Method Article
Genotyping המלא של מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, נעשה באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR הערכה.
גילוי הגנום של דנ"א באמצעות הגברה PCR וזיהוי על ג'ל electrophoretic היא הדרך הסטנדרטית כי גנוטיפ של דגימת רקמה נקבע. הכנה קונבנציונלי של רקמות עבור ה-DNA PCR מוכנים לעתים קרובות להימשך מספר שעות עד ימים, בהתאם המדגם רקמות. גנוטיפ של המדגם ובכך עשויה להתעכב מספר ימים, אשר אינו אופציה עבור סוגים שונים של ניסויים. כאן אנו מדגימים את genotyping להשלים מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR קיט. ראשית, אנו מדגימים את החילוץ של רבע שעה של ה-DNA מן המדגם רקמות. ואז, אנחנו מדגימים את הזמן האמיתי לקריאה מתוך הגברה PCR של המדגם, המאפשר זיהוי של מדגם חיובית זה להיות מוגבר. יחד, readout מהיר החילוץ בזמן אמת לאפשר זיהוי מהיר של גנוטיפ של מגוון סוגים שונים של רקמות באמצעות שיטת ה-PCR של אמין.
אנא לחץ כאן כדי לראות את הפרוטוקול.
The authors have nothing to disclose.
Name | Company | Catalog Number | Comments | |
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit | Reagent Kit | Sigma-Aldrich | XNATG | Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved