A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
זלוף הלב באתרו לשעבר normothermic (ESHP), שומר על הלב במצב הכאה, הפיזיולוגיות למחצה. כאשר מבוצעת במצב עבודה, ESHP מספק ההזדמנות כדי לבצע הערכות מתוחכמות של התורם הכדאיות איברים ותפקוד הלב. כאן, אנו מתארים את השיטה שלנו עבור הערכת ביצועים שריר הלב במהלך ESHP.
השיטה הרגילה הנוכחי לשימור איברים (אחסון הקרה, מדעי המחשב), חושף את הלב תקופה של איסכמיה קר זה מגביל את זמן השימור בטוחה ו מגביר את הסיכון של תופעות לוואי לאחר השתלת תוצאות. יתר על כן, הטבע סטטי של מדעי המחשב אינו מאפשר הערכה איברים או התערבות במהלך מרווח שימור. זלוף הלב באתרו לשעבר normothermic (ESHP) היא שיטה לשימור בלב שנתרמו שמקטינה איסכמיה קר על ידי מתן חמצן, עשירות perfusate ללב. ESHP הוכח להיות הלא-נחות ל CS שימור סטנדרטי-קריטריונים התורם לבבות, גם הנחתה את השתלת קליני של לבבות שנתרמו לאחר קביעת מוות במחזור הדם. כיום, המכשיר זמין רק ESHP קלינית perfuses הלב במצב לפרוק, עבודה, הגבלת הערכות הביצועים שריר הלב. לעומת זאת, ESHP במצב עבודה מספקת את ההזדמנות הערכה מקיפה של ביצועי לב על ידי הערכה של פרמטרים פונקציונליים וחילוף בתנאים הפיזיולוגיות. יתר על כן, קודם לכן ניסיוני שמחקרים הראו כי ESHP במצב עבודה עלולה שימור תפקודית משופרת. כאן, אנו מתארים את הפרוטוקול ex זלוף באתרו של הלב במודל של יונק גדול (חזירי), אשר הוא לשחזור עבור מודלים בבעלי חיים שונים וגדלים הלב. התוכנה בוהתותח ESHP מאפשר שליטה מהירות המשאבה בזמן אמת, אוטומטי כדי לשמור על הלחץ פרפור הרצוי אבי העורקים ושמאלה, ערך מגוון רחב של פרמטרים אלקטרופיזיולוגיות פונקציונלי עם הצורך פיקוח/מניפולציה.
הרלוונטיות הקלינית
בעוד רוב ההיבטים של השתלת לב התפתחו באופן משמעותי מאז השתלת הלב הראשונה בשנת 1967, אחסון הקרה (CS) נשאר לפי תקן תורם לב שימור1. CS חושף את האיבר תקופה של איסכמיה קר מגביל את מרווח הזמן בין שימור בטוח (4-6 שעות), מגביר את הסיכון של שתל ראשי בתפקוד2,3,4. בשל אופיו סטטי של CS, הערכות של פונקציה או התערבויות טיפוליות אינן אפשריות בזמן בין השתלת איברים רכש. זוהי מגבלה מסוימת בקריטריונים המורחבת תורמים כולל לבבות שנתרמו לאחר מותו במחזור הדם (DCD), יצירת מכשול להתגברות על פער ניכר בין הביקוש לבין הנוכחי תורם בריכה5,6. לכתובת שמגבלה זו, ex באתרו הלב זלוף הוצע כשיטה הרומן, חצי הפיזיולוגיות של שימור לבבות שנתרמו, מזעור חשיפה איסכמיה קר על ידי מתן חמצן, עשירות perfusate אל הלב במהלך זמן השימור 1 , 7 , 8.
Ex באתרו הלב זלוף
אחת השיטות הנפוצות ביותר עבור ex באתרו בחינת הלב מבודד היא Langendorff זלוף. בשיטה זו, לראשונה על ידי אוסקר Langendorff בשנת 1895, זרימת הדם בתוך את העורקים הכליליים, החוצה את הסינוס הכלילי של הלב מבודד, עם הלב ריקה ומכים המדינה9,10. ESHP קליני במצב Langendorff עם המנגנון Transmedics איברים במערכת (מדע"ר) הוכח להיות הלא-נחות ל CS שימור סטנדרטי-קריטריונים התורם לבבות1, ו הנחתה את השתלת קליני של DCD לבבות 11. עם זאת, ישנם חששות לגבי היכולת של המכשיר כדי להעריך את יכולת הקיום של איברים, כמו מספר של התורם לבבות חשב בתחילה להיות שיפותחו שנמחקו לאחר זלוף על OCS3. OCS תומך הלב במצב Langendorff (עבודה), ובכך הוא בעל קיבולת מוגבלת להערכת הפונקציה השאיבה של הלב3,12. גוף גדל והולך של ראיות מרמז כי בפרמטרים פונקציונאליים מציעים דרך טובה יותר כדי להעריך את הכדאיות איברים, רומז כי הערכות של תפקוד הלב עשויה להיות כלי אמין עבור הערכה ומבחר הלבבות השתלת במהלך ESHP3 12, ,13,14, יתר על כן, שלנו מחקרים על לב חזירי באתרו לשעבר perfused מראים כי ESHP במצב עבודה מספק שימור תפקודית משופרת של הלב במהלך ה זלוף מרווח15,16.
מכשירים ESHP מסוגל לשמר את הלב במצב עבודה דרושה רמה של אוטומציה לשמור בבטחה ובדיוק preload, afterload וקצבי זרימה. כמו כן, מערכת כזו צריך להחזיק את הגמישות כדי להקל על הערכות מקיף של תפקוד הלב להתבצע. ESHP המנגנון המשמש כאן הינו מצויד עם תוכנות מותאמות אישית 1) מספק שומר על אבי העורקים הרצוי (Ao) ועל שמאל פרפור (LA) לחץ/זרימה ו 2) מספק ניתוח בזמן אמת של פרמטרים פונקציונליים והערכה חזותי של הלחץ ואת עם הצורך הפיקוח. נתונים ללחץ נרכשת עם לחץ סטנדרטי מלאות נוזל מתמרים, זרימת הנתונים נרכשת עם זרימת דופלר זמן העברה הגששים. אותות אלה הם דיגיטציה עם גשר, קלט אנלוגי, בהתאמה. הלב ממוקם אופקית עם העלאת קלה כדי כלי נהדר על קרום סיליקון רך. הקבצים המצורפים תעלות לעבור דרך הממברנה, שילוב תא תאימות עבור הוצאה ventricular רטיבות. מטרת עבודה זו היא לספק חוקרים בתחום של השתלת לב עם פרוטוקול עבור ex באתרו זלוף והערכה של הלב, בתנאים normothermic, הפיזיולוגיות למחצה במצב עבודה, במודל של יונק גדול (יורקשייר חזיר).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
כל ההליכים כתב יד זה בוצעו בהתאם להנחיות של המועצה הקנדית על טיפול בעלי חיים, המדריך על הטיפול והשימוש של חיות מעבדה. הפרוטוקולים אושרו על ידי הוועדה המוסדית טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת אלברטה. פרוטוקול זה הוחל ב חזירות יורקשייר לנוער בין 35-50 ק"ג. כל האנשים המעורבים בהליכים ESHP קיבל הכשרה נאותה אבטחה.
1. בפגישת ההכנות
2. ESHP תוכנת אתחול והתאמות
הערה: המנגנון ESHP המשמש כאן הינו מצויד עם תוכנית מותאמת אישית כדי לאפשר שליטה על מהירות המשאבה על מנת להשיג ולשמור על הרצוי לה, אאו לחצים. התוכנה גם מנתחת פרמטרים פונקציונליים, ומספק הערכה חזותית של הלחץ ואת (איור 4).
3. ההכנות והרדמה
4. אוסף דם ולב רכש
5. מיקום של הלב אל המנגנון ESHP, חניכה של זלוף
6. מטבולית תמיכה במהלך ESHP
הערה: איברים זלוף פתרונות, כולל קרבס-Henseleit בופר, בדרך כלל מכילים גלוקוז כמו המצע אנרגיה ראשונית.
7. אנטי מיקרוביאלי, אנטי-דלקתי סוכני
8. הערכה של תפקוד
הערה: ESHP השליטה בתוכנה באופן אוטומטי מחשבת, רשומות בגרימת המצב היציב ומדד תפקודית כל 10 שניות.
9. מטבולית ובחינת באתרו לשעבר Perfused הלב
10. הסרת את הלב של המנגנון ESHP בסוף זלוף
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
בתחילת זלוף (במצב שאינו עבודה), הלב בדרך כלל יחדש את קצב סינוסי כאשר הטמפרטורה של המערכת perfusate מתקרב normothermia. בעת הזנת עבודה מצב, כמו הלחצים LA מתקרבים הערכים הרצויים, הוצאה ב- Ao לחץ העקיבה להתייחס ואת הזרם LA (השתקפות של תפוקת הלב) צריך להגדיל בהדרגה. מודל חזיר יורקשייר (35 – 50 ק ...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
זלוף מוצלח מוגדר על פי מטרות המחקר; עם זאת, זה צריך לכלול ESHP ללא הפרעה את הסכום הרצוי של הזמן, אוסף מלא של הנתונים על תפקוד הלב במהלך זלוף. לענין זה, חייב להיות במעקב כמה צעדים קריטיים בפרוטוקול.
הלב הוא איבר עם חמצן גבוהה והדרישות אנרגיה, צמצום הזמן איסכמי לפני תעלות זלוף הוא ע...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
DHF מחזיקה פטנטים באתרו לשעבר הטכנולוגיה זלוף איברים ופעולות. DHF JN הם המייסדים ובעלי המניות העיקריים של Tevosol, inc.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מתוכנית הקנדי הלאומי להשתלות מחקר. SH הוא הנמען של הפקולטה לרפואה ו רפואת שיניים Motyl Studentship בוגר במדעי הלב. DHF הוא הנמען של מענק פרוייקטי מחקר שיתופי (CHRP) בסיוע מן הלאומית למדעים, הנדסה מועצת המחקר הקנדי מכוני הבריאות מחקר.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Debakey-Metzenbaum dissecting scissors | Pilling | 342202 | |
MAYO dissecting scissors | Pilling | 460420 | |
THUMB forceps | Pilling | 465165 | |
Debakey straight vascular tissue forceps | Pilling | 351808 | |
CUSHING Gutschdressing forceps | Pilling | 466200 | |
JOHNSON needle holder | Pilling | 510312 | |
DERF needle holder | Pilling | 443120 | |
Sternal saw | Stryker | 6207 | |
Sternal retractor | Pilling | 341162 | |
Vorse tubing clamp | Pilling | 351377 | |
MORRIS ascending aorta clamp | Pilling | 353617 | |
Surgical snare (tourniquet) set | Medtronic | CVR79013 | |
2-0 SILK black 12" x 18" strands | ETHICON | A185H | |
3-0 PROLENE blue 18" PS-2 cutting | ETHICON | 8687H | |
Biomedicus pump drive (modified) | Medtronic | 540 | Modified to allow remote electronic control of pump speed |
Biomedicus pump | Maquet | BPX-80 | |
Membrane oxigenator D 905 | SORIN GROUP | 50513 | |
Tubing flow module | Transonic | Ts410 | |
PXL clamp-on flow sensor | Transonic | ME9PXL-BL37SF | |
TruWave pressure transducer | Edwards | VSYPX272 | |
Intercept tubing 3/8" x 3/32" xX 6' | Medtronic | 3506 | |
Intercept tubing 1/4" x 1/16" x 8' | Medtronic | 3108 | |
Heated/Refrigerated Bath Circulator | Grant | TX-150 | |
ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer | Radiometer | 989-963 | |
DLP cardioplegia cannula (aortic root cannula) | Medtronics | 20613994495406 | |
5F Ventriculr straight pigtail cathter | CORDIS | 534550S | |
5F AVANTI+ Sheath Introducer | CORDIS | 504605A | |
Emerald Amplatz Guidewire | CORDIS | 502571A | |
Dual chamber pace maker | Medtronic | 5388 | |
Defibrilltor | CodeMaster | M1722B | |
Infusion pump | Baxter | AS50 | |
Surgical electrocautery device | Kls Martin | ME411 | |
Gas mixer | SECHRIST | 3500 CP-G | |
Medical oxygen tank | praxair | 2014408 | |
Cabon dioxide tank | praxair | 5823115 | |
Bovine serum albumin | MP biomedicals | 218057791 |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved