A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
כאן, מוצג פרוטוקול לייצור התקנים מיקרופלואידיים מבוססי זכוכית המשמשים ליצירת תחליבי מונודיספראז גבוהים עם גודל טיפה מבוקר.
בכתב יד זה מתוארים שלושה פרוטוקולים שונים שלב אחר שלב ליצירת טיפות תחליב חד-ממדיות מאוד באמצעות מיקרופלואידיקה מבוססת זכוכית. המכשיר הראשון בנוי ליצירת טיפות פשוטות המונעות על ידי כוח הכבידה. המכשיר השני נועד ליצור טיפות תחליב בסכמת זרימה משותפת. המכשיר השלישי הוא הרחבה של התקן coflowing עם תוספת של נוזל שלישי הפועל כקרקע חשמלית, המאפשר היווצרות של טיפות חשמליות כי לאחר מכן לפרוק. במערך זה, לשניים משלושת הנוזלים יש מוליכות חשמלית ניכרת. הנוזל השלישי מתווך בין שני אלה והוא דיאלקטרי. הפרש מתח המופעל בין שני הנוזלים המוליכים יוצר שדה חשמלי המשתלב עם לחצים הידרודינמיים של הנוזלים הזורמים, ומשפיע על תהליך היווצרות הסילון והישורה. התוספת של השדה החשמלי מספקת נתיב ליצירת טיפות קטנות יותר מאשר בהתקני coflow פשוטים וליצירת חלקיקים וסיבים עם מגוון רחב של גדלים.
ייצור מבוקר של טיפות בקנה מידה זעיר וננומטרי עם התפלגות גודל צרה היא משימה מאתגרת. טיפות אלה מעניינות את ההנדסה של חומרים רכים עם יישומים רבים במדע וטכנולוגיה 1,2,3,4,4,5,6.
המכשירים הנפוצים ביותר לשיעור הייצור הגבוה של טיפות הם מיקסרים7 ותחליבי אולטרסאונד8. שיטות אלה הן פשוטות ובעלות נמוכה, אך הן בדרך כלל גורמות לטיפות פולידיספרזה עם מגוון רחב של גדלים. לפיכך, נדרשים צעדים נוספים כדי לייצר דגימות מונודיספרזה. ניתן לתכנן התקנים מיקרופלואידיים באופן שונה כדי לספק דרך יעילה להפיל היווצרות. בנוסף, קצבי הזרימה הנמוכים בדרך כלל המעורבים (כלומר, מספר ריינולדס נמוך) מאפשרים שליטה רבה על זרימת הנוזל.
בעוד שהתקנים מיקרופלואידיים מיוצרים בדרך כלל באמצעות טכניקות ליתוגרפיות עם פולי(דימתיל) סילוקסן (PDMS), כתב יד זה מתמקד בהתקנים נימיים מבוססי זכוכית. התקני PDMS נבחרים בדרך כלל בשל יכולתם לתכנן תבניות ערוצים מורכבות ובגלל מדרגיותם. מכשירי זכוכית, לעומת זאת, הם קשיחים ובעלי עמידות ממסים גדולה יותר ממקביליהם ב- PDMS. בנוסף, ניתן לשנות זכוכית כדי לשנות את יציבות הרטיבות שלה, המאפשרת שליטה בדור של תחליבים מורכבים. היכולת לטפל באופן עצמאי בקירות הזרבובית והתעלה מאפשרת היווצרות של טיפות באופן מבוקר וניתן לשחזור, תוך הבטחת היציבות של האמולסיות המתקבלות אם הטיפות היו נוגעות בקירות9; אחרת הטיפות עלולות להתלכד ולהצטבר בקיר. הבדל נוסף בין שני סוגי ההתקנים הללו הוא שבהתקנים מבוססי זכוכית, הזרימה היא תלת-ממדית, בעוד שהיא מישורית בהתקני PDMS קונבנציונליים. עובדה זו ממזערת את המגע טיפתי עם דפנות הערוץ, כך שניתן להזניח את השפעת קווי המגע10, ובכך להגן על היציבות של טיפות תחליב מרובות.
איור 1: תצורות שונות של התקנים מיקרופלואידיים. שרטוטים של (A) צומת T, (B) התקן coflowing ו-(C) התקן ממוקד זרימה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
ישנן שלוש גיאומטריות עיקריות בשימוש, כלומר T-צומת11, מיקוד זרימה12,13, ו coflow14. בגאומטריה של צומת T, הפאזה המפוזרת הכלולה בתעלה ניצבת מצטלבת בניצב עם הערוץ הראשי המאכלס את הפאזה הרציפה. לחץ הגזירה המופעל על ידי השלב הרציף שובר את הנוזל המפוזר הנכנס וכתוצאה מכך יורד. הטיפות הנוצרות מוגבלות בגודלן הנמוך יותר על ידי מידות הערוץ הראשי11. בגאומטריה של מיקוד הזרימה, שני הנוזלים נדחפים דרך פתח קטן הממוקם מול צינור ההזרקה. התוצאה היא היווצרות של סילון, שהוא הרבה יותר קטן מצינור ההזרקה12,13. לבסוף, לגיאומטריית הקו-זרימה יש תצורה המאופיינת בזרימה קואקסיאלית של שני נוזלים בלתי ניתנים להפרדה14. באופן כללי, ניתן לצפות בטפטוף ובטיסה בהתאם לתנאי ההפעלה. משטר הטפטוף מתרחש בקצבי זרימה נמוכים והטיפות המתקבלות הן חד-ממדיות מאוד וקוטרן פרופורציונלי לגודל הקצה. החיסרון הוא תדירות הייצור הנמוכה שלה. משטר הסילון מתרחש בקצבי זרימה גבוהים יותר בהשוואה למשטר הטפטוף. במקרה זה, קוטר הצניחה הוא ביחס ישר לקוטר הסילון אשר יכול להיות קטן בהרבה מקוטר הקצה בתנאים הנכונים.
חלופה לגישות הידרודינמיות אלה מסתמכת על שימוש נוסף בכוחות חשמליים. Electrospray היא טכניקה ידועה ונפוצה ליצירת טיפות. הוא מבוסס על העיקרון שנוזל בעל מוליכות חשמלית סופית יתעוות בנוכחות שדה חשמלי חזק. הנוזל יאמץ בסופו של דבר צורה חרוטית הנובעת מהאיזון בין מתח חשמלי למתח פני השטח15. התהליך מתחיל בכך שהשדה החשמלי גורם לזרם חשמלי בנוזל שגורם למטענים להצטבר על פני השטח. נוכחות השדה החשמלי גורמת לכוח חשמלי במטענים אלה, אשר גורר את הנוזל לאורך, ומאריך את המניסקוס לכיוון השדה. בתנאים שונים, המניסקוס יכול להשיל את הטיפות הטעונות או לפלוט סילון אחד או יותר אשר לאחר מכן לפרוץ לטיפות15. למרות ששיטות מיקרופלואידיות אלה בסיוע חשמלי מאפשרות באופן טבעי יצירת טיפות קטנות, הן סובלות מהיעדר פעולה במצב יציב הפוגעת במונודיספריות האמולסיה. הטיפות הטעונות המתקבלות נוטות לפרוק על הקירות המגבילים ו/או בכל מקום במכשיר שבו הפוטנציאל החשמלי נמוך מהמתח החיצוני המוטל. לפיכך, המניסקוס המחושמל הופך לבלתי יציב, ובסופו של דבר פולט טיפות בצורה כאוטית וגורם לייצורן הבלתי מבוקר ולאובדן המונודיספרסיות הבלתי מבוקרת שלהן.
ב- electro-coflow, הלחצים החשמליים וההידרודינמיים מצומדים בהתקן מיקרופלואידי של coflow16 הדומה לזה המשמש ליצירת תחליבים כפולים12. שתי תכונות עיקריות מאפשרות לאלקטרו-קו-זרימה להצליח להגיע למשטר פליטה במצב יציב: (i) הפאזה המפוזרת נפלטת לנוזל צמיג אחר, ו-(2) שימוש באלקטרודה נגדית נוזלית או בקרקע. נוזל חיצוני זורם הוכיח את עצמו כמשנים את התכונות הגיאומטריות של תהליך פליטת הטיפה17. אלקטרודת הנגד הנוזלית מאפשרת פריקה ומיצוי של הטיפות המתקבלות, ומבטיחה יצירת מצב יציב של טיפות. בנוסף, על ידי ניצול האיזון בין הכוחות החשמליים וההידרודינמיים, גדלי הירידה המתקבלים יכולים להשתנות בטווח רחב יותר מהגדלים שניתן לכסות על ידי כל אחת מהטכניקות שהוזכרו קודם לכן.
פרוטוקול וידאו מפורט זה נועד לסייע למתרגלים חדשים בשימוש וייצור של מיקרופלואידיקה מבוססת זכוכית.
1. ביצוע טיפות פשוטות
איור 2: מחט מגולפת. מחט עם חור חקוק בבסיסו כדי להתאים לנימי עגול. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 3: התקן ליצירת טיפות פשוטות. סכמות של מכשיר ליצירת טיפות פשוטות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 4: איסוף טיפות פשוטות. (B) מבט עליון על שבה נאספו טיפות שמן סיליקון 10cSt ב-16 mM SDS בתמיסת מים, המיוצרת עם קצה של 580 מיקרומטר. גודל הטיפה הוא (3.29 ± 0.08) ממ. (C) מבט עליון על שבה נאספו טיפות שמן סיליקון 10cSt בתמיסת מים 16 mM, המיוצר עם קצה 86 מיקרומטר. גודל הירידה הוא (1.75 ± 0.04) מ"מ אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
2. ביצוע טיפות תחליב באמצעות ערכת זרימה משותפת
הערה: ההתקן בנוי באופן דומה למכשיר המתואר בשלב 1.
איור 5: ההשפעות של הטיפול ההידרופובי. הקו האדום מציין את קצה הנימים. (ב) נימים לא מטופלים. הנוזל מרטיב את הנימים כשהוא מטפס מעל הקו האדום. (ד) מטופלים בנימים במים. מים אינם מרטיבים את הנימים במקרה זה. הנוזל נשאר מתחת לקו האדום. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 6: התקן זרימה משותפת.(A) מקם את הנימים המרובעים על שקופית המיקרוסקופ. (B) מקם את הנימים העגולים בתוך הריבוע. (C) המכשיר השלם עם מחטי המזרק. (ד) תצלום של המכשיר השלם. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
3. יצירת התקן אלקטרו-קו-זרימה
איור 7: כיצד למקם את הנימים על התקן אלקטרו-קו-זרימה צעד אחר צעד. החלקים הצבעוניים הם פיסות הזכוכית החתוכות שלאחר ההדבקה, מחזיקות יחד את שתי שקופיות המיקרוסקופ. (B) המיקום האופטימלי של הנימים המרובעים על שתי שקופיות מיקרוסקופ מורכבות. (C) מיקום הנימים העגולים לניסויים באלקטרו-קו-זרימה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 8: התקן אלקטרו-קו-זרימה. (A) תצלום של התקן אלקטרו-קו-זרימה. (B) שרטוט של התקן אלקטרו-קו-זרימה. המספרים מציינים את הקלט עבור (1) הנוזל הפנימי, (2) הנוזל החיצוני, (3) יציאת המכשיר ו-(4) האספן/הקרקע הנוזלי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 9: תמונה של אלקטרודת הנגד של הקצה והנוזל במהלך ניסוי אלקטרו-קו-זרימה. מרחק איסוף הטיפים, L, מסומן. סרגל קנה המידה מתאים ל-100 מיקרומטר. הגדלה של מיקרוסקופ היא 4x. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.
4. נהלי ניקיון
בכתב יד זה תוכננו שלושה מכשירים שונים ליצירת טיפות. יצרנו טיפות בגודל של (3.29 ± 0.08) מ"מ (איור 4B) ו-(1.75 ± 0.04) מ"מ (איור 4C) באמצעות המכשיר המתואר בשלב 1. ניתן ליצור את טיפות האמולסיה באמצעות הקו-זרימה והתקני האלקטרו-קו-זרימה. עבור האחרונים, אנו מראים טפטוף ...
הפרוטוקול לייצור שלושה התקנים שונים מבוססי זכוכית תואר לעיל. במקרה של המכשיר כדי ליצור נפילות פשוטות, קצב הזרימה ותכונות הנוזלים חיוניים ליצירת טיפות באופן מבוקר. טיפות ייווצרו בקצה משטר הטפטוף, או בסוף המטוס במשטר הסילון. המעבר מטפטוף לסילון הוא פרמטריזציה על ידי מספר וובר חסר הממדים, We
למחברים אין מה לחשוף.
אנו מודים ל- ACS PRF (מענק 60302-UR9), אגרוביו ס.ל. (חוזה #311325), ו- MCIN / AEI / 10.13039 / 501100011033 / FEDER, UE (מענק מס '. PID2021-122369NB-I00).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
2-[methoxy(polyethyleneoxy)6-9propyl] trimethoxysilane. | Gelest | SIM6492.7 | |
Ceramic tile | Sutter | CTS | |
Ethylene glycol | Fisher | BP230 | These can be found at other companies like Sigma-Aldrich |
Hexane | Sigma- Aldrich | 34859 | Available in other vendors |
ITW Polymers Adhesives Devcon 5 Minute Epoxy Adhesive 25 mL Dev-Tube | Ellsworth adhesives | 470740 | |
Microforge | Narishige | MF 830 | |
Micropipette puller | Sutter | P97 | |
Microscope slides | Fisher | 12-544-1 | Available in other vendors |
Needle 20 Gauge, .0255" ID, .0355" OD, 1/2" Long | McMaster | 75165A677 | |
SDS | Sigma-aldrich | 428015 | Surfactant |
Silicone oil | Clearco | PSF-10cSt | The catalog number correspond to the 10cSt viscosity oil. Different viscosity oils can be found at this company |
Span 80 | Fisher | S0060500G | non-ionic surfactant |
Square glass capillary 2mm ID (borosillicate 300 or 600 mm long) | VitroCom | S 102 | |
Standard Glass Capillaries, 6 in., 2 / 1.12 OD/ID | World Precision instruments | 1B200-6 | These can be found at other companies like Sutter or Vitrocom |
Syringe pump | Chemyx | FUSION 100-X | This model has a good quality/price ratio |
Syringes (it will depend on the compatibility with the liquids) | Fisher | Catalog number will depend on the size | |
Trimethoxy(octyl)silane | Sigma- Aldrich | 376221 | Available in other vendors |
Tubing ( it will depend on the compatibility with the liquids) | Scientific commodities | BB3165-PE/5 | This reference is for polyethylene micro tubing. The size fits the needle size listed here |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved