמים, יש כבר בשילוב עם הלם כדי לבחון תגובות הלחץ, כאמצעי אחד האמפתיה עכברים9,10.

ישנם שיקולים אתיים המשויכות כאב מושרה או הלם, כך חלופות בתדר מתח נדרשים. פיתחנו את הפרדיגמה עלמה במצוקה כאמצעי של התנהגות אמפתי בהיעדרו של כאבים או טיפול בהלם. העכברים לכוד בתוך פרוטוקול עלמה במצוקה שלנו מראים סימנים עבירה של מצוקה לאחר מספר רגעים בלבד כפי שהם לא מסוגלים להסתובב בתוך המיכל קטנה, ובכל זאת הם לא נפגע תוך מתן הזדמנות עבור עכברים אחרים להגיב על המצוקה שלהם.

כדי להתחיל את ההערכה עלמה במצוקה, עכבר זכר מונחת בזירה רומן גדול המכיל גליל מרכזי ריק קטן. התנהגויות גישוש נרשמים למשך מספר דקות, כולל כמה חלקים בזירה נרשמו כמה זמן שהית ברחבה המרכזית. שיטה זו מספקת דרך מהירה וקלה כדי לשלול גירעונות גינקולוגיות בתור confounder פוטנציאלי במצב למידה הדורש תנועה מתואמת על סיומו המוצלח. הוא גם מספק מידה בסיסיות של כמה סלידה מרכז המגרש קיים. בשני אמצעים יכול להשפיע על ביצועי מבוך בארנס.

בעקבות חקר הראשונית, הזכר מוסר מן הזירה, עכבר הנשי נמצא במחלקה סגור, קטן ברור המרכזית גליל (דומה לזה המשמש לאיסוף דם של עכברים). לאחר מכן, מופיעה שוב את העכבר הזכר המקורי אל תוך הזירה, התנהגות גישוש הוא הבקיע שוב. הפרדיגמה עלמה במצוקה מעריך אם עכבר הוא מעוניין אינטראקציה חברתית המבוססת על שינויים בדפוסי התנהגות כאשר אישה לכודה קיים (שבוים על ידי time ב מרכז הריבוע ומספר פרקים לחפור), ולבדוק אם העכבר תערוכות התנהגות פרוסוציאלית כלפי הנקבה לכודה (שבוים על ידי כמות גליל חקירות ואירועים קשר עם הנקבה לכוד). עלמה במצוקה וזמינותו ניתן למדוד נטייה לחדשנות חברתית (בדומה למבחן חברותיות שלוש-הקאמרית של קראולי) בהתאם אם חוקרים מלכודת עכבר מוכר או רומן.

יחד, מבוך בארנס וניסויים עלמה במצוקה לאפשר הערכה מדויקת של העכבר תגובתיות חברתיות ויכולות למידה בהעדר גירויים מלחיץ מאוד. כמו עם כל מבחני התנהגות, ניסויים אלה צריכה להתבצע ברגישות רבה לקראת החוויה בעלי חיים, למזער את אי הנוחות מנוסים על ידי החיה.

כמו רוב מבוכים, הבדלים בפעילות גינקולוגיות עשויים להשפיע את הביצועים על המבוך בארנס, אז החוקרים צריכים גם להעריך את פעילות גינקולוגיות, במיוחד בעת שימוש המבוך בארנס להערכת למידה אצל עכברים עם מוטציות עשוי לפגום תנועה (כגון אלה שנמצאו במודלים של העכבר מחלת הנטינגטון, או אלו שנחשפו רעלנים עלולה לגרום היפראקטיביות או מפגר התנועה, כגון אתנול). בנוסף, מבוך משטחים קאמרית שצריך לנקות ביסודיות, מצעים שונה בין כל בעל חיים כדי להימנע cue הריח מבלבל.

חשוב, יכול להיות מפוברק כל החומרים באתר עם השקעה פיננסית מינימלית, טביעת רגל פיזי קטן של מבחני אלה אומר כי ניסויים אלה ניתן לשכפל כמעט בכל סביבה, המאפשרות גמישות רבה. סוג זה של נגישות מאפשרת מדע טוב שיש לבצע במוסדות קטנים יותר עם משאבים מוגבלים או במצבים איפה הטייס הנתונים צריך להיות שנאספו במהירות בהיעדר תמיכה ניכרת.

Protocol

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של המכללה האמפדן סידני או מכללת רנדולף-מייקון (איפה עבודה בעבר בוצעה).

1. יסוד לדיור של עכברים

  1. בית העכברים בכלובים פלסטיק עם ישבנים מוצקים של הצדדים, שכבה של מצעים רכים וקינון חומר כגון לגרוס נייר. להשתמש במצעים המורכבת קלחי תירס גרוס או שבבי עץ ולהבטיח כי המצעים מדי באופן קבוע עבור תברואה.
  2. לספק גישה למזון, מים ad libitum. החלק העליון של הכלוב פלסטיק בתים קפצן מזון. לוותר על העכבר כראוי ניסח באוכל שלהן מן המזון הופר, מספקים מתקן מים. ודא כי הכלוב העליון כולל מסנן אוויר כדי להגן על עכברים מפני מזהמים חיצוניים.
  3. לשמור על קצב השעון הביולוגי הטבעי של העכברים על-ידי ביצוע מחזור בהירה-כהה 12 שעות במתקן דיור. התנהלות התנהגותית בדיקות באותו זמן של יום, באופן אידיאלי במהלך מחזור כהה של החיה, כמו למשל בשעות הערב.
    הערה: כדאי לשים לב להבחנה עכברים במערך הדיור. שיטות שונות עבור עכברים הבחנה זמינים, כגון אגרופים אוזן, אוזן תגיות הזנב סימונים.

2. בארנס מבוך בדיקות: בנייה

  1. להשיג לוח עץ עגול 120 ס מ קוטר.
  2. חותכים חורים עגולים 20 (4.5 ס מ קוטר) מסביב להיקף המעגל. מקם כל חור יהיה 2.5 ס מ מהקצה מבוך ו 13 ס מ חורים שכנות.
  3. להחלקת המשטחים ולצייר אותם לבן מבריק (צבע בהיר מומלץ).
  4. הקצאת בצד אחד של הלוח מבוך להכנסה של גביע קטן ווים בערך 2-3 ס מ מן אחד של 20 חורים, מקום שני ווים כל חור (אחד משני צידי כל חור).
  5. השתמש רדוד שחור (פלסטיק) דיסקים לכיסוי חורים בצד של מבוך עם ווים. השתמש ווים להשיג גומיות עבות כדי להחזיק את הדיסקים על גבי התחתון של המבוך.
  6. באופן מאובטח הר מבוך בארנס 120 ס מ מעל פני הקרקע, והרחק אובייקטים אחרים באופן דומה גבוה כמו שולחנות או כסאות. תיבת או שרפרף יכול לשמש כדי לתמוך באמצע של המבוך.
  7. במקום כרזות לבן גדול עם צורה אחת על כל הקיר (משולש, עיגול, קרוס) בתור תוספת-מבוך רמזים משלושה צדדים של המבוך. לשמור על הפוסטרים על הקירות סביב במבוך של כל משפט.
  8. בצד האחרון של מבוך, להגדיר וילון שחור מוצק כדי להסתיר משקיפים כך ניתן לצרוב נתונים בצורה מדויקת ללא החוקרים להיות גלויים לעין על המבוך עכברים.
  9. להשעות מצלמת וידאו מעל לזירה עם תצוגה ממעוף הציפור של פני השטח כולו מבוך.
  10. לנקות כל השטח של המבוך (דיסקים שחור ואת תיבת היעד כלול) עם מים ואז פתרון אתנול 70% לפני ואחרי כל עכבר הניסיון.
  11. הצב 100 W מקור אור 25 ס מ מעל מרכז של המבוך (הפעלה/כיבוי להתחיל/לסיים משפט), ודאו שיש לכם את הדיסקים ואת ווים מול הרצפה.
    הערה: כל האורות האחרים עילי בחדר צריך להיות כבוי במהלך בדיקות. התוספת של יוצר רעש אולטראסוניות תלוי ליד 100 W אור מומלץ. . תכבה את זה להתחיל/לסיים בכל ניסוי.

3. בארנס מבוך בדיקות: נוהל

הערה: ודא כי כל הרכיבים מבוך מנוקים עם מים ו- 70% אתנול פתרון לפני ואחרי בכל ניסוי, המאפשר זמן להתייבש לגמרי לפני בדיקת קורות חיים. ודאו שיש לכם ניקוי ציוד מוכן, כמו גם שעוני עצר על הניסויים.

  1. בית כל העכברים בקבוצות תוך שימוש שיטת זיהוי אמין. לשמור עכברים מחוץ לחדר בדיקות בעת שהן לא פעיל פועלות על המבוך. זאת על מנת להבטיח שהם לא נתון את רעשן אולטראסוניות בטרם עת.
  2. להתמודד עם עכברים מאת בעדינות לאסוף ולהחזיק אותם מבסיס של הזנב עם הכפות שמר על היד.
  3. עבור הדרכה, יש עכברים להפעיל המבוך יומית אחת ליום במשך 7 ימים ברציפות כדי להעריך למידה/רכישה.
    הערה: משפט לטווח ארוך בודד יכול להיעשות במועד מאוחר יותר כדי להעריך ושימור הזיכרון. בפרוטוקול הנוכחי מיומן עכברים בגיל ההתבגרות מתחיל ביום כמחנכת 32 ובוצע ניסוי לטווח ארוך במבוגרים-גיל 4 חודשים.
  4. באופן אקראי להקצות את העכבר בכל חור יעד לשימוש לאורך כל תקופת הבדיקה. ניתן לסמן את החורים 1-20 על החלק התחתון של המבוך או מחוץ למתחם מבוך, שבו הם אינם גלויים לעין העכבר במבוך.
  5. החלף את הדיסק שהוקצתה חור קופסה שחורה קטנה (23 פרק 11 ס מ). בחוזקה לצרף אותו מן המבוך בארנס באמצעות גומיות מחובר ווים הקרוב.
    הערה: תיבת היעד הוא רדוד מספיק כך העכבר יכול בקלות לרדת לתוכו או מכילה שלב על מנת להבטיח כי העכבר לא צריך לקפוץ למטה לתוך זה.
  6. הנח את העכבר אל מרכז המבוך מתחת לכוס להסתגלות למשך 30 שניות עד תחילת הבחינה. התחל הקלטת וידאו.
  7. . תדליק את האור, הידרואקוסטיים ואולטרא סאונד מקרטון הרם את הגביע דרך מנגנון מחרוזת להימנע ממתח הכותרת הראשונית של החיה. טיימר ומתחילים לשבת מאחורי הווילון להתבונן.
  8. אחרי העכבר נכנס לבור היעד, לכסות את החור עם מאותה הכוס אטום בשימוש בתחילת המשפט או קלסר וכבה את רעשן אולטראסוניות. אם העכבר לא נכנס המטרה לאחר 5 דקות שחלפו, לכלוא את העכבר לתוך החור המטרה.
    1. ודא שהעכבר נכנס לבור. כאשר העכבר נמצא בתוך תיבת היעד, לכסות את החור וכבה את רעשן. לאפשר את העכבר כדי להישאר בתיבה יעד במשך דקה אחת ללא הפרעה.
  9. למרות החור המטרה יישאר קבוע עבור כל העכבר לאורך כל תקופת האימונים, להפעיל עכברים אקראי בכל יום על מנת להבטיח כי הם לא עוקבים אחרי כל רמזים/ריחות שהותירו את העכבר הקודם.

4. בארנס מבוך בדיקות: ניתוח נתונים

  1. במהלך הניסויים מבוך בארנס, הרשומות הבאות תוזמן נתונים: סה כ זמן שהושקע מבוך הזמן למצוא את היעד, זמן להיכנס לחור היעד אם המטרה מוזנים.
  2. מעקב אחר תנועת הכוללת העכבר כדי לקבוע את מספר השגיאות (מספר של שגוי חורים חקר) של לפני ואחרי המטרה הוא נמצא. גם להקליט את המרחק מן החור המטרה אל החור הראשון חקרו (המרחק נמדד במספר חורים משם), יחד עם כל הבולט לטפח התנהגות.
  3. מעקב אחר התנועות של כל חיה על פיסת נייר עם דיאגרמה של המבוך במהלך כל המשפט ולהשתמש בה כדי לנתח אסטרטגיות חיפוש, וכן לקבוע את מספר פתחים, היו חקר ברביע מול היעד. השתמש ניתוח וידאו כדי לאשר את הנתיבים.

5. עלמה במצוקה בדיקות: בניית תא הריסון

  1. לחתוך צילינדר ברורה אורך שווה ¾ האורך של העכבר הנשי מבסיס של הזנב כדי של האף. ודא שהממדים של הגליל כך העכבר בתוך לא יכול להסתובב.
    הערה: חתכנו חרוט סוף צינור חרוטי 50 מ ל למטה כדי לבצע צינור ארוך 4 ס מ עבור עכברים בן חודש 1 ו- 8 ס"מ ארוך צינור עבור עכברים בת 4 חודשים.
  2. קאפ בשני הקצוות של הגליל כך אחת משתי אותיות יכול להיות הוסר, חיברתי. 3-4 חורים, כ 0.5 ס מ כל אחת, בתוך כל כובע. ודא החורים גדול מספיק כדי לאפשר אף נגיעה בין עכבר נשימה12.
    הערה: לחלופין, התקן עבור העכבר איפוק במהלך איסוף דם יכול לשמש.

6. עלמה במצוקה בדיקות: הכנת בזירה

  1. ודא כי הזירה אטום טופלס פלסטיק מרובע קופסת 38, 38 ס"מ עם קירות 19 ס מ. למלא את זה בצורה אחידה עם מצעים תירס בגובה של 2.5 ס מ.
    הערה: מצעים מקלח מקל אירועים לחפור לזהות.
  2. להשעות מצלמת וידאו מעל הזירה כך מכלול של הזירה הוא בתצוגה.

7. עלמה במצוקה בדיקות: מדד לניתוח התנהגות

  1. מקם את תא הלחץ סגור וריק למרכז הזירה.
  2. התחילו להקליט עם המצלמה על תנאי.
  3. בחר עכבר זכר. אם העכברים מסומנים עבור זיהוי, שים לב הזהות של הזכר הזה; אם לא, לסמן העכבר הזה כך שזה ניתן להבחין לאחר שחזר לכלוב.
  4. הנח בעדינות את העכבר זכר מתחת לכוס בפינה השמאלית התחתונה בזירה. לאחר 30 שניות, הסר את הגביע דרך מנגנון מחרוזת.
  5. לאפשר את העכבר כדי לחקור במשך 10 דקות, דואגת להישאר מחוץ שלה שדה ראייה במהלך ההקלטה. בסוף 10 דקות, להסיר את העכבר מן הזירה, להחזיר אותו לכלוב מחזיק 5 דקות הבא12.
  6. לעצור את ההקלטה ושמור את קובץ הווידאו עם מזהה המתאים.

8. עלמה במצוקה בדיקות: מדד התגובה החברתית

  1. השתמש את אותו סידור הקלטה של ארנה כמו המדד לניתוח התנהגות.
  2. בחר עכבר הנשי. אם העכברים מסומנים עבור זיהוי, שים לב הזהות של הנקבה הזו; אם לא, לסמן העכבר הזה כך שזה ניתן להבחין לאחר שמחזירים את הכלוב.
    הערה: littermate, חבר כלוב או העכבר הרומן יכול לשמש, בהתאם שאלת המחקר. אם מספר ניסויים מבוצעות, לשמור על סוג קשר הגומלין על פני כל המבחנים.
  3. החזק העכבר הנשי בעדינות בבסיס הזנב, או על ידי ריסון הצוואר, במידת הצורך, להוריד אותו אל החדר איפוק. סגור את הקצה הפתוח מאחורי זה, ודא שהוא אינו מסוגל להסתובב.
    הערה: לשקול לבש כפפות עמיד בנשיכה, העכבר הנשי יהיו חסינים מפני כניסה לחדר איפוק.
  4. התחילו להקליט עם המצלמה על תנאי.
  5. מקום תא הריסון עם העכבר הנשי לכוד בתוך במרכז הזירה אמפתיה ולאפשר הנקבה להסתגלות למשך 10 דקות. לטפל כדי להישאר מחוץ שדה ראייה של הנקבה.
  6. לאחר העכבר נקבה בבית הבליעה איפוק במשך 5 דקות, במקום העכבר זכר מסומן בחזרה אל תוך הזירה אמפתיה באמצעות תהליך זהה לזה לפני. לאפשר העכבר הזכר של 5 דקות נוספות כדי לחקור את הזירה, שוב מטפל ישארו מחוץ שדה הראייה של העכברים.
  7. לעצור את ההקלטה ושמור את קובץ הווידאו עם מזהה המתאים.
  8. בסוף 5 דקות, להסיר את שני העכברים מן הזירה, למקם אותם לתוך הכלובים. להחליף את המצעים. תירס, לחטא הזירה והן תא הלחץ עם אתנול 70%12.

9. עלמה במצוקה בדיקות: ניתוח נתונים

  1. תוכנת מעקב אחר יכול לשמש, אך ניתן הוידאו גם לנתח באופן ידני. לאחר שקובץ הווידאו אינו גלוי על המחשב, כיסוי סדין שקוף מעל המסך ומיתאר הריבוע של הזירה באמצעות סמן. לחלק את הכיכר ארנה תשעה תאים שווים.
  2. סקור את נתוני וידאו 5 דקות הראשונות של המדד גישוש ראשוני. להקליט את המספר של תאים חצה (פעילות גינקולוגיות/חוקר התנהגות), הזמן בילה במרכז מרובע של ארנה (סלידה בשטח פתוח), מספר חופר וטיפוח פרקים, מספר פעמים העכבר נגע הריסון מרכז ריק . תא
    הערה: ניקוד לא עשה את השני 5 דקות של חקר הראשונית של-10 דקות של הזכר, וגם 10 דקות הנקבה הוא לכוד בתוך החדר המרכזי בהיעדרו של הזכר.
  3. סקור את הנתונים וידאו עבור 5 דקות של המדד התגובה החברתית מיד לאחר שהזכר מופיעה שוב אל תוך הזירה עם הנקבה לכוד. להקליט את אותם נתונים לגבי המדד גישוש ראשוני, אך בנוסף להקליט מספר פעמים העכבר זכר נגע אפים עם העכבר הנשי לכוד.

תוצאות

המבוך בארנס

כדי להדגים כיצד ניתן להשתמש המבוך בארנס, חקרנו אם החשיפה אתנול מוקדם יחיד גרם לשינוי בלמידה במהלך פיתוח העכבר. C57Bl6/J עכברים הוזרק גם פתרון אתנול 2.5 g/kg (n = 8) או עם תמיסת מלח (n = 6) אחד מהשני, כמחנכת ביום 6 פעמיים, שעתיים....

Discussion

המבוך בארנס המחפשים לשלב בין טיפול אלטרנטיבי ונוחות יחסית קלה, מהירה וזולה דרכים להערכת למידה מרחבית, פעילות גינקולוגיות, והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים הניסויים עלמה במצוקה. יתרונות נוספים כוללים העדר לחצים עבירה, כאב או הגבלת מזון לבעל החיים. כמו רוב פרדיגמות למידה/זיכרון, חיסרון של המבו...

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

אנו במכללת. סידני האמפדן נותנים אישור והערכה שון וולדן, זאק לייטנר, צייד לי של אנטון Kheirani על מעורבותם בבדיקות הפרוטוקולים עבור בארנס מבוך וניסויים עלמה במצוקה. כן נרצה להודות ג'יימס פוסטר-מכללת רנדולף-מייקון לבנייה של המבוך בארנס, רנדולף-מייקון במכללה המחלקה של הביולוגיה למתן בדיקות שטח.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Damsel-in-Distress
50 mL conical tubeFisher Scientific14-432-22Any brand of 50 mL conical tube will work
Rubber bandsSprano Brandn/aSize 62, used to keep caps held to plywood
hammerGrainger6R252Any standard hammer will work
nail (size 8D)Grainger4NFE3Similarly-sized nails should work just as well
opaque, topless plastic boxAcmePlasticsCUT-TO-SIZE-ACRYLIC-CAST-BLACK-SHEET-2025Opaque plastic, cut to size (30 cm L x 19 cm W x 3-6 cm H). Step may be added to ensure no more than a 3.5 cm entrance depth for the mouse. 
video camera (smartphone)N/AN/AAny camera-equipped smartphone will work
bite-resistant glovesKent ScientificGLVDYN02Any brand offering appropriate protection
transparency sheetStaples954145Any brand of clear plastic sheet will work, used for scoring 
Barnes Maze
Petri DishesCorning353025Spray painted and used as covers for Barnes maze holes
Plywood (3/4 in.)LP Building Products22487To construct Barnes maze
Spray PaintKrylon1274937Used to paint petri dish caps black, white paint used to paint plywood
Cup Hooks (5/8 in.)Ace Hardware53606152 used on either side of ventral hole surfaces; Rubber band wraps around hooks to hold cap flat
Poster BoardCreatologyn/aUsed at edges of maze as extra cues
Light BulbsPhillipsn/a100W light bulb, used to during the trials
Rubber bandsSprano Brandn/aSize 62, used to keep caps held to plywood
Ultrasonic noisemakerVictor mini PestChaserM753SNUsed as aversive stimuli

References

  1. Sunyer, B., Patil, S., Höger, H., Lubec, G. Barnes maze, a useful task to assess spatial reference memory in the mice. Protocol Exchange. 2007, (2016).
  2. Vorhees, V., Williams, M. T. Assessing Spatial Learning and Memory in Rodents. ILAR Journal. 55 (2), 310-332 (2014).
  3. Barnes, C. A. Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat. Journal of Comparative and Physiological Psychology. 93 (1), 74-104 (1979).
  4. Harrison, F. E., Hosseini, A. H., McDonald, M. P. Endogenous anxiety and stress responses in water maze and Barnes maze spatial memory tasks. Behavioural Brain Research. 198 (1), 247-251 (2009).
  5. Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism. Nature Reviews Neuroscience. 11 (7), 490 (2010).
  6. Bartal, I. B. A., Decety, J., Mason, P. Empathy and pro-social behavior in rats. Science. 334 (6061), 1427-1430 (2011).
  7. Langford, D. L., et al. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312 (5782), 1967-1970 (2006).
  8. Smith, M. L., Hostetler, C. M., Heinricher, M. M., Ryabinin, A. E. Social transfer of pain in mice. Science Advances. 2 (10), e1600855 (2016).
  9. Melia, K. R., Ryabinin, A. E., Schroeder, R., Bloom, F. E., Wilson, M. C. Induction and habituation of immediate early gene expression in rat brain by acute and repeated restraint stress. Journal of Neuroscience. 14 (10), 5929-5938 (1994).
  10. Watanabe, S. Empathy and reversed empathy of stress in mice. Public Library of Science (PloS) One. 6 (8), e23357 (2011).
  11. Portfors, C. V. Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 46 (1), 28-34 (2007).
  12. Houlé, K., Abdi, M., Clabough, E. B. D. Acute ethanol exposure during late mouse neurodevelopment results in long term deficits in memory retrieval, but not in social responsiveness. Brain and Behavior. , (2017).
  13. Sales, G. D., Wilson, K. J., Spencer, K. E., Milligan, S. R. Environmental ultrasound in laboratories and animal houses: A possible cause for concern in the welfare and use of laboratory animals. Laboratory Animals. 22, 369-375 (1988).
  14. Crabbe, J. C., Walhsten, D., Dudek, B. C. Genetics of mouse behavior: Interactions with laboratory environment. Science. 248, 1670-1672 (1999).
  15. Attar, A., Liu, T., Chan, W. T. C., Hayes, J., Nejad, M., Lei, K., Bitan, G. A shortened Barnes maze protocol reveals memory deficits at 4-months of age in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease. PloS One. 8 (11), (2013).
  16. Inman-Wood, S. L., Williams, M. T., Morford, L. L., Vorhees, C. V. Effects of prenatal cocaine on Morris and Barnes maze tests of spatial learning and memory in the offspring of C57BL/6J mice. Neurotoxicology and Teratology. 22 (4), 547-557 (2000).
  17. Harrison, F. E., Reiserer, R. S., Tomarken, A. J., McDonald, M. P. Spatial and nonspatial escape strategies in the Barnes maze. Learning and Memory. 13 (6), 809-819 (2006).
  18. O'Leary, T. P., Savoie, V., Brown, R. E. Learning, memory and search strategies of inbred mouse strains with different visual abilities in the Barnes maze. Behavioural Brain Research. 216 (2), 531-542 (2011).
  19. Kaidanovich-Beilin, O., Lipina, T., Vukobradovic, I., Roder, J., Woodgett, J. R. Assessment of social interaction behaviors. Journal of Visualized Experiments. 48, (2011).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

141

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved