מחקר זה מפתח פרוטוקול Tuina יעיל וניתן לשחזור לטיפול בכתף קפואה שהוקמה במודל חולדה. גישה זו תסייע ללמוד את שיטת הטיפול Tuina עבור כתפיים קפואות.
כתף קפואה (FS) היא מצב שכיח ללא טיפול אופטימלי מוגדר. טיפול טווינה, טכניקת רפואה סינית מסורתית (TCM) המשמשת לטיפול בחולי FS בבתי חולים סיניים, הוכיחה תוצאות מצוינות, אך מנגנוניה אינם מובנים במלואם. בהתבסס על מחקר קודם, עבודה זו נועדה לפתח פרוטוקול Tuina עבור מודל חולדות FS. חילקנו באופן אקראי 20 חולדות SD לקבוצות ביקורת (C; n = 5), מודל FS (M; n = 5), מודל FS לטיפול Tuina (MT; n = 5), ומודל FS לטיפול פומי (MO; n = 5). מחקר זה השתמש בשיטת אימוביליזציה יצוקה כדי לבסס את מודל חולדת FS. ההשפעה של Tuina ו dexamethasone דרך הפה על טווח התנועה glenohumeral (ROM) הוערך, ואת הממצאים ההיסטולוגיים הוערכו. המחקר שלנו הראה כי Tuina ו dexamethasone דרך הפה היו מסוגלים לשפר את הכתף פעיל ROM ולשמר את המבנה של הקפסולה, עם טיפול Tuina הוכיח להיות יעיל יותר מאשר dexamethasone אוראלי. לסיכום, פרוטוקול Tuina שנקבע במחקר זה היה יעיל מאוד עבור FS.
כתף קפואה (FS), הידועה גם בשם קפסוליטיס דבק של הכתף, היא מחלה המגבילה את עצמה המאופיינת בכאבי כתף וליקויים בניידות. זה בדרך כלל משפיע על אנשים בין הגילאים 30 ל 70 שנים, עם גיל ממוצע של 50 שנים, ויש לו שכיחות של כ 5% באוכלוסייה הסינית1. נקבות מדווחות על שכיחות גבוהה פי 1.6 של FS בהשוואה לזכרים2. השכיחות של FS גבוהה יותר אצל אנשים עם סוכרת, הפרעות מטבוליזם גלוקוז ושומנים או מחלות קשורות אחרות, הנע בין 10% ל 36% 2,3. הטיפולים הקליניים הנוכחיים עבור FS כוללים פיזיותרפיה, תרופות סטרואידים, וטיפולים כירורגיים4.
Tuina, טיפול ברפואה סינית מסורתית (TCM), הוכח ביעילות להקל על כאבי כתף בחולי FS, ולשפר את איכות חייהם 5,6. עם זאת, המנגנונים הבסיסיים של טיפול זה אינם מובנים היטב. לכן, שימוש במודלים של בעלי חיים כדי לחקור את ההשפעות והמנגנונים של טווינה בטיפול ב- FS הוא חיוני.
למפרק כתף החולדה יש מבנה מורכב הדומה לזה של הכתף האנושית והוא משמש לעתים קרובות במחקרים מכניסטיים של FS7. מודל חולדת FS מאופיין בירידה ב- ROM glenohumeral ו- capsule fibrosis8. כמו כן, מודל זה מאפשר תצפית על קפסולת הכתף ומאפשר מחקר פתולוגי תוך תיקון הפציעה9. יתר על כן, קורטיקוסטרואידים אוראליים משמשים לעתים קרובות כקבוצת הביקורת במחקר הטיפול ב- FS10. מחקר זה נועד לפתח פרוטוקול Tuina עבור מודל חולדות FS ומדגים את ההיתכנות של ביצוע ניסויים בבעלי חיים במחקר Tuina על ידי השוואת היעילות של טיפול Tuina ו dexamethasone אוראלי.
מחקר זה אושר על ידי ועדת האתיקה של בית החולים המסונף של אוניברסיטת שאנדונג לרפואה סינית מסורתית (מספר: AWE-2022-023).
1. חיות ניסוי
2. שיטת קיבוץ
3. פיתוח מודל FS
4. שיטת טווינא
הערה: לאורך כל ההליך, על החוקר ללבוש ציוד מגן אישי. רק רופא טווינה מקצועי אחד חייב לבצע את כל המניפולציות (איור 3, איור 4 ואיור 5).
5. מדידה של ROM glenohumeral
הערה: חשוב להשלים את תהליך המדידה מהר ככל האפשר כדי למנוע ניוון של רקמת הקפסולה המפרקת.
6. הכנת המדור
7. צביעת יד
8. צביעת מסון
הפעילות הגופנית של חולדות נצפתה כדי להעריך את ההצלחה או הכישלון של מודל FS. מחקר קודם הראה כי אימוביליזציה של הגבס הפחיתה באופן משמעותי את מרחק הנסיעה ואת מהירות ההליכה בהשוואה לחולדות רגילות17. מחקר אחר הציע כי FS לא השפיע על המרחק שעבר, וצליעה הייתה התסמין השכיח ביותר13. מחקר זה הראה נוקשות במפרק כתף ימין, התכווצות של הגפה העליונה הימנית, ניוון שרירים וצליעה בחולדות לאחר דוגמנות. נגעים אלה בקבוצות MT ו- MO נפתרו לחלוטין על ידי שבועיים של התערבות. אבל לא היה שינוי משמעותי בקבוצת M.
הקריטריון העיקרי להערכת האפקטיביות של Tuina ב- FS הוא מדידת ROM glenohumeral18. ראינו שהערכים הממוצעים של ROM glenohumeral היו 149.3° ±-5.9° בקבוצת C, 111.1° ±-3.9° בקבוצת M, 128.5° ±-2.8° בקבוצת MT ו-119.56° ±-2.9° בקבוצת MO. כפי שמתואר באיור 7, הרום הגלנוהומרלי של חולדות בקבוצת M היה נמוך משמעותית מזה שבקבוצת C (P < 0.0001). יתר על כן, ROM בקבוצת MT וקבוצת MO היה גבוה משמעותית מזה שבקבוצת M (P < 0.05, P < 0.0001). עם זאת, ROM בקבוצת MO היה נמוך משמעותית מזה בקבוצת MT (P < 0.0001). ממצא זה מצביע על כך שטווינה יכולה לשפר באופן משמעותי את תפקוד מפרקי הכתף בחולדות FS.
בנוסף, צביעת H&E וצביעת Masson יכולות להדגים עוד יותר את ההשפעות של Tuina בשימור המבנה ובהפחתת פיברוזיס בכמוסה. כדי להקל על התצפית, הקפסולה של מפרק glenohumeral שימש לממצאים היסטולוגיים. קפסולת מפרק הכתף מורכבת משכבות סינוביאליות וסיביות19. צביעת H&E חשפה התפשטות סינוביוציטים, קפלים סינוביאליים שטוחים, קיפאון אריתרוציטים והתפשטות כלי דם בקבוצת M, שהם מאפיינים אופייניים של FS (איור 8A,B). המאפיינים האלה פחתו במידה מסוימת לאחר טיפול בטווינה ובדקסמטזון דרך הפה (איור 8C,D). בהשוואה לקבוצת MT, קבוצת MO הראתה גם הרבה תאים סינוביאליים. צביעת מסון הראתה את סידור צרורות הסיבים בכל קבוצה (חיצים צהובים). הקפסולה מורכבת מרשת רופפת של סיבים רשתיים עם צרורות סיבים המסודרים בכיוון מסודר (איור 8E). בקבוצת M, צרורות הסיבים היו מסודרים בצורה לא מסודרת, מה שמצביע על פיברוזיס כמוסה (איור 8F). הקפסולות של חולדות בקבוצת MT הראו שצרורות הסיבים מרובדים בצורה מסודרת וברורה, אבל נשארים מעט לא מסודרים בקבוצת MO (איור 8G,H).
איור 1: פרוטוקול לביסוס מודל FS והתערבות טווינה. החולדות היו על האכלה אדפטיבית במשך 7 ימים, הקמת מודל FS במשך 21 ימים, וטיפול Tuina בוצע מדי יום במשך 14 ימים. ביום ה-36 הוקרבו כל החולדות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: אימוביליזציה יצוקה לביסוס מודל חולדה של FS. לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: בקרה כמותית של מניפולציה . (A) מערכת קביעת פרמטרים אינטליגנטית של טכניקת עיסוי. (B) ניתן למדוד שלושה כוחות ככוח מקביל לאורך כיוון X, כוח אורכי לאורך כיוון Y וכוח אנכי לאורך כיוון Z. (C) חוזק שיטת הלישה הסיבובית. העקומה האדומה מייצגת את הכוח האנכי המיוצב (0.5 ק"ג). העקומה הכתומה מייצגת את הכוח המקביל הרגיל. העקומה הלבנה מייצגת את הכוח האורכי הרגיל. (D) חוזקה של שיטת הלחיצה הנקודתית. העקומה האדומה מייצגת את הכוח האנכי (0.5 ק"ג). עקומות כתומות ולבנות מייצגות כוחות לא מקבילים ואורכיים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 4: מניפולציה המשמשת בטיפול בטווינה. (א-ג) ללוש את שרירי הכתפיים הימניות, הגפיים הקדמיות והגב. (ד-ג) הקש בנקודה LI15, SI11, HT01 ו- LI11. (ח-ק) למתוח את הגפה הקדמית בתנוחת אדוקציה, חטיפה, הארכה קדמית והארכה אחורית. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 5: מיקומים אנטומיים של LI15, SI11, HT01 ו-LI11 בחולדות. ● משטח רוחבי, ○ משטח מדיאלי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 6: מדידה של ROM glenohumeral. חוט דק מחובר למחט הזרקה המוחדרת לפיר ההומרלי ונמשכת בקצה השני בכוח של 5 גרם כדי להפוך אותה למקבילה לפיר ההומרלי. הזווית בין הקצה התחתון של עצם השכמה לבין פיר ההומרל נמדדת כ- glenohumeral ROM. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 7: ROM Glenohumeral בשלוש קבוצות של חולדות. ערכים פירושם ± S.D., n = 5. הבדלים משמעותיים מסומנים על ידי ANOVA חד-כיווני (A P < 0.001 ו- bP < 0.0001). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 8: ממצאים היסטולוגיים של קפסולת הכתף. (A,E) קבוצת הביקורת מכילה מבנה קפסולה תקין (צביעת H&E ו-Masson). (ב,ו) קבוצת המודלים FS מדגימה שינויים במבנה הקפסולה באופן הבא: קפלים סינוביאליים שטוחים, פיברוזיס קפסולה וצרורות סיבים מופרעים (צביעת H&E ו- Masson). (ג,ז). מודל FS בשילוב עם קבוצת Tuina ממחיש כי מבנה הקפסולה קרוב לנורמה, ופיברוזיס אינו ברור (צביעת H&E ו- Masson). (ד,ח) מודל FS בשילוב עם דקסמתזון אוראלי מראה כי מבנה הקפסולה קרוב לנורמה, ופיברוזיס ברור (צביעת H&E ומאסון). סרגל קנה מידה = 100 מיקרומטר. HH: ראש ההומרוס; חץ שחור: קפלים סינוביאליים; חץ אדום: קיפאון אריתרוציטים והתפשטות כלי הדם; חץ צהוב: צרורות סיבים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
השלב הקריטי הראשון הוא בחירת הדגם. בשל הקושי ביישום מודל FS העיקרי, אימוביליזציה יצוקה וקיבוע פנימי כירורגי משמשים לעתים קרובות כדי להקים מודלים חולדות FS 9,12. ההגבלה החמורה ביותר של ניידות הכתף ופיברוזיס של הקפסולה נצפו במודל FS שהוקם על ידי אימוביליזציה יצוקה במשך 3 שבועות12,20. במחקר זה, שיעורי ההצלחה של מודל FS היו מצוינים, עם 100% הצלחה.
השלב הקריטי השני הוא המניפולציות המשמשות בפרוטוקול זה. במחקר זה נעשה שימוש בשלוש מניפולציות (לישה, לחיצה ומתיחה). מניפולציית לישת הרקמה הרכה הוחלה על הכתף, עצם השכמה והזרוע העליונה כדי להרפות את השרירים. מניפולציה בלחיצה בוצעה על ידי הפעלת לחץ על נקודות דיקור כגון LI15, SI11, HT01 ו- LI11, הנפוצים ביותר בפרקטיקה הקלינית עבור FS 5,21. LI15, SI11 ו-HT01 ממוקמים בתנוחות סביב קפסולת הכתף ויכולים להיות יעילים בשיפור תפקוד ה-ROM והכתף22. LI11 משמש לעתים קרובות לפגיעה מוטורית בגפיים העליונות וממוקם באותו מרידיאן כמו LI15. שיטת התאמת אקופוינט זו מסייעת לשפר את היעילות של LI1523. לאחר הרפיה מלאה, טכניקות מתיחה שימשו כדי לשחזר פעילויות פונקציונליות.
הבעיה האפשרית בפרוטוקול זה היא שהחולדות מפגינות התנגדות עזה במהלך הטווינה, שעשויה להיגרם על ידי פחד ולא מעבר לסבילות של החולדות. בשלב זה, יש להפסיק את המניפולציות עד שהחולדות יירגעו (ליטוף במשך 10 שניות מרגיע את החולדות). בנוסף, יש להתאים את מידת המתיחה בהתאם לסימפטומים של החולדות. בתחילה, המגבלה של מפרק הכתף הייתה ברורה, ומשרעת המתיחה הייתה קטנה. יחד עם ההתערבות, תפקוד מפרק הכתף של החולדות התאושש בהדרגה ומשרעת המתיחה גדלה בהדרגה. הסטנדרט הוא שחולדות יכולות לקבל את שיטת המתיחה ללא התנגדות. לבסוף, לחולדות יש מידה מסוימת של תוקפנות, וטווינה דורשת מגע ממושך עם חולדות, ולכן חשוב ללבוש ציוד מגן אישי.
הבקרה הכמותית של מניפולציה היא הקשה ביותר בניסויי טווינה. בעוד סימולטור מניפולציה עיסוי יכול לשמש כדי לשלוט על כוח ותדירות של מניפולציה אחת, שיטה זו מוגבלת כאשר מניפולציות מרובות ואתרי טיפול מעורבים24,25. בפרקטיקה הקלינית, טווינה מבוצעת בדרך כלל ישירות על ידי מתרגלים, ובמחקר זה, היה קשה להתערב עם ציוד רפואי. כדי לשלוט בגירוי, ניתן להשתמש במערכת קביעת הפרמטרים של טכניקת עיסוי חכמה כדי לתקנן את האימון של Tuina. לאחר האימון, החוקר יכול להפעיל את אותו כוח על כל חולדה במידה מסוימת. המגבלה העיקרית של פרוטוקול זה היא שלא ניתן לשלוט לחלוטין במניפולציות.
לטיפול TCM Tuina יש היסטוריה עשירה של שימוש ברחבי סין, עם רופאים שונים בבתי חולים המשתמשים בשילובי מניפולציות ואתרי טיפול שונים. לכן, חשוב לקבוע פרוטוקולים הניתנים לשכפול ויעילים הן לניסויים בבעלי חיים והן למחקרים קליניים. במחקר זה, המניפולציות ונקודות הדיקור בהן נעשה שימוש התבססו על מחקר קודם של הצוות שלנו, המשלב את הניסיון הקליני שלנו עם המאפיינים של מודל בעלי החיים FS21. מחקר זה הדגים את יעילותו של פרוטוקול Tuina שפותח בשיפור תפקוד מפרק הכתף ובהפחתת פיברוזיס קפסולה בחולדות FS. ממצאים אלה מספקים בסיס לחקירות נוספות של המנגנונים העומדים בבסיס הטיפול בטווינה. יתר על כן, הפרוטוקול יכול להיות שימושי עבור חוקרים המעוניינים לחקור את היעילות של טיפולים רפואיים אלטרנטיביים עבור FS.
מחקר קודם מצא כי מנגנון התערבות טווינא על פיברוזיס עשוי להיות קשור להפחתת הרגולציה של TGF-β ו- CTGF תוך ויסות האיזון של MMP-1/TIMP-1, ובכך להקל על ייצור מטריצה חוץ-תאית (ECM)26. ההשפעה של טווינה על הפיברוזיס של קפסולת הכתף עשויה להיות מושגת באמצעות ויסות של מנגנונים שונים. עם זאת, נדרש מחקר נוסף כדי להבין באופן מלא את המנגנונים המעורבים בשיפור זה.
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית פיתוח המדע והטכנולוגיה לשנת 2020 בעיר ג'ינאן (מענק מספר 202019059), פרויקט המדע והטכנולוגיה של הרפואה הסינית המסורתית של פרובינציית שאנדונג (מענק מספר 2021Q080), ופרויקט הירושה של בית הספר צ'ילו לרפואה סינית מסורתית (מספר מענק [2022]93).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
4% paraformaldehyde | Solarbio | P1110 | |
Embedding machine | Changzhou Paisijie Medical Equipment Co., Ltd | BM450A | |
Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA) | Solarbio | E1171 | |
Hematoxylin eosin (HE) staining kit | Sparkjade | EE0012 | |
Intelligent-massage technique parameter determination system | Shanghai Dukang Intrument Equipment Co. Ltd | ZTC-![]() | |
Microtome | Leica | 531CM-Y43 | |
Modified Masson Trichrome Staining Solution | Shanghai yuanye Bio-Technology Co., Ltd | R20381-8 | Bouin 50 mL; lapis lazuli blue dye 50 mL; Hematoxylin (Mayer) 50 mL; acidic ethanol differentiation solution 50 mL; ponceau magenta dye solution 50 mL; phosphomolybdic acid solution 50 mL; aniline blue staining solution 50 mL; weak acid 50 mL |
Tribromoethanol | Macklin | T903147-5 |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved