JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

דימום אינטרפרנכימלי ודלקת עצבית המלווה בחבלה מוחית עלולים לגרום לפגיעה מוחית משנית חמורה. פרוטוקול זה מפרט מודל השפעה קליפתית מבוקרת עכבר (CCI) המאפשר לחוקרים לחקור דימום, קונטוזיה ותגובות חיסוניות פוסט-טראומטיות ולחקור טיפולים פוטנציאליים.

Abstract

חבלה מוחית היא בעיה רפואית חמורה המשפיעה על מיליוני אנשים ברחבי העולם מדי שנה. יש צורך דחוף להבין את המנגנון הפתופיזיולוגי ולפתח אסטרטגיה טיפולית יעילה להפרעה נוירולוגית הרסנית זו. דימום אינטרפרנכימלי ותגובה דלקתית פוסט-טראומטית הנגרמת על ידי השפעה פיזית ראשונית יכולים להחמיר את הפעלת מיקרוגליה/מקרופאגים ודלקת עצבית, אשר לאחר מכן מחמירים את הפתולוגיה במוח. אנו מספקים כאן פרוטוקול השפעה קורטיקלית מבוקרת (CCI) שיכול לשחזר חבלה קורטיקלית ניסיונית בעכברים באמצעות מערכת השפעה פנאומטית כדי להעביר כוח מכני עם גודל ומהירות הניתנים לשליטה על פני השטח הדוראליים. מודל פרה-קליני זה מאפשר לחוקרים לגרום לחבלה מוחית מוקדית בינונית חמורה בעכברים ולחקור מגוון רחב של התפתחויות פתולוגיות פוסט-טראומטיות, כולל חבלה בדימום, הפעלת מיקרוגליה/מקרופאגים, רעילות ברזל, פגיעה אקסונלית, כמו גם ליקויים נוירו-התנהגותיים לטווח קצר וארוך. הפרוטוקול הנוכחי יכול להיות שימושי לחקר ההשפעות ארוכות הטווח של התערבויות פוטנציאליות לחבלה מוחית.

Introduction

חבלה מוחית היא צורה של פגיעה מוחית טראומטית המדורגת גבוה בין בעיות הבריאות הקטלניות ביותר בחברה המודרנית1. זה נגרם בעיקר על ידי אירועים מקריים כגון תאונת דרכים שגורמת לכוחות חיצוניים להפעיל אנרגיה מכנית על הראש. פגיעה מוחית טראומטית משפיעה על כ -3.5 מיליון אנשים ומהווה 30% מכלל מקרי המוות הקשורים לפציעה חריפה בארה"ב בכל שנה2. חולים ששורדים חבלה מוחית סובלים לעתים קרובות מהשלכות ארוכות טווח הכוללות חולשה מוטורית מוקדית, תפקוד חושי לקוי ומחלות נפש1.

הפגיעה העיקרית של חבלה מוחית נגרמת על ידי גורמים מכניים כולל כוחות מתיחה וקריעה, מה שמוביל לעיוות מיידי של מבנה פרנכימלי ומוות תאי CNS מוקד3. דימום קונטוזיה הוא מונח כללי לדימום מוחי עקב קרע בכלי הדם במקום של חבלת ראש4. באופן ספציפי, דימום intraparenchymal מתרחשת מיד לאחר חבלה מוחית המוביל היווצרות hematoma מאוחר. בתוך ההמטומה, המוגלובין וברזל חופשי המשתחררים מתאי הדם האדומים יכולים לגרום עוד יותר לרעילות הקשורה לדם 5,6 אשר גורמת לפריצה, בצקת במוח ועליית לחץ תוך גולגולתי 5,6. התפקודים המשותפים של נוירונים (אקסונים), גליה, כלי דם ורקמות תומכות נפגעים גם הם על ידי אפקט המסה של המטומה7. בנוסף, דלקת עצבית מתמשכת ומפושטת עם ניוון עצבי מתקדם נמשכת חודשים וגורמת לנזק משני במוח8.

הפעלת מיקרוגליה היא אחת התכונות הפתולוגיות החשובות הרבות של קונטוזיה מוחית 9,10. לאחר חישה של הדפוסים המולקולריים הקשורים לנזק (DAMPs) ודליפה של דם ברקמה הפגועה, תאי מיקרוגליה מופעלים מעוררים דלקת עצבית אשר מקדמת נזק מוחי משני11. בנוסף, כימואטרקטנט המשתחרר מתאי מיקרוגליה מקדם חדירת תאי מערכת החיסון ההיקפית לטריטוריה הטראומטית וכתוצאה מכך ייצור מיני חמצן תגובתי וציטוקינים מעודדי דלקת. זה יוצר סביבה פרו-דלקתית שמנציחה את עצמה וגורמת לפגיעה מוחית מתקדמת 9,12. בינתיים, מיקרוגליה עם פנוטיפ מופעל חלופי יכולה לתרום לשיקום הומיאוסטטי של רקמות ולתיקון המוח באמצעות פינוי פסולת מהרקמה הפגועה13. מניעה של דלקת עצבית משנית על-ידי הפחתת תגובות חיסוניות מזיקות של תאי מיקרוגליה הוכחה כיעילה במיוחד לקידום התאוששות המוח מחבלה מוחית 3,9,10,12.

מספר מודלים פרה-קליניים פותחו לחקר פגיעה מוחית טראומטית, כולל מודל ירידה במשקל, פגיעה בכלי הקשה בנוזל הצידי, ומודל גל הדף14,15. עם זאת, לכל אחד מהמודלים הללו יש חולשה משלהם, כולל שיעור תמותה גבוה במהלך ההליך, שחזור נמוך של תוצאות היסטולוגיות, ושונות גבוהה של פציעה שנגרמה בין מעבדות16,17. לשם השוואה, מודל ההשפעה המבוקרת של קליפת המוח (CCI) מתאים יותר לחקר קונטוזיה מוחית מוקדית בגלל השליטה המדויקת שלו ויכולת השחזור הגבוהה שלו 14,15,18,19.

יתר על כן, באמצעות מניפולציה של פרמטרים של עיוות ביומכני כגון מהירות ועומק הפגיעה, ניתן לשלוט בחומרת הנזק המושרה כדי לייצר טווח רחב של סדרי גודל של פגיעה, מה שמאפשר לחוקרים לחקות רמות שונות של ליקוי הנראות לעתים קרובות בחולים17. המודל הפרה-קליני של CCI פותח לראשונה בשנת 189620. מאז, CCI היה המודל הרלוונטי הרחב ביותר ששונה לשימוש בפרימטים21, חזירים22, כבשים23, חולדות24 ועכברים25. יחד, תכונות אלה הופכות את CCI לאחד המודלים הניסיוניים המתאימים ביותר לחבלה מוחית26.

המעבדה שלנו משתמשת במערכת השפעה פנאומטית CCI זמינה מסחרית ובפרמטרים של דפורמציה ביומכנית שנבדקה כדי לייצר חבלה מוחית מוקדית חמורה בינונית שמטריטוריה את האזורים הסנסוריים והמוטוריים העיקריים בקליפת המוח מבלי לפגוע בהיפוקמפוס27,28. אנו ואחרים הדגמנו כי הליך CCI זה יכול לשמש לחקר מאפיינים קליניים של חבלה מוחית אנושית, כולל אובדן רקמת מוח, פגיעה עצבית, דימום תוך פרנכימלי, דלקת עצבית וחסר סנסומוטורי 24,25,27,28,29,30. כאן, אנו מפרטים פרוטוקול סטנדרטי לביצוע CCI עכבר המאפשר לשאול שאלות לגבי אובדן מיאלין המושרה על ידי CCI, שקיעת ברזל, דלקת CNS, רעילות דימומית והתגובות של מיקרוגליה/מקרופאגים לאחר חבלה מוחית מוקדית.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

כל ההליכים המתוארים בפרוטוקול זה נערכו תחת אישור הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים בבית החולים הכללי צ'נג סין ובמכללה הלאומית לרפואה של אוניברסיטת טייוואן. בפרוטוקול זה נעשה שימוש בעכברי בר זכרים בני שמונה עד עשרה שבועות מסוג C57BL/6.

1. אינדוקציה הרדמה

  1. מרדים את העכבר עם ~4% איזופלורן מעורבב עם אוויר החדר ב~0.2 ליטר/דקה בתא אינדוקציה המחובר לוופורייזר איזופלורן.
  2. ודא שדפוס הנשימה חלק. בדוק את עומק ההרדמה על ידי אישור חוסר רפלקס צביטת הבוהן בחיה.

2. הכנה טרום ניתוחית

  1. גילח את ראש העכבר עם קוצצים חשמליים בכיוון קאודלי עד רוסטרלי. אין לקצץ את שפם העכבר.
    הערה: אובדן שפם עלול להשפיע על הדיוק של תוצאות בדיקות התנהגותיות עוקבות.
  2. הנח את העכבר על המסגרת הסטריאוטקסית. הכניסו בזהירות את מוטות האוזניים לתעלות האוזן. ודא שראש העכבר מיוצב על ידי שני פסי האוזניים באופן שווה.
  3. יש להכניס את חרוט האף ולשמור על הרדמה באיזופלורן של 1%-2% למשך כל תקופת הניתוח.
  4. יש למרוח משחת עיניים על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות במהלך הניתוח. שמור את החיה על כרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של 37 °C (77 °F).
  5. יש לחטא את הראש המגולח בבטדין ולאחר מכן 70% אלכוהול באמצעות צמר גפן סטרילי. חזור על הפעולה שלוש פעמים.

3. ניתוח CCI

  1. מתן 100 μL של Bupivacaine (0.25%) תת עורית באמצעות מחט אינסולין 31 G לפני החתך. יש לעסות בעדינות את אזור ההזרקה לספיגה טובה יותר.
    הערה: הרדמה מקומית זו מספקת הקלה בכאב ישירות במקום הניתוח.
  2. בצע חתך אורכי (~ 1.5 ס"מ) לאורך קו האמצע על הקרקפת עם אזמל או מספריים. השתמש hemostat להחזיק את העור בצד ימין ולאפשר את הגולגולת החשופה להתייבש במשך 1 דקה. השתמש בצמר גפן סטרילי כדי לנקות את שאריות הדם והרקמות על הגולגולת.
  3. ודא שראש העכבר ישר במישור האופקי.
    1. זהה ציוני דרך אנטומיים ברגמה ולמבדה וסמן את שני המקומות בטוש/עיפרון כירורגי סטרילי.
    2. ודא כי הראש של החיה הוא ברמה בכיוון rostral-caudal. עשו זאת על ידי מדידת קואורדינטות Z של ברגמה ולמבדה באמצעות מחט אינסולין 31 גרם המחוברת למסגרת הסטריאוטקסית.
      הערה: יש לכוונן את האוזנייה אנכית במידת הצורך.
    3. בצע את המיקום האופקי של ראש החיה על ידי ביצוע אותו הליך של בדיקת קואורדינטות Z בקו האמצע יחד עם שני מיקומים מתאימים בצד שמאל וימין של קו האמצע וכוונן את מוטות האוזניים במידת הצורך.
      הערה: מיקום יציב ויציב של ראש בעל החיים חיוני ליכולת השחזור והאמינות של מודל CCI.
  4. השתמש באותה מחט אינסולין 31 גרם כדי לזהות את אתר כריתת הגולגולת. הגדר את מקור XY לברגמה והזז לרוחב את המחט 3 מ"מ ימינה. סמנו תנוחה זו כמקום כריתת הגולגולת וציירו עיגול בקוטר 4 מ"מ על הגולגולת בטוש/עיפרון כירורגי סטרילי.
  5. השתמש במקדח מיקרו מהיר עם טרפין (קוטר 4 מ"מ) כדי לחתוך לאורך העיגול המתואר בעיפרון כדי ליצור חור פתוח בקוטר 4 מ"מ. השתמש בהגדרת מהירות של 20,000 סל"ד. הימנע מהפעלת לחץ עודף.
    הערה: בצע שלב זה במהירות (בדרך כלל תוך 30 שניות עד דקה אחת) כדי למנוע נזק תרמי למוח. הפעלת לחץ עודף בזמן הקידוח עלולה להוביל לחדירה מקרית שעלולה לדחוס ולפצוע את פני השטח של המוח.
  6. בזהירות להסיר את דש העצם עם פינצטה ולאחסן אותו באופן זמני במי מלח רגילים קרים כקרח. שטפו בעדינות את החור במי מלח רגילים לפני הפעלת לחץ על משטח המוח עם קצה צמר גפן כדי לעצור דימום.
  7. הגדר את קצה הפגיעה המעוגל בקוטר 2.5 מ"מ במכשיר CCI לזווית של 22.5°. אפס את קצה הפגיעה למשטח הדוראלי. הגדר את פרמטרי ההשפעה בתיבת הבקרה למהירות של 4 מ"ש ועומק עיוות של 2 מ"מ. משכו את קצה המתכת.
    הערה: אפס החוד בזמן שהוא נלחץ באופן סטטי ומעט על פני השטח הדוראלי במצב פעימה מלאה משפר את הדיוק של נקודת האפס ואת יכולת השחזור של רמת הפציעה.
  8. שחררו את הבוכנה כדי ליצור אימפקציה על המוח. הניחו צמר גפן סטרילי על האזור הפגוע כדי לעצור את הדימום.
  9. הניחו את דש העצם בחזרה למוח העכבר ואבטחו אותו במלט דנטלי. סגרו את הקרקפת עם דבק רקמות (למשל, 3M Vetbond).

4. התאוששות לאחר הניתוח

  1. הניחו את העכבר בכלוב התאוששות נקי עם מצעים מתחת למנורת החום עד להחלמה מלאה.
  2. לספק מזון צ'או לח ולתת קטופרופן (5 מ"ג / ק"ג) במשך יומיים רצופים לאחר הניתוח.
  3. בצע את ההליכים לעיל למעט שלבים 3.7 ו- 3.8 עבור בעלי חיים להדברת דמה.

5. המתת חסד עכבר

  1. המתת עכברים ביום המחקר על ידי מנת יתר של איזופלורן ולאחר מכן עריפת ראש.
    הערה: ניתן להשתמש במספר אסטרטגיות כדי להרדים את חיות הניסוי לפני איסוף הדגימות.
  2. לאסוף דגימות מוח לניתוח היסטולוגי.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

המחשה של מיקום סטריאוטקטי והליך קרניוטומיה.

מודל CCI ידוע ביציבותו וביכולת השחזור שלו בייצור פציעות החל מקלה ועד חמורה18. טכניקה סטריאוטקטית נכונה והליך קרניוטומיה הם גורמים עיקריים ביצירת פגיעה מוחית יציבה וניתנת לשחזור הנגרמת על-י?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

פרוטוקול CCI מייצר פגיעה מכנית במוח הניתנת לשחזור לצורך מחקר חבלה מוחית. השלבים הבאים חיוניים ליצירת פגיעה מוחית עקבית בבעלי חיים באמצעות פרוטוקול CCI זה.

ראשית, ראש העכבר צריך להיות מותקן ביציבות על המסגרת הסטריאוטקסית ואת ציוני הדרך האנטומיים ברגמה ולמבד?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

אנו מודים לדניה ג'יאנג על עריכת כתב היד ועל הקלט מלא התובנה. אנו מודים לג'יה סיואן לין על הסיוע בהכנת כתבי היד. עבודה זו נתמכה על ידי משרד המדע והטכנולוגיה של טייוואן (MOST 107-2320-B-002-063-MY2) ל- C.F.C.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
4mm Short Trephine DrillSalvin Dental Specialties, Inc.TREPH-SHORT-4
anti-Iba1 antibodyWako chemicals#019-19741
anti-Ly76 antibodyabcamab91113
carboxylate cement3M70201136010
cortical contusion injury impactorCustom Design & Fabrication, Inc.S/N 49-2004-C, eCCI Model 6.3CCI device (S/N 49-2004-C, eCCI Model 6.3)
cresyl violet acetateSigma-AldrichC5042
DAB staining kitVectorSK-4105
goat anti-rabbit IgG secondary antibody, Alexa Fluor 488InvitrogenA11034
goat anti-rat IgG secondary antibody, Alexa Fluor 594InvitrogenA11007
Mayer's HematoxylinScyTekHMM500
tweezersfine science tools11252-20 NO. 5
isofluranePanion & BF Biotech Inc.
Bupivacaine 0.25%Hospira
lithium carbonateSigma-Aldrich62470
steriotexic framestoelting
scissorsfine science tools14068-12
solvent blue 38Sigma-AldrichS3382

References

  1. Maas, A. I. R., et al. Traumatic brain injury: integrated approaches to improve prevention, clinical care, and research. The Lancet Neurology. 16 (12), 987-1048 (2017).
  2. Taylor, C. A., Bell, J. M., Breiding, M. J., Xu, L. Traumatic Brain Injury-Related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths - United States, 2007 and 2013. Morbidity and Mortality Weekly Report Surveillance Summaries. 66 (9), 1-16 (2007).
  3. Pearn, M. L., et al. Pathophysiology Associated with Traumatic Brain Injury: Current Treatments and Potential Novel Therapeutics. Cellular and Molecular Neurobiology. 37 (4), 571-585 (2017).
  4. Nyanzu, M., et al. Improving on Laboratory Traumatic Brain Injury Models to Achieve Better Results. International Journal of Medical Sciences. 14 (5), 494-505 (2017).
  5. Zhao, M., et al. Iron-induced neuronal damage in a rat model of post-traumatic stress disorder. Neuroscience. 330, 90-99 (2016).
  6. Cepeda, S., et al. Contrecoup Traumatic Intracerebral Hemorrhage: A Geometric Study of the Impact Site and Association with Hemorrhagic Progression. Journal of Neurotrauma. 33 (11), 1034-1046 (2016).
  7. Robicsek, S. A., Bhattacharya, A., Rabai, F., Shukla, K., Dore, S. Blood-Related Toxicity after Traumatic Brain Injury: Potential Targets for Neuroprotection. Molecular Neurobiology. 57 (1), 159-178 (2020).
  8. Morganti-Kossmann, M. C., Semple, B. D., Hellewell, S. C., Bye, N., Ziebell, J. M. The complexity of neuroinflammation consequent to traumatic brain injury: from research evidence to potential treatments. Acta Neuropathologica. 137 (5), 731-755 (2019).
  9. Ramlackhansingh, A. F., et al. Inflammation after trauma: microglial activation and traumatic brain injury. Annals of Neurology. 70 (3), 374-383 (2011).
  10. Wang, G. H., et al. Microglia/macrophage polarization dynamics in white matter after traumatic brain injury. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 33 (12), 1864-1874 (2013).
  11. Karve, I. P., Taylor, J. M., Crack, P. J. The contribution of astrocytes and microglia to traumatic brain injury. British Journal of Pharmacology. 173 (4), 692-702 (2016).
  12. Huber-Lang, M., Lambris, J. D., Ward, P. A. Innate immune responses to trauma. Nature Immunology. 19 (4), 327-341 (2018).
  13. Russo, M. V., McGavern, D. B. Inflammatory neuroprotection following traumatic brain injury. Science. 353 (6301), 783-785 (2016).
  14. Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. Animal models of traumatic brain injury. Nature Reviews Neuroscience. 14 (2), 128-142 (2013).
  15. Johnson, V. E., Meaney, D. F., Cullen, D. K., Smith, D. H. Animal models of traumatic brain injury. Handbook of Clinical Neurology. 127, 115-128 (2015).
  16. Albert-Weissenberger, C., Siren, A. L. Experimental traumatic brain injury. Experimental & Translational Stroke Medicine. 2 (1), 16(2010).
  17. Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. Animal Models of Traumatic Brain Injury and Assessment of Injury Severity. Molecular Neurobiology. 56 (8), 5332-5345 (2019).
  18. Osier, N. D., Korpon, J. R., Dixon, C. E. Brain Neurotrauma: Molecular, Neuropsychological, and Rehabilitation Aspects. Frontiers in Neuroengineering. Kobeissy, F. H. , (2015).
  19. Osier, N. D., Dixon, C. E. The Controlled Cortical Impact Model: Applications, Considerations for Researchers, and Future Directions. Frontiers in Neurology. 7, 134(2016).
  20. Kramer, S. P. A Contribution to the Theory of Cerebral Concussion. Annals of Surgery. 23 (2), 163-173 (1896).
  21. King, C., et al. Brain temperature profiles during epidural cooling with the ChillerPad in a monkey model of traumatic brain injury. Journal of Neurotrauma. 27 (10), 1895-1903 (2010).
  22. Costine, B. A., et al. Neuron-specific enolase, but not S100B or myelin basic protein, increases in peripheral blood corresponding to lesion volume after cortical impact in piglets. Journal of Neurotrauma. 29 (17), 2689-2695 (2012).
  23. Anderson, R. W., Brown, C. J., Blumbergs, P. C., McLean, A. J., Jones, N. R. Impact mechanics and axonal injury in a sheep model. Journal of Neurotrauma. 20 (10), 961-974 (2003).
  24. Chen, S., Pickard, J. D., Harris, N. G. Time course of cellular pathology after controlled cortical impact injury. Experimental Neurology. 182 (1), 87-102 (2003).
  25. Lee, H. F., Lin, J. S., Chang, C. F. Acute Kahweol Treatment Attenuates Traumatic Brain Injury Neuroinflammation and Functional Deficits. Nutrients. 11 (10), 2301(2019).
  26. Dixon, C. E., Clifton, G. L., Lighthall, J. W., Yaghmai, A. A., Hayes, R. L. A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 39 (3), 253-262 (1991).
  27. Hung, T. H., et al. Deletion or inhibition of soluble epoxide hydrolase protects against brain damage and reduces microglia-mediated neuroinflammation in traumatic brain injury. Oncotarget. 8 (61), 103236-103260 (2017).
  28. Wu, C. H., et al. Post-injury treatment with 7,8-dihydroxyflavone, a TrkB receptor agonist, protects against experimental traumatic brain injury via PI3K/Akt signaling. PLoS One. 9 (11), 113397(2014).
  29. Chen, S. F., Su, W. S., Wu, C. H., Lan, T. H., Yang, F. Y. Transcranial Ultrasound Stimulation Improves Long-Term Functional Outcomes and Protects Against Brain Damage in Traumatic Brain Injury. Molecular Neurobiology. 55 (8), 7079-7089 (2018).
  30. Su, W. S., Wu, C. H., Chen, S. F., Yang, F. Y. Low-intensity pulsed ultrasound improves behavioral and histological outcomes after experimental traumatic brain injury. Scientific Reports. 7 (1), 15524(2017).
  31. Chen, S. F., et al. Salidroside improves behavioral and histological outcomes and reduces apoptosis via PI3K/Akt signaling after experimental traumatic brain injury. PLoS One. 7 (9), 45763(2012).
  32. Chen, C. C., et al. Berberine protects against neuronal damage via suppression of glia-mediated inflammation in traumatic brain injury. PLoS One. 9 (12), 115694(2014).
  33. Furmanski, O., Nieves, M. D., Doughty, M. L. Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells. Journal of Visualized experiments. (149), e59561(2019).
  34. Romine, J., Gao, X., Chen, J. Controlled cortical impact model for traumatic brain injury. Journal of Visualized experiments. (90), e51781(2014).
  35. Saatman, K. E., Feeko, K. J., Pape, R. L., Raghupathi, R. Differential behavioral and histopathological responses to graded cortical impact injury in mice. Journal of Neurotrauma. 23 (8), 1241-1253 (2006).
  36. Robertson, C. L., et al. Cerebral glucose metabolism in an immature rat model of pediatric traumatic brain injury. Journal of Neurotrauma. 30 (24), 2066-2072 (2013).
  37. Adelson, P. D., Fellows-Mayle, W., Kochanek, P. M., Dixon, C. E. Morris water maze function and histologic characterization of two age-at-injury experimental models of controlled cortical impact in the immature rat. Child's Nervous System. 29 (1), 43-53 (2013).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

160

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved