JoVE Logo

Sign In

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Protocol
  • Disclosures
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Genotyping המלא של מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, נעשה באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR הערכה.

Abstract

גילוי הגנום של דנ"א באמצעות הגברה PCR וזיהוי על ג'ל electrophoretic היא הדרך הסטנדרטית כי גנוטיפ של דגימת רקמה נקבע. הכנה קונבנציונלי של רקמות עבור ה-DNA PCR מוכנים לעתים קרובות להימשך מספר שעות עד ימים, בהתאם המדגם רקמות. גנוטיפ של המדגם ובכך עשויה להתעכב מספר ימים, אשר אינו אופציה עבור סוגים שונים של ניסויים. כאן אנו מדגימים את genotyping להשלים מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR קיט. ראשית, אנו מדגימים את החילוץ של רבע שעה של ה-DNA מן המדגם רקמות. ואז, אנחנו מדגימים את הזמן האמיתי לקריאה מתוך הגברה PCR של המדגם, המאפשר זיהוי של מדגם חיובית זה להיות מוגבר. יחד, readout מהיר החילוץ בזמן אמת לאפשר זיהוי מהיר של גנוטיפ של מגוון סוגים שונים של רקמות באמצעות שיטת ה-PCR של אמין.

Protocol

אנא לחץ כאן כדי לראות את הפרוטוקול.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR KitReagent KitSigma-AldrichXNATGIncludes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

References

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

11genotypingPCRDNA

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved