JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

בהקשר הקליני, חולים עם סרטן הלבלב מקומי יעברו כריתת לבלב ואחריו טיפול אדג'ובנטי. פרוטוקול זה שדווח כאן נועד לבסס שיטה בטוחה ויעילה של מידול תרחיש קליני זה בעכברים עירומים, באמצעות השתלה אורתוטופית של סרטן הלבלב ואחריו כריתת לבלב דיסטלית וכריתת טבור.

Abstract

קיים מחסור במודלים משביעי רצון של בעלי חיים לחקר טיפול אדג'ובנטי ו/או ניאו-ג'ובנטי בחולים הנחשבים לניתוח של סרטן הלבלב (PC). כדי לטפל במחסור זה, אנו מתארים מודל העכבר מעורבים השתלה אורתוטופית של המחשב ואחריו כריתת לבלב דיסטלי ו splenectomy. המודל הוכח כבטוח וגמיש כראוי לחקר גישות טיפוליות שונות בהגדרות אדג'ובנטיות וניאו-אדג'ובנטיות.

במודל זה, גידול בלבלב נוצר לראשונה על ידי השתלת תערובת של תאים סרטניים בלבלב האנושי (לוציפראז מתויג AsPC-1) וסרטן האדם הקשורים תאים כוכבי הלבלב לתוך הלבלב הדיסטלי של עכברי עירום Balb/c אתימי. לאחר שלושה שבועות, הסרטן הוא resected על ידי לפרוטומיה מחדש, כריתת לבלב דיסטלי ו splenectomy. במודל זה, הדמיה bioluminescence ניתן להשתמש כדי לעקוב אחר ההתקדמות של התפתחות סרטן והשפעות של כריתה / טיפולים. לאחר כריתה, ניתן לתת טיפול אדג'ובנטי. לחלופין, ניתן לתת טיפול ניאואדג'ובנטי לפני כריתה.

מוצגים נתונים מייצגים מ-45 עכברים. כל העכברים עברו כריתת לבלב דיסטלית מוצלחת / כריתת טבור ללא בעיות של עצירת דימום. שולי לבלב פרוקסימליים מקרוסקופיים הגדולים מ- 5 מ"מ הושגו ב- 43 (96%) עכברים. שיעור ההצלחה הטכנית של כריתת הלבלב היה 100%, עם 0% תמותה מוקדמת ותחלואה. אף אחת מהחיות לא מתה במהלך השבוע שלאחר כריתה.

לסיכום, אנו מתארים טכניקה חזקה הניתנת לשחזור עבור מודל כריתה כירורגית של סרטן הלבלב בעכברים המחקה את התרחיש הקליני. המודל עשוי להיות שימושי עבור בדיקות של טיפולים אדג'ובנטיים ו neoadjuvant.

Introduction

אדנוקרצינומה צינורית הלבלב (סרטן הלבלב [PC]) קשורה פרוגנוזה עניים1. כריתה כירורגית נשאר הטיפול רק פוטנציאל מרפא עבור PC ויש לשקול עבור חולים המציגים עם מחלה בשלב מוקדם. למרבה הצער, אפילו עם כריתת R0 (כלומר, שולי כריתה ללא גידול), שיעור הישנות (מקומי או ממחלה גרורתית שלא זוהתה) הוא גבוה2,3. לכן, טיפול אדג'ובנטי מערכתי מצוין כמעט בכל החולים שעוברים כריתה4. יתר על כן, בעוד טיפול neoadjuvant מומלץ כעת רק עבור סרטן גבולי resectable, האינדיקציות שלה מתרחבים כך השימוש השגרתי שלה הוא המוקד של מחקר קליני רב5,6,7,8. על מנת לפתח גישות טיפוליות חדשניות עבור מחשב מעורב כריתה, גישות אלה צריך להיות מוערך תחילה במודלים פרה קליניים כי במדויק recapitulate הגדרות קליניות.

דגמי עכבר אורתוטופיים של PC שימשו לעתיםקרובותבעבר כדי לבדוק טיפולים תרופתיים 9,10. רבים מהם יוצרו על ידי הזרקת תאים סרטניים לבד לתוך הלבלב העכבר, וכתוצאה מכך גידולים חסרים סטרומה בולטת האופיינית למחשב. לאחרונה, מודלים אורתוטופיים בהזרקה משותפת, כגון זה שפיתחנו לראשונה על ידי הזרקת תערובת של מחשב אנושי ותאי כוכבי לבלב אנושיים (PSCs, היצרנים העיקריים של סטרומה קולגנית במחשב), נכנסו לשימוש קבוע11,12. הגידולים המיוצרים על ידי הזרקה משותפת כזו של סרטן ותאי סטרומה מציגים (i) הן את האלמנטים הסרטניים והן את המרכיב הסטרומלי האופייני (desmoplastic) של המחשב, ו - (ii) התפשטות תאים סרטניים משופרת גרורות11. לכן, מודל זה דומה מאוד למחשב אנושי. בעוד מספר מודלים כריתה של מחשב אורתוטופי תוארו13,14,15,16, אף אחד לא שיקף את המציאות הקלינית של כריתת הלבלב בבני אדם מדויק כמו מודל זה, ולכן היו suboptimal לבדיקת טיפולים אדג'ובנטי או neoadjuvant.

המטרות של מודל העכבר שהוצגו היו להדגים כיצד: (i) בהצלחה להשתיל סרטן הלבלב אורתוטופי תוך מזעור הפצה צפק בשוגג ו (ii) לאחר מכן לחלוטין resect הסרטן. הנייר מדגיש טיפים ומלכודות פוטנציאליות של טכניקה זו.

Protocol

כל ההליכים אושרו על ידי ועדת האתיקה והטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת ניו סאות' ויילס (17/109A). עכברי עירום אתמיים נקבה Balb / c, בגילאי 8-10 שבועות במשקל 16-19 גרם, שימשו עבור פרוטוקול זה. עכברים שוכנו בכלובי מיקרו מבודדים והאכילו מזון כדורי זמין מסחרית וליביטום מודעתמים .

1. השתלת סרטן הלבלב אורתוטופי

  1. הכינו את התאים להשתלה. ראשית, לחשב את מספר התאים הדרושים עבור ההליך (1 x 106 לוציפראז מתויג AsPC-1 תאים ו 1 x 10 6 תאים כוכביהלבלב האנושי הקשורים לסרטן [CAhPSCs] נדרשים עבור כל בעל חיים).
    1. לשמור על תאים אלה באינקובטור CO2 מבוקר טמפרטורה לחות ולבצע בדיקות מיקופלסמה שגרתיות. מדיום התרבות המשמש עבור AsPC-1 ו- CAhPSCs הם RPMI 1640 (עם 300 מ"ג / L-גלוטמין, סרום שור עוברי 20% v/v, 1% v/v פניצילין/סטרפטומיצין) ו- IMDM (עם 4 מ"מ L-גלוטמין, סרום שור עוברי 10% v/v, 1% v/v פניצילין/סטרפטומיצין).
    2. השתמש בטכניקות סטנדרטיות של תרבית תאים כדי לנסות להפוך את התאים להשעיית תאים. לנטרל את טריפסין באמצעות מדיום התרבות המלאה בהתאמה בנפח כפול מזה של פתרון טריפסין בשימוש.
    3. לשטוף תאים אלה פעמיים עם מלוחים אגירה פוספט (PBS) ו resuspend לתוך תערובת המכילה 1 x 106 AsPC-1 תאים ו 1 x 106 CAhPSCs בהשעיית תא 50 μL.
    4. שמור את ההשעיה על הקרח עד לשימוש.
  2. הכינו ארון ביו-רווי מדרגה 2 להליך. השתמש מחצלת חימום מכוסה וילון פלסטיק סטרילי. להגדלה במהלך ההליך, השתמש בזוג זכוכית מגדלת כירורגית 2.5x עד 3.5x.
  3. הכן ספוגיות ארנק-מחרוזת על ידי חיתוך חור, 1 ס"מ קוטר, לתוך ספוגית גזה. אבטחו את החור הזה עם תפר ארנק-מחרוזת. כל תפר קלוע עדין יכול לשמש לכך (למשל, 5/0 תפר חומצה פוליגליקולית). חומר תפר קלוע מומלץ כפי שהוא מאפשר את הקשר רופף להישאר במקום לאחר הידוק. כך מתואר באיור 1א.
  4. הרדמה את העכבר עם 80 מ"ג/ק"ג קטמין ו 10 מ"ג/ קילוגרם של xylazine על ידי הזרקה תוך-אישית.
  5. ניהול 5 מ"ג/ק"ג טיפול מונע אנטיביוטי enrofloxacin, 2.5 מ"ג /ק"ג משככי כאבים flunixin ו 1 מ"ל של 0.9% מלוחים תת עורית.
  6. לאחר הרדמה, מניחים את העכבר על השדה סטרילי במצב סופי ולהחיל povidone-יוד ואחריו 70% אתנול להכנת העור.
  7. בצע חתך אורך בעור של הרביע הגולגולתי השמאלי של הבטן, ולאחר מכן להיכנס לבטן על ידי חרפה של שכבת השרירים בין מלקחיים.
  8. טען מזרק אינסולין 29 G עם 50 μL של השעיית תאים–זה משווה 1 x 106 CAhPSCs ו 1 x 106 לוציפראז מתויג AsPC-1 תאים לכל הזרקה. תארגן את זה על מכשיר ההזרקה. העיצוב והתפקוד של התקן הזרקה זה מוסברים בפירוט באיור 1b ובמקרא שלו.
  9. מניחים את ספוגית ארנק מחרוזת מעל החתך לפרוטומי ולאחר מכן החיצוניים את הטחול וזנב הלבלב דרך הפתיחה של ספוגית זו. הדקו את מחרוזת הארנק כדי להקיף בעדינות את גוף הלבלב, וחשפו את זנב הלבלב להזרקה. חשוב להיות הדוק מספיק כי גזה יוצר קשר עם הלבלב בהיקף בעת ובעונה אחת לא מכווץ אותו.
  10. באמצעות זוג מלקחיים, לתפוס את הזנב של הלבלב בעדינות למקם מתח לרוחב על זה. לנקב את פני השטח הצפק הגחוני עם המחט בזווית רדודה ולאחר מכן להזריק את המתלה התא לתוך הלבלב בצורה איטית ומבוקרת (מעל 10-15 s) עם מכשיר ההזרקה.
  11. במהלך תהליך ההזרקה, יש להקפיד על דליפה – הן סביב אתר ההזרקה (מרפלוקס) והן בצד השני של הלבלב (במקרה של חדירה דרך ודרך). אם מתרחשת דליפה גלויה, לעצור את ההזרקה ולשים לב לנפח הדליפה על ידי בדיקת נפח של הזרקה שנותרה במזרק. אם הדליפה היא של נפח קטן (<10 μL), ולאחר מכן לספוג כל דליפה עם גזה למקם מחדש את המחט לתוך lobule הלבלב שונה כדי להשלים את הזריקה.
  12. החלף את הטחול והלבלב וסגור את דופן הבטן בתפר חומצה פוליגליקולית 5/0 באופן רציף. סגור את העור עם קליפים.
  13. לפקח על העכבר בכלוב מחומם עד התאושש מן ההרדמה. ברגע ער וערני, להזיז את העכבר בחזרה לכלוב שלה.

2. ניתוח כריתת סרטן: כריתת לבלב דיסטלית וכריתת טבור

  1. עיתוי כריתה ביחס להשתלה יכול להשתנות בהתאם לפרוטוקול הניסוי. באופן כללי, לאפשר את הגידולים לגדול לפחות במשך 3 שבועות לפני כריתה, אבל לייעל את זה באופן אמפירי עבור קו תאים סרטניים מושתלים מסוימים.
  2. ביום שלפני ניתוח כריתה, לבצע הדמיה bioluminescence על בעלי החיים כדי לאשר את נוכחותו של גידול ראשוני מקומי. שים לב כי מחקר הדמיה זה משמש פשוט כדי לא לכלול עכברים עם מחלת חוץ לבלב ברורה כריתה. אין להשתמש בגודל או בשטף קורן כסף לקביעת הזכאות לכריתה.
    1. שוקלים עכברים ומזריקים D-לוציפרין תוך-פיטריטוני (150 מ"ג/ק"ג).
    2. לקבוע את התזמון של שלב ההדמיה ביחס להזרקת לוציפרין עבור כל ניסוי על ידי ביצועים של עקומה קינטית לוציפרין. פרק הזמן שבו השטף הקורן הוא מעל 90% מהמקסימום שלו מייצג את הזמן האופטימלי להדמיית ביולומינציה (בניסוי זה, 18 עד 26 דקות לאחר ההזרקה)
    3. לגרום להרדמה ולשמור באמצעות isoflurane (4% ו 3% עם חמצן, בהתאמה) ולבצע הדמיה באמצעות מכשיר הדמיה bioluminescent (למשל, IVIS Lumina II). השתמש בהגדרות חשיפה ואיתור אוטומטיות (עם זאת, ניתן למטב זאת עבור השטף הקורן הצפוי).
  3. הכינו את ארון הביו-רוויה מדרגה 2 להליך. השתמש מחצלת חימום מכוסה וילון פלסטיק סטרילי. להגדלה במהלך הניתוח, יש להשתמש בזוג זכוכית מגדלת של 2.5 עד 3.5x.
  4. הרדמה את העכבר עם 80 מ"ג/ק"ג קטמין ו 10 מ"ג/ קילוגרם של xylazine על ידי הזרקה תוך-אישית.
  5. ניהול 5 מ"ג/ק"ג טיפול מונע אנטיביוטי enrofloxacin, 2.5 מ"ג /ק"ג משככי כאבים flunixin ו 1 מ"ל של 0.9% מלוחים תת עורית.
  6. מניחים את העכבר על השדה סטרילי בתנוחה סופית ולהחיל povidone-יוד ואחריו 70% אתנול להכנת העור.
  7. בצע חתך אורך בעור של הרבע הגולגולתי השמאלי של הבטן, רצוי דרך אתר החתך הקודם.
  8. לנתח בבוטות את העור את דופן הבטן השרירית הבסיסית, ולאחר מכן למקם רקטור שמירה עצמית Alm להחזיק את פצע העור פתוח.
  9. להסית את שכבת השרירים בין מלקחיים רק לצד אחד של קו התפר של הפעולה הקודמת, ולאחר מכן להאריך את החתך כדי excise את קו התפירה הקודם כולו.
  10. החיצוניים את הטחול ואת הלבלב דיסטלי ולחזור בו בגולגולת. בהיבט הקאודאלי של הלבלב, המעי הגס עשוי להימצא מחובר על ידי הידבקויות פילם. אם זה נמצא, לנתח בבוטות את המעי הגס.
  11. בזהירות להעביר זוג מלקחיים הגב לגוף הלבלב וכלי טחול ולפתוח את החלל הזה. פעולה זו מפנה קטע של הלבלב עבור קשירה לאחר מכן.
  12. Ligate הגוף של הלבלב proximal לגידול עם קליפ קשירה טיטניום, ולאחר מכן לחתוך את הלבלב distal לזה עם צריבה. דרך חלופית לשלוט על גדם הלבלב היא ligate אותו בהמשכיות עם 5/0 תפר חומצה פוליגליקולית לפני transection.
  13. לסגת הלבלב caudally לצרוב את כלי gastrosplenic בין מוט הגולגולת של הטחול ואת הבטן.
  14. הסר את הדגימה ולאשר haemostasis.
  15. סגור את דופן הבטן עם תפר חומצה פוליגליקולית 5/0 באופן רציף. סגור את העור עם קליפים.

3. ניהול לאחר הניתוח

  1. בתקופה המיידית שלאחר ההרדמה (עבור שני ההליכים לעיל), לפקח על העכבר בכלוב מחומם עד התאושש מן ההרדמה. ברגע ער וערני, להזיז את העכבר בחזרה לכלוב שלה. בתקופה שלאחר הניתוח, לפקח על בעלי החיים עבור כאב וסימני מצוקה. לנהל 0.05 מ"ג /ק"ג buprenorphine על ידי הזרקה תת עורית מקרוב לצפות בבעלי החיים במשך 12 שעות.
  2. לאחר מכן, לפקח על עכברים מדי יום עבור משקל, צריכת מזון ופעילות. בדוק אתרי חתך ומ מוחשי לגודל הגידול. הסר קליפי עור ביום שלאחר הניתוח השביעי.
  3. המתת חסד לעכבר אם מגיעים לנקודות קצה אנושיות. נקודות קצה אנושיות אלה כוללות: אובדן משקל גוף >20%, תכונות של מצוקה בלתי ניתנת לטיפול (כולל יציבה רכון, חוסר תנועה או טיפוח) וגודל הגידול גדול מ 1 ס"מ3 כפי שהוערך על ידי מישוש חיצוני.

תוצאות

חמישים ותשעה עכברים רצופים עברו ניתוח השתלה. דליפת ברוטו התרחשה בשמונה (14%) עכברים. מידת הדליפה בזמן ההזרקה מוערכת כמתואר לעיל בסעיף הפרוטוקול. לאחר שלושה שבועות כדי לאפשר לגידולים מושתלים אלה לגדול, הדמיה ביולומינציה לפני כריתה בוצעה כדי לא לכלול עכברים עם מחלה גרורתית ברוטו לפני כריתה. א...

Discussion

דגם עכבר אורתוטופי כריתה של סרטן הלבלב חשוב כי זה מאפשר בדיקה של טיפולים אדג'ובנטיים neoadjuvant. זה חשוב במיוחד בסרטן הלבלב שבו הניתוח נשאר הטיפול היעיל ביותר, אבל קשורה לסיכון גבוה להישנות. מאמר זה מתאר שיטה אשר תייצר באופן אמין סרטן הלבלב אשר פוטנציאל לריפוי עם כריתה, שכפול התרחיש הקליני שבו n...

Disclosures

המחברים אין מה לחשוף ביחס לפרויקט זה.

Acknowledgements

המחברים קיבלו תמיכה מהקרן לסרטן הלבלב אבנר.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Animals, Materials and Equipment for Implantation Procedure
AsPC-1 human pancreatic cancer cell line, luciferase tagged (luc+ gene from Promega PGL3 Basic plasmid)American Type Culture Collection, Manassas, VA, USAsupplied by Professor Takashi Murakami, Saitama Medical University, Saitama, Japan
Autoclip wound clips, 9 mmBecton Dickson Pty Ltd, North Ryde, NSW, Australia500346
Basic Dressing PackMultigate Medical Products Pty Ltd, Villawood, NSW, Australia
Cancer associated human pancreatic stellate cellsPancreatic Research Group cell bankIn house cell bank
Cryogenic tubes, 1.0 mLThermo Fisher Scientific Australia Pty Ltd, Scoresby, VIC, Australia366656
Disposable stainless-steel scalpel blade with handle, size 15Livingstone International, Mascot, NSW,SCP15
Foetal bovine serum (FBS)Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia16000044
Gilles fine tooth forceps 12 cmGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Heated mats to maintain body temperature during surgery and postoperative recoveryGeneric
Homozygous athymic nude mice: Strain BALB/c-Fox1nu/Ausb, femaleAustralian Bioresources, Moss Vale, NSW, Australia
Iscove's modified Dulbecco's medium (IMDM) with 4mM L-glutamine and no phenol redLife Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia21056023
Jewellers forceps 11.5 cmGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Micro needle holder (round handle) 15 cm straightGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Micro scissors (round handle) 15 cm straightGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Penicillin 10,000 U/mL, streptomycin 10,000 μg/mLLife Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia15140122
Polyglycolic acid suture, size USP 5/0 on 13mm half-circle round-bodied needleBraun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, AustraliaC1049407
Portable weighing scalePrecision balances, Bradford, MA, USA
Reflex clip applier and clip removerWorld Precision Instruments, Sarasota, FL, USA500345
Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 with phenol red and 300 mg/L LglutamineLife Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia11875085
Round bodied vessel dilator 15 cm, 0.1 mm tipGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Trypsin 0.05%, EDTA 0.02%Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia25300054For pancreatic stellate cells
Trypsin 0.25%, EDTA 0.02%Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia25200056For ASPC-1 cells
U-100 insulin syringes, 0.5 mL with 29 G (0.33 mm) × 13 mm needleTerumo Medical Corporation, Elkton, MD, USA
Equipment for Resection Procedure
Alm self-retaining retractorGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Autoclip wound clips 9 mmBecton Dickson Pty Ltd, North Ryde, NSW500346
Basic Dressing PackMultigate Medical Products Pty Ltd, Villawood, NSW, Australia08-559NP
Disposable stainless-steel scalpel blade with handle, size 15Livingstone International, Mascot, NSW,SCP15
Gilles fine tooth forceps 12 cmGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Hand-held high temperature fine tip cauteryBovie Medical Corporation, Melville, NY, USAAA01
Heated mats to maintain body temperature during surgery and postoperative recoveryGeneric
IVIS Lumina II Bioluminescent Imaging DeviceCaliper Life Sciences, Hopkinton, MA, USA
Jewellers forceps 11.5 cmGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Micro needle holder (round handle) 15 cm straightGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Micro scissors (round handle) 15 cm straightGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Polyglycolic acid suture, size USP 5/0 on 13mm half-circle round-bodied needleBraun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, AustraliaC1049407
Portable weighing scalePrecision balances, Bradford, MA, USA
Reflex wound clip applier and clip removerWorld Precision Instruments, Sarasota, FL, USA500345
Round bodied vessel dilator 15 cm, 0.1 mm tipGeneric stainless steel microsurgical instrument set
Titanium “Weck style” Ligaclip, smallHZMIM, Hangzhou, China
Titanium Ligaclip applier for open surgery, smallHZMIM, Hangzhou, China
Volatile anaesthetic machine, including vapouriser and induction chamberGenericGeneric vapouriser and induction chamber
Drugs for Procedures
70% w/w ethanol solutionSigma-Aldrich Pty Ltd, Castle Hill, NSW, AustraliaApplied topically as surgical skin preparation
Buprenorphine 0.3 mg/mLTroy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, AustraliaDose: 0.05 mg/kg s.c.
D-Luciferin (1 U/g)PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, USA122799diluted in PBS to 15 mg/mL. Dose: 150 mg/kg i.p
Enrofloxacin 50 mg/mLTroy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, AustraliaDose: 5 mg/kg s.c.
Flunixin 50 mg/mLNorbrook Laboratories Australia, Tullamarine, VIC, AustraliaDose: 2.5 mg/kg s.c.
IsofluraneZoetis Australia Pty Ltd., Rhodes, NSW, AustraliaDose (vapourised with oxygen): 4% induction, 3% maintenance
Ketamine 100 mg/mLMaylab, Slacks Creek, QLD, AustraliaDose: 80 mg/kg i.p.
Povidone-Iodine 10% w/v solutionPerrigo Australia, Balcatta, WA, AustraliaRIO00802FApplied topically to the anterior abdomen as surgical skin preparation
Refresh eye ointment (liquid paraffin 42.5% w/w, soft white paraffin 57.3% w/w)Allergan Australia Pty Ltd, Gordon, NSW, AustraliaApplied to both eyes
Sodium chloride 0.9% w/vBraun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, Australia9481PDose: 900 μL s.c.
Water for injections BPPfizer Australia, Sydney, NSW, AustraliaFor dilution of drugs
Xylazine 20 mg/mLTroy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, AustraliaDose: 10 mg/kg i.p.

References

  1. . SEER Cancer Statistics Review, 1975-2015, National Cancer Institute Available from: https://seer.cancer.gov/csr/1975_2015/ (2018)
  2. Sugiura, T., et al. Margin status, recurrence pattern, and prognosis after resection of pancreatic cancer. Surgery. 154 (5), 1078-1086 (2013).
  3. Hishinuma, S., et al. Patterns of recurrence after curative resection of pancreatic cancer, based on autopsy findings. Journal of Gastrointestinal Surgery. 10 (4), 511-518 (2006).
  4. NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology - Pancreatic Adenocarcinoma (Version 3.2019). National Comprehensive Cancer Network Available from: https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/pancreatic.pdf (2019)
  5. Breslin, T. M., et al. Neoadjuvant chemoradiotherapy for adenocarcinoma of the pancreas: treatment variables and survival duration. Annals of Surgical Oncology. 8 (2), 123-132 (2001).
  6. Mokdad, A. A., et al. Neoadjuvant Therapy Followed by Resection Versus Upfront Resection for Resectable Pancreatic Cancer: A Propensity Score Matched Analysis. Journal of Clinical Oncology. 35 (5), 515-522 (2017).
  7. Tachezy, M., et al. Sequential neoadjuvant chemoradiotherapy (CRT) followed by curative surgery vs. primary surgery alone for resectable, non-metastasized pancreatic adenocarcinoma: NEOPA- a randomized multicenter phase III study (NCT01900327, DRKS00003893, ISRCTN82191749). BMC Cancer. 14, 411 (2014).
  8. Barbour, A. P., et al. The AGITG GAP Study: A Phase II Study of Perioperative Gemcitabine and Nab-Paclitaxel for Resectable Pancreas Cancer. Annals of Surgical Oncology. , (2020).
  9. Fu, X., Guadagni, F., Hoffman, R. M. A metastatic nude-mouse model of human pancreatic cancer constructed orthotopically with histologically intact patient specimens. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 89 (12), 5645-5649 (1992).
  10. Marincola, F., Taylor-Edwards, C., Drucker, B., Holder, W. D. Orthotopic and heterotopic xenotransplantation of human pancreatic cancer in nude mice. Current Surgery. 44 (4), 294-297 (1987).
  11. Vonlaufen, A., et al. Pancreatic stellate cells: partners in crime with pancreatic cancer cells. Cancer Research. 68 (7), 2085-2093 (2008).
  12. Xu, Z., et al. Role of pancreatic stellate cells in pancreatic cancer metastasis. American Journal of Pathology. 177 (5), 2585-2596 (2010).
  13. Tepel, J., et al. Adjuvant treatment of pancreatic carcinoma in a clinically adapted mouse resection model. Pancreatology. 6 (3), 240-247 (2006).
  14. Torgenson, M. J., et al. Natural history of pancreatic cancer recurrence following "curative" resection in athymic mice. Journal Surgical Research. 149 (1), 57-61 (2008).
  15. Metildi, C. A., et al. Fluorescence-guided surgery allows for more complete resection of pancreatic cancer, resulting in longer disease-free survival compared with standard surgery in orthotopic mouse models. Journal of the American College of Surgeons. 215 (1), 126-135 (2012).
  16. Ni, X., Yang, J., Li, M. Imaging-guided curative surgical resection of pancreatic cancer in a xenograft mouse model. Cancer Letters. 324 (2), 179-185 (2012).
  17. Hiroshima, Y., et al. Hand-held high-resolution fluorescence imaging system for fluorescence-guided surgery of patient and cell-line pancreatic tumors growing orthotopically in nude mice. Journal of Surgical Research. 187 (2), 510-517 (2014).
  18. Hiroshima, Y., et al. Metastatic recurrence in a pancreatic cancer patient derived orthotopic xenograft (PDOX) nude mouse model is inhibited by neoadjuvant chemotherapy in combination with fluorescence-guided surgery with an anti-CA 19-9-conjugated fluorophore. PLoS One. 9 (12), 114310 (2014).
  19. Hiroshima, Y., et al. Fluorescence-guided surgery in combination with UVC irradiation cures metastatic human pancreatic cancer in orthotopic mouse models. PLoS One. 9 (6), 99977 (2014).
  20. Metildi, C. A., et al. Ratiometric activatable cell-penetrating peptides label pancreatic cancer, enabling fluorescence-guided surgery, which reduces metastases and recurrence in orthotopic mouse models. Annals of Surgical Oncology. 22 (6), 2082-2087 (2015).
  21. Metildi, C. A., et al. Fluorescence-guided surgery with a fluorophore-conjugated antibody to carcinoembryonic antigen (CEA), that highlights the tumor, improves surgical resection and increases survival in orthotopic mouse models of human pancreatic cancer. Annals of Surgical Oncology. 21 (4), 1405-1411 (2014).
  22. NCCN Guidelines: Pancreatic Adenocarcinoma. National Comprehensive Cancer Network Available from: https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/pancreatic.pdf (2019)
  23. Maithel, S. K., Allen, P. J., Jarnagin, W. R. . Blumgart's Surgery of the Liver, Biliary Tract and Pancreas, 2-Volume Set (Sixth Edition). , 1007-1023 (2017).
  24. Egberts, J. H., et al. Dexamethasone reduces tumor recurrence and metastasis after pancreatic tumor resection in SCID mice. Cancer Biology & Therapy. 7 (7), 1044-1050 (2008).
  25. Xu, Z. H., et al. Targeting the HGF/c-MET pathway in advanced pancreatic cancer: a key element of treatment that limits primary tumor growth and eliminates metastasis. British Journal of Cancer. , (2020).
  26. Pothula, S. P., et al. Targeting the HGF/c-MET pathway: stromal remodelling in pancreatic cancer. Oncotarget. 8 (44), 76722-76739 (2017).
  27. Pothula, S. P., et al. Hepatocyte growth factor inhibition: a novel therapeutic approach in pancreatic cancer. British Journal of Cancer. 114 (3), 269-280 (2016).
  28. Giri, B., et al. An Immunocompetent Model of Pancreatic Cancer Resection and Recurrence. Journal of Gastrointestinal Surgery. , (2020).
  29. Allen, V. B., Gurusamy, K. S., Takwoingi, Y., Kalia, A., Davidson, B. R. Diagnostic accuracy of laparoscopy following computed tomography (CT) scanning for assessing the resectability with curative intent in pancreatic and periampullary cancer. Cochrane Database of Systematic Reviews. (11), 009323 (2013).
  30. Vaillant, F., Lindeman, G. J., Visvader, J. E. Jekyll or Hyde: does Matrigel provide a more or less physiological environment in mammary repopulating assays. Breast Cancer Research. 13 (3), 108 (2011).
  31. Jesnowski, R., et al. Immortalization of pancreatic stellate cells as an in vitro model of pancreatic fibrosis: deactivation is induced by matrigel and N-acetylcysteine. Laboratory Investigation. 85 (10), 1276-1291 (2005).
  32. Phillips, P. A., et al. Cell migration: a novel aspect of pancreatic stellate cell biology. Gut. 52 (5), 677-682 (2003).
  33. Boj, S. F., et al. Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer. Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).
  34. Egberts, J. H., et al. Superiority of extended neoadjuvant chemotherapy with gemcitabine in pancreatic cancer: a comparative analysis in a clinically adapted orthotopic xenotransplantation model in SCID beige mice. Cancer Biology & Therapy. 6 (8), 1227-1232 (2007).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

163PDAC

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved