JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

בתאומים מונוכוריונים עם רצף פוליציטמיה של אנמיה תאומה (TAPS), התאום התורם וחלק השליה המקביל לו חיוורים, בעוד שלתאום המקבל ולחלק השליה שלו יש היבט פלטורי. מוצג כאן פרוטוקול לכימות הבדלי הצבע בצד האימהי של שליית TAPS לאחר הלידה.

Abstract

רצף פוליציטמיה של אנמיה תאומים (TAPS) מתרחש ב-5% מהתאומים המונוכוריוניים ומאופיין בהבדלים גדולים בהמוגלובין בין תאומים. קריטריוני האבחון לאחר הלידה ל-TAPS מבוססים על פרמטרים המטולוגיים ומאפייני שליה. בדיקת שליה לאחר הלידה מראה שצבע הצד האימהי בין טריטוריות השליה של התאומים האנמיים והפוליציטמיים שונה להפליא. הבדל הצבע בשליה TAPS גבוה יותר בהשוואה לשליה מונוכוריונית עם עירוי עוברי-עוברי חריף סביב הלידה; לפיכך, זה משמש כקריטריון אבחון נוסף עבור TAPS. תוכנה כגון ImageJ מאפשרת מדידה מבוססת מחשב של עוצמת הצבע בשליות TAPS. עם זאת, טרם תוארה שיטה מפורטת לחישוב הבדלי צבע בין רכיבים אנמיים ופוליציתמיים של שליית TAPS. הפרוטוקול המוצג כאן מספק שיטה שלב אחר שלב לניתוח הבדלי צבע בצד האימהי של שליית TAPS באמצעות תוכנת ImageJ.

Introduction

TAPS היא צורה כרונית של תסמונת עירוי עוברי-עוברי ומאופיינת בהבדל גדול בהמוגלובין בין תאומים (Hb) ללא סימנים של רצפי אוליגו-פוליהידראמניוס1. הפתוגנזה העיקרית של TAPS קשורה לארכיטקטורת השליה הייחודית, עם רק כמה אנסטומוזות זעירות המאפשרות עירוי כרוני ובמהירות נמוכה מהתורם (תאום אנמי) למקבל (תאום פוליציטמי)2,3,4. אבחנה לאחר לידה של TAPS מבוססת על בדיקות המטולוגיות המראות הבדל גדול בהמוגלובין והבדל גדול בספירת הרטיקולוציטים ו/או הזרקת שליה עם צבע המראה רק אנסטומוזה זעירה5. עם זאת, ספירת הרטיקולוציטים לא תמיד נמדדת בלידה, והזרקת שליה אינה מבוצעת באופן שגרתי ברוב המרכזים לרפואת העובר. קריטריון אבחון נוסף עשוי להיות שימושי כדי לסייע באבחון מקרים ללא מדידות ספירת רשתית וללא הזרקת צבע שליה. הבדל צבע בולט בין העור החיוור של תאום תורם לעור הרב של התאום המקבל קיים באופן עקבי בתאומים TAPS בלידה. הבדל צבע דומה של הצד האימהי בין טריטוריות השליה של התאומים האנמיים והפוליציטמיים מתגלה גם בבדיקה גסה.

לאחרונה הועלתה השערה כי הבדל צבע שליה זה עשוי לשמש כשיטה פשוטה ומדויקת לאישור אבחנת TAPS לאחר לידה6. כימות הבדלי הצבע בשליות TAPS חוסך זמן בהשוואה להזרקת שליה. בנוסף, כימות הבדלי הצבע בשליות TAPS הוא חסכוני יותר בהשוואה לספירת הרטיקולוציטים. החומרים המשמשים בשיטה זו זמינים בקלות במסגרות קליניות לכן, שיטה זו מספקת קריטריונים פשוטים ומדויקים לאבחון TAPS. הפרוטוקול מתאר שיטה מפורטת לכימות הבדלי צבע מהצד האימהי של שליה מונוכוריונית עם TAPS.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

פרוטוקול זה אושר על ידי ועדת האתיקה של המרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן, ובדיקה לאחר הלידה של שליה תאומה חד-כוריונית אנושית היא חלק מהטיפול הסטנדרטי במרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן. קבלת הסכמה לבדיקה לאחר הלידה של שליה תאומה חד-כוריונית אנושית מוותרת במרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן.

1. איסוף שליה של TAPS ובדיקה ברוטו

  1. השתמש בכל השליות התאומות החד-כוריוניות האנושיות עם TAPS הניתנים בכל גיל הריון. שמור על השליה התאומה האנושית החד-כוריונית שלמה ככל האפשר. העבירו את השליה המונוכוריונית בעדינות ככל האפשר, אם יש צורך בהסרה ידנית.
    הערה: לאחר הלידה, מיילדות או ניאונטולוגים צריכים להעביר את שליית TAPS לקופסת פלסטיק ולאחר מכן למעבדה.
  2. כאשר התינוק הראשון נולד, השתמש במהדק אחד כדי להדק את חבל הטבור כדי לסמן את סדר הלידה כראשון. כאשר התינוק השני נולד, השתמש בשני מהדקים כדי להדק את חבל הטבור כדי לסמן את סדר הלידה כשני.
  3. יש לבחון את השליה מבחינה מקרוסקופית, כולל שלמות השליה, סוגי החדרות חבל הטבור, מספר כלי הטבור ובדיקה גסה של הקרום המחלק כדי לאשר את הכוריוניות. אסוף את הממברנה הבין-תאומה לאבחון פתולוגי של מונוכוריוניות. קוטר השליות של TAPS תלוי בגיל ההריון.
    הערה: יש לבצע בדיקה תוך שבוע לאחר הלידה כדי למנוע היווצרות קרישי דם דביקים בצד האם.
  4. שומרים את השליה בקירור (1-4 מעלות צלזיוס) בקופסת פלסטיק יבשה עד לבדיקה, במידת הצורך.

2. הכנת הצד האימהי השליה

  1. חתוך את קרום מי השפיר לאורך קצה השליה בעזרת מספריים. שימו לב לכלי הדם על הממברנה ואם קיימת החדרת חבל הטבור כדי למנוע זרימת דם ממסת השליה.
    הערה: בהחדרת חבל הטבור, כלי הדם מחבל הטבור עוברים אל פני קרום מי השפיר למרחק מה לפני שהם נצמדים למסת השליה. אם חותכים את כלי הדם ה"עירומים", הדם ממסת השליה עלול לזרום החוצה ולעשות בלגן.
  2. הסר קרישי דם בזהירות כדי למנוע נזק לאונות השליה.
  3. ארגן את אונות השליה בצד האימהי כדי לחסל את הפער בין האונות. לשליה יש בדרך כלל כ-15 אונות וניתן לזהות אותן בצד האימהי.

3. הכנה לתיעוד

  1. הניחו את השליה על לוח פלסטיק כשהצד האימהי פונה כלפי מעלה.
  2. חשוף את הצד האימהי של השליה לאור (פיזור אחיד באמצעות שתי מנורות זהות בצד שמאל וימין). השתמש במנורות שיש להן פונקציה להתאמת עוצמת האור.
  3. כדי להפחית את ההשתקפות, צלם תמונות דיגיטליות עם מצלמה (טבלת חומרים) בתנאי תאורה קלים והימנע מחשיפה ישירה למקור האור.
  4. צלם תמונות בניצב לצד האימהי של השליה.

4. מדידה ממוחשבת באמצעות ImageJ

  1. פתח את ImageJ במחשב על ידי לחיצה על סמל התוכנה.
  2. לחץ על "קובץ", ואז על "פתח" כדי לפתוח את תמונת השליה. לאחר פתיחת התמונה הנדרשת, לחץ על "תמונה" | "צבע", ולאחר מכן "כלי ערוצים" כדי לבחור את "צבע" מרשימת השחרורים.
    הערה: התוכנה יכולה לזהות באופן אוטומטי את צבע האובייקט הנמדד. השליה אדומה. בתוכנה, לאחר לחיצה על "צבע", תמונת השליה תומר אוטומטית לערוץ ספקטרום אדום.
  3. לחץ על "בחירות ביד חופשית" כדי לעצב בהתאמה את החלק הפלטורי והחיוור של התאומים הפוליציטמיים והאנמיים באמצעות בדיקה ויזואלית של עוצמת צבע שונה של הצד האימהי של השליה.
  4. לחץ על "נתח" | "היסטוגרמה". השג את ההיסטוגרמה של עוצמת הצבע לאחר בחירת האזור הצלע או האזור החיוור, בהתאמה. המצב המוצג בהיסטוגרמת העוצמה מייצג את הצבע הנוכח ביותר באזור השליה שנבחר.
  5. חשב את יחס הפרש הצבעים על ידי חלוקת מצב עוצמת הצבע של התאום האנמי במצב עוצמת הצבע של התאום הפוליציטמי.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

בדיקת שליה מספקת מידע רב ערך לאבחון TAPS. שליות TAPS מאופיינות בנוכחות של מעט אנסטומוזות וסקולריות קטנות1 (איור 1, איור 2). תכונה זו של שליית TAPS קשורה לפתוגנזה של TAPS ומהווה קריטריון אבחון לאחר הלידה. בדומה לצבע היילודים בלידה, חלק הש...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

נקודות מפתח להשגת בדיקה אופטימלית על סמך הניסיון שלנו כוללות: 1) מתן השליה בעדינות ככל האפשר כדי למנוע נזק, במיוחד כאשר מצוין הסרה ידנית; 2) בדיקת שליית MC זמן קצר לאחר הלידה כדי למנוע היווצרות קרישי דבק (רצוי תוך מספר ימים); 3) הסרה עדינה של כל קרישי הדם, הימנעות מנזק לאונות הש...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

מחקר זה מומן על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מספר מענק: 81801465), פרויקט סנמינג לרפואה בשנג'ן (מספר מענק: SZSM201512012) ותוכנית המחקר והפיתוח הלאומית של סין (מספר מענק: 2018YFC1002900).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
20 ml syringesBD Plastipak300613
Color dyeRoyal Talens Schoolverf36716010 (blue); 36715010 (green); 36712350 (yellow); 36713570 (pink)
Digital cameraCanon Inc.ixus 125 hs
ImageJNational Institute of HealthFor Windows ImageJ bundled with 64-bit Java 1.8.0_112
Umbilical cathetersVygon1270.08 (8 F)
1270.08 (5 F)
1270.04 (4 F)
1270.03 (3.5 F)
1270.02 (2.5 F)

References

  1. Lopriore, E., et al. Twin anemia-polycythemia sequence in two monochorionic twin pairs without oligo-polyhydramnios sequence. Placenta. 28 (1), 47-51 (2007).
  2. Zhao, D., et al. Placental share and hemoglobin level in relation to birth weight in twin anemia-polycythemia sequence. Placenta. 35 (12), 1070-1074 (2014).
  3. Lopriore, E., et al. Assessment of feto-fetal transfusion flow through placental arterio-venous anastomoses in a unique case of twin-to-twin transfusion syndrome. Placenta. 28 (2-3), 209-211 (2007).
  4. Lopriore, E., et al. Quantification of feto-fetal transfusion rate through a single placental arterio-venous anastomosis in a monochorionic twin pregnancy. Placenta. 30 (3), 223-225 (2009).
  5. Tollenaar, L. S. A., et al. Improved prediction of twin anemia-polycythemia sequence by delta middle cerebral artery peak systolic velocity: new antenatal classification system. Ultrasound in Obstetrics and Gynecology. 53 (6), 788-793 (2019).
  6. Tollenaar, L. S., et al. Color Difference in Placentas with Twin Anemia-Polycythemia Sequence: An Additional Diagnostic Criterion. Fetal Diagnosis and Therapy. 40 (2), 123-127 (2016).
  7. Zhao, D. P., et al. Prevalence, size, number and localization of vascular anastomoses in monochorionic placentas. Placenta. 34 (7), 589-593 (2013).
  8. De Paepe, M. E., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations. Pediatric and Developmental Pathology. 5 (1), 37-44 (2002).
  9. Lewi, L., et al. Placental sharing, birthweight discordance, and vascular anastomoses in monochorionic diamniotic twin placentas. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 197 (6), 581-588 (2007).
  10. Robertson, E. G., Neer, K. J. Placental injection studies in twin gestation. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 147 (2), 170-174 (1983).
  11. Lewi, L., et al. The outcome of monochorionic diamniotic twin gestations in the era of invasive fetal therapy: a prospective cohort study. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 199 (5), (2008).
  12. Slaghekke, F., et al. Fetoscopic laser coagulation of the vascular equator versus selective coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: an open-label randomised controlled trial. Lancet. 383 (9935), 2144-2151 (2014).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

TAPSImageJ

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved