תגובת לב לגירוי β-אדנרגיות שנקבע על ידי ניתוח לולאת נפח לחץ

Summary

כאן אנו מתארים ניתוח לולאת לחץ לב תחת מינונים הולכים וגדלים של איזופרוטרנול תוך ורידי כדי לקבוע את תפקוד הלב המהותי ואת המילואים β-adrenergic בעכברים. אנו משתמשים בגישה שונה של חזה פתוח למדידות לולאת נפח הלחץ, שבה אנו כוללים אוורור עם לחץ חיובי של תפוגת קצה.

Abstract

קביעת תפקוד הלב היא ניתוח נקודת קצה חזק במודלים של בעלי חיים של מחלות לב וכלי דם על מנת לאפיין השפעות של טיפולים ספציפיים על הלב. בשל היתכנות של מניפולציות גנטיות העכבר הפך למודל החייתי היונקים הנפוץ ביותר לחקר תפקוד הלב ולחיפוש אחר מטרות טיפוליות פוטנציאליות חדשות. כאן אנו מתארים פרוטוקול כדי לקבוע את תפקוד הלב ב vivo באמצעות מדידות לולאה נפח לחץ וניתוח במהלך מצבים בסיסיים ותחת גירוי β-adrenergic על ידי עירוי תוך ורידי של הגדלת ריכוזים של isoproterenol. אנו מספקים פרוטוקול מעודן כולל תמיכה באוורור תוך התחשבות בלחץ חיובי של תפוגת קצה כדי לשפר השפעות שליליות במהלך מדידות חזה פתוח, ומשככי כאבים חזקים (Buprenorphine) כדי למנוע מתח שריר הלב בלתי נשלט מעורר על ידי כאב במהלך ההליך. כל זאת יחד התיאור המפורט של ההליך והדיון על מלכודות אפשריות מאפשר ניתוח לולאת נפח לחץ סטנדרטי מאוד וניתן לשחזור, ומפחית את הדרת בעלי החיים מהחבורה הניסיונית על ידי מניעת הטיה מתודולוגית אפשרית.

Introduction

מחלות לב וכלי דם משפיעות בדרך כלל על תפקוד הלב. בעיה זו מצביעה על החשיבות בהערכת תפקוד הלב המפורט של vivo במודלים של מחלות בעלי חיים. ניסויים בבעלי חיים מוקפים במסגרת של שלושת העקרונות המנחים של Rs (3Rs) (צמצום/מקד/החלפה). במקרה של הבנת פתולוגיות מורכבות המערבות תגובות מערכתיות (כלומר, מחלות לב וכלי דם) ברמה ההתפתחותית הנוכחית, האפשרות העיקרית היא לחדד את השיטות הזמינות. זיקוק יוביל גם לירידה במספרי בעלי החיים הנדרשים בשל פחות שונות, מה שמשפר את כוח הניתוח והמסקנות. בנוסף, שילוב של מדידות התכווצות לב עם מודלים בעלי חיים של מחלות לב כולל אלה המושרה על ידי גירוי נוירוהומורלי או על ידי עומס יתר בלחץ כמו פסים בתחום העורקים, אשר מחקה למשל קטכולאמין שונה / β-adrenergic רמות^1,2,3,4, מספק שיטה חזקה למחקרים פרה קליניים. אם ניקח בחשבון כי השיטה מבוססת צנתר נשאר הגישה הנפוצה ביותר להערכה מעמיקה של התכווצות הלב⁵, אנו שואפים להציג כאן מדידה מעודנת של תפקוד הלב in vivo בעכברים על ידי לולאת נפח לחץ (PVL) מדידות במהלך גירוי β-adrenergic המבוסס על ניסיון קודם כולל הערכה של פרמטרים ספציפיים של גישה זו^{6, 7.}

כדי לקבוע גישות פרמטרים המודינמיים לב הכוללים הדמיה או טכניקות מבוססות צנתר זמינים. שתי האפשרויות מלוות ביתרונות וחסרונות שיש לשקול בזהירות לשאלה המדעית המתאימה. גישות ההדמיה כוללות אקוקרדיוגרפיה והדמיה תהודה מגנטית (MRI); שניהם שימשו בהצלחה בעכברים. מדידות אקוקרדיוגרפיות כרוכות בעלויות ראשוניות גבוהות מבדיקה במהירות גבוהה הנדרשת לקצב הלב הגבוה של העכברים; זוהי גישה פשוטה יחסית לא פולשנית, אך היא משתנה בקרב מפעילים אשר באופן אידיאלי צריך להיות מנוסה זיהוי והדמיה של מבני לב. בנוסף, לא ניתן לבצע מדידות לחץ ישירות וחישובים מתקבלים משילוב של סדרי גודל ומדידות זרימה. מצד שני, יש לו את היתרון כי מספר מדידות ניתן לבצע על אותה חיה ותפקוד הלב ניתן לפקח למשל במהלך התקדמות המחלה. לגבי מדידת הנפח, ה- MRI הוא הליך תקן הזהב, אך בדומה לאקוקרדיוגרפיה, אין מדידות לחץ ישירות אפשריות וניתן להשיג רק פרמטרים תלויים בטעינה מראש⁸. גורמים מגבילים הם גם הזמינות, מאמץ הניתוח ועלויות התפעול. כאן שיטות מבוססות קטטר למדידת תפקוד הלב הן חלופה טובה המאפשרת בנוסף ניטור ישיר של לחץ תוך-לבבי וקביעת פרמטרים של התכווצות בלתי תלויה בעומס כמו עבודת שבץ גיוס מראש (PRSW)⁹. עם זאת, נפחי חדרית הנמדדים על ידי קטטר מוליכות לחץ (באמצעות קביעת מוליכות) קטנים יותר מאלה של ה- MRI אך הבדלי קבוצות נשמרים באותו טווח¹⁰. כדי לקבוע ערכי נפח אמינים, הכיול המתאים נדרש, שהוא צעד קריטי במהלך מדידות PVL. הוא משלב מדידות ex vivo של מוליכות דם ב cuvettes מכויל נפח (המרה של מוליכות לנפח) עם ניתוח in vivo עבור מוליכות מקבילה של שריר הלב במהלך הזרקת בולוס של תמיסת מלח^{היפרטונית 11,12}. מעבר לכך, מיקום הקטטר בתוך החדר והכיוון הנכון של האלקטרודות לאורך ציר האורך של החדר הם קריטיים ליכולת הזיהוי של השדה החשמלי שמסביב המיוצר על ידיהם. עדיין עם גודל מופחת של לב העכבר ניתן להימנע חפצים המיוצרים על ידי שינויים בכיוון תוך חדרי של הקטטר, אפילו בחדרים המורחבים^5,10, אבל חפצים יכולים להתפתח תחת גירוי β-adrenergic^6,13. בנוסף לשיטות ההולכה נראה כי פיתוח השיטה מבוססת האשפוז נמנעה מכללי הכיול, אך כאן ערכי הנפח מוערכים יתר על^{המידה 14,15}.

מאז העכבר הוא אחד המודלים הקדם קליניים החשובים ביותר במחקר לב וכלי דם ואת β-עתודה אדנרגיית של הלב הוא עניין מרכזי בפיזיולוגיה לב ופתולוגיה, אנו מציגים כאן פרוטוקול מעודן כדי לקבוע בתפקוד הלב vivo בעכברים על ידי מדידות PVL במהלך גירוי β-adrenergic.

Protocol

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו ובוצעו על פי תקנות המועצה האזורית קרלסרוהה ואוניברסיטת היידלברג (AZ 35-9185.82/A-2/15, AZ 35-9185.82/A-18/15, AZ 35-9185.81/G131/15, AZ 35-9185.81/G121/17) בהתאם להנחיות הנחיה 2010/63/האיחוד האירופי של הפרלמנט האירופי להגנה על בעלי חיים המשמשים למטרות מדעיות. הנתונים המוצגים בפרוטוקול זה נגזרים מעכברים זכרים מסוג C57Bl6/N (17 ± גיל שבוע וחצי). עכברים נשמרו בתנאים מוגדרים ללא פתוגן במתקן בעלי החיים (IBF) של הפקולטה לרפואה היידלברג. עכברים שוכנו במחזור של 12 שעות של אור-חושך, עם לחות יחסית בין 56-60%, שינוי אוויר של פי 15 לשעה וטמפרטורת החדר של 22 מעלות צלזיוס +/- 2 מעלות צלזיוס. הם הוחזקו בכלובים קונבנציונליים מסוג II או סוג II שסופקו זמן רב עם מצעים לבעלי חיים וניירות טישו כהעשרה. מזון אוטומטי סטנדרטי ומים אוטומטיים היו זמינים לצריכת ליביטום מודע.

1. הכנת מכשירים ופתרונות תרופתיים

1. צנתר ורידים מרכזי: חותכים את צינור המיקרו (קוטר חיצוני 0.6 מ"מ) לצינורות צנתר באורך 20 ס"מ. השתמש במלקחיים כדי למשוך קצה אחד של הצינור על קצה צינורית 23-מד. חותכים את הקצה השני של הצינורות באלכסון כדי ליצור קצה חד שיכול לנקב את וריד הירך.
2. צינור אנדוטראצ'אל: עבור צינור צנרור לחתוך 20-מד venipuncture-צינורית 3 ס"מ אורך כדי להסיר את מצורף מזרק.
   1. אם צינור הצנרור אינו מתאים לחיבור מכונת ההנשמה בצורה מושלמת, לעטוף parafilm מעל קצה הצינור שבו מכשיר האוורור מחובר. החיבור חייב להיות יציב ואטום על ידי העיבוי (איור 1A). לקצר את סיכת מדריך המתכת של 20-מד venipuncture-צינורית ל 2.7 ס"מ ולהשתמש בו כסיוע צנרור. גישות מעודנות לצנרור כולל סיבי אור כדי להקל על הדמיה של קנה הנשימה מתוארים גם הם היטב, למשל על ידי Das ומשתפי פעולה¹⁶.
3. תערובת הרדמה המשמשת אינטובציה: לערבב 200 μL של הפרין (1000 IU / mL) עם 50 μL של 0.9% NaCl ו 750 μL של 2 מ"ג / מ"ל אטומידאט ממוצר מבוסס תחליב שמן במים. השתמש 7 μL / g משקל גוף (BW) עבור כל עכבר (0.1 מ"ג / קילוגרם BW Buprenorphine 10 מ"ג / קילוגרם BW אטומידאט).
4. מרפה שרירים: להמיס 100 מ"ג של Pancuronium-ברומיד ב 100 מ"ל של 0.9% NaCl. השתמש 1.0 μL / g משקל גוף (1 מ"ג / קילוגרם BW) עבור כל עכבר.
5. פתרונות איזופרוטרנול: להמיס 100 מ"ג איזופרוטרנול ב 100 מ"ל של 0.9% NaCl (1 מיקרוגרם / μL). הכן את הדילולים הבאים(טבלה 1)והעבר כל אחד במזרק של 1 מ"ל.
   1. כדי להשיג דילול 1, לדלל את המניה 1:1.8. כדי להשיג דילול 2, לדלל את המניה 1:6. כדי להשיג דילול 3, לדלל את הדילול 1 לתוך 1:10. לבסוף, להשיג דילול 4 על ידי דילול 1:10 של דילול 2.
6. 15% NaCl היפרטוני (w/v): להמיס 1.5 גרם של 0.9% NaCl ב 10 מ"ל של כפול מזוקק H₂O. לסנן את הפתרון עם מסנן מזרק נקבוביות 0.45 מיקרומטר.
7. הכנת 12.5% פתרון אלבומין (w/v): להמיס 1.25 גרם של אלבומין סרום בקר ב 10 מ"ל של 0.9% NaCl. לדגור על הפתרון ב 37 °C (55 °F) במשך 30 דקות. מצננים לטמפרטורת החדר ומסננים את הפתרון עם מסנן מזרק נקבוביות בגודל 0.45 מיקרומטר.
8. הכנת ההתקנה: ראשית להפעיל את צלחת חימום ולהגדיר אותו 39-40 °C (50 °F). מניחים מזרק מלא מלוח על כרית החימום ומעבירים את צנתר לולאת נפח הלחץ (PVL) למזרק. יש להקדים את הצנתר למשך 30 דקות לפחות לפני השימוש לייצוב. ההתקנה בה אנו משתמשים מורכבת מקטטר מוליכות לחץ של 1.4-F, יחידת בקרה והתוכנה המתאימה, והיא מתוארת גרפית באיור 1B והפניות לספק מפורטות בטבלת החומרים.

2. הרדמה

1. הזריקו בופרנורפין (0.1 מ"ג/ק"ג ב.ו. תוך-תאי) 30 דקות לפני צנרור.
2. מניחים את העכבר לתוך תא זכוכית אקרילי רווי מראש עם 2.5% איזופלוראן והתחמם מראש עם כרית חימום להציב על בסיס התא.
3. ברגע שהעכבר ישן (חוסר רפלקס), הזריקו את התערובת ההרדמה (7 מ"ל/ק"ג BW) המכילה 10 מ"ג/ק"ג אטומידאט והפרין (1,200 יב"ל/ק"ג BW) תוך-אפיטרונלית.

3. אוורור

1. העבירו את החיה לפלטפורמת הצנרור (איור 1C) 3-4 דקות לאחר הזרקת ההרדמה. העכבר תלוי מהשיניים עם תצוגת הגופרית הפונה למפעיל.
2. הרימו בעדינות את הלשון במלקחיים. כדי לזהות את הגלוטי, הרם מעט את הלסת התחתונה של העכבר עם מלקחיים שניים.
3. הכניסו בזהירות את צינור האנדוטרכאל(איור 1A)לתוך קנה הנשימה והסירו את מוט המדריך.
4. מעבירים את החיה על צלחת החימום, מניחים אותה על הגב ומחברים את צינור הצינור לנשימה של בעלי החיים הקטנים.
5. התאם את קצב הנשימה ל-53.5 x (משקל גוף בגרמים)^{-0.26 [דקה -1],}כפי שתואר על ידי אחרים¹², ונפחי גאות ושפל לשיא לחצים מעוררי השראה של 11 ± 1 ס"מ₂O. להקים PEEP של 2 ס"מH₂O.
6. לתקן בזהירות את הגפיים של העכבר על צלחת החימום עם רצועות דבק ולהחיל משחת עיניים על שתי העיניים כדי למנוע יובש.
7. הכנס בדיקה טמפרטורה רקטלית ולשמור על טמפרטורת הגוף הליבה ב 37 ± 0.2 °C (50 °F).
8. התקן אק"ג בעל קצה חוט אחד ונטר את קצב הלב באופן מקוון כאינדיקטור לעומק ויציבות הרדמה.
9. בהיעדר רפלקסים בין-גיטריים, הזריקו 1 מ"ג/ק"ג BW של פנקורניום-ברומיד מרפה השרירים תוך-איפריטונית. פעולה זו מונעת ממצאים נשימתיים במהלך מדידות PVL.

4. ניתוח

1. המלצות כלליות
   1. במהלך הניתוח, לאוורר עם ~ 1.5-2% איזופלוראן התאדה עם O₂. ריכוז איזופלוראן יכול להיות תלוי גם במשתנים כמו זן העכבר, מין, גיל ומשקל של בעלי החיים, אבל זה צריך להיות נקבע באופן אינדיבידואלי וניסוי והערכים כאן הם התייחסות לזן העכבר C57BL6 / N. חשוב לציין, מכונת ההנשמה מחוברת למערכת מיצוי כדי למנוע מהמפעיל לשאוף איזופלוראן.
   2. השתמש בהגדלה בין 1.5-4x ממיקרוסקופ הסטריאו להליכים כירורגיים.
      הערה: עיין בהדרכה מוסדית/מקומית על הכנת החיה לניתוחים שאינם הישרדותיים.
2. קנוניציה של הירך
   1. לשטוף את האחורי עם 70% אתנול, incise את האזור מפשעתי שמאל ולחשוף את וריד הירך השמאלי.
   2. פיצוץ העורק האפיגסטרי והווריד עם צריבה.
   3. ליגט את וריד הירך עם תיל הניח דיסטל לגישה קטטר.
   4. מעבירים תפר מתחת לווריד הירך ומכינים קשר גולגולתי של אתר ניקוב. לנקב את וריד הירך עם צינור מיקרו מוכן (ראה שלב 1.1) מחובר מזרק 1 מ"ל.
   5. לקשור את הקשר כדי לתקן את הצינור בתוך הכלי.
   6. נטרל אובדן נוזלים על ידי עירוי של 0.9% NaCl בתוספת 12.5% אלבומין בקצב עירוי של 15 μL / min עם משאבת מזרק אוטומטית. בנוסף, לשמור על רקמות חשופות לחות באמצעות 0.9% NaCl מחומם מראש.
3. בית החזה
   1. לשטוף את בית החזה עם 70% אתנול.
   2. יש להסית את העור ממש מתחת לתהליך הקסיפוד ולהפריד בבוטות את שרירי החזה מקיר החזה עם מלקחיים או כרוכי.
   3. הרם את תהליך xyphoid עם מלקחיים, ולאחר מכן לחתוך דרך קיר החזה נע לרוחב משני הצדדים עם cautery עד הסרעפת גלויה לחלוטין מלמטה.
   4. תעוררו את הסרעפת מלמטה ותחשפו את פסגת הלב. ואז בזהירות להסיר את קרום הלב עם מלקחיים.
   5. בצע costotomy מוגבל בצד שמאל כפי שתואר בעבר⁶.
   6. להעביר תפר מתחת לווריד הפרשים הנחות כדי לבצע הפחתת עומס מראש בשלבים מאוחרים יותר.
   7. לנקב בעדינות את פסגת הלב עם צינורית 25-מד (מקסימום 4 מ"מ). הסר את הצינורית ולהכניס את צנתר PV עד כל האלקטרודות נמצאות בתוך החדר.
   8. התאם את מיקום הקטטר על ידי תנועות עדינות ופניות עד לקבלת לולאות בצורת מלבן (איור 2A).
   9. שמור תמיד את כל הרקמות חשופות לחות באמצעות 0.9% NaCl מחומם מראש.

5. מדידות

1. המלצות כלליות
   1. במהלך המדידות, לאוורר עם ~ 1.5-2% איזופלוראן התאדה עם 100% O_2.
   2. בצע 2 מדידות בסיסיות, כמו גם 2 אסימות vena cava על כל שלב של פרוטוקול תגובת המינון.
      הערה: חשוב שלאחר החסימה הראשונה והשנייה של הוועד הוועד, ערכי הלחץ והנפח יחזרו לערכי מצב יציב כמו לפני החסימה הראשונה. תצפית זו נחוצה על מנת לזהות שינוי במצב הקטטר עקב הפחתות סדרתיות בנפח תוך חדריקולרי. אם שינוי בתנוחת הצנתר יהיה המקרה, במיוחד ערכי נפח יוסטו.
2. בצע ניתוח מקוון של פרמטרים (קצב לב, נפח שבץ, dP / dt_{מקסימום}) ולחכות עד תפקוד לב יציב-מצב מתקבל. עבור טווח הפרמטרים הצפוי עם ההגדרה כאן בשימוש בעכברים C57Bl6/N אנא עיין בתוצאות שפורסמו⁶.
3. עצור את מכונת ההנשמה במצב תפוגה קצה ולרשום פרמטרים בסיסיים. לאחר 3 עד 5 שניות להפחית preload הלב על ידי הרמת התפר מתחת לווריד הפרשים הנחותים עם מלקחיים כדי להשיג מראש פרמטרים עצמאיים (איור 2B). תדליק את מכונת ההנשמה. המתן לפחות 30 שניות לחסימה השנייה עד שהפרמטרים המודינמיים יתייצבו.
4. לאחר קבלת המדידות בתנאים בסיסיים להמשיך את המינון-תגובה של isoproterenol על ידי מעבר מזרקים מוכנים. כאן שיעור העירוי נשאר ללא שינוי על מנת למנוע שינויים של preload הלב. יש להקפיד לא להחדיר בועות אוויר בעת החלפת המזרק.
   1. המתן לפחות 2 דקות עד שתתקבל פונקציית לב חדשה במצב יציב מאשר שוב לעצור את מכונת ההנשמה במצב תפוגה הסופי ולרשום פרמטרים בסיסיים. לאחר 3 עד 5 שניות להפחית preload הלב על ידי הרמת התפר מתחת לווריד הפרשים הנחותים על מנת להשיג פרמטרים עצמאיים preload.
   2. המתן לפחות 30 שניות לחסימת החסם השני. לאחר מכן מעבר למזרק המוכן עם ריכוז isoproterenol הבא ולחזור על ההקלטות של פרמטרים בסיסיים לטעון מראש עצמאי.
      הערה: חפצים כמו ספייק הלחץ הסיסטולי הסופי (ESPS, איור 2C)יכולים להתרחש במהלך העלייה במינון של איזופרוטרנול, הנובע מלכוד קטטר. חפצים המתרחשים לפני תחילת הפרמטרים הבזליים ניתן לתקן בקלות באמצעות מיקום מחדש של הקטטר.

6. כיול

הערה: הליכי הכיול עשויים להשתנות בהתאם למערכת PVL המשמשת.

1. כיול מוליכות מקבילית
   1. חבר מזרק המכיל תמיסת NaCl של 15% לסלסול הירך לאחר המדידה האחרונה מתגובת המינון של איזופרוטרנול. בזהירות להחדיר 5 μL של הפתרון ההיפרטוני שנותר בצינור עד PVL לזוז מעט ימינה במהלך הדמיה באינטרנט. אז חכה עד שהלולאות יחזרו למצב יציב.
   2. עצור את מכונת ההנשמה בסיום תפוגה ולהזריק בולוס אחד של 10 μL של 15% NaCl בתוך 2 עד 3 שניות. בדוק אם PVL מתרחב במידה רבה ומוזז ימינה במהלך תצוגה חזותית מקוון.
2. כיול מוליכות לנפח
   1. המתן 5 דקות, לא פחות, כך בולוס מלוחים היפרטוני מדולל לחלוטין. לאחר מכן להסיר את הקטטר ולשאוב לפחות 600 דם μL מן החדר השמאלי של הלב הפועם באמצעות מזרק 1 מ"ל ו צינורית 21-מד. בשלב זה החיה מורדמת תחת הרדמה עמוקה ומעשי שךך על ידי דימום מסיבי, על ידי עצירת האוורור והסרת הלב.
   2. העבר את הדם לתוך cuvette כיול מראש (באמבט מים ב 37 °C (37 °F) כיול עם צילינדרים של נפח ידוע. מניחים את צנתר PV במרכז בכל גליל ומקליטים את המוליך. על ידי חישוב עקומה סטנדרטית עבור כל בעל חיים, ניתן להמיר את יחידות המוליכות לערכי נפח מוחלטים.

7. ניתוח

1. לאחר מדידות PVL מוצלחות בתנאים בסיסיים וגירוי איזופרוטרנול, לדמיין, להפוך, דיגיטציה, לחשב ולחלץ פרמטרים המאפיינים את תפקוד הלב (כמו PRSW, dP / dt, לחץ ונפח סופ-דיאסטולי, לחץ ונפח סיסטולי קצה, טאו קבוע הרפיה, בין היתר) באמצעות תוכנת ניתוח PVL מתאימה. ניתוח סטטיסטי נוסף וייצוגים גרפיים יכולים להתבצע באמצעות תוכנת ניתוח סטנדרטית.
2. ניתוח פרמטרים בלתי תלויים בטעינה מראש
   הערה: בשלב זה חיוני לתקנן את ההליך.
   1. בחר את 5-6 PVLs הראשונים המציגים הפחתת עומס מראש לאורך כל המדידות לניתוח של פרמטרים בלתי תלויים בטעינה מראש (איור 2D). מספר קבוע של PVLs שנבחרו לניתוח במהלך הפחתת עומס מראש יקטין את השונות בין המדידות של הפרמטרים שהושגו.
   2. חשב את הערך הממוצע של שתי המידות בכל שלב בפרוטוקול.

תוצאות

מדידת לולאת נפח הלחץ (PVL) היא כלי רב עוצמה לנתח פרמקודינמיקה לבבית של תרופות ולחקור את פנוטיפ הלב של מודלים עכבר מהונדס גנטית בתנאים נורמליים ופתולוגיים. הפרוטוקול מאפשר הערכה של רזרבה β-אדנרגיות לב במודל העכבר למבוגרים. כאן אנו מתארים שיטת חזה פתוח תחת הרדמה איזופלורנית בשילוב עם buprenorphine (...

Discussion

כאן, אנו מספקים פרוטוקול כדי לנתח את תפקוד הלב in vivo בעכברים תחת הגדלת גירוי β-adrenergic. ההליך יכול לשמש כדי לטפל בשניהם, פרמטרים בסיסיים של תפקוד הלב ואת עתודה adrenergic (למשל, inotropy ו כרונוטרופיה) בעכברים מהונדסים גנטית או על התערבויות. היתרון הבולט ביותר של מדידות לולאת נפח לחץ (PVL) בהשוואה לאמצעים ...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.4F SPR-839 catheter	Millar Instruments, USA	840-8111
1 ml syringes	Beckton Dickinson, USA	REF303172
Bio Amplifier	ADInstruments, USA	FE231
Bridge-Amplifier	ADInstruments, USA	FE221
Bovine Serum Albumin	Roth, Germany	8076.2
Buprenorphine hydrochloride	Bayer, Germany	4007221026402
Calibration cuvette	Millar, USA	910-1049
Differential pressure transducer MPX	Hugo Sachs Elektronik- Harvard Apparatus, Germany	Type 39912
Dumont Forceps #5/45	Fine Science tools Inc.	11251-35
Dumont Forceps #7B	Fine Science tools Inc.	11270-20
Graefe Forceps	Fine Science tools Inc.	11051-10
GraphPad Prism	GraphPad Software	Ver. 8.3.0
EcoLab-PE-Micotube	Smiths, USA	004/310/168-1
Etomidate Lipuro	Braun, Germany	2064006
Excel	Microsoft
Heparin	Ratiopharm, Germany	R26881
Hot plate and control unit	Labotec, Germany	Hot Plate 062
Isofluran	Baxter, Germany	HDG9623
Isofluran Vaporizer	Abbot	Vapor 19.3
Isoprenalinhydrochloride	Sigma-Aldrich, USA	I5627
Fine Bore Polythene tubing 0.61 mm OD, 0.28 mm ID	Smiths Medical International Ltd, UK	Ref. 800/100/100
MiniVent ventilator for mice	Hugo Sachs Elektronik- Harvard Apparatus, Germany	Type 845
MPVS Ultra PVL System	Millar Instruments, USA
NaCl	AppliChem, Germany	A3597
NaCl 0.9% isotonic	Braun, Germany	2350748
Pancuronium-bromide	Sigma-Aldrich, USA	BCBQ8230V
Perfusor 11 Plus	Harvard Apparatus	Nr. 70-2209
Powerlab 4/35 control unit	ADInstruments, USA	PL3504
Rechargeable cautery-Set	Faromed, Germany	09-605
Scissors	Fine Science tools Inc.	140094-11
Software LabChart 7 Pro	ADInstruments, USA	LabChart 7.3 Pro
Standard mouse food	LASvendi GmbH, Germany	Rod18
Stereo microscope	Zeiss, Germany	Stemi 508
Surgical suture 8/0	Suprama, Germany	Ch.B.03120X
Venipuncture-cannula Venflon Pro Safty 20-gauge	Beckton Dickinson, USA	393224
Vessel Cannulation Forceps	Fine Science tools Inc.	00574-11
Water bath	Thermo Fisher Scientific, USA
Syringe filter (Filtropur S 0.45)	Sarstedt, Germany	Ref. 83.1826