מודל זיהום במפרק פריפרוסתי קנדידה אלביקנס בעכבר

Summary

זיהום מפרק פריפרוסתטי (PJI) הנגרם על ידי פתוגנים מסוכנים נפוץ באורתופדיה קלינית. מודלים קיימים של בעלי חיים אינם יכולים לדמות במדויק את המצב האמיתי של PJI. כאן, הקמנו מודל עכבר PJI הקשור לביופילם קנדידה אלביקנס כדי לחקור ולפתח טיפולים חדשים עבור PJI.

Abstract

זיהום מפרק פריפרוסתטי (PJI) הוא אחד הזיהומים הנפוצים הנגרמים על ידי קנדידה אלביקנס (C. albicans), אשר מדאיג יותר ויותר מנתחים ומדענים. באופן כללי, ביופילמים שיכולים להגן על C. albicans מפני אנטיביוטיקה ופינוי חיסוני נוצרים באתר הזיהום. ניתוח הכולל הסרת השתל הנגוע, הטריה, טיפול אנטי מיקרוביאלי והשתלה מחדש הוא תקן הזהב לטיפול ב- PJI. לפיכך, לביסוס מודלים של PJI בבעלי חיים יש משמעות רבה למחקר ופיתוח של תרופות או טיפולים חדשים עבור PJI. במחקר זה, חוט סגסוגת ניקל-טיטניום חלק, שתל בשימוש נרחב במרפאות אורתופדיות, הוחדר למפרק הירך של עכבר C57BL/6 לפני שחוסנו C. albicans לחלל המפרקי לאורך החוט. לאחר 14 יום, ביופילמים בוגרים ועבים נצפו על פני השטח של שתלים תחת מיקרוסקופ אלקטרוני סורק (SEM). נמצאה ירידה משמעותית בטרבקולה של העצם בצביעת H&E של דגימות המפרקים הנגועות. לסיכום, הוקם מודל PJI עכברי עם יתרונות של הפעלה קלה, שיעור הצלחה גבוה, חזרתיות גבוהה ומתאם קליני גבוה. זה צפוי להיות מודל חשוב למחקרים קליניים של מניעת PJI הקשורה לביופילם של C. albicans.

Introduction

קנדידה אלביקנס (C. albicans) מתגוררת בחלקים רבים של גוף האדם¹, שהוא גם הפתוגן האופורטוניסטי הנפוץ ביותר הגורם לזיהומים פטרייתיים פולשניים מסכני חיים, במיוחד בחולים מדוכאי חיסון ^2,3. C. albicans יכול להשתנות בין מצב שמרים ותפטיר כפטרייה פולימורפית. מצב התפטיר מציג אלימות גבוהה יותר, הידבקות חזקה יותר, ופלישה של תאים ורקמות ^4,5. חוץ מזה, C. albicans יכול ליצור ביופילמים על פני השטח של חומרים ביו-רפואיים כגון תותבות, קטטרים וסטנטים ^1,6,7<....

Protocol

החיות נרכשו מאוניברסיטת שיאן ג'יאוטונג. כל הליכי הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה האתית המוסדית לבעלי חיים של אוניברסיטת שיאן ג'יאוטונג (מספר אישור: SCXK [שאאנשי] 2021-103). העכברים הוחזקו במשך שבוע עם 5 עכברים בכל כלוב. הותרה להם גישה חופשית למזון ולמים. בעלי החיים הוחזקו בטמפרטורת החדר (RT; 24 ° C ± 1 ° C) ובמחזור בהיר / כהה (12 שעות / 12 שעות) לפני ביצוע המחקר.

1. חיץ והכנת ציוד

1. C. albicans תרבית תאים
   1. יש לחסן מושבה חד-שבטית של C. albicans (SC5314) מצלחת פפטון דקסטרוז (YPD) תמצית שמרים עם לולאה מחסנת ל-5 מ"ל של מדיום נוזלי YPD (YPD + 50 מיקרוגרם/מ"ל קרבניצלין).
   2. לאחר מכן....

תוצאות

העברת הדגימות לצלחת בינונית וספירת מושבות לאחר דגירה לילית משמשת בדרך כלל להערכת עומס הפתוגן המקומי ליד הנגע^22,23. במחקר שלנו, התרבית המיקרוביאלית של דגימות כבד, כליות וטחול הייתה שלילית, מה שמצביע על כך שהמודל במחקר זה הוביל רק להדבקה מקומית במקום זיהום מערכ.......

Discussion

הזיהום הנגרם על ידי זיהום של כלי ניתוח או הסביבה הכירורגית במהלך הניתוח הוא הסיבה העיקרית לרוב זיהומים שתלים 24,25,26,27. לכן, במחקר זה נבנה מודל PJI הקשור לביופילם של עכבר C. albicans. בהשוואה למודל PJI המסורתי שבו נעשה שימוש ב?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 Mactutrius turbidibris	Shanghai Lujing Technology Co., Ltd	5106063
4 °C refrigerator	Electrolux (China) Electric Co., Ltd	ESE6539TA
Agar	Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd	01-023
Analytical balances	Shimadzu	ATX124
Autoclaves Sterilizer	SANYO	MLS-3750
Carbenicillin	Amresco	C0885
Eclipse Ci Nikon upright optical microscope	Nikon	Eclipse Ts2-FL
Glucose	Macklin	D823520
Inoculation ring	Thermo Scientific	251586
Isoflurane	RWD	20210103
NaCl	Xi'an Jingxi Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd	20180108
Paraformaldehyde	Beyotime Biotechnology	P0099
Peptone	Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd	01-001
RWD R550 multi-channel small animal anesthesia machine	RWD	R550
SEM	Hitachi	TM-1000
Temperature incubator	Shanghai Zhichu Instrument Co., Ltd	ZQTY-50N
Ultrapure water water generator	Heal Force	NW20VF
Ultrasound machine	Do-Chrom	DS10260D
Yeast extract	Thermo Scientific Oxoid	LP0021B