JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

מאמר זה מתאר את הפרוטוקולים המשמשים להפקת פלטפורמת אספקת חיסונים חדשנית, "polybubbles", כדי לאפשר שחרור פרץ מושהה. פוליאסטר כולל פולי (חומצה לקטית-co-גליקולית) ו polycaprolactone שימשו כדי ליצור את polybubbles מולקולות קטנות ואנטיגן שימשו מטען.

Abstract

אסטרטגיות אספקת חיסונים שיכולות להגביל את החשיפה של מטען לממס אורגני תוך מתן אפשרות לפרופילי שחרור חדשניים הן קריטיות לשיפור כיסוי החיסון ברחבי העולם. כאן, מוצגת פלטפורמת חדשנית להזרקה, אולטרה סגולה הניתנת לריפוי ועיכוב בהפצה, המאפשרת אספקת חיסונים בשם polybubbles. המטען הוזרק לתוך polybubbles פוליאסטר מבוסס שנוצרו 10% carboxymethycellulose מבוסס תמיסה מים. נייר זה כולל פרוטוקולים לשמירה על צורה כדורית של polybubbles ולמטב את מיקום מטען ושמירה כדי למקסם את כמות המטען בתוך polybubbles. כדי להבטיח בטיחות, תכולת ממס כלור בתוך polybubbles נותחו באמצעות ניתוח הפעלת ניוטרונים. מחקרי שחרור נערכו עם מולקולות קטנות כמטען בתוך polybubble כדי לאשר שחרור פרץ מושהה. כדי להראות עוד יותר את הפוטנציאל למסירה לפי דרישה של המטען, nanorods זהב היו מעורבים בתוך מעטפת פולימר כדי לאפשר הפעלת לייזר כמעט אינפרא אדום.

Introduction

כיסוי חיסון מוגבל גורם למותם של 3 מיליון אנשים הנגרמת במיוחד על ידי מחלות הניתנות למניעה חיסון1. תנאי אחסון ותחבורה לקויים מובילים לבזבוז של חיסונים פונקציונליים ובכך תורמים לצמצום החיסונים הגלובליים. בנוסף, חיסון לא שלם בשל אי דבקות בלוחות הזמנים הנדרשים של החיסון גורם גם לכיסוי חיסון מוגבל, במיוחד במדינות מתפתחות2. ביקורים מרובים של אנשי צוות רפואי נדרשים בתקופה המומלצת לקבלת זריקות מאיץ, ובכך להגביל את אחוז האוכלוסייה עם חיסון מלא. לפיכך, יש צורך בפיתוח אסטרטגיות חדשניות לאספקת חיסון מבוקר כדי לעקוף אתגרים אלה.

המאמצים הנוכחיים לפיתוח טכנולוגיות לאספקת חיסונים כוללים מערכות פולימריות מבוססות אמולסיה3,4. עם זאת, המטען חשוף לעתים קרובות לכמות גדולה יותר של ממס אורגני שעלול לגרום באופן פוטנציאלי צבירה ופירוק, במיוחד בהקשר שלמטען מבוסס חלבון 5,6. פיתחנו פלטפורמת אספקת חיסונים חדשנית, "polybubbles", שיכולה לאסוף מספר תאים מטען תוך מזעור נפח המטען החשוףלממס 7. לדוגמה, בפלטפורמת מעטפת הליבה שלנו polybubble, כיס מטען אחד של קוטר 0.38 מ"מ (SEM) מוזרק במרכז polybubble 1 מ"מ. במקרה זה, שטח פני השטח של מטען חשוף ממס אורגני יהיה כ 0.453 מ"מ2. לאחר ששקל את צפיפות האריזה של ספירות (מיקרוחלקיקים) בתוך כדור (מחסן מטען), הנפח בפועל של מיקרוחלקיקים (10 μm קוטר) שיכול להתאים במחסן הוא 0.17מ"מ 3. הנפח של מיקרוחלקיקים אחד הוא 5.24x10-8 מ"מ 3 ולכן מספר החלקיקים מיקרוחלקיקים שיכולים להתאים למחסן הוא ~ 3.2x106 חלקיקים. אם לכל מיקרו-חלקיק יש 20 כיסי מטען (כתוצאה מתמוה כפול) בקוטר 0.25 μm, אז שטח פני השטח של המטען שנחשף לממס אורגני הוא 1274 מ"מ2. מחסן מטען בתוך polybubble ובכך יהיה ~ 2800 פי שטח פני השטח פחות חשוף ממס אורגני בהשוואה לזה של מטען אורגני חשוף ממס בחלקיקים זעירים. הפלטפורמה המבוססת על פוליאסטר שלנו יכולה להפחית את כמות המטען החשוף לממס אורגני, שאחרת עלול לגרום לצובר מטענים וחוסר יציבות.

Polybubbles נוצרים על בסיס עקרון הפרדת פאזה שבו הפוליאסטר בשלב אורגני מוזרק לתוך פתרון מים וכתוצאה מכך בועה כדורית. מטען בשלב המים לאחר מכן ניתן להזריק במרכז polybubble. תא מטען נוסף יכול להיות מושגת פוטנציאלית בתוך polybubble על ידי ערבוב מטען שונה עם מעטפת הפולימר. הפוליבבל בשלב זה יהיה ניתן לגבש ולאחר מכן ירפא כדי לגרום למבנה polybubble מוצק עם מטען באמצע. פוליבבלים כדוריים נבחרו על פני צורות גיאומטריות אחרות כדי להגדיל את קיבולת המטען בתוך polybubble תוך מזעור הגודל הכולל של polybubble. פוליקבבלים עם מטען במרכז נבחרו להפגין שחרור פרץ מושהה. Polybubbles שולבו גם עם אינפרא אדום ליד (NIR)- רגיש (כלומר, theranostic-זמין) סוכן, כלומר nanorods זהב (AuNR), כדי לגרום לעלייה בטמפרטורה של polybubbles. אפקט זה עשוי להקל על השפלה מהירה יותר, והוא יכול לשמש לשליטה בקינטיות ביישומים עתידיים. בנייר זה, אנו מתארים את הגישה שלנו לצורה ולאפיין polybubbles, כדי להשיג שחרור פרץ מושהה מן polybubbles, ולשלב AuNR בתוך polybubbles כדי לגרום ניר-הפעלה.

Protocol

1. פוליקאפולאציון טריקרילט (PCLTA) סינתזה

  1. יבש 3.2 מ"ל של 400 דה פוליקאפולאסיון (PCL) טריו בלילה ב 50 מעלות צלזיוס בקבוקון פתוח 200 מ"ל עגול בתחתית K2CO3 ב בקבוקון זכוכית ב 90 מעלות צלזיוס.
  2. מערבבים את הטריו עם 6.4 מ"ל של דיכלורומטאן (DCM) ו-4.246 גרם אשלגן קרבונט (K2CO3)תחת ארגון.
  3. מערבבים 2.72 מ"ל של אקרילויל כלוריד ב-27.2 מ"ל של DCM ומוסיפים את הירידה לתערובת התגובה במבחנות במשך 5 דקות.
  4. מכסים את תערובת התגובה בנייר אלומיניום ומשאירים אותה ללא הפרעה בטמפרטורת החדר למשך 24 שעות תחת ארגון.
  5. לאחר 24 שעות, לסנן את תערובת התגובה באמצעות נייר מסנן על משפך Buchner תחת ואקום כדי להשליך ריאגנטים עודפים.
  6. לזרז את סינון מ שלב 1.5 המכיל את הפולימר endcapped באתר diethyl ב 1:3 (vol / vol) ו rotovape ב 30 ° C כדי להסיר את אתר diethyl.

2. היווצרות הפוליבבל

הערה: הזרקת פולימר במים deionized (DI) תגרום polybubbles לנדוד לתחתית הבקבוקון וכתוצאה מכך תחתית שטוחה. השתמש 10% (wt / vol) תאית carboxymethyl (CMC) למלא את בקבוקון הזכוכית במקום כדי למנוע שיטוח polybubble.

  1. הכן 10% (wt/vol) CMC פתרון במים DI.
  2. מלא בקבוקון זכוכית 0.92 מ"ל עם 0.8 מ"ל של 10% CMC באמצעות צינור העברה 1 מ"ל.
  3. לערבב 1000 מ"ג/מ"ל של 14 kDa PCL ב- DCM ולסנתז PCLTA ב 1:3 (vol/vol) עבור נפח כולל של 200 μL או להכין 200 μL של 1000 מ"ג/מ"ל של 5 kDa פולי (חומצה לקטית-co-גליקולית) diacrylate (PLGADA) בכלורופורם.
  4. לערבב את 2-hydroxy-4′-(2-hydroxyethoxy)-2-מתילפרופיופנון (פוטויינטיאטור) עם פולימר (PLGADA או PCL / PCLTA) תערובת ב 0.005:1 (vol / vol).
  5. טען 200 μL של תערובת פולימר לתוך מזרק זכוכית 1 מ"ל רכוב על משאבת מזרק המחובר צינור נירוסטה חלוקת עם קוטר פנימי של 0.016 אינץ'.
  6. השתמש micromotor כדי לשלוט בתנועה קדימה ואחורה של צינור הפולימר להזריק פולימר לתוך 10% CMC במבחנה זכוכית כדי ליצור את polybubble.
  7. לרפא את polybubbles תחת אולטרה סגול (UV) ב אורך גל 254 צפון צפון עבור 60 s ב 2 W / ס"מ2.
  8. פלאש להקפיא את polybubbles חנקן נוזלי lyophilize לילה ב 0.010 mBar ואקום ב -85 ° C.
  9. הפרד את הפוליבבלים מה-CMC המיובש באמצעות מרסים ושטוף את הפוליבבלים עם מי DI כדי להסיר כל שאריות CMC שיורית. שים לב כי פולימרים אחרים יכול לשמש סביר עם שינויים כדי לשנות את הקינטיות שחרור.

3. אפנון של קוטר polybubble

  1. מלא בקבוקון זכוכית 0.92 מ"ל עם 10% CMC באמצעות צינור העברה של 1 מ"ל.
  2. ערבב PCL/PCLTA ב- 1:3 (vol/vol) עם 1000 מ"ג/מ"ל 14kDa PCL וסנתז PCLTA. מערבבים את הפוטו-אינטיטור עם תערובת פולימר ב-0.005:1 (vol/vol).
  3. טען את תערובת הפולימר למזרק זכוכית של 1 מ"ל המותקן על משאבת מזרק המחוברת לצינור מפלדת אל-חלד בקוטר פנימי של 0.016 אינץ'.
  4. השתמש micromotor כדי לשלוט בתנועה קדימה ואחורה של צינור הפולימר להזריק פולימר לתוך 10% CMC במבחנה זכוכית כדי ליצור את polybubble.
  5. כדי להשיג polybubbles עם קוטרים שונים, לשנות את קצב חלוקת מ 0.0005 כדי 1 μL / s.
  6. לצלם תמונות של הבקבוקון עם polybubbles בקוטר משתנה.
  7. השתמש ב- ImageJ כדי לכמת את קוטר הפוליקבלים ולהשתמש בגודל הבקבוקון כקני קנה מידה.

4. רכז מטען בתוך polybubble

  1. אפנון צמיגות PCL/PCLTA באמצעות K2CO3:
    הערה: צמיגות של PLGADA אין צורך לשנות באמצעות K2CO3 כי צמיגות של 5 kDa PLAGDA ב 1000 מ"ג / מ"ל מספיק למרכז המטען.
    1. להוסיף K2CO3 (שהיה מבודד לאחר תגובת PCLTA) PCLTA בריכוזים שונים כולל 0 מ"ג / מ"ל, 10 מ"ג / מ"ל, 20 מ"ג / מ"ל, 40 מ"ג / מ"ל, ו 60 מ"ג / מ"ל.
    2. מדוד את צמיגות הדינמיות של הפתרונות על-ידי שינוי קצב ההטיה מ- 0 ל- 1000 1/s באמצעות ראומטריה.
    3. להזריק באופן ידני את המטען באמצע (עיין שלב 4.2 כדי להכין את תערובת המטען) של polybubbles שנוצרו באמצעות פתרונות PCL / PCLTA עםריכוזים שוניםשל K 2 CO3 (שלב 4.1.1). לקבוע את הריכוז האופטימלי של K2CO3 על ידי התבוננות איזה פתרון מ שלב 4.1.1 יכול לגרום לשמירה של המטען באמצע.
  2. רכז המטען (שכבר מוצג היתכנות עם מולקולות קטנות) עם CMC
    1. מערבבים את המטען עם 5% (wt/vol) CMC ברוטציה בן לילה כדי להגדיל את צמיגות המטען.
    2. באופן ידני להזריק 2 μL של תערובת מטען polybubble ולהמשיך עם ריפוי UV ב 254 צפון צפון גל עבור 60 s ב 2 W / ס"מ2.
    3. פלאש להקפיא את polybubbles בחנקן נוזלי עבור 30 s ו lyophilize לילה ב 0.010 mBar ואקום ב -85 ° C.
    4. הפרד את הפוליבבלים מה-CMC המיובש באמצעות מרסים ושטיפה עם מי DI כדי להסיר שאריות CMC.
    5. חותכים את הפוליבבל לשניים ודמיינת את החצאים באמצעות מיקרוסקופית קונפוקלית כדי להבטיח שהמטען יהיה מרוכז (עיין בשלב 6 לרגשות ולאוכי גל של פליטה).

5. ניסוח מטען

הערה: ניסוח Polybubble יכול לאסוף סוגי מטען שונים, כולל מולקולות קטנות, חלבונים, וחומצות גרעין.

  1. בהתבסס על מחקרים קודמים, במקרה של מטען חלבון, להשתמש excipients כולל פוליאתילן גליקול (PEG)6, polyvinylpyrrolidone (PVP), ו גליקופולימרים 6 כדי לשפר את היציבות של חלבוןבמהלך ניסוח polybubble.
  2. טופס polybubbles בהתבסס על הפרוטוקול בשלב 2.
  3. להכין את פתרון האנטיגן על ידי הוספת 17.11 גרם של trehalose 625 μL של HIV gp120/41 אנטיגן.
  4. להזריק באופן ידני 1 μL של תמיסת אנטיגן באמצע polybubble.
  5. פתח polybubbles בימים 0, 7, 14, ו 21, ולתוע את הפלואורסצנטיות של אנטיגן עם אורכי גל של העירור ופליטה 497 נמיום ו 520 צפון צפון, בהתאמה.
  6. לקבוע את הפונקציונליות של האנטיגן באמצעות אנזים מקושר תסה חיסונית (ELISA) ולהשתמש 5% חלב דל שומן כמאגר חסימה.

6. שחרור מטען

הערה: מולקולה קטנה או אנטיגן יכול לשמש כסוג המטען

  1. מולקולה קטנה
    1. דגירה polybubbles עם acriflavine מרוכז ב 400 μL של תמיסת מלח מאגר פוספט (PBS) ב 37 ° C, 50 ° C עבור פוליבבים PLGADA וב 37 ° C, 50 ° C, 70 ° C עבור PCL / PCLTA polybubbles.
      הערה: הסיבה מדוע אנו ממליצים בדיקות מעל טמפרטורות הגוף היא כדי) לדמות את הטמפרטורה (50 °C) שבה polybubble מגיע תוך לייזר nanorods זהב (AuNRs) בתוך PCL ו PLGA; ב) להאיץ את תהליך ההשפלה של PCL (50 °C, 70 °C).
    2. בכל נקודת זמן, לאסוף את supernatants ולהחליף עם 400 μL של PBS טרי.
    3. השתמש בקורא לוחות כדי לכמת את עוצמת הפלואורסץ בסופרנטנטים שנאספו.
      הערה: השתמש לשעבר/em של 416 נאר/514 צפון-מז' עבור acriflavine.
  2. אנטיגן
    1. דגירה polybubbles עם סרום אלבומין של פר מרוכז (BSA)-488 ב 400 μL של PBS ב 37 ° C, 50 ° C עבור PLGADA polybubbles וב 37 ° C, 50 ° C עבור PCL / PCLTA polybubbles.
    2. בכל נקודת זמן, לאסוף את supernatants ולהחליף עם 400 μL PBS טרי.
    3. השתמש בקורא לוחות כדי לכמת את עוצמת הפלואורסץ בסופרנטנטים שנאספו. השתמש ב-497 00 00 00 00 00 00:00:00,000 --&00:00,000 --&00:00,000 00:00:00
      הערה: שחרור מחקר ב 70 °C עבור PCL / PCLTA polybubbles לא צריך לערך כדי למנוע חשיפת האנטיגן לטמפרטורה קיצונית.

7. רעילות

  1. כימות תכולת כלור בפוליבבלים באמצעות ניתוח הפעלת ניוטרונים (NAA)
    1. השתמש polybubbles שהיו lyophilized עבור 2, 4, 6, 20, ו 24 שעות עבור מחקר זה ב 0.010 mBar ואקום ב -85 °C.
    2. למדוד 5-9 מ"ג של polybubbles ולמקם אותם על בקבוקונים LDPE ההקרן.
    3. הכן 1000 גרם/מ"ל של פתרון כיול כלור מהמכון הלאומי לתקנים וטכנולוגיה (NIST)-פתרון כיול הניתן למעקב.
    4. השתמש 1-מגוואט Triga כור לבצע הקרנות ניוטרונים על כל דגימה בקצב fluence ניוטרונים של 9.1 ×10 12 /cm2·s עבור 600 s.
    5. מעבירים את הפוליקבלים לנבעונים ללא תדר.
    6. השתמש בגלאי HPGe כדי להשיג ספקטרה קרני גמא עבור 500 s לאחר 360 מרווחי ריקבון.
    7. השתמש בתוכנות NAA על ידי תעשיות קנברה כדי לנתח את הנתונים.
  2. כימות תכולת כלור ששוחררה מפוליבבלים באמצעות NAA
    1. דגירה polybubbles שהיו lyophilized לילה (ב 0.010 mBar ואקום ו -85 ° C) ב 400 μL של PBS ב 37 ° C.
    2. לאסוף את supernatants בשבועות 1, 2, ו 3 לאחר הדגירה.
    3. נתח את supernatants עבור תוכן כלור באמצעות NAA באמצעות אותה שיטה כמתואר לעיל בשלב 7.1.

8. סינתזה של AuNR מאת קיטלר, ס', ואח'8

  1. להכין פתרון זריעה AuNR על ידי ערבוב 250 μL של 10 m חומצה כלורואורית (HAuCl4),7.5 מ"ל של 100 m cetrimonium ברומיד (CTAB), ו 600 μL של 10 mM קרח קר נתרן borohydride (NaBH4).
  2. להכין פתרון צמיחה על ידי ערבוב 40 מ"ל של 100 מ"ר CTAB, 1.7 מ"ל של 10 mM HAuCl4, 250 μL של כסף חנקתי (AgNO3),ו 270 μL של 17.6 מ"ג / מ"ל חומצה אסקורבית לצינור.
  3. מערבבים במרץ 420 μL של פתרון זרע עם פתרון הצמיחה ב 1200 סל"ד במשך 1 דקות. לאחר מכן להשאיר את התערובת ללא הפרעה להגיב במשך 16 שעות.
  4. מוציאים את הריגנטים העודפים מהתערובת על ידי צנטריפוגה g ב-8,000 × גרם למשך 10 דקות ומשליכים את הסופרנטנט.

9. הידרופוביזציה של AuNRs על ידי סולימן, M.G., ואח '9

  1. להתאים את ה-pH של 1.5 מ"ל של AUNRs מיוצב CTAB מסונתז ל 10 באמצעות 1 mM נתרן הידרוקסיד (NaOH).
  2. מערבבים את הפתרון עם 0.1 מ"ל של 0.3 mM מתילציה PEG (mPEG) thiol ב 400 סל"ד לילה.
  3. מערבבים PEGylated AuNRs עם 0.4 M dodecylamine (DDA) בכלורופורם ב 500 סל"ד במשך 4 ימים.
  4. מקטרים את השכבה האורגנית העליונה המכילה AuNRs הידרופוביים ולאחסן ב 4 מעלות צלזיוס עד לשימוש עתידי.

10. ניר-הפעלה של polybubbles

  1. מערבבים את תמיסת הפולימר (PLGADA או PCL/PCLTA) עם AuNRs הידרופוביים ב- 1:9 (vol/vol).
  2. מוסיפים את הפוטו-יטיטור לתערובת הפולימר-AuNR ב- 0.005:1 (vol/vol).
  3. טופס polybubbles על ידי הזרקת תערובת פולימר-AuNR לתוך בקבוקון זכוכית 0.92 מ"ל עם 10% CMC (wt / vol) (עיין שלב 2).
  4. לרפא את polybubbles ב 254 צפון צפון אורך גל עבור 60 s ב 2 W / ס"מ2.
  5. פלאש להקפיא חנקן נוזלי עבור 30 s ו lyophilize לילה ב 0.010 mBar ואקום ב -85 ° C.
  6. הפרד את הפוליבבלים המיובשים באמצעות מרסים ושטיפה עם מי DI כדי להסיר כל שאריות CMC שיורית.
  7. דגירה polybubbles ב 400 μL של PBS ב 37 ° C.
  8. הפעל את polybubbles באמצעות 801 nm ניר לייזר ב 8A במשך 5 דקות בכל יום שני, רביעי ושישי.
  9. קח תמונות אינפרא אדום (FLIR) במבט קדימה של polybubble לפני ואחרי הפעלת לייזר כדי להשיג ערכי טמפרטורה.
  10. חשב את הבדלי הטמפרטורה בין לפני ואחרי הפעלת לייזר בהתבסס על ערכי הטמפרטורה מתמונות FLIR.

תוצאות

Polybubbles היו מאופיינים בהרחבה באמצעות SEM ו NAA. המטען היה מרוכז בהצלחה כדי לגרום לשחרור פרץ מושהה. Polybubbles היו גם בהצלחה מופעל בלייזר בגלל הנוכחות של AuNRs בתוך polybubbles.

אפיון פוליבבל
Polybubbles מוזרק בתמיסה מים ללא CMC הביא polybubble שטוח בשל המגע...

Discussion

טכנולוגיות ואתגרים נוכחיים
חלקיקים מיקרו וחלקיקים מבוססי אמולסיה שימשו בדרך כלל כנשאים משלוח סמים. למרות שחרור קינטיקה של המטען ממכשירים אלה נחקרו בהרחבה, שליטה פרץ שחרור קינטיקה כבר אתגר גדול11. רב-תכליתיות ופונקציונליות המטען מוגבלות גם במערכות מבוססות אמולסיה ...

Disclosures

לסופרים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

ברצוננו להודות ד"ר בריאן א. טומלין המזוהה עם מעבדת ניתוח יסודי בתוך המחלקה לכימיה ב TAMU שסייע עם ניתוח ההפעלה ניוטרונים (NAA).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1-Step Ultra Tetramethylbezidine (TMB)-Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Substrate SolutionThermo scientific34028
2-Hydroxy-2-methylpropiophenoneTCI AMERICAH0991
450 nm Stop Solution for TMB SubstrateAbcamab17152
Acryloyl chlorideSigma AldrichA24109-100G
AcriflavineChem-Impex International22916
Anhydrous ethyl etherFisher ChemicalE138-500
Anti-HIV1 gp120 antibody conjugated to horseradish peroxidase (HRP)
Bovine serum albumin (BSA)Fisher BioReagentsBP9700100
BSA-CF488 dye conjugatesInvitrogenA13100
Bromosalicylic acidAcros OrganicsAC162142500
Carboxymethylcellulose (CMC)Millipore Sigma80502-040
Centrimonium bromide (CTAB)MP BiomedicalsICN19400480
ChloroformFisher ChemicalC2984
Coating bufferAbcamab210899
Dichloromethane (DCM)Sigma Aldrich270997-1L
Diethyl etherFisher ChemicalE1384
Dodeacyl AmineAcros OrganicsAC117665000
Doxorubicin hydrochlorideFisher BioReagentsBP251610
L-ascorbic acidAcros OrganicsA61 100
Legato 100 Syringe PumpKD Scientific14 831 212
mPEG thiolLaysan BioNC0702454
Nonfat dry milkAndwin ScientificNC9022655
Potassium carbonateAcros OrganicsAC424081000
Phosphate saline bufferFisher BioReagentsBP3991
(Poly(caprolactone)Sigma Aldrich440744-250G
(Poly(caprolactone) triolAcros OrganicsAC190730250
Poly (lactic-co-glycolic acid) diacrylateCMTec280050
Potassium carbonateAcros OrganicsAC424081000
Recombinant HIV1 gp120 + gp41 proteinAbcamab49054
Silver nitrateAcros OrganicsS181 25
Sodium borohydrideFisher ChemicalS678 10
Tetrachloroauric acidFisher ChemicalG54 1
TrehaloseAcros OrganicsNC9022655
Triethyl amineAcros OrganicsAC157910010

References

  1. . Global Immunization: Worldwide Disease Incidence Available from: https://www.chop.edu/centers-programs/vaccine-education-center/global-immunization/diseases-and-vaccines-world-view (2018)
  2. Paul, A., Bera, M., Gupta, P., Singh, N. D. P. o-Hydroxycinnamate for sequential photouncaging of two different functional groups and its application in releasing cosmeceuticals. Organic and Biomolecular Chemistry. 17 (33), 7689-7693 (2019).
  3. Kumari, A., Yadav, S. K., Yadav, S. C. Biodegradable polymeric nanoparticles based drug delivery systems. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 75 (1), 1-18 (2010).
  4. Dai, C., Wang, B., Zhao, H. Microencapsulation peptide and protein drugs delivery system. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 41 (2-3), 117-120 (2005).
  5. Souery, W. N., et al. Controlling and quantifying the stability of amino acid-based cargo within polymeric delivery systems. Journal of Control Release. 300, 102-113 (2019).
  6. Wang, W. Advanced protein formulations. Protein Science. 24 (7), 1031-1039 (2015).
  7. Lee, J., et al. An ultraviolet-curable, core-shell vaccine formed via phase separation. Journal of Biomedical Materials Research Part A. , (2019).
  8. Kittler, S., Hickey, S. G., Wolff, T., Eychmüller, A. Easy and Fast Phase Transfer of CTAB Stabilised Gold Nanoparticles from Water to Organic Phase. Zeitschrift für Physikalische Chemie. 229, 235 (2015).
  9. Soliman, M. G., Pelaz, B., Parak, W. J., del Pino, P. Phase Transfer and Polymer Coating Methods toward Improving the Stability of Metallic Nanoparticles for Biological Applications. Chemistry of Materials. 27 (3), 990-997 (2015).
  10. Arun Kumar, S., Good, J., Hendrix, D., Yoo, E., Kim, D., Deo, K. A., Jhan, Y. Y., Gaharwar, A. K., Bishop, C. J. Nanoengineered Light-Activatable Polybubbles for On?Demand Therapeutic Delivery. Adv. Funct. Mater. , 2003579 (2020).
  11. Wuthrich, P., Ng, S. Y., Fritzinger, B. K., Roskos, K. V., Heller, J. Pulsatile and delayed release of lysozyme from ointment-like poly(ortho esters). Journal of Controlled Release. 21 (1), 191-200 (1992).
  12. Wang, W. Instability, stabilization, and formulation of liquid protein pharmaceuticals. International Journal of Pharmaceutics. 185 (2), 129-188 (1999).
  13. Wong, D. Y., Hollister, S. J., Krebsbach, P. H., Nosrat, C. Poly(epsilon-caprolactone) and poly (L-lactic-co-glycolic acid) degradable polymer sponges attenuate astrocyte response and lesion growth in acute traumatic brain injury. Tissue Engineering. 13 (10), 2515-2523 (2007).
  14. Davoodi, P., et al. Drug delivery systems for programmed and on-demand release. Advanced Drug Delivery Reviews. 132, 104-138 (2018).
  15. Huang, Y. C., Lei, K. F., Liaw, J. W., Tsai, S. W. The influence of laser intensity activated plasmonic gold nanoparticle-generated photothermal effects on cellular morphology and viability: a real-time, long-term tracking and monitoring system. Photochemical and Photobiological Sciences. 18 (6), 1419-1429 (2019).
  16. Link, S., Burda, C., Nikoobakht, B., El-Sayed, M. A. Laser-Induced Shape Changes of Colloidal Gold Nanorods Using Femtosecond and Nanosecond Laser Pulses. The Journal of Physical Chemistry B. 104 (26), 6152-6163 (2000).
  17. . Chlorine Available from: https://www.epa.gov/sites/production/files/2016-09/documents/chlorine.pdf (2000)

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

164NIR

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved