JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

מטרת פרוטוקול זה היא לתאר מודל פרה-קליני של בעלי חיים של כוריואמניוניטיס הנגרמת על ידי סטרפטוקוקוס מקבוצה B (GBS). המחקר נועד לחקור תהליכים מכניסטיים, קשרים סיבתיים פוטנציאליים עם ליקויים התפתחותיים, ולבסוף לפתח טיפולים אנטי דלקתיים תרגומיים של שליה והגנה נוירולוגית.

Abstract

סטרפטוקוקוס מקבוצה B (GBS) הוא אחד החיידקים הנפוצים ביותר המבודדים במהלך הריון אנושי. זהו גורם מוביל לזיהום/דלקת שליה, הנקרא כוריואמניוניטיס. כוריואמניוניטיס חושפת את העובר המתפתח לסיכון גבוה לפגיעות באיברים, תחלואה סביב הלידה ותמותה, כמו גם ליקויים נוירו-התנהגותיים לכל החיים ובעיות התפתחותיות אחרות שאינן נוירולוגיות. שני תת-הסוגים השכיחים ביותר של מבודדי GBS מרקמות האם והעובר הם סרוטיפים Ia (13%-23%) ו-III (25%-53%). המעבדה שלנו פיתחה ואפיינה מודל חולדות של כוריואמניוניטיס הנגרמת על ידי GBS כדי לחקור את ההשפעות הבאות על מערכת העצבים המרכזית של העובר המתפתח ולהבין היבטים מכניסטיים בסיסיים. מאמר זה מציג את העיצוב כמו גם את השימושים של מודל החולדה הפרה-קליני, המשחזר מקרוב את סימן ההיכר של כוריואמניוניטיס הנגרמת על ידי GBS בבני אדם. מאמר זה נועד לסייע למדענים לשחזר את תכנון הניסוי, כמו גם לספק תמיכה באמצעות דוגמאות לפתרון בעיות. המודל הנוכחי עשוי גם לתרום לתגליות פוטנציאליות באמצעות חשיפת גורמים, מנגנונים ודרכים טיפוליות חדשות, שנותרו בלתי מיושבים בליקויים התפתחותיים רבים הנובעים מכוריואמניוניטיס. יתר על כן, ניתן להרחיב את השימוש במודל זה למחקרים של תחלואה שכיחה וחמורה סביב הלידה המשפיעות, למשל, על הרשתית, המעי, הריאות והכליות. העניין העיקרי של מחקר זה הוא בתחום של ליקויים נוירו-התפתחותיים עובריים הנגרמת על ידי GBS כגון שיתוק מוחין (CP), הפרעת קשב וריכוז (ADHD) והפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD). הרציונל התומך במודל זה מוצג במאמר זה, ואחריו נהלים ותוצאות.

Introduction

הפעלה חיסונית אימהית (MIA) תוארה כאחד מגורמי הסיכון העצמאיים הקריטיים ביותר ללידה מוקדמת, מוות עוברי וליקויים קוגניטיביים והתנהגותיים לכל החיים בצאצאים 1,2,3,4. חלק ניכר מהמחקר הפרה-קליני הקיים על תפקידה של דלקת הריונית על תוצאות שליה והתפתחותיות משתמש במרכיבי פתוגנים, כגון ליפופוליסכריד (LPS) מ-E. coli והאנלוגי הסינתטי של RNA דו-גדילי נגיפי, פוליאינוסיני: חומצה פוליציטידילית (Poly[I: C]), המחקה זיהומים ויראליים. עם זאת, למרות שסטרפטוקוקוס מקבוצה B (GBS) הוא הגורם השכיח ביותר לזיהום סביב הלידה, מעט מודלים של בעלי חיים התייחסו לתפקידו במנגנונים דלקתיים הפועליםובתוצאות.

GBS הוא קוקוס גרם חיובי מכוסה המתיישב בדרכי המין התחתונות בכ-15%-30% מהנשים ההרות6. זה מוביל לזיהום/דלקת שליה, המכונה כוריואמניוניטיס 7,8. מבין עשרת הסרוטיפים של GBS, שני הסרוטיפים השכיחים ביותר Ia ו-III הם גורמים זיהומיים עיקריים לפציעות ברקמות המטרנו-עובר 9,10. הוכח כי זיהום GBS מוביל לתגובה דלקתית גבוהה יותר בדם העובר ובמחסור בשליה, אשר חשודים מאוד כמעורבים בהפרעות נוירו-התפתחותיות מרובות כגון שיתוק מוחין (CP), הפרעת קשב וריכוז (ADHD) והפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD)5,11.

במהלך עשר השנים האחרונות, פיתחנו מודל חולדות של כוריואמניוניטיס הנגרמת על ידי GBS שמוביל לליקויים התפתחותיים שונים בצאצאים12. מודל פרה-קליני זה מדגים את הקשר הסיבתי בין דלקת שליה הנגרמת על ידי GBS לבין מגוון ליקויים נוירו-התפתחותיים ספציפיים למין בצאצאים 13,14,15. מטרת מאמר זה היא לספק לקוראים תובנה לגבי העיצוב של מודל חולדה פרה-קליני של זיהום בסוף ההריון וכתוצאה מכך ליקויים נוירו-התנהגותיים בצאצאים. הפרוטוקול הנוכחי נועד לחקות את המציאות הקלינית של כוריואמניוניטיס הנגרמת על ידי GBS.

תוצאות ממודל פרה-קליני זה מראות כי חיסון תוך-צפקי (IP) בסוף ההריון (איור 1) של GBS מוביל ל-(i) זיהום שליה ודלקת, ועונה על הקריטריונים האבחנתיים של כוריואמניוניטיס16; (ii) ויסות מסיבי של IL-1β ומולקולות דלקתיות במורד הזרם ממסלול IL-1, בתוך השליה12; (3) ליקויים נוירו-התפתחותיים בצאצאים12; (iv) הבדלים בין המינים בתגובות החיסוניות וליקויים נוירו-התנהגותיים שלאחר מכן, כגון צאצאים נקבות המציגים תכונות דמויות ADHD בוגרות בעוד שצאצאים זכרים מציגים תכונות דמויות ASD מוקדמות וארוכות טווח; (v) תוצאות נוירו-התנהגותיות מובהקות בצאצאים בהתאם לסרוטיפ GBS המשמש לגרימת כוריואמניוניטיס14,15. בהתאם לממצאים אלה, הצעדים הבאים העיקריים המשתמשים במודל זה יהיו לבחון, ראשית, את תפקידו של אנדרוגן בכוריואמניוניטיס הנגרמת על ידי GBS, ושנית, את תפקיד ההגנה על השליה והעצבים של מולקולות המכוונות למסלולים דלקתיים ספציפיים, בתקווה להביא חלק מהמולקולות הללו לסף הניסויים הקליניים הטיפוליים.

Protocol

כל הניסויים אושרו על ידי מכון המחקר של מרכז הבריאות של אוניברסיטת מקגיל (RI-MUHC). כל הניסויים בוצעו על פי המועצה הקנדית לטיפול בבעלי חיים.

1. חולדות לואיס בהריון

  1. השג חולדות לואיס ממקורות מסחריים ביום ההריון (G)14. שיכנו אותם במתקן מתאים לבעלי חיים (מתקן בעלי חיים RI-MUHC) בסביבה מבוקרת בטמפרטורה של 20-23 מעלות צלזיוס עם מחזור אור/חושך של 12 שעות, וגישה למים ומזון עד גיל17.
  2. שקלו סכרים מדי יום כדי לזהות התנהגות מחלה כלשהי מ-G14 (כלומר, יום ההגעה) ועד G22 (כלומר, יום הניתוח הקיסרי)

2. גידול חיידקים

  1. ב- G18, הכינו שתי מבחנות סטריליות עם 5 מ"ל של מרק עירוי לב מוח סטרילי (BHI). קחו חלק קטן של מלאי חיידקים קפואים (סרוטיפ קפסולרי β-המוליטי Ia ב-BHI ו-15% גליצרול14) מ-80 מעלות צלזיוס והוסיפו אותו לתוך צינורות BHI של 5 מ"ל (איור 2).
  2. מניחים את הצינורות בשייקר (240 סל"ד) למשך 18 שעות בחום של 37 מעלות צלזיוס.
  3. ב- G19, הכינו תמיסה של 3% של GBS במרק BHI סטרילי על ידי איסוף 1.5 מ"ל מהתמיסה המודגרת למרק BHI סטרילי של 48.5 מ"ל.
  4. אסוף 1.5 מ"ל מתמיסת 3% GBS בתוספת BHI לקובטה. בעזרת ספקטרופוטומטר, רשום את הספיגה הראשונית כ-T0 (צפיפות אופטית (OD)600 ננומטר).
    הערה: ריק עשוי מרק BHI סטרילי שימש בכל פעם לאיזון הספקטרופוטומטר.
  5. מניחים את תמיסת ה-3% בחממה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם ניעור של 240 סל"ד למשך כשעתיים.בדוק את הספיגה כל 20 דקות לאחר שעתיים עד שמגיעים למידה של ספיגה בין 0.6 ל-0.8 (OD600 ננומטר).
  6. לאחר שהגעתם לספיגה הרצויה, אספו 20 מ"ל של תמיסת 3% GBS בתוספת BHI והוסיפו אותו לצינור של 50 מ"ל.
  7. צנטריפוגה (1792 x גרם) הדגימות ב-4 מעלות צלזיוס למשך 13 דקות ושטפו את ה-GBS המשקע פעמיים עם 20 מ"ל של 0.9% מי מלח סטריליים.
  8. השעו את ה-GBS המשקע ב-2 מ"ל של 0.9% מי מלח סטריליים. שמור את המנה הזו על קרח עד למועד ההזרקה.
  9. הזרקה (תוך צפקית) לקבוצת הביקורת עם 100 מיקרוליטר של תמיסת מלח סטרילית של 0.9% ולקבוצת ה-GBS עם 100 מיקרוליטר סרוטיפ β-המוליטי Ia GBS מרחף בתמיסת מלח סטרילית של 0.9%.
    הערה: המינון המוזרק היה 108 יחידות יוצרות מושבה (CFUs) של GBS או מי מלח (לביקורת). חיסון של 108 CFU הוכח היטב כמודל לכוריואמניוניטיס אנושית. חיסון במינון גבוה יותר של GBS יגרום ככל הנראה לתמותה מסכרים. הזרקה של פחות מהמינון שהוזכר לא תחקה את הזיהום והדלקת.
  10. בצע דילולים בין 10-5 ל-10-10 וצלח את הדילולים בשלוש פעמים על צלחות אגר BHI. כדי לשלול זיהום, בצע שתי בקרות שליליות (ללא כל תוספת חומר), האחת על צלחת אגר BHI והשנייה על צלחת אגר CHROMID Strepto B. בצע שתי בקרות חיוביות על ידי ציפוי החיידקים המוכנים על צלחת אגר BHI וצלחת אגר CHROMID Strepto B. מניחים את כל הצלחות בחממה למשך הלילה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס (איור 3).
    הערה: לוחות אגר סטרפטו B של כרומיד הם מדיום סלקטיבי לבדיקת GBS עליו מושבות ה-GBS מופיעות באדום.

3. טכניקת הזרקה

  1. ב-G19, הוציאו את החולדה בעדינות מהכלוב והניחו אותה על משטח ישר. שתק את החולדה באמצעות מגבת לכיסוי הראש ופלג הגוף העליון. הרם את הרגל האחורית כדי לאפשר גישה נוחה לאתר ההזרקה.
    הערה: ודא שהאזור האנטומי המתאים להזרקה נמצא ברבע הימני התחתון של הבטן כדי למנוע ניקוב של איברים כגון שלפוחית השתן וצקום (איור 1).
  2. השתמש במזרק אינסולין U-100 עם מחט 29 גרם 1/2 אינץ'. הכנס את שיפוע המחט כלפי מעלה לכיוון הראש בזווית של 40-45° לאופק, כפי שמוצג באיור 1. בצע זריקות GBS פעם אחת לכל סכר. הקפד לבצע זריקות כל שעה כדי למנוע אפקט זמן בין סכרים מחוסנים.
    הערה: יש לגוון את הזריקות בין הצד השמאלי והימני בימים בהם מבוצעת יותר מזריקה אחת ביום.

4. קביעת מינון

  1. ב-G20, ודא ארבעה בקרות (שלב 10.2) וספור את מושבות החיידקים בכל צלחת אגר BHI.
  2. חשב את מושבות ה-GBS הממוצעות עבור כל גורם דילול (10-5 עד 10-10) כדי לקבוע את המינון המדויק של GBS המוזרק

5. ניתוח קיסרי ואיסוף רקמות

  1. בצע ניתוחים קיסריים ב-G22 (72 שעות לאחר ההזרקה) ובצע ניתוחים עוקבים עם שעה אחת בין סכר לסכר בהתאם לזמן החיסון של כל סכר.
  2. להרדים את הסכר בתא המתת חסד עם 2% איזופלורן ו-1.5% O2, להרדמה כללית.
  3. הניחו את הסכר על כרית חימום מכוסה בחבישה כירורגית מתאימה ומרחו את משחת העיניים על העין כדי למנוע התייבשות.
  4. הכן את אזור הניתוח על ידי הסרת שיער מאזור הבטן התחתונה באמצעות להב או אזמל.
  5. נקו את אזור הניתוח עם גזה סטרילית ספוגה בחומר חיטוי.
  6. בעזרת אזמל סטרילי ומספריים עדינים, בצע חתך אופקי בבטן התחתונה של החולדה. בצע חתך אנכי משני צידי הבטן כדי לחשוף את האיברים הבסיסיים.
  7. הפרד דגימות שליה מעוברים. רשום את משקל העוברים, השליה ויחס העובר/שליה.
  8. בעזרת אזמל סטרילי חותכים את השליה לשני חצאים.
    1. השתמש ב-2-מתילבוטן כדי להקפיא במהירות מחצית מהשליה ולשמור בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס עד הדרוש לקביעת רמות החלבון באמצעות ELISA.
    2. תקן את החצי השני של השליה בפורמלדהיד 4% חוצץ לניתוח באתרו על ידי אימונוהיסטוכימיה (IHC) כדי לחקור את הביטוי של GBS ותאים פולימורפו-גרעיניים (PMNs) בשליה שנאספה.
  9. ערוף את הראש כדי לאסוף דם מעוברים חיים ולהעביר את הדם לצינורות מפריד ג'ל ליתיום הפרין.
  10. צנטריפוגה (18,928 x גרם) דגימות דם ב-4 מעלות צלזיוס כדי להפריד את הפלזמה ולאחסן את דגימות הפלזמה ב-80 מעלות צלזיוס עד לניתוח נוסף.
    הערה: דגימות פלזמת הדם העוברי שנאספו ישמשו ל-ELISA לבדיקת רמות החלבון של ציטוקינים שונים בדם העובר.
  11. אסוף זנבות עובריים כדי לקבוע את מין העוברים על ידי הגברה של רצף בתוך הגן SRY, באמצעות הפריימרים הבאים (פריימר קדימה: 5' - TAC AGC CTG AGG ACA TAT TA3'; פריימר הפוך: 5' - GCA CTT TAA CCC TTC GAT -3') כפי שתואר קודם לכן18.
  12. באמצעות מחט של 5 מ"ל 23 גרם, אספו דם מהסכר על ידי ניקוב לב כדי לבדוק ולהשוות את רמות החלבון של ציטוקינים שונים בדם הסכר לאלו שבדם העובר. המתת חסד של הסכרים באמצעות ניקוב דיאפרגמה ושיטת עריפת ראשים.
    הערה: בין בעלי חיים, יש לנקות את כל המכשירים המשומשים עם רקמה סטרילית ומי מלח סטריליים. כדי לבצע מחקרים נוירופתולוגיים והתנהגותיים בצאצאים, סכרים ילדו באופן טבעי ב-G23. לאחר המתת חסד של צאצאים ביום שלאחר הלידה (PN) 80, נאספו מוחות למחקרים מולקולריים והיסטולוגיים.

תוצאות

חיסון IP של GBS הביא לזיהום שליה
צביעה אימונוהיסטוכימית (IHC) (באמצעות נוגדנים רב-שבטיים המכוונים לסרוטיפ GBS Ia) הראתה כי זיהום GBS הגיע לתא העשרוני של השליה. הזיהום התפשט גם מהדצידואה למבוך, לצלחת הכוריונית, ובמקרים מסוימים, לעוברים שהובילו למוות עוברי (5.8 ± 0.8 בהמלטות...

Discussion

שלבים קריטיים בפרוטוקול
מספר שלבים של הפרוטוקול הם קריטיים ודורשים כמה בקרות איכות. לדוגמה, קיים סיכון לזיהום מלאי ה-GBS על ידי פתוגנים אחרים. ניתן לזהות זאת במהירות באמצעות הטכניקה המתאימה של זיהוי מיקרוביאלי של GBS כגון היבט המושבה על אגר BHI (למשל, גודל, צורה, צב?...

Disclosures

למחברים אין ניגודי אינטרסים כספיים.

Acknowledgements

מחקר זה נתמך על ידי מכון המחקר של מרכז הבריאות של אוניברסיטת מקגיל (RI-MUHC), המכונים הקנדיים לחקר הבריאות (CIHR). מחקר זה התאפשר על ידי סוכנויות המימון, המוסדות והקרנות הבאים: המכון הקנדי לחקר הבריאות (CIHR), קרן הכוכבים, Fonds de Recherche Québec-Sciences (FRQS), אוניברסיטת מקגיל ואוניברסיטת שרברוק. תודה רבה לד"ר קלייר פויארט, אוניברסיטת דניס דידרו (פריז VII), צרפת, ולד"ר מריאלה סגורה, אוניברסיטת מונטריאול, קנדה על התרומות הנדיבות של GBS.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
5 mL sterile tubeBD Biosciences
50 ml falcon tubesThermo Fisher339652
Blade or scalpelBD Medical371716
Brain Heart Infusion BrothCriterion (Hardy diagnostics)C5141
CHROMID Strepto B agar plateBioMerieux, Saint-Laurent43461
Columbia blood agar 5 % with sheep blood mediumThermo ScientificR01215
Forward primer5' - TAC AGC CTG AGG ACA TAT TA3'Sigma
Insulin syringeBecton, Dickinson and Co(BD)324702
Lewis ratsCharles River Laboratories
MethylbutanSigma AldrichM32631
Microtainer blood collection tubesBecton, Dickinson and Co(BD)365965
Reverse primer5' - GCA CTT TAA CCC TTC GAT GA -3'Sigma
Serological Pipettes 1 MLThermo Fisher170353N
Serological Pipettes 10 MLThermo Fisher170356N
Serological Pipettes 25 MLThermo Fisher170357N
Serological Pipettes 5 MLThermo Fisher170355N
Superfrost Plus Micro Slide, PremiumVWRCA48311-703

References

  1. Hui, C. W., et al. Prenatal immune challenge in mice leads to partly sex-dependent behavioral, microglial, and molecular abnormalities associated with schizophrenia. Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 13 (2018).
  2. Costa, A., et al. Activation of the NLRP3 inflammasome by group B streptococci. Journal of Immunology. 188 (4), 1953-1960 (2012).
  3. Gupta, R., et al. RNA and beta-hemolysin of group B Streptococcus induce interleukin-1beta (IL-1beta) by activating NLRP3 inflammasomes in mouse macrophages. Journal of Biological Chemistry. 289 (20), 13701-13705 (2014).
  4. Henneke, P., et al. Lipoproteins are critical TLR2 activating toxins in group B streptococcal sepsis. Journal of Immunology. 180 (9), 6149-6158 (2008).
  5. Nelson, K. B., Chang, T. Is cerebral palsy preventable. Current Opinion in Neurology. 21 (2), 129-135 (2008).
  6. Larsen, J. W., Sever, J. L. Group B Streptococcus and pregnancy: a review. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 198 (4), 440-448 (2008).
  7. Patras, K. A., Nizet, V. Group B Streptococcal maternal colonization and neonatal disease: molecular mechanisms and preventative approaches. Frontiers in Pediatrics. 6, 27 (2018).
  8. Tita, A. T., Andrews, W. W. Diagnosis and management of clinical chorioamnionitis. Clinics in Perinatology. 37 (2), 339-354 (2010).
  9. Teatero, S., et al. Serotype distribution, population structure, and antimicrobial resistance of Group B Streptococcus strains recovered from colonized pregnant women. Journal of Clinical Microbiology. 55 (2), 412-422 (2017).
  10. Lu, B., et al. Microbiological and clinical characteristics of Group B Streptococcus isolatescausing materno-neonatal infections: high prevalence of CC17/PI-1 and PI-2b sublineage in neonatal infections. Journal of Medical Microbiology. 67 (11), 1551-1559 (2018).
  11. Limperopoulos, C., et al. Positive screening for autism in ex-preterm infants: prevalence and risk factors. Pediatrics. 121 (4), 758-765 (2008).
  12. Bergeron, J. D., et al. White matter injury and autistic-like behavior predominantly affecting male rat offspring exposed to group B streptococcal maternal inflammation. Developmental Neuroscience. 35 (6), 504-515 (2013).
  13. Giraud, A., et al. Ampicillin treatment increases placental Interleukin-1 beta concentration and polymorphonuclear infiltration in Group B Streptococcus-induced chorioamnionitis: A preclinical study. Neonatology. 117 (3), 369-373 (2020).
  14. Allard, M. J., et al. A sexually dichotomous, autistic-like phenotype is induced by Group B Streptococcus maternofetal immune activation. Autism Research. 10 (2), 233-245 (2017).
  15. Allard, M. J., Giraud, A., Segura, M., Sebire, G. Sex-specific maternofetal innate immune responses triggered by group B Streptococci. Scientific Reports. 9 (1), 8587 (2019).
  16. Allard, M. J., Brochu, M. E., Bergeron, J. D., Segura, M., Sebire, G. Causal role of group B Streptococcus-induced acute chorioamnionitis in intrauterine growth retardation and cerebral palsy-like impairments. Journal of Developmental Origins of Health and Disease. 10 (5), 595-602 (2019).
  17. Girard, S., Tremblay, L., Lepage, M., Sebire, G. IL-1 receptor antagonist protects against placental and neurodevelopmental defects induced by maternal inflammation. Journal of Immunology. 184 (7), 3997-4005 (2010).
  18. Bergeron, J., et al. Activation of the IL-1beta/CXCL1/MMP-10 axis in chorioamnionitis induced by inactivated Group B Streptococcus. Placenta. 47, 116-123 (2016).
  19. Allard, M. J., Brochu, M. E., Bergeron, J. D., Sebire, G. Hyperactive behavior in female rats in utero-exposed to group B Streptococcus-induced inflammation. International Journal of Developmental Neuroscience. 69, 17-22 (2018).
  20. Shuster, K. A., et al. Naturally occurring disseminated group B streptococcus infections in postnatal rats. Comparative Medicine. 63 (1), 55-61 (2013).
  21. Randis, T. M., et al. Group B Streptococcus beta-hemolysin/cytolysin breaches maternal-fetal barriers to cause preterm birth and intrauterine fetal demise in vivo. Journal of Infectious Diseases. 210 (2), 265-273 (2014).
  22. Noble, K., et al. Group B Streptococcus cpsE is required for Serotype V capsule production and aids in biofilm formation and ascending infection of the reproductive tract during pregnancy. ACS Infectious Diseases. 7 (9), 2686-2696 (2021).
  23. Kim, C. J., et al. Acute chorioamnionitis and funisitis: definition, pathologic features, and clinical significance. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 213, 29-52 (2015).
  24. Becker, K. J. Strain-related differences in the immune response: Relevance to human stroke. Translational Stroke Research. 7 (4), 303-312 (2016).
  25. Mestas, J., Hughes, C. C. Of mice and not men: differences between mouse and human immunology. Journal of Immunology. 172 (5), 2731-2738 (2004).
  26. Fernandez de Cossio, L., Guzman, A., vander Veldt, S., Luheshi, G. N. Prenatal infection leads to ASD-like behavior and altered synaptic pruning in the mouse offspring. Brain, Behavior, and Immunity. 63, 88-98 (2017).
  27. Shi, L., Fatemi, S. H., Sidwell, R. W., Patterson, P. H. Maternal influenza infection causes marked behavioral and pharmacological changes in the offspring. The Journal of Neuroscience. 23 (1), 297-302 (2003).
  28. Boksa, P. Effects of prenatal infection on brain development and behavior: a review of findings from animal models. Brain, Behavior, and Immunity. 24 (6), 881-897 (2010).
  29. Girard, S., Kadhim, H., Beaudet, N., Sarret, P., Sebire, G. Developmental motor deficits induced by combined fetal exposure to lipopolysaccharide and early neonatal hypoxia/ischemia: a novel animal model for cerebral palsy in very premature infants. Neuroscience. 158 (2), 673-682 (2009).
  30. Meyer, U., Feldon, J. To poly(I:C) or not to poly(I:C): advancing preclinical schizophrenia research through the use of prenatal immune activation models. Neuropharmacology. 62 (3), 1308-1321 (2012).
  31. Lammert, C. R., Lukens, J. R. Modeling autism-related disorders in mice with Maternal Immune Activation (MIA). Methods. Journal of Molecular Biology. 1960, 227-236 (2019).
  32. Gundling, W. E., Wildman, D. E. A review of inter- and intraspecific variation in the eutherian placenta. Philosophical Transactions of the Royal Society B. 370 (1663), 20140072 (2015).
  33. Harrell, M. I., et al. Exploring the pregnant guinea pig as a model for Group B Streptococcus intrauterine infection. The Journal of Infectious Diseases. 2 (2), (2017).
  34. Redline, R. W. Classification of placental lesions. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 213, 21-28 (2015).
  35. Erez, O., et al. Differential expression pattern of genes encoding for anti-microbial peptides in the fetal membranes of patients with spontaneous preterm labor and intact membranes and those with preterm prelabor rupture of the membranes. Journal of Maternal-Fetal and Neonatal Medicine. 22 (12), 1103-1115 (2009).
  36. Burns, C., Hall, S. T., Smith, R., Blackwell, C. Cytokine levels in late pregnancy: Are female infants better protected against inflammation. Frontiers in Immunology. 6, 318 (2015).
  37. Elsmen, E., Ley, D., Cilio, C. M., Hansen-Pupp, I., Hellstrom-Westas, L. Umbilical cord levels of interleukin-1 receptor antagonist and neonatal outcome. Biology of the Neonate. 89 (4), 220-226 (2006).
  38. Chuang, K. H., et al. Neutropenia with impaired host defense against microbial infection in mice lacking androgen receptor. Journal of Experimental Medicine. 206 (5), 1181-1199 (2009).
  39. Mantalaris, A., et al. Localization of androgen receptor expression in human bone marrow. The Journal of Pathology. 193 (3), 361-366 (2001).
  40. Rasmussen, J. M., et al. Maternal Interleukin-6 concentration during pregnancy is associated with variation in frontolimbic white matter and cognitive development in early life. Neuroimage. 185, 825-835 (2019).
  41. Dozmorov, M. G., et al. Associations between maternal cytokine levels during gestation and measures of child cognitive abilities and executive functioning. Brain, Behavior, and Immunity. 70, 390-397 (2018).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

BGBS

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved