אינדוקציה היפותרמיה משך זמן קצר בחולדות באמצעות מודלים למחקרים הבוחנים רלוונטיות קלינית ומנגנונים

Summary

מאמר זה מתאר שתי שיטות של אינדוקציה היפותרמיה לכל הגוף קצר בחולדות. שיטת האינדוקציה הראשונה, המהירה, משתמשת בקירור פעיל באמצעות מאווררים ותרסיס אתנול לירידה מהירה בטמפרטורה. השיטה השנייה היא שיטת קירור הדרגתית. זה מושג באמצעות השילוב של הרדמה איזופלוריין והפחתת הגדרות הטמפרטורה על מחצלת החום ההומיאותרמית. התוצאה היא ירידה הדרגתית בטמפרטורת הגוף הליבה ללא שימוש במכשירי קירור חיצוניים. 

Abstract

היפותרמיה טיפולית (TH) היא אסטרטגיה neuroprotective רבת עוצמה שסיפקה ראיות חזקות עבור neuroprotection במחקרים פרה קליניים של הפרעות נוירולוגיות. למרות ראיות פרה-קליניות חזקות, TH לא הראה יעילות בניסויים קליניים של רוב ההפרעות הנוירולוגיות. הניסויים המוצלחים היחידים שהשתמשו בהיפותרמיה טיפולית היו קשורים לדום לב אצל מבוגרים ופגיעה איסכמית היפוקסית ביילודים. חקירות נוספות של הפרמטרים של השימוש בו, והשוואות עיצוב המחקר בין מחקרים פרה קליניים וקליניים, מוצדקים. מאמר זה מדגים שתי שיטות של אינדוקציה היפותרמיה לטווח קצר. השיטה הראשונה מאפשרת אינדוקציה היפותרמיה מהירה בחולדות באמצעות תרסיס אתנול ומאווררים. שיטה זו פועלת על ידי קירור העור, אשר היה פחות נפוץ בניסויים קליניים, עשוי להיות השפעות פיזיולוגיות שונות. קירור הוא הרבה יותר מהיר עם טכניקה זו מאשר הוא בר השגה בחולים אנושיים בשל הבדלים בשטח הפנים ליחס נפח. יחד עם זאת, מוצגת גם שיטה שנייה, המאפשרת שיעור קירור בר השגה קלינית עבור היפותרמיה לטווח קצר. שיטה זו קלה ליישום, ניתנת לשחזור ואינה דורשת קירור עור פעיל.

Introduction

TH הוא התרגול של קירור הגוף או טמפרטורת המוח על מנת לשמר את הכדאיות והתפקוד של האיבר / מערכת^1,2. התפקיד של היפותרמיה neuroprotection נחקר והראה יתרונות במגוון מודלים פרה קליניים של מחלות נוירולוגיות כגון שבץ³, דימום subarachnoid⁴, ופגיעה מוחית טראומטית⁵. במונחים של יישומים קליניים, TH הראה יעילות בחולים לאחר דום לב ובפגיעה היפוקסית-איסכמית^{יילודים 6}.

אינדוקציה TH מושגת באמצעות משטח או שיטות קירור אנדווסקולרי. רוב מחקרי היפותרמיה פרה קלינית לבצע קירור פני השטח על ידי החלת מים או אתנול על פרוות החיה, או על ידי שימוש בשמיכת קירור כדי להשיג טמפרטורת היעד¹. אצל בני אדם, קירור משטח מערכתי מושגת באמצעות חבילות קרח ושמיכות^{קירור 7,8}. קירור מהיר יותר הוכח בחולים באמצעות שיטות אנדווסקולריות, אשר זוג עירוי אינדוקציה של מלוחים קרים דרך צנתר תוך ורידי או תוך עורקי, עם המיקום של מכשיר קירור אנדווסקולרי בתוך נבל קאווה נחות^9,10. לדוגמה, טמפרטורת יעד מתונה של 33 °C (5 °F) ניתן להגיע ב 1.5 שעות עם קירור אנדווסקולרי לעומת 3-4 שעות עם קירור פני השטח בחולים¹¹. הגישה אנדווסקולרית הפכה גם פופולרית יותר בשנים האחרונות כי זה דווח כדי להפחית חלק מתופעות הלוואי לראות קירור משטח מערכתי, כגון רועד^12,13. האירופי multicenter, אקראי שלב III ניסוי קליני של היפותרמיה עבור שבץ איסכמי (EUROHYP-1) בשימוש בעיקר קירור פני השטח¹⁴. תוצאות שפורסמו לאחרונה מניסוי זה הראו כי צמרמורת הייתה סיבוך גדול וייתכן שהגבילה את היכולת להשיג את טמפרטורת היעד¹⁰. התגובה רועדת ידועה להיות מונע בעיקר על ידי טמפרטורת העור. כמה מאמצים נעשו לפתח שיטת קירור אנדווסקולרית מכרסם¹⁵, אבל האופי ה פולשני מאוד של הטכניקה לעומת זה המשמש בבני אדם, סיכונים מבלבלים את כל התוצאות המתקבלות ממודל זה.

הטמפרטורה היא אפנון המפתח של תהליכים ביולוגיים בגוף והוא מוסדר היטב על ידי הומאוסטזיס. לכן, כל מניפולציה של טמפרטורת הגוף יכול להיות סיכונים הקשורים. משך הקירור הוא גורם שעשוי להגביל את ההצלחה של ניסויים קליניים היפותרמיה. ניסויים אלה משתמשים בשיטת קירור ארוכת טווח, עם רבים השומרים על היפותרמיה מ 24-72 שעות¹¹. משך זמן ממושך זה מהווה סיכון לזיהום במהלך פרוטוקול הקירור. דלקת ריאות היא הסיבוך הנפוץ ביותר מהיפותרמיה, המשפיעה בין 40-50% מהחולים שעוברים את ההליך¹³. זאת בניגוד למה שנראה בדרך כלל במחקרים בבעלי חיים של היפותרמיה שבה פרדיגמה לטווח קצר משמשת (1-6 שעות)³. ההצלחה של מחקרים אלה בבעלי חיים פרה קליניים צפויה לגרום הסתגלות של היפותרמיה לטווח קצר לשימוש בניסויים קליניים. כתוצאה מכך, יש צורך במודל בעלי חיים של היפותרמיה לטווח קצר הדומה לשיעורי הקירור של ניסויים קליניים עתידיים. פרטים נוספים הנוגעים לפרמטרים אחרים של טמפרטורה ותוקף היפותרמיה לטווח קצר נדונו במספר מאמרי סקירה^1,16,17,18.

הדגים כאן הוא מודל הדרגתי של קירור כי הוא בר השגה קלינית יותר מאשר מודלים היפותרמיה ניסיוני הנוכחי. שיטה חדשנית זו יש קצב הרבה יותר איטי של קירור ולכן, הזמן למקד את הטמפרטורה קרוב יותר לטווח של אלה שנראו בניסויים קליניים של היפותרמיה¹¹. זה גם נמנע קירור משטח ישיר, אשר יש השפעות פיזיולוגיות ספציפיות, ולכן, עשוי להיות דומה יותר קירור אנדווסקולרי, אשר היה שיטת הקירור הנפוצה ביותר בניסויים קליניים^9,12. מודל זה מאפשר לבעלי חיים להתקרר בהדרגה מעל 2 שעות ואחריו תקופה קצרה של תחזוקה בטמפרטורת היעד. בנוסף, הקירור המהיר קצר היפותרמיה שיטה¹⁹ הוא הודגם גם. שיטת הקירור המהיר מאפשרת טמפרטורת היעד להיות מושגת במהירות לאחר תחילת היפותרמיה. בעוד גישה זו אינה רלוונטית קלינית כמו שיטת הקירור ההדרגתית, היא שימושית למחקרים שמטרתם לחקור את המנגנונים של היפותרמיה neuroprotection כדי לחקות את ההשפעות neuroprotective החזק שלה פרמקולוגית. שיטה זו יש גם יישומים פוטנציאליים מחוץ למדעי המוח והוא יכול להיות מותאם לכל מספר של מחקרים פרה קליניים. יתרון נוסף של שתי השיטות בהשוואה לגישות אחרות הוא שהן זולות ואינן דורשות ציוד מומחה. לבסוף, פרוטוקול זה מדגים גם השתלה של dataloggers טמפרטורה, שכן התחממות לאחר הניתוח וניטור מהם חשובים כדי למנוע היפותרמיה לאחר הניתוח בשוגג, עם הפוטנציאל שלה לבלבל את תוצאות המחקר²⁰.

Protocol

כל ההליכים הניסיוניים היו בהתאם לקוד התרגול האוסטרלי לטיפול ושימוש בבעלי חיים למטרות מדעיות ואושרו על ידי ועדת הטיפול והאתיקה בבעלי חיים של אוניברסיטת ניוקאסל (A-2013-343 ו- A-2020-003). בנוסף לשיטות האינדוקציה היפותרמיה המתוארות להלן, הפרוטוקולים הבאים נעשים באופן שגרתי בשילוב עם היפותרמיה: קנוניציה קו הירך כדי לפקח על לחץ הדם וקצב הלב²¹, ושבץ ניסיוני²².

1. השתלת Datalogger

הערה: התקן datalogger המשמש בפרוטוקול זה לא היה מסוגל לספק קריאה בזמן אמת של טמפרטורת הגוף. הקריאה אפשרית לאחר שמפתה הנתונים הוסר מהחיה ומחובר בחזרה למחשב. כתוצאה מכך, בדיקת הטמפרטורה רקטלית משמשת כדי לספק מידע בזמן אמת במהלך תהליך הקירור וההחלמה מחדש. בנוסף, הבדיקה רקטלית חיונית גם לשיטה זו מכיוון שמזרן החום הכירורגי שעליו ממוקם בעל החיים במהלך ההליך מוסדר על ידי מערכת הבדיקה ההסגרית. datalogger משמש גם מטרה חשובה של מתן נתוני טמפרטורה בחופשיות נע, חולדות ערות חשוב להבטיח כי טמפרטורת הגוף נורמלי נשמר לאחר התחממות. לכן, שני התקני ניטור טמפרטורה חשובים לפרוטוקול זה.

1. מרדים 10-12 שבועות זכר גדל עכברוש Wistar עם איזופלוראן (5% עבור אינדוקציה ו 2-2.5% לתחזוקה) בתערובת 50% N₂ ו 50% O_2.
2. לאחר אינדוקציה, מניחים את החולדה בתנוחה נוטה על מחצלת חום כירורגית.
3. מקם את החולדה כך שהאף יושב בקונוס האף. אבטחו את האף עם סרט ניתוחי כדי להבטיח שאף גז לא יברחו.
4. לגלח את הפרווה מהבטן הימנית התחתונה ולהזריק לאתר תת עורית עם הרדמה מקומית, Bupivacaine 0.2 מ"ל, 0.05%.
5. יש למרוח תמיסת חיטוי על האזור המגולח הטרי.
6. באמצעות כלים כירורגיים מעוקרים, לבצע חתך אורך 2 ס"מ לאורך אזור הבטן הימנית, פרוקסימלי לירך ימין. הפוך את החתך עמוק מספיק כדי לחשוף את החלל בקמט הירך הגחון.
7. השתמש hemostats ומלקחיים כדי ליצור 'כיס' מתחת לעור כי הוא גדול מספיק כדי להחזיק את המכשיר.
8. הכנס את מכשיר datalogger ניטור הטמפרטורה לכיס ולסגור את השריר והעור באמצעות 5-0 תפרי משי. השיטה התת עורית המתוארת כאן עדיפה על השיטה התוך-צפקית מכיוון שהיא פחות פולשנית ומאפשרת התאוששות טובה יותר לאחר ההליך.
9. ודא שמבדק נתונים ובדיקה רקטלית מכוילים צולבים לניטור טמפרטורה (ראה דיון).
10. ודאו כי מאגר הנתונים אינו נח על מחצלת החום של החיה לאחר ההחדרה, מכיוון שהדבר ישפיע על קריאות הטמפרטורה.

איור 1: השתלת התקן datalogger. (A)לוחות משמאל לימין מראים חתירה של כ -2 ס"מ שנעשה בצד ימין של הבטן התחתונה של החולדה. (B)datalogger ניטור טמפרטורה הוכנס תת עורית לתוך חתך הכיס. (ג)ההסתה נסגרה בתפרים ניילון. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

2. אינדוקציה של היפותרמיה פעילה (מהירה) ללימודים מכניים

1. הגדרת היפותרמיה (ראו איור 2). מניחים שני עמדות תשובה עם מלחציים משני צדי גופו של החולדה.
2. חבר מאוורר 60 מ"מ 12 v/130 mA לכל דוכן תגמולים המבטיח שהאוהדים מכוונים לגב התחתון של החולדה. המרחק בין המלחציים לחולדה הוא כ-20 ס"מ. המאוורר בו נעשה שימוש חייב להיות במהירות של 4,000 סל"ד.
3. יש מנורת חום בעלי חיים מוכן או בצד או על דוכן תשובה שלישי.
4. התחל היפותרמיה על ידי התאמת מחצלת חום בעלי חיים לטמפרטורת היעד הרצויה. בדוגמה זו, 32 °C (32°F) היא טמפרטורת היעד (3.75 ביחידת בקרת הטמפרטורה).
5. הפעל את שני המאווררים והחל שלושה עד ארבעה תרסיסים של 70% אתנול (בקבוק תרסיס פלסטיק סטנדרטי) על הגב התחתון של החולדה. קפל פרוות בעלי חיים בעת ריסוס עבור אינדוקציה קירור מהר יותר.
   הערה: אתנול משמש כפתרון מועדף על פני מים כי יש לו קצב מהיר יותר של אידוי ולכן התוצאה אינדוקציה היפותרמיה מהירה יותר.
6. יש להקפיד לא להרוות יתר על המידה את הפרווה, שכן זה יכול לתרום overshooting טמפרטורת היעד.
   הערה: המאווררים יאיצו את אידוי האתנול ואת תהליך הקירור.
7. אפשר מרווחים קצרים בין יישומי אתנול תוך שמירה מקרוב על הטמפרטורה רקטלית של החולדה.
8. הפסק כל יישום נוסף של אתנול ברגע שהטמפרטורה רקטלית מגיעה בתוך 1 °C (50°) של טמפרטורת היעד.
9. כבה את שני המאווררים לאחר שהטמפרטורה הגיעה בתוך 0.5 מעלות צלזיוס מטמפרטורת היעד (33 °C (33 °F) במקרה זה).
   הערה: כיבוי מאווררים לפני הגעת טמפרטורת היעד מסייע במניעת תרסיס יתר של החולדה מעבר לטמפרטורה הנדרשת.
10. אפשר לטמפרטורה לרדת ל 32 °C (5 °F).
    1. אם מתרחשת תרסיס יתר, השתמש במנורת חום בעלי חיים כדי לחמם קלות את החיה בחזרה למטרה. סיוע של אוהד אחד עשוי לשמש כדי למנוע התחממות מחדש של חבטה חוזרת.
11. לאחר טמפרטורת היעד הוא הגיע והתייצב, להמשיך לפקח על הטמפרטורה. הטמפרטורה בדרך כלל תישאר יציבה מאוד למשך שארית תקופת ההיפותרמיה ללא צורך בריסוס, שימוש במאווררים או שימוש במנורת חום.
12. כדי לחמם מחדש את החיה בסוף ההיפותרמיה, להתאים את טמפרטורת מחצלת החום בחזרה ל 37 °C (6 על יחידת בקרת הטמפרטורה המשמשת בדוגמה זו) ולאפשר לחיה thermoregulate על פני תקופה של 30 דקות.
    הערה: הגדרות הטמפרטורה על יחידות בקרת טמפרטורה עשוי להשתנות וזה עשוי, ולכן, יהיה צורך לקבוע הגדרות עבור היפותרמיה היעד ונורמוטמיה במכשירים בודדים.

3. אינדוקציה של היפותרמיה הדרגתית בר השגה קלינית ללא קירור עור פעיל

1. להשיג היפותרמיה על ידי הפחתת הטמפרטורה של טמפרטורת הליבה מוסדר מחצלת חום הומיאותרמי במרווחים קטנים לטמפרטורת היעד הנדרשת. בדוגמה המאוירת (איור 3B), נעשה שימוש במרווח של 1 °C כל 30 דקות.
2. מצננים את החיה כדי למקד את הטמפרטורה על פני התקופה הרצויה (2 שעות בדוגמה המתוארת). לאחר התקררות, לשמור על היעד עבור המרווח הרצוי. בדרך כלל, אין צורך בהתערבות נוספת אם הם נשמרים על מחצלת החום ההומיאותרמית שנקבעה לטמפרטורת היעד הרצויה.
3. אין צורך בקירור חיצוני עם פרוטוקול זה כמו הרדמה מונעת את הרגולציה הרגילה של טמפרטורת הגוף הליבה.
   הערה: דרישות Isoflurane לרדת עם היפותרמיה. ברוב בעלי החיים, ריכוז איזופלוראן התחלתי של 2% ניתן להפחית במרווחים של 0.1% כל 20-30 דקות עד 1.5% כדי לשמור על קצב נשימה יציב (>50 נשימות / דקה), קצב הלב ולחץ הדם, ולשמור על דיכוי תגובות רפלקס.
4. כדי לחמם מחדש את החיה לאחר היפותרמיה, להתאים את מחצלת החום כדי לאפשר לחיה לחמם מחדש על המרווח הרצוי. בדוגמה, התחממות מחדש עם התאמה אחת ל 37 °C (6 על יחידת בקרת הטמפרטורה FHC המשמש בדוגמה) הושג על פני תקופה של 30 דקות.
   1. למחקרים ארוכי טווח הדורשים התאוששות בעלי חיים, שמור על בעלי חיים בכלוב שמונח חצי מעל מחצלת חום כדי לאפשר לחיה להתרמורמולג ולהימנע מהיפותרמיה לאחר ניתוח בשוגג.
   2. אקמול רקטלי (250 מ"ג/ק"ג) יכול להינתן להתאוששות והקלה על כאבים השחלות. זריקות מלוחות תת עוריות (2 x 1.5 מ"ל) ניתן גם לתת כדי למנוע התייבשות מהרדמה והליכים כירורגיים.

תוצאות

איור 3A הוא ייצוג של האופן שבו חולדת ויסטאר מגיבה להיפותרמיה באמצעות גישת הקירור המהירה. אינדוקציה היפותרמיה מושגת על ידי שימוש של מאווררים 70% תרסיס אתנול. היפותרמיה ליעד של 32 °C (5 °F) מושגת ב 15 דקות. יש להקפיד על מנת להבטיח יחסי הגומלין עדינים בין השימוש במאווררים/ מנורת חום ותרסיס אתנול כדי לשמור על טמפרטורת המטרה. כפי שניתן לראות מאיור 3A, נצפתה חריגה בטמפרטורה קלה, שעלולה להתרחש אם לא יתקררו מ-0.5 מעלות צלזיוס מעל טמפרטורת היעד. המטרה נשמרת ומיוצבת בסימן 30 דקות והחימומה מחדש מתבצעת בשעה 1.5 שעות.

איור 3B מציג את הפרוטוקול ההדרגתי שבו טמפרטורת היעד ל-33 °C (50°F) מגיעה ל-2 שעות ומתוחזקת למשך 30 דקות לפני ההחמה מחדש בשעה 2.5 שעות. כאן, הטמפרטורה מותאמת במרווחים אשר מאריך את משך הזמן הדרוש כדי להגיע לטמפרטורת היעד. קווים מנוקדים אנכיים בשני הגרפים מייצגים את משך הקירור.

איור 3A ואיור 3B מתקבלים מהתקן datalogger. בתחילת הניסוי, datalogger מתוכנת ליזום הקלטה לפני ההשתלה. בסוף הניסוי, datalogger מוסר מן החיה ומחובר לקורא הטמפרטורה שסופק באמצעות יציאת USB. התוכנה (למשל, eTemperature) קוראת ומייצרת את הנתונים, אשר לאחר מכן ניתן לייצא לתוכנת גיליון אלקטרוני.

איור 2: הגדר פרוטוקול קירור מהיר. (A)שני מאווררים (חץ שחור) היו ממוקמים מעל אזור הגב התחתון של החולדה. בטקס החניכה של היפותרמיה, שני המאווררים הופעלו ותרסיס אתנול הוחל על הגב התחתון. השילוב של אתנול והמאוורר מקל ומאיץ היפותרמיה כדי להשיג במהירות את טמפרטורת היעד. (B)מנורת חום (חץ לבן) שימשה למניעת ההפוגה של היפותרמיה. ברגע שהגיעה טמפרטורת המטרה, מנורת החום שימשה כדי למנוע מטמפרטורת הליבה של החולדה לרדת נמוך יותר. לאחר שהמטרה התייצבה, מנורת החום ו/או המאוורר הנותר כובו. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 3: אינדוקציה היפותרמיה בשיטות פעילות (A) והדרגתיות (B). (A)טמפרטורת היעד הגיעה תוך 15 דקות באמצעות תהליך הקירור הפעיל ונשמרה במשך 60 דקות בדוגמה לעיל לפני שהחיה הוחזרה. (B)טמפרטורת היעד הגיעה תוך 2 שעות בשיטת הקירור ההדרגתית נשמרה במשך 30 דקות לפני שהחיה התגייסה מחדש. אזורים מוצללים בשני הגרפים מייצגים נקודות זמן שבהן נשמרה טמפרטורת היעד. קווים מנוקדים בניצב בשני הגרפים מתייחסים למשך הקירור הכולל. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Discussion

ההליכים המתוארים כאן מיושמים בקלות, לא פולשניים, ומספקים ירידות אמינות ושחזוריות בטמפרטורת הגוף הליבה לטמפרטורת היעד הרצויה.

ישנם מספר שלבים קריטיים בשיטת הקירור המהיר הכוללים את הפעולות הבאות. אין להרוות יתר על המידה אתנול - יש להקפיד שלא להשרות את החיה באתנול, שכן הדבר יפריע לתוצאות. לפקח על החיה במהלך אינדוקציה היפותרמיה- יש לנקוט כדי לפקח מקרוב על תגובות בעלי חיים אינדוקציה היפותרמיה מהירה. שעון צמוד של טמפרטורה רקטלית חשוב כדי להבטיח כי הטמפרטורה לא יורדת מתחת ליעד הרצוי - אם זה קורה, לכבות את המאווררים ולאפשר מנורת החום לחמם מחדש בעדינות את החיה בחזרה אל היעד הנדרש.

בשתי השיטות, ניטור פיזיולוגי חשוב כדי להבטיח התאמה מתאימה של מינון הרדמה. לקירור ממושך, מינון הרדמה לקוי עשוי להאריך את משך הקירור. במקרה זה, ריכוז איזופלוראן ניתן להגדיל עד שיעור קירור נאות מושגת. צעד קריטי נוסף הוא כיול צולב של התקני טמפרטורה. בעת שימוש מחצלת חום מווסתת גשושית טמפרטורה datalogger באותו ניסוי, מומלץ לחצות לכייל את datalogger עם בדיקה רקטלית, ב vivo, שכן ייתכנו וריאציות קלות בטמפרטורה המתועדת של שני המכשירים.

שיטות אלה מתאימות למחקרים המעוניינים לחקור את השימוש בהיפותרמיה כטיפול פוטנציאלי להפרעות נוירולוגיות. המטרה הספציפית של המחקר צריכה להכתיב איזו שיטה נעשה שימוש. ניתן לסווג את שתי השיטות כקירור משטח מערכתי, אולם השיטה השנייה אינה דורשת קירור פעיל. מודל הקירור ההדרגתי המתואר לעיל יש יישומים פוטנציאליים חשובים לשימוש היפותרמיה בטיפול שבץ איסכמי. היפותרמיה ארוכת טווח והסיבוכים הנובעים מכך מציבים אתגר לחולי שבץ קשישים. יתר על כן, התגובה רועדת מקשה על השגת טמפרטורת היעד בחלק מהחולים¹⁰. בעוד תרופות נגד רעד יכול לעזור להפחית את התגובה רועדת, קירור הדרגתי משך קצר יכול לשפר את הבעיה בצורה יעילה יותר. לאחר תקופת קירור קצרה יותר עשוי גם להפחית את השכיחות של דלקת ריאות מדווח לעתים קרובות בניסויים. יתרון פוטנציאלי נוסף של שיטה זו לטווח קצר הוא כי מהירות ההתחממות מחדש לא יכול להיות חשוב כמו בהשוואה קירור משך זמן ארוך. מחקרים קליניים מוקדמים מאוד של קירור ארוך טווח בחולי שבץ עם אוטם גדול מצאו כי התחממות מהירה הובילה לגבהים גדולים בלחץ תוך גולגולתי (ICP), אשר החמיר את התוצאה ולעתים קרובות היה קטלני. זה הוביל להתפתחות של פרדיגמות התחממות הדרגתית, אשר עוד יותר האריך את משך הקירור הכולל. קירור משך זמן קצר שומר רק על טמפרטורת היעד לתקופה קצרה ועשוי פחות לגרום ל- ICP ריבאונד. עבודה קודמת אשר חקרה טיפול היפותרמיה לגובה ICP, באמצעות פרוטוקול קירור והתחממות מהירה דומה כמו אלה המתוארים כאן, לא הראו ריבאונד הגבהת ICP לאחר התחממות מחדש^23,24.

ניסויים קליניים של היפותרמיה לטיפול שבץ איסכמי לא הצליחו לתרגם את היתרונות של היפותרמיה המדווחים במחקרים ניסיוניים. חוסר ההתאמה בשיעורי הקירור ומשך הזמן בין מודלים ניסיוניים למטופלים, הם משתנים חשובים שעשויים להסביר את הפער הזה. לאחר מודל ניסיוני של היפותרמיה הדומה יותר את קצב הקירור הקליני יאפשר חקירה מושכלת יותר של היתרונות של היפותרמיה כאמצעי טיפול לחולי שבץ.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Absolute ethanol	ThermoFisher Scientific/ Ajax Finechem	AJA214-20LPL	Diluted with deionized water to give 70 % ethanol
Antiseptic solution (Chlorhexidine)	David Craig	A2957
Anaesthetic (Marcain)	Aspen	PS13977
Brushless fan motor	Sirocco	YX2505	2 x 12 V/130 mA
Heat lamp	Reptile One	AC220	240 V 50/60 Hz
Heat pad	FHC, Inc	40-90-2
Rectal probe	FHC, Inc	40-90-5D-02
Temperature controller	FHC, Inc	40-90-8D
Temperature Datalogger	Maxim	DS1922L-F5