הכשרת ארנבי מעבדה לשכלול הליכי גידול שגרתיים

Summary

פרוטוקולי אילוף הכוללים חיזוקים חיוביים להליכי גידול שגרתיים בארנבים פותחו והוכחו כמוצלחים, שכן הארנבים הראו באופן אמין את ההתנהגויות המאומנות בבדיקה הכללית השבועית. איסוף הארנבים עם ארגז ההובלה היה פחות מרתיע מטכניקת הטיפול הקונבנציונלית.

Abstract

טכניקות טיפול ואילוף לא מרתיעות עבור חיות מעבדה נדרשות כדי להקל על הליכי גידול ניסיוניים ושגרתיים, ולשפר הן את רווחת בעלי החיים והן את האיכות המדעית. אימוני קליקר נוצלו לפיתוח פרוטוקולי אילוף לארנבים כדי לחדד נהלי גידול שגרתיים מלחיצים הקשורים בדרך כלל להרמה (כלומר, הרמה מהרצפה) / ריסון (כלומר, החזקתם בזרועות אדם) אותם. שלוש עשרה נקבות ארנבים לבנים מניו זילנד אומנו במשך שלושה שבועות. כל הארנבים למדו את התנהגויות המטרה שהוגדרו מראש: הם עקבו אחר מקל המטרה, קפצו על סולם השקילה, נכנסו לארגז הובלה והתרוממו לאחור תוך שהם מניחים את כפותיהם הקדמיות על ידו של המאמן. בנוסף, עשר חיות קפצו מהרצפה אל ברכי המאמן בישיבה ואפשרו למאמן להרים את כפותיו מהמשטח בעודו יושב על ברכי המאמן. עבור אנשים מסוימים, היה צורך להתאים את הפרוטוקולים על ידי צעדי ביניים נוספים. בסוף האימון, הארנבים הראו באופן אמין את התנהגויות המטרה הצפויות, גם לאחר הפסקות אימון קצרות וארוכות. למעט כמה יוצאים מן הכלל, אדם מוכר שאינו המאמן יכול היה לעורר את התנהגויות המטרה מהארנבים (הכללה), אם כי נדרשו מפגשים נוספים לצורך הכללה. במבחן הגישה הוולונטרית, הארנבים העדיפו אינטראקציה עם המאמן בניסוי^הראשון אך בילו זמן רב עם אדם לא מוכר כמו עם המאמן^{בניסוי השני} . התצפיות ההתנהגותיות הצביעו על כך שלהרים את הארנבים עם תיבת ההובלה, כמתואר בפרוטוקול, במקום לרסן אותם עם קשקוש צווארם ולהרים אותם על הזרוע, היה פחות מרתיע. בסך הכל, פרוטוקולי האימון היו אפשריים ויכולים לשמש כאסטרטגיית חידוד במתקני חיות מעבדה. למען רווחת בעלי החיים, יש ליישם את פרוטוקולי האילוף במידת האפשר.

Introduction

בין השנים 2015 ל-2019, יותר מ-49 מיליון בעלי חיים שימשו למטרות מדעיות באיחוד האירופי (ובנורבגיה); 1,745,037 (3.5%) מהם היו ארנבים¹. ארנבים משמשים בעיקר למחקר רגולטורי (למשל, בקרת איכות, רעילות ובדיקות בטיחות אחרות, כולל פרמקולוגיה) ולייצור שגרתי של חומרים ביולוגיים (למשל, מוצרים מבוססי דם)². למרות שנעשים מאמצים להחליף ניסויים בבעלי חיים בשיטות ללא בעלי חיים, השימוש בבעלי חיים עדיין נחוץ לחלק ממטרות אלה. בכל פעם שלא ניתן להחליף ניסוי בבעלי חיים, חיוני לצמצם את מספר בעלי החיים ולחדד את תנאי הניסוי, הדיור והגידול כדי למזער את הסבל. ראסל וברץ' תיארו אסטרטגיה זו כעקרון 3R (להחליף, להפחית, לחדד) בשנת 1959³ , ובשנת 2010, היא יושמה בדירקטיבה 2010/63/EU להגנה על חיות מעבדה המשמשות למטרות מדעיות⁴. תפקיד העידון, המכונה לעתים "סינדרלה" של ה-3Rs⁵, זכה לחשיבות הולכת וגוברת. בעוד החלפה והפחתה הן אסטרטגיות ארוכות טווח לקראת המטרה הסופית של הדירקטיבה להחליף באופן מלא ניסויים בבעלי חיים, עידון מאפשר שיפור מיידי של רווחת בעלי חיים⁵, אשר בתורו יש פוטנציאל לשפר את האיכות המדעית⁶. חלקים חיוניים של זיקוק הם טיפול בבעלי חיים ואילוף, כפי שצוין בנספח III של דירקטיבה 2010/63/EU. הדירקטיבה קובעת כי מתקני בעלי חיים צריכים לתכנן תוכניות הרגלה והכשרה לחיות המעבדה המותאמות למינים, לנוהל ולפרויקט⁴. מנספח א' לת"צ מס' 123 עולה כי אנשי צוות חיות המעבדה מקדישים זמן "לשיחה, טיפול, אילוף וטיפוח בעלי חיים"⁷.

חלק מהליכי הטיפול גורמים ללחץ, במיוחד עבור חיות טרף יבשתיות כגון ארנבות. דוגמאות לכך הן נדחקים לפינה, מרוסנים (כלומר, נתפסים על ידי אדם, מוחזקים בזרועותיו של אדם, או משותקים על ידי מכשיר), ומרימים (כלומר, מרימים מהרצפה) לצורך בדיקת בריאות או הליכים ניסיוניים⁸. סקר שהתמקד בארנבי מחמד גילה כי 57-61% מהם נאבקו כאשר הרימו^{אותם 9,10} וחלקם אף הראו תוקפנות הקשורה לפחד (כלומר, נשיכה)¹¹. זה מדגיש את הצורך בטכניקות טיפול ואימון עדינות. כבר הוכח עבור יונקים קטנים אחרים כגון עכברים כי טכניקות טיפול עדינות מפחיתות חרדה¹². יתר על כן, טיפול עדין בשילוב עם אימון מפחית מתח, חרדה והתנהגות דמוית דיכאון בעכברים¹³. בקופי מקוק רזוס ושימפנזים, מדדים פיזיולוגיים הקשורים ללחץ הושפעו פחות כאשר הם אומנו בעבר בהליך^14,15. ניתן להניח שאם בעל חיים יכול לבחור להשתתף באילוף מרצונו, הוא יכול לעסוק באופן פעיל ולשלוט במצב, מה שמשפר את רווחתו של בעל החיים ועשוי גם לתרום לנתונים מדעיים חזקים ואמינים יותר¹⁶.

הליכי אילוף רבים של בעלי חיים מסתמכים על עקרונות התניה אופרנטית, במיוחד השימוש בחיזוק חיובי ועיצוב 17,18,19. התניה אופרנטית דורשת מבעל החיים לעורר התנהגויות שלאחר מכן ניתן להגדיל או להקטין²⁰. ישנם ארבעה מצבים נפוצים המשמשים לתיאור התניה אופרנטית: חיזוק חיובי ושלילי וכן עונש חיובי ושלילי^21,22. בארנבות, עונש חיובי משמש כאשר אדם מתקרב (גירוי לא רצוי) לחיה כדי להרחיק אותה ממקום מסוים או לקראתו²³ . בהקשר של טיפול בארנב על שולחן הבדיקה, דוגמה לחיזוק שלילי היא הסרת לחץ (גירוי לא רצוי) על גוף הארנב כאשר הארנב שומר על שקט; דוגמה לעונש שלילי היא משיכת פרס מזון (גירוי רצוי) כאשר הארנב מתחיל להיאבק. לא עונש חיובי/שלילי ולא חיזוקים שליליים מומלצים באילוף בעלי חיים. ענישה גורמת להשפעות רגשיות שליליות²⁴ , כגון מצוקה כפי שמוצג אצל כלבים²⁵ . במקום זאת, חיזוק חיובי צריך להיות שיטת הבחירה בעת אילוף בעלי חיים^25,26. אימון חיזוק חיובי (PRT) פירושו שגירוי רצוי (למשל, פרס מזון) ניתן לאחר שבעל החיים הראה התנהגות רצויה, מה שמגדיל את הסבירות שבעל החיים יציג שוב את ההתנהגות הרצויה בעתיד²⁷ . PRT כרוך לעתים קרובות ביישום של חיזוק מותנה. מחזק מותנה (מחזק משני) הוא בדרך כלל גירוי ניטרלי כגון צליל, שהחיה לומדת לקשר עם מחזק בלתי מותנה (מחזק ראשוני, למשל, תגמול מזון)²⁸. לאחר שהחיה מציגה את ההתנהגות הרצויה, מוצג מיד החיזוק המותנה, ואחריו הצגת פרס המזון²⁶. דוגמה ידועה ל-PRT היא אימון קליקרים, שבו קליקר משמש להפקת קליק כמחזק משני²⁶.

האימון צריך לעקוב אחר דפוסים צפויים, אשר מושגת על ידי עיצוב פרוטוקול אימון. פרוטוקול האימון מתאר כיצד ניתן להגיע להתנהגות מטרה צעד אחר צעד (כלומר, עיצוב התנהגותי) כאשר כל צעד מוגדר על ידי קריטריונים אובייקטיביים ויש לבצע אותו בקלות²⁶ . אם האילוף מתבצע על פי פרוטוקול מסוים, ייתכן שצוות חיות המעבדה מתחלף באילוף בעלי החיים. חשוב לציין כי אנשי הצוות צריכים לדעת את העקרונות של טכניקות למידה והכשרה על מנת ליישם אותם כראוי²⁶. אילוף בעלי חיים משלב לעתים קרובות עיצוב התנהגותי. עיצוב התנהגותי ידני שימש לראשונה במכוון על ידי סקינר ועמיתיו בתחילת שנות הארבעים²⁹. לעומת זאת, בעבודות קודמות, סקינר התמקד דווקא ב"ביצוע שינויים קטנים בסביבה הפיזית כדי ליישם תוכנית של קירוב עוקב"²⁹. במאמר שפורסם בסיינטיפיק אמריקן, הוא הסביר כי חיזוק התנהגות מגדיל את הסבירות שההתנהגות תחזור על עצמה, מה ש"מאפשר לעצב התנהגות של חיה כמעט כפי שפסל מעצב גוש חימר"³⁰. מאז, העיצוב חווה חשיבות גוברת עבור בעלי חיים בשבי 29,30,31,32. לצורך שכפול ושיפור פרוטוקולי עיצוב, חיוני להעריך את הפרוטוקולים באופן שיטתי ואובייקטיבי 33,34,35,36.

סקירה שיטתית ומטא-אנליזה שפורסמה לאחרונה על ידי Pfaller-Sadovsky et al. מצאה כי חיזוק מותנה נחקר בתדירות הגבוהה ביותר בסוסים וכלבים, אם כי חתולים, בקר, דגים, עזים ופרימטים לא אנושיים נחקרו גם³⁷. במדעי חיות המעבדה, PRT נמצא בשימוש נרחב עבור פרימטים לא אנושיים 38,39,40 וכלבים^41,42. בנוסף, חזירים⁴³, עזים⁴⁴, ואפילו יונקים קטנים, כגון עכברים¹³ וחולדות 45,46,47, אומנו בהצלחה באמצעות קליקר בסביבת המעבדה. למיטב ידיעת המחברים, הכנסת PRT לארנבי מעבדה דווחה רק לעתים רחוקות⁴⁸; ספרות קיימת שעברה ביקורת עמיתים ופורסמה לפני כמה עשורים היא מיושנת ואינה עומדת בקריטריונים של המחקר האתי המודרני. למרות שמעט פיסות מידע שלא עברו ביקורת עמיתים מצביעות על כך שניתן לאלף ארנבים בהצלחה באמצעות PRT⁴⁹, נראה שיש חוסר ידע על פרוטוקולי אילוף מתאימים לארנבים השוכנים במתקני חיות מעבדה. הסיבות הבסיסיות עשויות להיות שונות. לדוגמה, טכניקות אימון בשימוש לא יכול להיות מתואר בפירוט במאמרי מחקר או נתונים מופקים עבור מחקר רגולטורי ולכן לא מתפרסמים. יתר על כן, ארנבים עשויים שלא להיות המוקד העיקרי של מחקר עידון מאז מינים אחרים כגון עכברים וחולדות משמשים לעתים קרובות יותר במחקר. מכיוון שארנבים יכולים להסוות מתח ואי נוחות בצורה טובה מאוד, מצבם הרגשי השלילי בעת הטיפול עשוי לעתים קרובות להישאר בלתי מזוהה. גודלו של ארנב מאפשר לבני אדם לרסן בעלי חיים אלה לצורך פרוצדורות, בעוד שמינים אחרים, כגון פרימטים שאינם אנושיים, אינם יכולים להיות מוחזקים עם הידיים להתערבויות דומות מבלי להיפצע קשה⁵⁰. עם זאת, עובדות אלה לא צריכות למנוע פיתוח או שיתוף של פרוטוקולי PRT עבור ארנבי מעבדה.

באשר ליתרונות הפוטנציאליים של PRT, נעשו ניסיונות ראשונים למלא את פער הידע על פרוטוקולי הכשרה מתאימים לארנבי מעבדה. כדי להקל על הליכים שגרתיים כגון טיפול, בדיקות בריאות ושקילה, פותחו פרוטוקולי אילוף והוערכה היתכנותם עבור נקבות ארנבות לבנות בניו זילנד. בוצעו השוואות כדי להעריך האם טכניקת הטיפול החלופית המתוארת בפרוטוקולי האימון הייתה פחות מרתיעה מטכניקת הטיפול הקונבנציונלית והאם פרוטוקולי האימון יכולים לשמש כאמצעי חידוד. איור 1 מדגים את לוח הזמנים של המחקר הנוכחי.

תחזוקת בעלי חיים

שלוש עשרה נקבות ארנבים לבנים מניו זילנד נלקחו ממקורות מסחריים (הגיעו למתקן לבעלי חיים בגיל שבעה שבועות בערך). בעלי החיים היו נקיים מכל הפתוגנים הנגיפיים, החיידקיים והטפיליים המפורטים בהמלצות FELASA⁵¹. ביגוד וציוד מגן (כפפות, מסכות, רשתות לשיער) נלבשו בעת ביצוע הצעדים של הפרוטוקול הנוכחי. קבוצה של שישה וקבוצה של שבעה בעלי חיים שוכנו יחד במכלאה רצפתית של 2.8 מ' × 2.8 מ' (שיכון רצפה), בהתאמה. הרצפה כוסתה במצעי עץ עדינים ומתקלפים (autoclaved). יתר על כן, חומר קינון וצמר נייר פוזרו על גבי המצעים. שלושה בתי פלסטיק בעלי שני פתחים כל אחד (37 ס"מ × 60 ס"מ; גובה 30 ס"מ) ומנהרת פלסטיק (אורך: 58 ס"מ, קוטר: 16 ס"מ) שימשו כמקלטים. בנוסף, סופקו פריטי העשרה כגון קוביות מכרסמים מעץ, כדורי חציר וערבה וכדורי חטיפים מלאים בכדורי מזון, הנושרים בעת הנעת הכדור. לארנבים הייתה גישה חופשית למי ברז, מזון כדורי, חציר אוטוקלאבי וקש. מידע נוסף על פריטי מזון והעשרה מופיע בטבלת החומרים. חדר החיות נוקה בימי חמישי.

הארנבים הוחזקו בתנאים סטנדרטיים (טמפרטורת החדר והלחות היחסית שניתנו כממוצע ± סטיית תקן: 20.3 ± 0.4 מעלות צלזיוס ו-50 ± 5%) במחזור אור:כהה של 12:12 שעות (אור מלאכותי עם שכיחות נוספת של אור יום). רדיו הופעל 30 דקות לפני תחילת שלב האור במשך כ -8 שעות כדי להרגיל את הארנבים לרעשי הסביבה.

Protocol

תחזוקת בעלי החיים אושרה על ידי הרשות הממלכתית של ברלין (Landesamt für Gesundheit und Soziales, מספר היתר: ZH3 - המכון הפדרלי הגרמני להערכת סיכונים, ברלין). פרוטוקולי ההדרכה פותחו במסגרת גידול בעלי החיים השגרתי כדי לחדד נהלים כגון טיפול, בדיקת בריאות ושקילה. מכיוון שפרוטוקולי האילוף לא גרמו לכאב, סבל או נזק וכל התצפיות נעשו בהקשר של גידול שגרתי של בעלי חיים, מחקר זה לא נחשב לניסוי בבעלי חיים על פי החקיקה האירופית.

1. דרישות כלליות להכשרה

הערה: הנקודות הבאות נדרשות בדרך כלל לאילוף בעלי חיים, ללא תלות בפרוטוקול הנוכחי.

1. סמן בבירור את בעלי החיים לזיהוי.
2. דאגו לקבל פרס באיכות גבוהה, למשל, אוכל טעים מאוד.
3. הגדירו את תוכנית האילוף הכוללת את כל השלבים לקראת התנהגות המטרה, כלומר ההתנהגות הרצויה שבעל החיים צריך להציג.
   הערה: התנהגות המטרה מעוצבת צעד אחר צעד בעוד שכל צעד מוגדר על ידי קריטריונים אובייקטיביים ויש להשיגו בקלות.
4. הגדירו אם בעלי החיים יצליחו לבצע 80% או 100% משלבי האילוף לפני שימשיכו לשלב הבא.
5. הכינו את התיעוד (למשל, טבלה משלימה 1).
6. אל תאלף את בעלי החיים כשהם ממהרים ותקפידו על גינונים, טון דיבור ומהירות תנועה, כלומר, דברו ברכות וברוגע, נעו לאט ובזהירות.
7. בדוק את השלבים שהוכשרו בהכשרה הקודמת.
8. אין לאלף בעל חיים כאשר מצבו הבריאותי הכללי של בעל החיים נפגע ו/או כאשר בעל החיים אינו מעוניין באינטראקציה עם המאמן.

2. שגרות אימונים לפרוטוקול הנוכחי

הערה: שגרות האימונים הבאות הוגדרו עבור הפרוטוקול הנוכחי.

1. מקמו את זירת האימונים בחדר/דיר החיות (איור 2), ובהתאם להתנהגות המטרה שיש לאמן, הניחו את המשקל או את קופסת ההובלה (רצפה 30 ס"מ × 50 ס"מ; דלת 27 ס"מ × 25.5; עם פתח במכסה 16 ס"מ × 39 ס"מ) בזירה.
2. מקמו את המשקל ואת תיבת ההובלה מחוץ לזירה כדי להכיר לארנבים את החפצים החדשים הללו לפני שמאמנים את התנהגויות המטרה "שקילה" ו"תיבת ההובלה".
3. להתנהגויות מטרה (ראו שלבים 6-9), הובילו את הארנב לזירת האימונים, כמתואר בשלב 5.7.
4. שבו על הרצפה או השתמשו בשרפרף/מדרגה נמוכים כדי לשבת עליהם בזירת האימונים.
5. לאמן את התנהגויות המטרה בזו אחר זו, בסדר המתואר בפרוטוקול ולא בו זמנית. חריג אם בעל חיים לא מצליח ללמוד צעד של התנהגות מטרה במשך יומיים רצופים - במקרה זה, לאמן את התנהגות המטרה הבאה בו זמנית. שנה את סדר התנהגויות המטרה אם זה מקל על תהליך האימון עבור אדם.
6. לאחר ההתרגלות והכנסת הקליקר, התחילו לאמן את כל בעלי החיים בצעד^הראשון של התנהגות המטרה "בעקבות המטרה" (כלומר, הכדור בקצה מקל המטרה מוגדר כמטרה). שימו לב שבהתאם לביצועים האישיים שלהם, הם עשויים להגיע לשלבי אימון שונים ביום זה. המשיכו את האילוף בהתאם להתקדמות האישית של בעלי החיים בימים הבאים.
7. קבעו אימון (למשל, כ-30 דקות לקבוצה עם שישה עד שבעה בעלי חיים) לכל יום עבודה במהלך השבוע.
   הערה: האימון מתחיל כאשר המאמן נמצא בחדר/דיר בעלי החיים ומוכן להתחיל את האימון. סשן מסתיים כאשר אף אחד מהארנבים לא משתתף באימון (יותר) או שכל הארנבים הגיעו לשלב האימון הסופי של התנהגות המטרה שיש לאמן באימון זה. התחילו כל אימון עם השלב המוצלח האחרון של הפרוטוקול. מפגש מורכב לפחות מניסוי אחד או יותר לכל חיה.
8. התחל ניסוי על ידי בקשה מהחיה לבצע שלב אימון מסוים (כלומר, שלב 3.1 לאחר שהארנב למד לגעת במטרה עם האף/הפה) וסיים את הניסוי כאשר בעל החיים אינו משתתף באילוף (יותר) או שהחיה הגיעה לשלב האימון הסופי של התנהגות המטרה שיש לאמן. בסיום האימון, פתחו את זירת האימונים והוציאו את הארנב מהזירה; לאחר מכן החזיקו את מוט המטרה (כשהמטרה פונה לכיוון התקרה) וכן את קערת התגמול מול החזה.
9. תזמן את האימון לפני האכלה, ניקוי, טיפולים או הליכים ניסיוניים.
10. השתמשו בקערת תגמולים עם קליקר משולב (איור 3, קובץ קידוד משלים 1) ועבור התנהגויות מטרה מסוימות, מוט מטרה נוסף.
11. מלאו את קערת התגמול במזון טעים, כגון גרעיני חמניות ופינוקי מזון על בסיס דגנים.
    הערה: ארנבים הם אוכלי עלווה ודוגמאות תגמול אלה אינן אופטימליות; עם זאת, בשל מגבלות ההיגיינה במתקן חיות המעבדה, הם היו החלופות הטובות ביותר הזמינות עבור בעלי חיים אלה. במידת האפשר, יש להעדיף עשבי תיבול טריים כפרס מזון. שימו לב שפרס הוא פרס רק אם הארנב באמת מעדיף אותו.
12. הקפידו תמיד להחזיק את קערת התגמול באותה תנוחה, למשל מול החזה, והתחילו להזיז את קערת התגמול לכיוון הארנבים רק לאחר הקליק. פרט להתנהגות המטרה "הגדלה" ו"קפיצה על הברכיים", החזיקו את מוט המטרה ביד אחת ואת קערת התגמול ביד השנייה.
13. הציגו את הפרס במקום שבו היה האף/פה של הארנב כאשר ההתנהגות הרצויה הוצגה בצורה נכונה.
14. דאג כי הארנב אוכל רק כמות קטנה של מזון בעת הצגת הפרס.
15. אם ארנב מראה את ההתנהגות הרצויה לפחות ארבע פעמים בבלוק של חמישה ניסיונות (80% אחוזי הצלחה), המשך לשלב הבא. אם בעל חיים אינו מסוגל לבצע את השלב הבא (כלומר, אינו מצליח לבצע את השלב יותר מפעם אחת), חזור לשלב הקודם של הפרוטוקול. אם היה צורך לחזור לשלב קודם או שארנב אינו משתתף באימונים, שנו את פרוטוקולי האימון (למשל, הגדירו צעדי אימון קטנים יותר), בחרו תגמול מזון אחר (טעים יותר) או בדקו את כישורי האימון של המאמן.
16. אם ארנב מבצע נכון את שלב האימון הסופי של התנהגות מטרה, סיים את האימונים עבור ארנב זה באותו יום.
17. הדפס את דף התיעוד (קובץ משלים 1), את פרוטוקולי ההדרכה המפורטים, וכן את פרוטוקולי ההדרכה הפשוטים (קובץ משלים 2) וצרף אותם ללוח או פתח אותם בטאבלט. השתמשו בדף התיעוד כדי לציין את שלבי האילוף שאליהם הגיעו בעלי החיים הבודדים בכל מפגש.

3. התניה הקשרית / התרגלות

הערה: מפגשי ההתניה/הרגלה ההקשריים מבוצעים מדי יום על ידי המאלף והמטפלים בבעלי חיים במשך כ-15 דקות לכל קבוצת ארנבים במשך חמישה ימים רצופים (שני עד שישי).

1. דברו ברכות עם הארנבים.
2. הציעו תגמולי אוכל טעימים.
   הערה: שימו לב ששינויים פתאומיים בתזונה עלולים לגרום לבעיות עיכול אצל ארנבים. לכן, לאט לאט להציג את פרס המזון החדש.
3. הזיזו את קערת הגמול המלאה באוכל טעים לעבר הארנבים ותנו להם לאכול ממנה.
4. גע בעדינות בארנבים סביב הצוואר, הכתפיים, הגב והעכוז מבלי לרסן אותם.

4. הכירו את הקליקר

הערה: התנהגות מטרה: גשו למאמן ואכלו את הפרס מהקערה לאחר הקליקk. המטרה היא שהארנב יקשר את תגמול המזון לקליק, כלומר הארנב יאכל את פרס המזון לאחר הקליק.

1. תנו לארנב להתקרב.
2. לחץ פעם אחת והזז את קערת התגמול לכיוון הארנב (המכונה לחץ וטפל או C ו- T).
3. חזור על שלב 4.2 עשר פעמים. בעת לחיצה בפעם העשירית, המתן שנייה לפני הצגת הפרס והתבונן בהתנהגותו של הארנב.
   הערה: אם בעל החיים מבקש את הפרס מיד לאחר הלחיצה, ניתן להניח כי ההתניה של המחזק המשני הצליחה.
4. חזור על שלבים 4.1.-4.3. למחרת, אם ארנב לא אכל את פרס המזון לאחר הקליק לפחות שמונה פעמים.

5. מעקב אחר היעד

הערה: התנהגות המטרה: עקבו אחר המטרה וגעו בה באף/בפה. התנהגויות המטרה בסעיפים 6-9 הן שינויים של התנהגות המטרה המוצגת בסעיף 5.

1. הניחו את המטרה קרוב לאף/פה של הארנב.
   הערה: הכדור בקצה מקל המטרה מוגדר כמטרה.
   1. C ו-T כאשר הארנב נוגע במטרה עם האף/הפה.
      הערה: יש לוודא שהאף/פה של הארנב אינו נוגע במקל במקום לא מוגדר מלבד הכדור.
   2. הסר את המטרה משדה הראייה של הארנב תוך תגמול.
   3. חזור על כל השלבים הנ"ל במשך חמש פעמים עד שהארנב ביצע בהצלחה שלב זה לפחות ארבע מתוך חמש פעמים (שיעור הצלחה של 80%).
2. מקם את המטרה במקום אחר שבו ניתן לגעת בה עם האף/פה על ידי תנועות ראש מבלי להזיז את כל הגוף.
   1. C ו-T כאשר הארנב נוגע במטרה עם האף/הפה ובצע את השלבים 5.1.2 ו-5.1.3.
3. הניחו את המטרה במרחק רחב יותר מהארנב ותנו לארנב להימתח לעברו.
   1. C ו-T כאשר הארנב נוגע במטרה עם האף/הפה ובצע את השלבים 5.1.2 ו-5.1.3.
4. הגדילו עוד יותר את המרחק בין המטרה לארנב ודרשו מהחיה לבצע קפיצה אחת כדי להגיע למטרה.
   1. C ו-T כאשר הארנב נוגע במטרה עם האף/הפה ובצע את השלבים 5.1.2 ו-5.1.3.
5. הניחו את המטרה ממש מול האף/פה של הארנב כך שהארנב יוכל לגעת במטרה ואז הרחיקו את המטרה לאט מהארנב. ודא כי הארנב חייב לעשות מספר משתנה של כשות כדי לעקוב אחר המטרה.
   הערה: בבלוק של חמישה ניסיונות, בפעם^{הראשונה, השנייה,} השלישית^{, הרביעית והחמישית} הארנב מתוגמל לאחר 2, 1, 2, 3 ו-2 כשות, בהתאמה (בממוצע: אחרי 2 כשות).
   1. C ו- T כאשר הארנבים עשו את המספר הנדרש של כשות ובצע שלבים 5.1.2 ו 5.1.3.
6. חזור על שלב 5.5 והזז את המטרה דרך המסדרון בין שני האובייקטים.
   הערה: בשלב זה, שני עצמים כגון מנהרות ממוקמים במקביל זה לזה ויוצרים מסדרון.
   1. C ו- T כאשר הארנבים עשו את מספר הכשות הנדרש ובצע את השלבים 5.1.2 ו 5.1.3.
7. חזור על שלב 5.5 והזז את המטרה לכיוון זירת האימונים כך שהארנב ייכנס אליה.
   1. C ו- T כאשר הארנבים עשו את מספר הכשות הנדרש ובצע את השלבים 5.1.2 ו 5.1.3.

6. שקילה

הערה: התנהגות המטרה: הישאר על סולם השקילה למשך שנייה אחת לפחות. אם פני השטח של הסולם חלקלקים מדי, ניתן לשים כרית מונעת החלקה על החלק העליון. עם זאת, ארנבים מסוימים נוטים לכרסם את הפד.

1. להוביל את הארנב עם מקל המטרה לכיוון הסולם כמתואר בשלב 5.5.
   1. C ו-T כאשר הארנב נוגע במטרה עם האף/הפה.
   2. הסר את המטרה משדה הראייה של הארנב תוך תגמול.
   3. חזור על כל השלבים המתוארים לעיל חמש פעמים עד שהארנב ביצע בהצלחה שלב זה לפחות ארבע מתוך חמש פעמים (שיעור הצלחה של 80%).
2. הזיזו את המטרה מעט מעל הסקאלה כך שהארנב ידרוך עליה עם הכפות הקדמיות כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 6.1.2 ו- 6.1.3.
3. הזיזו את המטרה מעט מעבר למרכז הסולם כך שהארנב ידרוך עליה עם הכפות הקדמיות ויימתח על הסולם כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 6.1.2 ו- 6.1.3.
4. הזיזו את המטרה מעבר למרכז הסולם כך שהארנב ידרוך על הסולם עם הכפות הקדמיות והאחוריות כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 6.1.2 ו- 6.1.3.
5. להוביל את הארנב על הסולם כמתואר 4.4. ולחכות כמה שניות לפני C ו- T.
   הערה: בשלב זה, תגמלו את הארנב לאחר ישיבה למשך פרק זמן משתנה על הסקאלה. בבלוק של חמישה ניסיונות, בפעם^{הראשונה, השנייה,} השלישית^{, הרביעית והחמישית}, הארנב מתוגמל לאחר 0.5, 1.0, 2.0, 0.5 ו-1.0 שניות, בהתאמה (בממוצע: 1.2 שניות). בעוד הארנב נשאר ללא תזוזה במהלך הזמן הזה, ניתן לקרוא את המשקל מתוך המאזניים. אם לוקח למשקל יותר זמן לייצב ולמדוד את המשקל, הגדילו את זמן הישיבה של בעל החיים על המאזניים.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 6.1.2 ו- 6.1.3.

7. כניסה לתיבת הובלה

הערה: התנהגות יעד: כניסה ויציאה מתיבת ההובלה. לאימון יש להשתמש בקופסת הובלה (רצפה 30 ס"מ × 50 ס"מ; דלת 27 ס"מ × 25.5 ס"מ) עם פתח במכסה (16 ס"מ × 39 ס"מ) שתחתיתה מכוסה בחומר מצע מלוכלך.

1. להוביל את הארנב עם מקל המטרה לכיוון התיבה כמתואר בשלב 5.5.
   1. C ו- T כאשר הארנב נמצא מול הכניסה לתיבה.
   2. הסר את המטרה משדה הראייה של הארנב תוך תגמול.
   3. חזור על כל השלבים המתוארים לעיל חמש פעמים עד שהארנב יבצע בהצלחה את המשימה לפחות ארבע מתוך חמש פעמים (שיעור הצלחה של 80%).
2. החזיקו את מקל המטרה דרך פתח המכסה והעבירו אותו לתוך הקופסה ובכך הניעו את הארנב להיכנס לקופסה עם הכפות הקדמיות.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 7.1.2 ו- 7.1.3.
3. בצע את שלב 7.2 והוביל את הארנב לתוך התיבה (כלומר, כל הכפות הקדמיות והאחוריות נכנסו לתיבה).
   1. C ו- T ובצע את שלבים 7.1.2 ו- 7.1.3.
4. בצע את שלב 7.3 וסגור את דלת התיבה למשך מספר שניות. ואז פתח שוב את הדלת.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 7.1.2 ו- 7.1.3.
5. בצע את שלב 7.3 וסגור את דלת התיבה. בזהירות להרים את הקופסה קצת (כלומר, כמה סנטימטרים מעל הרצפה). החזירו את הקופסה לרצפה ופתחו את הדלת.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 7.1.2 ו- 7.1.3.
6. בצע את שלב 7.5. ואז להוביל את הארנב עם מקל המטרה מחוץ לקופסה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 7.1.2 ו- 7.1.3.

8. גידול

הערה: התנהגות מטרה: הניחו את הכפות הקדמיות על כף היד בזמן הגידול. במהלך האימון, החזיקו באותה יד גם את מקל המטרה וגם את קערת התגמול.

1. הניחו את המטרה מעל ראשו של הארנב כך שהארנב ימתח את האף כלפי מעלה כדי לגעת במטרה עם האף/פה בזמן שכל הכפות נשארות על הקרקע.
   1. ג וט.
   2. הסר את המטרה משדה הראייה של הארנב תוך תגמול.
   3. חזור על כל השלבים המתוארים לעיל חמש פעמים עד שהארנב ביצע בהצלחה שלב זה לפחות ארבע מתוך חמש פעמים (שיעור הצלחה של 80%).
2. מקם את המטרה מעל ראשו של הארנב, כמתואר בשלב 8.1. לאחר שהארנב מתח את האף כלפי מעלה, הזיזו את המטרה עוד יותר כלפי מעלה כך שהארנב ירים את הכפות הקדמיות מהקרקע וייגע במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את השלבים 8.1.2 ו- 8.1.3.
      הערה: אם הארנב נכשל בביצוע 8.2, ניתן להוסיף שלב ביניים לאחר 8.2. לשם כך, בצע 8.2 ולאחר מכן לגשת ולגעת בכפותיו הקדמיות של הארנב (משטח palmar) עם כף היד החופשית. C ו- T ובצע את השלבים 8.1.2 ו- 8.1.3.
3. הניחו את כף היד החופשית לפני הארנב והזיזו את המטרה מעל ראשו של הארנב כך שהארנב יניח את הכפות הקדמיות על היד כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T לאחר שנייה אחת ובצע את השלבים 8.1.2 ו- 8.1.3.
      הערה: בעוד הכפות הקדמיות מונחות על ידו של המאמן, ניתן לבדוק חזותית את בטנו של הארנב.

9. קפיצה על הברכיים

הערה: התנהגות מטרה: קפצו על ברכי המאמן והישארו לשבת בזמן שנוגעים בכם. עבור שלבים 9.5-9.9, החזיקו באותה יד גם את מקל המטרה וגם את קערת התגמול מכיוון שיד אחת צריכה לגעת בארנב.

1. להוביל את הארנב עם מקל המטרה ליד המאמן כמתואר בפרוטוקול שלב 5.5.
   1. C ו-T כאשר הארנב נוגע במטרה עם האף/הפה.
   2. הסר את המטרה משדה הראייה של הארנב תוך תגמול.
   3. חזור על כל השלבים המתוארים לעיל חמש פעמים עד שהארנב ביצע בהצלחה שלב זה לפחות ארבע מתוך חמש פעמים (שיעור הצלחה של 80%).
2. הזיזו את המטרה מעל רגלי המאמן כך שהארנב יניח את הכפות הקדמיות על הרגליים כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
3. הזיזו את המטרה מעל הרגליים ומעט התרחקו מהארנב כך שהארנב יניח את הכפות הקדמיות על הרגליים ויימתח קדימה כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
      הערה: אם הארנב לא מצליח לבצע 9.4, ניתן להוסיף שלב ביניים לאחר 9.3. לשם כך, בצע את שלב 9.3 ולאחר מכן לפתות את הארנב עם קערת התגמול על הברכיים. כאשר הארנב הניח את כל ארבע הכפות על הברכיים, C ו- T ובצע את השלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
4. הזיזו את המטרה מעל הרגליים ואפילו הרחק מהארנב כך שהארנב יקפוץ על הברכיים כדי לגעת במטרה עם האף/הפה.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
5. בצע את שלב 9.4. ומלטפים בזהירות את הארנב ביד חופשית מהגולגולת לקאודלית (החל מהכתף) בזמן שהארנב יושב על הברכיים.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
6. בצע את שלב 9.4 ולטף בזהירות את אוזני הארנב ביד חופשית מהגולגולת לקאודלית בזמן שהארנב יושב על הברכיים.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
7. בצע את שלב 9.4. ותאחזו בעדינות באחת מאוזני הארנב כדי לבדוק ויזואלית את האוזניים.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
8. בצע את שלב 9.4. וללטף כף קדמית או אחורית ביד חופשית בזמן שהארנב יושב על הברכיים.
   הערה: אם צד הגוף הימני של הארנב פונה לכיוון וצד הגוף השמאלי הרחק מהמאמן, ניתן לגעת בכפות השמאליות בעדינות (ולהיפך). דאגו לאמן את שני הצדדים לסירוגין.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.
9. בצע את שלב 9.4. והרימו בזהירות כפה קדמית או כפה אחורית עם היד החופשית בזמן שהארנב יושב על הברכיים.
   הערה: ניתן לבדוק את הטפרים כאשר הכפות מורמות. דאגו לאמן את שני הצדדים לסירוגין.
   1. C ו- T ובצע את שלבים 9.1.2 ו- 9.1.3.

תוצאות

בסעיפים הבאים מסופק מידע על חומר ושיטות החורגים מהפרוטוקול יחד עם התוצאות המייצגות.

סטטיסטיקה

הנתונים שהתקבלו מהפרוטוקול שהוזכר לעיל נשמרו בגיליונות אלקטרוניים ונותחו באמצעות תוכנה לניתוח סטטיסטי מתקדם (Table of Materials). בדיקות לנורמליות (בדיקה חזותית של היסטוגרמות וחלקות qq, השוואה של ממוצע, סטיית תקן וחציון) בוצעו עבור הפרמטרים הרציפים. הבדלים בין פרמטרים שנחקרו במבחן הגישה הרצונית (משך זמן אינטראקציה עם מאמן ואדם לא מוכר, נגיעות רגליים קדמיות) נותחו באמצעות מבחן Wilcoxon signed-rank. ההבדלים בין טכניקות הטיפול נותחו באמצעות מבחן Wilcoxon signed-rank test או מבחן McNemar (אם בינארי). ההבדלים נחשבו משמעותיים בעמ' < 0.05. בעת שימוש במבחן Wilcoxon signed-rank, התפלגות ההבדלים הייתה צריכה להיות סימטרית על פי בדיקה חזותית של ההיסטוגרמה.

המחקר היה חקרני. ניתוח הספק המבוסס על משך הזמן שבו הארנבים קיימו אינטראקציה עם "מכשירי הטיפול" בוצע לאחר המחקר (מבחן Wilcoxon signed-rank; הספק ≥ 0.999) באמצעות G*Power (גרסה 3.1.9.7)⁵².

התרגלות

כל הארנבים למעט #4 ו #10 בלעו מזון מקערת התגמול ולתת למאמן לגעת בהם בכל מפגשי ההרגלה. ארנב #4 לא קיבל את פרס המזון במפגש^הראשון ברחוב אך אכל ארבע פעמים מקערת התגמול^{במפגש השני} . עם זאת, כמות צריכת התגמול גדלה בפגישות מאוחרות יותר וניתן היה לגעת גם בארנב. ארנב #10 גם דרש יותר זמן להתרגל למאמן ולתגמול המזון. בפגישה הראשונה הארנב קיבל את פרס המזון מהמאמן לאחר 5 דקות אך לא ניתן היה לגעת בו. במפגש השני לא נצפתה התעניינות באוכל. במפגשים הבאים, לעומת זאת, ארנב #10 קיבל גם תגמולי מזון וגם נגיעות.

הכירו את הקליקר

שנים עשר מתוך שלושה-עשר ארנבים השלימו בהצלחה את פרוטוקול סעיף 4 ביום אחד וקישרו את תגמול המזון (מחזק ראשי) לקליק (מחזק משני) במהלך אימון זה. הקשר נבחן על ידי התבוננות בהתנהגות הארנבים לאחר הצגת הקליק בפעם העשירית. כאשר בעל חיים חיפש את הפרס מיד לאחר הקליק, ההנחה הייתה שהארנב מקשר את הראשוני עם המחזק המשני. ארנב #4 לא אכל את פרס המזון לאחר הקליק ביום הראשון. לקח לארנב #4 יום אחד יותר (כלומר, יומיים) כדי לקשר בהצלחה בין הקליק לתגמול המזון.

מעקב אחר היעד

טבלה 1 מציגה את מספר מפגשי האימון (הניתנים כחציון^{, אחוזון} 25^{ואחוזון} 75) הנדרשים כדי ללמד את הארנבים את התנהגויות המטרה של הפרוטוקולים. נדרשו לארנבים 2 אימונים (חציון) כדי לעקוב אחר מקל המטרה לתוך זירת האימונים (טבלה 1). כל הארנבים הגיעו לשלב הסופי (5.7) של התנהגות מטרה זו.

Rabbit #4 ו-Rabbit #7 נזקקו לאימונים של 7 ו-8 אימונים בהתאמה, לפני שהם עקבו אחרי מקל המטרה לתוך זירת האימונים. מכיוון שארנב #7 לא הצליח להשלים את שלב 5.4 ולא עשה קפיצה כדי לעקוב אחר מקל המטרה, שלב אימון נוסף (5.3+) יושם בפרוטוקול לאחר שלב 5.3. בשלב 5.3+, מקל המטרה הונח במרחק רחב יותר מהארנב מאשר ב-5.3 והארנב היה צריך להימתח לעברו לכיוונים שונים, אך מקל המטרה עדיין היה נגיש מבלי לבצע קפיצה. לארנב #4 היו בעיות עם שלב 5.5 ולא היה מסוגל לעקוב אחר מקל המטרה, שהונח ממש לפני האף/הפה, למספר משתנה של כשות. לכן, שלב נוסף 5.4+ נוסף לפרוטוקול. במקרה זה, מקל המטרה הונח ממש לפני האף/פה של הארנב ואז הועבר לכיוונים שונים ודרש מהארנב לבצע קפיצה אחת. אותו שלב נוסף שימש בהצלחה גם עבור ארנב #7. לאחר השלמת שלבי ההכשרה הנוספים עם אחוזי הצלחה של לפחות 80%, הם יכלו להמשיך בשלבים הבאים.

שקילה

הארנבים נזקקו לאימון אחד (חציון) עד לביצוע שלב 6.5 (כלומר, להישאר על הסולם למשך פרק זמן משתנה) (טבלה 1). כל הארנבים הגיעו לשלב הסופי (6.5) של התנהגות מטרה זו.

כניסה לתיבת הובלה

הארנבים ביצעו בהצלחה את כל השלבים מ-7.1 עד 7.6 (כלומר, כניסה ויציאה מארגז ההובלה לאחר הרמה) בתוך 2 אימונים (חציון) (טבלה 1). כל הארנבים הגיעו לשלב הסופי (7.6) של התנהגות מטרה זו.

כאשר ארנבים #2 ו- #3 ביצעו בהצלחה את שלב 7.6 בפעם הראשונה, הם לא רצו להיכנס שוב לתיבת ההובלה כדי לחזור על שלב זה. לכן, נוצר שלב 7.5+: לאחר שהחיה עקבה אחר מקל המטרה לכיוון הקופסה, קערת הגמול הוחזקה דרך פתח המכסה והחיה פותתה להיכנס לתוך הקופסה. ברגע שהארנב נכנס לתיבה, הדלת נסגרה, והקופסה הורמה בזהירות. לאחר שהחזיר את הקופסה לרצפה, הדלת נפתחה, והארנב הובל עם מקל המטרה אל מחוץ לקופסה. שני בעלי החיים הצליחו לבצע את שלב 7.5+ לפחות 4 פעמים, ואחריו שלב 7.6 למחרת.

גידול

נדרש אימון אחד (חציון) עד שהארנבים השלימו בהצלחה את שלב 8.3 (כלומר, הנחת הכפות הקדמיות על ידו של המאמן) (טבלה 1). מכיוון ש-11 מתוך 13 ארנבים (כלומר, כולם מלבד #3 ו-#7), לא הצליחו לבצע את שלב 8.3, שלב אימון נוסף 8.2+ לאחר 8.2 הוגדר עבור בעלי חיים אלה. בשלב 8.2+, מקל המטרה הועבר מעל ראשו של הארנב כך שהארנב הרים את הכפות הקדמיות מהקרקע ונגע במטרה עם האף/הפה. בזמן שהארנב נגע במטרה, המאמנת התקרבה ונגעה בכפות הקדמיות (משטח פלמר) בכף ידה החופשית. לאחר ששלב 8.2+ בוצע בהצלחה לפחות בארבעה מתוך חמישה ניסיונות, שלב 8.3 אומן שוב והושלם.

קפיצה על הברכיים

2.5 אימונים (חציון) נדרשו כדי לאמן את הארנבים בשלבים 9.1. ל-9.9. (טבלה 1). עשרה ארנבים הצליחו להגיע לשלב הסופי 9.9 (כלומר, לקבל את כפותיהם שיגעו בהן בזמן שישבו על ברכי המאמן). ארנב #4 הגיע רק לשלב 9.2 (כלומר, הנחת כפותיו הקדמיות על רגלי המאמן) וארנב #10 הגיע לשלב 9.3 (כלומר, קפיצה על ברכי המאמן). Rabbit #7 הגיע לשלב 9.3+, שהיה שלב ביניים נוסף לאחר שלב 9.3. במקרה זה, הארנב הניח את הכפות הקדמיות על רגליו של המאמן, כמתואר בשלב 9.2, ואז פותה עם קערת התגמול על ברכי המאמן. לאחר שכל ארבע הכפות הונחו על ברכי המאמן, הוצגו הקליק והפרס. שלב זה נוסף בהצלחה לפרוטוקול עבור שמונה ארנבים כדי להקל על ביצוע השלבים הבאים.

הכללה

כדי להעריך אם הארנבים הכלילו את הרמזים המאומנים לביצוע התנהגויות המטרה עם אנשים אחרים מלבד המאמן, מטפלת בבעלי חיים, שהייתה מוכרת לארנבים אך היו לה רק מעט ניסיון קודם באילוף קליקרים, ביקשה מהארנבים לבצע את התנהגויות המטרה המאומנות "שקילה", "כניסה לקופסת הובלה", "גידול" ו"קפיצה על הברכיים". אם ארנב לא למד בעבר את השלב האחרון של "קפיצה על הברכיים", יש להדגים את שלב האימון המוצלח האחרון.

המפגשים התקיימו חמישה ימים רצופים לאחר השלמת האימון בן 3 השבועות (איור 1). המטפל בבעלי חיים קרא את פרוטוקולי האילוף לפני המפגש^הראשון . בתחילת הפגישה^{הראשונה} , המאמן נתן הדגמה קצרה של כל התנהגויות המטרה. לאחר מכן היא נשארה במכלאה, נתנה הוראות במהלך המפגשים, ותיעדה איזה שלב בהתנהגויות המטרה הציגו הארנבים. אם ארנב לא הראה צעד מסוים, המטפל בבעלי חיים הונחה לחזור לשלב הקודם בפרוטוקול.

כל הארנבים למעט ארנב #4 ביצעו את התנהגויות המטרה "שקילה", "כניסה לתיבת הובלה" ו"גידול" (נתונים שניתנו כחציון) לאחר מפגש אחד, 2 מפגשים ו-2 מפגשים, בהתאמה (טבלה 2). ארנב #4 לא היה מוכן להראות שום צעדים של התנהגויות מטרה אלה.

שמונה מתוך עשרה בעלי חיים שהצליחו להראות את השלב האחרון של "קפיצה על הברכיים" (9.9) הדגימו התנהגות זו לאחר 3 מפגשים (חציון). למרות שארנב #3 ו #11 למדו בעבר את השלב האחרון של "קפיצה על הברכיים" (9.9), הם הראו רק את שלב 9.3 עם המטפל בבעלי החיים. ארנב #4, #7 ו- #10 הראו את אותו צעד כמו עם המאמן (9.2, 9.3+ ו- 9.3).

ביצוע התנהגויות מטרה לאחר הפסקות אימון של שבוע

כדי לבדוק אם החיות יכולות לשמור על השלבים האחרונים של "שקילה", "כניסה לקופסת הובלה", "גידול" ו"קפיצה על הברכיים", המאמן שחזר את התנהגויות המטרה שבוע ושבועיים לאחר מפגשי ההכללה (איור 1). במהלך הפסקות אלה, בעלי החיים לא אומנו ולא קיבלו כל פרס.

בשתי נקודות הזמן, כל הארנבים היו מסוגלים לבצע את השלבים האחרונים של "שקילה" (6.5), "כניסה לתיבת הובלה" (7.6) ו"גידול" (8.3) שהם למדו באימון הקודם בן 3 השבועות. בעלי חיים (n = 10) שלמדו את השלב האחרון של "קפיצה על הברכיים" (9.9) הראו התנהגות זו בשתי נקודות הזמן; אלה שלא למדו את הצעד האחרון של התנהגות מטרה זו (N = 3) הצליחו להדגים את הצעד האחרון אליו הגיעו בעבר (ארנב #4: צעד 9.2; ארנב #7: צעד 9.3+, ארנב #10: צעד 9.3) לאחר הפסקה של שבוע אחד. לאחר ההפסקה השנייה בת השבוע, שלושת הארנבים הללו הראו את אותם צעדים כמו בשבוע הקודם, אך התבקשו גם לבצע את השלבים הבאים והגיעו לשלב 9.9.

ביצוע התנהגויות מטרה לאחר הפסקת אימון של כ-8.5 שבועות

לאחר שהחיות קיבלו הפסקת אימון של כ-7.5 שבועות (#1-5, #13) או 9.5 שבועות (#6-12), התנהגויות המטרה נזכרו שוב. כל בעלי החיים הצליחו להראות את השלב האחרון של "שקילה" (6.5), "כניסה לתיבת הובלה" (7.6) ו"גידול" (8.3). שנים עשר ארנבים הציגו את השלב האחרון של "קפיצה על הברכיים" (9.9) בעוד ארנבת #7 רק הניחה את כפותיה הקדמיות על רגלי המאמן ונמתחה קדימה כדי לגעת במטרה עם האף/פה שלה (9.3).

גישה רצונית כלפי המאמן המוכר והאדם הלא מוכר

שלושה שבועות לאחר האימון נבדקה התנהגות הגישה הרצונית של הארנבים כדי לחקור את האינטראקציה שלהם עם המאלף המוכר ועם אדם לא מוכר (שניהם נשים). לפני הבדיקה, שני האנשים התקלחו באמצעות אותו ג'ל רחצה ושמפו, לבשו את אותו סוג של בגדים וציוד מגן (כפפות, מסכות, רשתות שיער). שני ניסויים בני 5 דקות בוצעו עם הפסקה של 2 דקות בין הניסויים בדיר בעלי החיים. כפי שניתן לראות באיור 4A, המאמן המוכר ואדם לא מוכר ישבו (באותה תנוחה) זה מול זה על רצפת העט, כשגבו פונה לקיר העט. שני בתים הוצאו מהדיר; הבית הנותר והמנהרה הוצבו ליד שני הקירות האחרים, במרחק זהה משניהם. בניסוי^השני , הם החליפו את מיקומי המושבים שלהם כדי לשקול העדפות מקום פוטנציאליות של הארנבים. הם לא זזו ולא דיברו במהלך 5 הדקות של הניסויים. אם ארנב לעס את מכנסיו וצבט את רגלו, יד הוזזה בעדינות לעבר הארנבת כדי לגרום לה לעצור. יש לציין כי התצפיות של בעלי החיים הבודדים נעשו בתוך הקבוצה, כלומר, הארנבים יכלו לתקשר זה עם זה במהלך שני הניסויים.

הסרטונים נותחו בדיעבד באמצעות BORIS⁵³. על פי האתוגרמה שהוגדרה לחקירה זו, ארנב קיים אינטראקציה עם אדם כאשר כל ארבע הכפות היו בריבוע של 70 ס"מ × 70 ס"מ סביב אדם או על קו הגבול של ריבוע זה. יתר על כן, היה מעקב אם ארנב הניח את שתי הכפות הקדמיות על הרגליים או קפץ על הברכיים (כאשר כל ארבע הכפות הונחו על הברכיים).

איור 4B מראה את משך הזמן שבו הארנבים קיימו אינטראקציה עם שני האנשים. מבחן Wilcoxon signed-rank גילה כי זמן האינטראקציה עם המאמן והאדם הלא מוכר היה שונה באופן משמעותי בניסוי^הראשון (z = -2.040, p = 0.041, מקדם מתאם פירסון r = 0.57) אך לא בניסוי^השני (z = 0.245, p = 0.807, r = 0.07). בניסוי^הראשון , הארנבים בילו יותר זמן באינטראקציה עם המאמן.

שלושה ארנבים (#1, #5, #6) וחמישה (#1, #6, #7, #8, #12) הניחו את כפותיהם הקדמיות על רגלי המאמן בניסוי 1 ו -2, בהתאמה. חמש חיות קפצו עם כל ארבע הכפות על ברכי המאמן (משפט 1: #1, #3, #5, #6; משפט 2: #9). בעוד ארבע חיות (#1, #2, #8, #9) בניסוי^הראשון ושלוש (#1, #4, #8) חיות בניסוי^השני טיפסו עם כפותיהם הקדמיות על רגליו של האדם הלא מוכר, אף אחת מהן לא קפצה עם כל ארבע הכפות על ברכיה. ממוצע ההבדלים בין מספר "נגיעות רגלי הרגליים הקדמיות" לא היה שונה באופן משמעותי בין המאמן לאדם הלא מוכר במשפט 1 (z = -0.264, p = 0.792, r = 0.07) וגם לא במשפט 2 (z = -0.707, p = 480, r = 0.20).

השפעת טכניקות הטיפול על התנהגות הארנבים כלפי "מכשיר הטיפול"

כדי לחקור אם הטכניקות ששימשו להרמת הארנבים מהרצפה השפיעו על התנהגותם, בוצעה תצפית התנהגותית של 2 דקות לאחר ההליך הזה בהקשר של הבדיקה הכללית במשך יומיים רצופים (איור 1). תצפית זו בוצעה עבור שבעה בעלי חיים.

ביום הראשון, הארנבים נאספו עם תיבת ההובלה. לשם כך, הם עקבו אחר מקל המטרה לתוך הקופסה, הקופסה נסגרה והובאה לשולחן הבחינה, כמתואר בשלב האימון 7.5. כאן הם הורמו בעדינות מהקופסה אל השולחן, כששתי ידיהם/זרועותיהם מונחות מתחת/סביב גוף החיה. בוצעה בדיקה בריאותית (כולל מישוש הגוף, בדיקה חזותית של אוזניים, עיניים, נחיריים, חותכות, אזור אנוגניטלי) והוצע להם פרס מזון לאחר מכן. לאחר בדיקת הבריאות, הם הונחו בעדינות עם הידיים לתוך תיבת ההובלה. לא נעשה שימוש במקל המטרה על שולחן הבדיקה כדי להבטיח שידיו של המאלף יהיו חופשיות לאבטח את בעלי החיים. כאשר נכנסו הארנבים שוב לארגז ההובלה והדלת נסגרה, הועברה הארגז למכלאה והדלת נפתחה. הארנב אולץ לעקוב אחר מקל המטרה ולצאת מהקופסה, ולאחר מכן להציג את פרס המזון, כמתואר בשלב האימון 7.6.

ביום השני, הארנבים נאספו בטכניקה הקונבנציונלית, המשמשת באופן שגרתי את המטפלים בבעלי החיים (כלומר, הם רוסנו על ידי קשקוש צווארם ביד אחת והורמו לזמן קצר על הזרוע השנייה כשהראש פונה לעקמת הזרוע). לאחר מכן הם הועברו לשולחן הבדיקה ובוצעה בדיקת בריאות, כמתואר לעיל. לאחר בדיקת הבריאות, הוצע להם פרס מזון מקערת הפרס. לבסוף, הם שוב נבלמו על ידי קשקוש צווארם והורמו לרגע על זרועם כדי להחזיר אותם למכלאה. לאחר שחרורם הוצע להם שוב פרס מזון.

לאחר שפרס המזון הוצע לארנבים במכלאה, המאלף התיישב על רצפת הדיר ללא אינטראקציה עם הארנבים והוקלט סרטון בן 2 דקות, שנותח בדיעבד באמצעות BORIS⁵³. יש לציין כי התצפיות על בעלי חיים בודדים נעשו בתוך הקבוצה מכיוון שיש לעקוב אחריהם בסביבתם המוכרת. משמעות הדבר היא שהארנבים יכלו לתקשר זה עם זה. הפרמטרים הבאים נחקרו והוגדרו: משך הזמן שהוקדש לאינטראקציה עם מאמן או תיבת הובלה (כלומר, ארנב היה באזור האינטראקציה של המאמן או תיבת ההובלה כאשר האף היה במרחק של פחות מאורך גוף מהמאמן או מהקופסה); משך הזמן שבילה בתיבת ההובלה (כלומר, אירוע זה התרחש כאשר החיה הייתה באזור האינטראקציה של התיבה; זה התחיל כאשר הארנבים נכנסו לתיבה עם כל ארבע הכפות ונעצר כאשר כפה אחת או יותר הונחו מחוץ לתיבה); משך הזמן שהוקדש לאכילה (כלומר, הארנב בלע קש, חציר, כדורים או צואה; לעיסת בגדיו או נעליו של המאמן לא נחשבה לאכילה); משך הזמן שבילה במסתור (אירוע זה התחיל כאשר הארנב נכנס לבית או מנהרה עם כל ארבע הכפות; הוא נעצר כאשר הארנב עזב את המקלט עם כפה אחת או יותר); קפיצה על הברכיים (כלומר, הארנב קפץ על ברכי המאמן והניח עליו את כל ארבע כפותיו; אירוע זה התרחש כאשר החיה הייתה באזור האינטראקציה של המאמן); הנחת כפות קדמיות על רגליים (כלומר, הארנב הניח את שתי הכפות הקדמיות על רגלי המאמן; אירוע זה התרחש כאשר החיה הייתה באזור האינטראקציה של המאמן).

הניתוח ההתנהגותי בוצע על ידי המאמן ואדם עיוור לחלוטין להליך שבוצע. לפי לנדיס וקוך⁵⁴, אמינות האינטררט בין המאמן לעיוור שחושבה באמצעות בוריס⁵³ (כהן קאפה) הייתה משמעותית עד כמעט מושלמת. לצורך ניתוח נוסף, נעשה שימוש בנתונים שחולצו על ידי הצופה העיוור.

מבחן Wilcoxon signed-rank גילה כי טכניקת הטיפול הקונבנציונלית הפחיתה באופן משמעותי את משך הזמן שהוקדש לאינטראקציה עם "מכשיר הטיפול", כלומר, סכום משך הזמן שהוקדש לאינטראקציה עם המאמן והקופסה לאחר שנאספו (z = 2.366, p = 0.018, r = 0.89; איור 5A). טכניקת הטיפול לא השפיעה באופן משמעותי על משך הזמן של אינטראקציה עם המאמן (z = 1.014, p = 0.310, r = 0.28; איור 5B). לעומת זאת, הרמת הארנבים על ידי התיבה הגדילה את משך הזמן שבו הם קיימו אינטראקציה עם התיבה (z = 2.366, p = 0.018, r = 0,66; איור 5C) ובילה בתיבה (z = 2.201, p = 0.028, r = 0.61; איור 5D) בהשוואה לטכניקת הטיפול הקונבנציונלית. יתר על כן, בעלי החיים בילו זמן רב יותר במסתור במקלטים לאחר שנאספו על ידי טכניקת הטיפול הקונבנציונלית (z = -1.992, p = 0.046, r = 0.046; איור 5F).

לטכניקת הטיפול לא הייתה השפעה משמעותית על משך הזמן שהחיות אכלו (z = 0.944, p = 0.345, r = 0.26; איור 5E), מספר הארנבים שהניחו את כפותיהם הקדמיות על רגלי המאמן (McNemar: p = 1.000) או קפצו על ברכי המאמן (McNemar: p = 0.500). ללא קשר לטכניקת הטיפול, ארנבת #9 קפצה על ברכי המאמן וארנבת #12 הניחה את כפותיה הקדמיות על רגלי המאמן. בנוסף, ארנבים #8 ו #11 לשים את כפותיהם הקדמיות על רגליהם לאחר שנאספו על ידי תיבת ההובלה.

בעוד שפרס המזון שהוצע על שולחן הבדיקה נבלע על ידי כל הארנבים לאחר ההובלה הקצרה בתיבה, רק ארנב אחד (# 3) קיבל אותו לאחר טכניקת הטיפול הקונבנציונלית. הבדל זה היה משמעותי (McNemar: p = 0.031). במכלאה, פרס המזון התקבל על ידי שישה ארנבים (כלומר, כולם למעט #7) לאחר שעזבו את תיבת ההובלה וארבעה ארנבים (#7, #9, #10 ו- #12) לאחר ששוחררו מהזרוע (טכניקת טיפול קונבנציונלית; מקנמר: p = 0.625).

איור 1: לוח זמנים. כל מפגשי ההרגלה, האימון וההכללה, כמו גם התצפיות ההתנהגותיות, בוצעו בבוקר לפני האכלה וניקוי. בשבוע 1 (כלומר, ארבעה ימים לאחר ההגעה), חמישה מפגשי התניה/הרגלה הקשריים (שני עד שישי; פרוטוקול סעיף 3) בוצעו על ידי המטפלים בבעלי החיים והמחבר המתאים (כולם נשים), ולאחר מכן תקופת הכשרה של 3 שבועות בשבועות 2-4 (שני עד שישי; פרוטוקול סעיף 4-9). מפגשי ההדרכה נערכו על ידי המחבר המקביל שהוא וטרינר המתמחה במדעי חיות מעבדה ומנוסה באילוף ארנבות, עכברים, תרנגולות וסוסים. לאחר מכן, נערכו תצפיות התנהגותיות במשך יומיים רצופים כדי לחקור אם הטכניקה ששימשה להרמת הארנבים מהרצפה השפיעה על התנהגותם. בשבוע 5 נערכו חמישה מפגשי הכללה (שני עד שישי) כדי להעריך אם הארנבים יבצעו את התנהגויות המטרה שנלמדו עם אדם אחר מאשר המאמן. בשבוע 6 ובשבוע 7 (בימי חמישי) כמו גם בשבוע 14 (שני/שלישי), המאמן בדק במסגרת בדיקת הבריאות הכללית השבועית האם הארנבים יכולים לשמור ולהראות את התנהגויות המטרה. בשבוע 7 בוצע מבחן גישה וולונטרי עם המאלף ואדם לא מוכר כדי לחקור את התגובות ההתנהגותיות של הארנבים כלפי בני אדם מוכרים לעומת לא מוכרים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 2: זירת אימונים. זירת האימונים (ראו טבלת חומרים) הוקמה דקות ספורות לפני תחילת האימונים. (א) כדי להקל על ההובלה וההתקנה, הורכבה הזירה משני חלקים, שהיו מחוברים זה לזה במכלאה. (B) שתי שורות של לוחות פלסטיק שקופים יצרו זירה בגודל של כ-136 ס"מ ×-90 ס"מ ×-70 ס"מ. הדלת חוברה ללוחות האחרים באמצעות אזיקונים, המאפשרים לפתוח ולסגור אותה. ניתן לנעול את הדלת באמצעות תפס. מכיוון שקירות זירת האימונים היו שקופים, לארנב היה מגע חזותי, חוש ריח ואקוסטי עם חברי הקבוצה כשנכנס לזירת האימונים. שרפרף/מדרגה נמוכים כמושב למאמן, ובהתאם להתנהגות המטרה שיש לאמן, ניתן להציב סולם או תיבת הובלה בזירה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 3: קערת תגמול עם קליק משולב. קערת התגמול הודפסה בתלת-ממד באמצעות חומצה פולילקטית לבנה (PLA). גודל הכיור המרובע: 8 ס"מ × 8 ס"מ × 3 ס"מ; גודל ידית גלילית: 9.5 ס"מ × 2.3 ס"מ. לידית הוצמד לוחץ אצבע (ראו טבלת חומרים). קובץ הדפסה תלת מימדי עבור קערת התגמול ניתן למצוא בקובץ קידוד משלים 1. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 4: מבחן גישה מרצון. (A) בשני הניסויים שנמשכו 5 דקות, המאמן המוכר ואישה לא מוכרת ישבו זה מול זה בעט, כשגבו פונה לקיר העט. בית ומנהרה הוצבו ליד שני הקירות האחרים, במרחק זהה משני האנשים. (B) משך הזמן שבילה אינטראקציה עם אדם נותח עבור כל ארנב. ארנב קיים אינטראקציה עם אדם כאשר כל ארבע הכפות היו בריבוע של 70 ס"מ × 70 ס"מ סביב אדם או על קו הגבול של ריבוע זה. הסמלים מציינים את הנתונים של כל חיה בודדת. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 5: השפעות של טכניקות טיפול על התנהגות הארנבים. (A-F) איורים של נתונים התנהגותיים שנאספו משבעה ארנבים לאחר שטופלו על ידי תיבת ההובלה או על ידי הטכניקה המקובלת (כלומר, הם רוסנו על ידי קשקוש צווארם והורמו על הזרוע). מכיוון שמאמן ותיבת הובלה נחשבו ל"מכשירי טיפול", (A) לוח זה מציג את הסכום של לוחות B ו - C. הסמלים מציינים את הנתונים של כל חיה בודדת. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

ארנב	מספר האימונים הדרושים לאימון התנהגות המטרה
	מעקב אחר היעד	שקילה	כניסה לתיבת הובלה	גידול	קפיצה על הברכיים
#1	1	1	2	2	2
#2	1	1	4	1	5
#3	2	1	3	1	4
#4	7	2	1	3	2 (שלב 9.2)
#5	2	1	3	1	3
#6	2	1	2	1	1
#7	8	1	2	2	3 (שלב 9.3+)
#8	2	1	2	1	1
#9	2	1	2	1	2
#10	2	2	3	3	5 (שלב 9.3)
#11	2	1	2	2	4
#12	2	1	1	1	1
#13	2	3	1	2	4
חציון (אחוזונים 25-75)	2	1	2	1	2.5
	(2–2)	(1–1.5)	(1.5–3)	(1–2)	(1–4)*

טבלה 1: מספר המפגשים הדרושים לאימון התנהגויות המטרה. אם ארנב לא למד את השלב האחרון של התנהגות מטרה, שלב האימון האחרון שהושג מצוין בסוגריים.

הגדרת אימון: כ-30 דקות לקבוצה (6-7 בעלי חיים); בימים שני עד שישי במשך שלושה שבועות; מתחיל כאשר המאמן יושב בעט ומוכן להתחיל את האימון; מסתיים כאשר אף אחד מהארנבים כבר לא משתתף באילוף או שכל הארנבים הגיעו לשלב האחרון של התנהגות מטרה; בעל חיים יכול לבצע יותר מניסוי אחד בכל מפגש.

* ארנבים #4, #7, #10 לא נכללו בחישוב זה מכיוון שהם לא הגיעו לשלב הסופי של "קפיצה על הברכיים".

ארנב	מספר האימונים עד שהושג השלב הסופי של התנהגות המטרה
	שקילה (5 שלבי אימון)	כניסה לתיבת הובלה (6 שלבי הדרכה)	גידול (3 שלבי אימון)	קפיצה על הברכיים (9 שלבי אימון)
#1	1	3	1	1
#2	1	3	1	1
#3	1	3	1	פ (9.3)
#4	F	F	F	3 (9.2)
#5	2	3	2	2
#6	1	1	3	3
#7	1	1	3	3 (9.3+)
#8	1	1	1	3
#9	1	1	1	3
#10	1	3	3	3 (9.3)
#11	1	1	3	פ (9.3)
#12	1	1	3	3
#13	1	3	2	5
חציון (אחוזונים 25-75)	1	2	2	3
	(1–1)	(1–3)	(1–3)	(1.25–3)
	(למעט #4)	(למעט #4)	(למעט #4)	(למעט #3, #4, #7, #10, #11)

טבלה 2: הכללה. בחמישה מפגשים (שני עד שישי), מטפל בבעלי חיים המוכר לארנבים ביקש מהארנבים לבצע את הצעדים האחרונים (או את הצעד האחרון שהושג) של התנהגויות המטרה המאולפות. אם השלב האחרון של התנהגות המטרה לא הושג, שלב האימון האחרון שהושג מצוין בסוגריים. F (כישלון) צוין כאשר בעל חיים לא הראה את השלב האחרון של התנהגות מטרה שהושגה בעבר באימונים. הגדרת הפעלה: שני עד שישי במשך שבוע; מתחיל כאשר המטפל בבעלי החיים והמאלף יושבים במכלאה; מסתיים כאשר אף אחד מהארנבים לא משתתף (יותר) או שכל הארנבים הראו את הצעד האחרון (או את הצעד האחרון שהושג) של התנהגות מטרה רצויה; בעל חיים יכול לבצע יותר מניסוי אחד בכל מפגש.

קובץ קידוד משלים 1: קובץ הדפסה תלת מימדי "קערת תגמול". ניתן להשתמש בחומצה פולילקטית (PLA) להדפסה. אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.

קובץ משלים 1: דף תיעוד לשישה ארנבים. יש להדפיס או לפתוח את הגיליון על לוח כדי לתעד את התקדמות האילוף של כל ארנב. בכל אימון יש לציין לאילו שלבי אילוף הגיעו בעלי החיים הבודדים או האם נדרשו התאמות לפרוטוקול. יש לתעד גם כל התרחשות מיוחדת (למשל, גורמים חיצוניים, מצב בריאותי לקוי). אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.

קובץ משלים 2: פרוטוקולי הדרכה פשוטים. הטבלאות מתארות את השלבים של סעיפי הפרוטוקול 3-9 בצורה פשוטה. לפרטים נוספים, יש לקרוא את שלבי הפרוטוקול של כתב היד הראשי. אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.

Discussion

פרוטוקולי ההכשרה פותחו כדי לחדד נהלים שגרתיים כגון טיפול, בדיקות בריאות ושקילה בארנבי מעבדה. היתכנותם הוערכה במחקר גישוש זה באמצעות שלוש עשרה נקבות ארנבים לבנים מניו זילנד. פרוטוקולי האילוף יכולים להיות מיושמים באופן אמין כדי לאלף בהצלחה את הארנבים. רוב הארנבים הצליחו ללמוד את התנהגויות המטרה שהוגדרו בפרוטוקולי האימון תוך פחות מתקופת האימון בת 3 השבועות, זכרו אותן לאחר הפסקות אימון של שבוע, והכלילו אותן לאדם אחר מאשר המאמן. היה צורך לבצע התאמות מעטות לפרוטוקול כדי לענות על הצורך של בעלי חיים בודדים. הממצא העיקרי של המחקר הנוכחי היה שטכניקת הטיפול המעודנת להרמת ארנבים, כפי שתוארה בפרוטוקולי האימונים, הייתה פחות מרתיעה מטכניקת הטיפול הקונבנציונלית. באופן מעניין, הארנבים המאומנים הראו את התנהגותם החקרנית לא רק כלפי המאמן המוכר אלא גם כלפי אדם לא מוכר במבחן גישה מרצון.

משמעות המטרה

היעד שימש בסיס לפרוטוקול האימונים הנוכחי. בעת הצגת המטרה, בעלי החיים למדו כי התנהגותם השפיעה על הסביבה ויצרה תוצאות. הצגת המטרה בונה אמון בין האדם לחיה, כפי שהודגם על ידי ארנב #4, נדרשו 7 אימונים לפני שעקב אחר מקל המטרה לזירת האימונים אך למד את התנהגויות המטרה הבאות במהירות (כלומר, תוך 1-3 מפגשי אימון). נראה כי ארנב #4 זה רכש אמון במאמן במהלך הצגת המטרה, מה שהקל על אימון התנהגויות המטרה האחרות. עם זאת, ארנב זה עדיין חסר אמון באנשים אחרים ולא היה מוכן להראות את רוב התנהגויות המטרה בפגישות הכללה.

יש לציין כי היעד לא הוגדר כנקודת קצה בחלק מסעיפי הפרוטוקול. במקום זאת, למשל, החיות היו צריכות לעקוב אחר המטרה למספר משתנה של כשות או להישאר על הסקאלה במשך מספר משתנה של שניות. דפוס תגמול משתנה נבחר כדי להגדיל ולשמר את תשומת הלב והמוטיבציה של הארנבים באימונים.

אותות

לאחר שהארנבים ביצעו בהצלחה את שלב 5.1, בכל האימונים הבאים, המאמן מיקם את המטרה במרחק קרוב לאפו של הארנב כדי לאותת לארנב שניסוי האימונים החל. אם הארנב נגע במטרה באף/פה, נשקלה נכונות להשתתף באימון והאימונים החלו.

הפרוטוקולים הנוכחיים לא כללו אותות נוספים, למשל, קנה המידה, תיבת ההובלה או היד לא נחשבו לאותות. במקום זאת, המטרה שימשה כדי להוביל את החיה לתוך זירת האימונים, על המאזניים, לתוך תיבת ההובלה, באוויר (גידול) או על ברכי המאמן. משמעות הדבר היא כי התנהגויות המטרה "שקילה", "כניסה לתיבת הובלה", "גידול" ו "קפיצה על הברכיים" היו שינויים של "בעקבות המטרה". הסיבה לכך הייתה הדרישות לפרוטוקול ההכשרה: זה צריך להיות ריאלי להתבצע על ידי צוות של מתקני בעלי חיים, כי לא יכול להיות מומחים באילוף בעלי חיים, ולשלב בקלות לתוך שגרת העבודה היומיומית. לכן, הפרוטוקולים חייבים להיות יעילים ולהשיג את התנהגויות המטרה במהירות.

עם זאת, היד שמונחת לפני הארנב (שלב 8.3), הסולם או תיבת ההובלה יש גם פוטנציאל להיות גם אות וגם מטרה עבור הכפות. לכן, ייתכן שניתן יהיה להגדיר צעדים נוספים החורגים מהפרוטוקולים הנוכחיים ואינם מחייבים שימוש במקל המטרה. לדוגמה, ברגע שהארנב רואה את קנה המידה, הסולם מסמן לארנבים לקפוץ עליו עם כל ארבע הכפות.

התאמות של הפרוטוקולים

אף על פי שניתן לצפות שהפנוטיפ של חיות מעבדה כמעט זהות גנטית דומה מאוד, ישנם "הבדלים התנהגותיים בין פרטים עקביים לאורך זמן ובין מצבים [ו]מכונים אישיות"⁵⁵, למשל, חלק מבעלי החיים ביישנים למדי ואחרים נועזים⁵⁶ . ייתכן שייקח לבעלי חיים ביישנים ופחות חקרניים זמן רב יותר ללמוד את התנהגויות המטרה המוגדרות של הפרוטוקול (למשל, ארנב #4). גם אם פרוטוקולי אילוף סטנדרטיים עשויים להתאים לרוב, אילוף צריך להתחשב בצרכים של בעל חיים בודד ולהסתגל אליו, בעת הצורך²⁶ . לפיכך, יש להגדיר צעדי ביניים קטנים יותר עבור אותם ארנבים שאינם לומדים שלב הכשרה של הפרוטוקול. שלבי אימון הביניים הנוספים אמורים לסייע להם להתקדם בהצלחה לשלב הבא. במיוחד מכיוון שתוכניות אימון מפותחות בתיאוריה ולאחר מכן נבדקות בפועל, ייתכן שיתברר כי נדרשים צעדי אימון נוספים כדי לאמן התנהגות מטרה מסוימת.

ביחס לפרוטוקולי האימון הנוכחיים, היה צורך להוסיף כמה שלבי אימון ביניים עבור התנהגויות המטרה "בעקבות המטרה", "כניסה לתיבת הובלה", "גידול" ו"קפיצה על הברכיים", כפי שמתואר בפירוט בפרק על התוצאות המייצגות מכיוון שבעלי חיים בודדים לא המשיכו בשלב האימון הבא. מעניין לציין כי שלבי הביניים 8.2+ ו-9.3+ נדרשו על ידי רוב הארנבים, תוך הדגשת חשיבותם. לכן, שלבים אלה נוספו כהערה לפרוטוקולי ההדרכה.

לחלופין, לשלב 8.2+ המוגדר, המאמן יכול להניח יד על הרצפה כשכף היד פונה כלפי מעלה ולתת לארנב לדרוך על היד עם כף קדמית אחת ובסופו של דבר שתי כפות קדמיות. יתר על כן, ניתן להעלות על הדעת כי ארנב דורש צעדי ביניים נוספים לפני שלב 9.3+, למשל, תחילה הארנב מניח כפה אחורית אחת ולאחר מכן שתי כפות אחוריות על ברכי המאמן. אם ארנב אינו מסכים שיגעו בו בשלבים 9.5-9.9, ניתן להגדיל בהדרגה את משך הנגיעה בחלקי הגוף השונים. יתר על כן, בתחילה רק את האצבע המורה ואת האצבע האמצעית ניתן להשתמש כדי ללטף את החיות עם לחץ נוצה אור. לאחר מכן ניתן להגדיל את מספר האצבעות המשמשות למגע ואת הלחץ במספר צעדים.

חידוד טכניקות הטיפול

ניתן להניח כי הטיפול מרתיע מאוד, במיוחד אצל ארנבים עם תכונת אישיות ביישנית. ארנבים הם חיות טרף יבשתיות והרמה (כלומר, הרמה מהרצפה) או ריסון (כלומר, החזקתם בזרועות אדם) לצורך בדיקת בריאות והליך ניסיוני עלולה לגרום לחרדה ומצוקה. אפשרות אחת לשכלל את שיטות הטיפול הוכנסה בפרוטוקולי האילוף: במקום לרסן את הארנב על ידי קשקוש הצוואר ולהרים את הארנב על היד השנייה, ניתן להוביל את הארנב עם מקל המטרה לתוך התיבה ולשאת אותו בקופסה אל שולחן הבדיקה, כפי שהוצע קודם לכן^{50, 57}, שם הארנב מועבר בעדינות מהקופסה לשולחן. לחלופין, ניתן להסיר את החלק העליון של הקופסה, או להנחות את הארנב עם מקל המטרה מחוץ לקופסה.

התצפיות ההתנהגותיות שבוצעו לאחר איסוף הארנבים באמצעות טכניקת הטיפול הקונבנציונלית או תיבת ההובלה גילו כי טכניקת הטיפול הקונבנציונלית הייתה קשורה ליותר התנהגות הקשורה ללחץ וחרדה מאשר הטכניקה החלופית. מסקנה זו נבעה מהמספר הגבוה של בעלי חיים המסרבים לקבל תגמול מזון על שולחן הבדיקה, וממשך הזמן הארוך יותר שהוקדש להסתתרות במקלטים כאשר יושמה טכניקת הטיפול הקונבנציונלית. באופן מעניין, טכניקת הטיפול לא השפיעה על זמן האינטראקציה עם המאמן, מה שמצביע על כך שייתכן שתהליך הטיפול לא פגע ביחסי אדם-חיה. עם זאת, מלבד המאמן, תיבת ההובלה שימשה גם כ"מכשיר טיפול" (כלומר, מכשיר הטיפול של הטכניקה הקונבנציונלית היה המאמן, מכשירי הטיפול של הטכניקה החלופית היו גם המאמן וגם תיבת ההובלה). לכן, זמן האינטראקציה עם תיבת התחבורה נותח גם. למרות שהארנבים נאספו זה עתה עם ארגז ההובלה, הם בילו זמן רב יותר באינטראקציה עם התיבה או בתיבה מאשר כאשר נאספו על ידי הטכניקה הקונבנציונלית. זה הציע כי תיבת התחבורה יכולה להיות קשורה עם השפעה חיובית. כאשר משווים את משך הזמן שהוקדש לאינטראקציה עם שני "מכשירי הטיפול" (כלומר, סכום משך הזמן שהוקדש לאינטראקציה עם הקופסה ועם המאמן), טכניקת הטיפול בקופסה הגדילה את משך הזמן באינטראקציה עם "מכשירי הטיפול", כלומר, לטכניקה זו הייתה השפעה חיובית ברורה על התגובה ההתנהגותית של הארנבים כלפי "מכשירי הטיפול" בציפייה לטיפול. ממצאים דומים נעשו בעכברי מעבדה, והראו כי טכניקות טיפול עדינות ואימון הפחיתו מתח וחרדה: בעלי חיים שנאספו באמצעות מנהרה או ידיים מקופלות בילו זמן רב יותר באינטראקציה רצונית עם "מכשיר הטיפול" והראו פחות התנהגות הקשורה לחרדה מאשר עכברים עם טיפול בזנב¹². נראה כי האימונים חיזקו את האפקט הזה. לידינגר ועמיתיו הראו כי עכברים בעלי טיפול עדין (מנהרה /) הראו פחות השתנה, עשיית צרכים וקול כאשר היו מרוסנים על ידי קשקוש צווארם ופחות התנהגות צפה במבחן מבוך המים מוריס כאשר הם אומנו באמצעות PRT בהשוואה לעכברים לא מאומנים¹³.

היתכנות הפרוטוקולים לעבודה יומיומית - משך ההדרכה, שימור והכללה

מספר האימונים שנדרשו כדי ללמוד התנהגות מטרה היה תלוי בחיה הבודדת ובהתנהגויות המטרה, שכללו מספר שונה של שלבים החל מסעיף 3 ועד סעיף 9 לפרוטוקול שהוצג לעיל.

על פי מספר בעלי החיים שהצליחו ללמוד התנהגות מטרה ומספר ההתאמות שהיו צריכות להיעשות לפרוטוקולים עבור בעלי החיים הבודדים, שלבי האילוף היו בדרגות קושי שונות. ההתנהגות "בעקבות המטרה" הייתה חווית האילוף הראשונה של הארנבים, ולכן לקח לבעלי חיים מסוימים זמן רב יותר להתאמן על התנהגות זו מאשר התנהגות המטרה האחרת, כפי שפורט לעיל. בעוד שניתן היה לאמן את כל בעלי החיים על "שקילה" על פי הפרוטוקול הנוכחי, נדרשו צעדי ביניים נוספים ל"כניסה לתיבת הובלה" על ידי שני בעלי חיים ול"גידול" וכן "קפיצה על הברכיים" על ידי כמעט כל הארנבים. ניתן להסביר זאת במידת המגע הפיזי בין בעל החיים למאלף שהיה הכרחי לביצוע התנהגויות המטרה השונות. "שקילה" ו"כניסה לקופסת הובלה" לא היו כרוכים במגע פיזי בין בעל חיים לאדם. השלב האחרון של "גידול" (8.3) והשלבים 9.2-9.4 של "קפיצה על הברכיים" דרשו מהארנבים ליצור מגע פיזי עם המאמן. בנוסף, המאלף נגע בכתף, בגב, בעכוז, באוזניים או בכפות של הארנב בשלבים 9.5-9.9 של "קפיצה על הברכיים", מה שהגדיל את מידת המגע הפיזי בין בעל החיים למאמן. קבלת המגע הייתה מאתגרת יותר עבור ארנבים מסוימים מאשר עבור אחרים. כפי שפורט לעיל, היה מועיל להתאים את פרוטוקולי האימון של התנהגויות מטרה אלה ולהוסיף צעדי ביניים.

עם זאת, שלושה ארנבים דרשו אימונים נוספים כדי להשלים את התנהגות המטרה "קפיצה על הברכיים" (#4, #7, #10). ניתן לשלול ליקויים פיזיים שמנעו מבעלי חיים אלה לקפוץ על ברכי המאמן. יתר על כן, הארנבים הצליחו לקפוץ על בתיהם, הגבהים של אלה היו גבוהים יותר מחיקו של המאמן.

ניתן היה להבחין כי שניים משלושת הארנבים הללו (#4 ו- #10) נזקקו לזמן רב יותר כדי להתרגל למאמן כמו גם לתגמול המזון במפגשי ההרגלה ונזקקו באופן חלקי לאימונים נוספים כדי להגיע לשלב הסופי של התנהגויות מטרה אחרות. זה היה נכון גם לגבי ארנב #7, שנפצע בזנב עקב קרבות בתוך הקבוצה מאז ההרגלה הרביעית. לכן, ארנב #7 נאסף, הועבר לשולחן הבדיקה, טופל ונבדק מדי יום במשך 15 ימים, מה שאולי הביא לזהירות מוגברת כלפי בני אדם. מצד אחד, חשוב לציין כי ביצועי האימון יכולים להיות מושפעים, למשל, ממצב בריאותי לקוי, רמות מתח מוגברות, או מערכת יחסים מופרעת בין אדם לחיה עקב התערבויות אחרות. מצד שני, תצפיות אלה הדגימו את חשיבות ההתרגלות למאמן ואת תגמול המזון. בעלי חיים מסוימים עשויים לדרוש זמן רב יותר כדי להכיר את נוכחותו של המאלף ולקבל את פרס המזון מהמאמן. אם היו נערכים מפגשי הרגלה נוספים, ארנב #4 ו #10 עשויים היו לבצע טוב יותר במפגשי האימונים. הרלוונטיות של הרגלת ארנבים לבני אדם כבר דווחה בספרות. המגדל המסחרי, שממנו נרכשו הארנבים המשמשים במחקר זה, הציג לאחרונה מפגשי ליטוף קבועים, אשר הפחיתו את ההתנהגות הקשורה ללחץ וביטלו תוקפנות⁵⁸. במחקר קודם הודגם כי ליטוף וטיפול בארנבים צעירים מפחיתים התנהגות הקשורה לחרדה, מגבירים את העלייה במשקל שלהם ומפחיתים את שיעור התמותה⁵⁹.

לאחר שהארנבים למדו את התנהגויות המטרה השונות, הם עדיין היו מסוגלים להציג אותן לאחר שתי הפסקות אימון קצרות (שבוע) וארוכות (כ-7.5-9.5 שבועות), למעט חריגים בודדים. תצפיות אלה עשויות להצביע על כך שמספיק לבקש מהארנבים לבצע את התנהגויות המטרה המאומנות פעם בשבוע כאשר הבדיקה הכללית מבוצעת, ומנקים את החדר/עט.

עבור היתכנות של הפרוטוקול עבור חיי העבודה היומיומיים, זה גם חיוני כי ארנבים להכליל את התנהגויות המטרה מאומן לאנשים אחרים מאשר המאמן. במקרה של חופשה או מחלה, אדם אחר צריך להמשיך את האילוף והטיפול בבעלי החיים. רוב הארנבים (שנים עשר מתוך שלושה-עשר) הכלילו את התנהגויות המטרה "שקילה", "כניסה לתיבת הובלה" ו"גידול" למטפל בבעלי החיים, אם כי, במקרים מסוימים, נדרשו לארנבים יותר מאימון אחד כדי להראות את ההתנהגות הרצויה. נראה שהמילה "שקילה" היא הכללה הטובה ביותר; ואחריו "כניסה לתיבת הובלה" ו"גידול". עם זאת, "קפיצה על הברכיים" נראה קשה יותר להכליל לאדם אחר. לקח לבעלי החיים זמן רב יותר להדגים את ההתנהגות הרצויה (9.9.) ושני ארנבים, שלמדו קודם לכן את השלב האחרון 9.9, לא הצליחו להראות התנהגות מטרה זו, אולי בגלל המגע הפיזי הגבוה יותר הדרוש (ראו לעיל). ארנב אחד (# 4) לא הראה צעדים כלשהם של התנהגויות המטרה "שקילה", "כניסה לתיבת הובלה" ו"גידול "ולא היה מעוניין באינטראקציה עם המטפל בבעלי החיים. ארנב #4 היה אחד מבעלי החיים שהיו זקוקים לזמן רב יותר כדי להתרגל למאלף ולתגמול המזון במפגשי ההרגלה. זה עשוי להצביע על כך, עבור אנשים מסוימים, מפגשים נוספים שבהם המטפלים בבעלי חיים מבלים זמן עם הארנבות, להרגיל אותם לקבל את פרס המזון מהם ולבנות קשר חיובי מועילים²³. ארנבים עשויים להיות מסוגלים להבחין בין אנשים שונים, כפי שהודגם עבור חולדות⁶⁰. גורמים נוספים, שיש להם פוטנציאל להשפיע על ביצועי הארנבים בפגישות עם המאלף ועם המטפל בבעלי החיים, עשויים להיות אותות לא מודעים שהמאלף נתן לבעלי החיים במהלך האימון, למשל, מיקום מקל המטרה או קערת התגמול, תנוחת הגוף או התנועה. אם המאמן אינו מודע לאותות אלה, הם לא יתועדו והאנשים האחרים לא יחקו אותות אלה.

יתר על כן, מיומנויות האילוף של האנשים העובדים עם בעלי החיים, כולל שגרת הטיפול במקל המטרה והצגת התגמולים, יכולים להשפיע על התנהגות בעלי החיים. מלבד ידע בעקרונות למידה ותקשורת עם בעלי חיים, יש צורך בהתנסויות מעשיות כדי לאמן בהצלחה בעל חיים⁶¹ ולשלוף התנהגות מטרה. מכיוון שלא הושוו מפגשי הכללה של אדם מיומן ובלתי מיומן, לא ניתן לקבוע את הרלוונטיות של הגורם "מיומנויות אימון". עם זאת, למיטב ידיעת המחברים, חלק גדול מצוות חיות המעבדה אינו מאומן באילוף בעלי חיים ולכן התנאים שבהם בוצעו מפגשי ההכללה (כלומר, השתתפות מטפל בבעלי חיים עם ניסיון קודם מועט בלבד באילוף קליקרים) ייצגו סביבה מציאותית במתקני חיות מעבדה.

הנתונים המייצגים של הפרוטוקולים מספקים למתקנים לבעלי חיים מושג על עומס העבודה הקשור לאימון התנהגויות המטרה השונות. הנתונים עשויים לסייע למתקנים לבעלי חיים ליצור לוחות זמנים משלהם לעבודה בעת יישום (חלקים של) הפרוטוקול. בהתאם להתנהגות האישית של בעל החיים והמטרה, יש לשמור זמן נוסף לתהליך ההכללה. עם זאת, משך הזמן עשוי להשתנות בעת עבודה עם ארנבים זכרים או גזע ארנב אחר. במתקני בעלי החיים יש לקיים דיון האם קיים זמן מתאים ומה צריך לשנות כדי לאפשר זמן לאילוף בעלי חיים.

מלבד הזמן הנדרש לאילוף בעלי החיים, יש לקחת בחשבון כי אילוף צריך מאמנים מיומנים וללמד את הצוות כיצד לאלף בעלי חיים יכול גם לקחת זמן. אם ההכשרה הייתה חלק חובה מהחינוך של אנשי צוות חיות המעבדה, כלומר מטפלים בבעלי חיים, וטרינרים וחוקרים, יישום אילוף בעלי חיים במתקנים היה מתקל יותר והיה לוקח פחות זמן. על פי נספח III של דירקטיבה 2010/63/EU, "מפעלים יקימו תוכניות הרגלה ואילוף המתאימות לבעלי החיים, לנהלים ולמשך הפרויקט", כלומר, אילוף בעלי חיים נדרש על פי חוק. בגרמניה, יש להגיש תוכניות כאלה בעת הגשת בקשה לרישיון לניסויים בבעלי חיים. זה דורש שאנשים המתכננים ניסויים בבעלי חיים ועובדים עם חיות מעבדה יהיו מיומנים באילוף בעלי חיים. עם זאת, לפחות בגרמניה, אילוף בעלי חיים אינו חלק מלוח הזמנים של הכשרה של מטפלים בבעלי חיים בתחום המחקר והמרפאה 62,63,64. יתר על כן, היא אינה מוזכרת במפורש בהמלצות האיחוד האירופי למסגרת חינוך והכשרה⁶⁵. לכן, כל עוד לא הוטמעה הכשרה בתקנות אלה, המשך הפיתוח המקצועי המתמקד בהכשרת חיזוקים חיוביים דורש תשומת לב רבה יותר. אנשי חיות המעבדה צריכים ללמוד את עקרונות טכניקות הלמידה והאילוף, את הקריטריונים הדרושים, את העברת הנוהל בין מאמנים, שמירת רשומות וכיצד להגיב לבעלי חיים שאינם משתתפים באופן רצוי כדי להבטיח עקביות ויכולת חיזוי.

אינטראקציה בין אדם לחיה

זמן האינטראקציה האינטנסיבי בין אדם לחיה במהלך האימונים מספק סביבה אופטימלית לחיזוק הקשר בין הארנבים הבודדים לבין המאלף^26,66. יחסי אדם-חיה חיוביים מועילים לרווחתם של בעלי החיים, שכן הם יכולים להפחית את רמות הלחץ שלהם בגידול ובמסגרות ניסוי⁶⁷. בפרוטוקולי האימון הנוכחיים, המאמן שוקל את סוכנות הארנבים והם יכולים להחליט להשתתף (או לא להשתתף) באימון על בסיס התנדבותי. מתן סוכנות לבעלי החיים מועיל לרווחתם ¹⁶ ולכן יש להמשיך בניסויים כמו גם בדיור ובגידול. ישנן רמות סוכנות התנהגותיות שונות⁶⁸; ניתן לייחס את ההשתתפות ב-PRT לרמה של סוכנות מונעת פעולה, כלומר, "התנהגות פעילה להשגת תוצאות נוכחיות [למשל, רכישת מזון]"⁶⁸.

כאשר מנתחים את הגישה הוולונטרית של הארנבים כלפי המאלף ואדם לא מוכר, ניתן להבחין באינטראקציה אינטנסיבית בין אדם לחיה. התוצאות הראו כי כל הארנבים, למעט חיה אחת בניסוי^הראשון (#12), קיימו אינטראקציה הן עם המאלף והן עם האדם הלא מוכר. נראה שהם זיהו את המאמן מכיוון שהם הראו העדפה ברורה לאינטראקציה עם המאמן בניסוי^הראשון וחלקם קפצו עם כל ארבע הכפות על ברכי המאמן; התנהגות שלא הוצגה כלפי האדם הלא מוכר. למרות שהארנבים בילו יותר זמן באינטראקציה עם המאמן מאשר האדם הלא מוכר בניסוי^הראשון , זמן האינטראקציה כבר לא היה שונה^{במשפט השני} . סיבה לתצפית זו עשויה להיות שהארנבים ציפו לקבל תגמול מזון מהמאמן בניסוי^הראשון ובשל היעדר תגמולי מזון במבחן הגישה מרצון, הם לא בילו יותר זמן עם המאמן בניסוי^השני . עם זאת, נתונים אלה הדגישו כי הארנבים המאומנים התרגלו במהירות לנוכחותו של אדם לא מוכר ואף אחד מהם לא התבייש מדי לקיים אינטראקציה. לעומת זאת, הם היו מאוד חקרניים והתעניינו באדם הלא מוכר. עם זאת, מכיוון שקבוצת ביקורת לא מאומנת לא נחקרה, השפעת האימון על התנהגות הגישה הרצונית של הארנבים אינה ברורה.

השערה המסבירה את התנהגותו של ארנב #12 בניסוי^הראשון היא שאדם זה עדיין היה צריך להתרגל לנוכחותו של האדם הלא מוכר בניסוי^הראשון והיה מעוניין יותר באינטראקציה הן עם המאמן (70 שניות) והן עם האדם הלא מוכר (9 שניות) בניסוי^השני. לארנבים יש תכונות אישיות שונות אשר עשויות להשפיע על רמת הנוחות סביב אנשים לא מוכרים ובתורו על ההשהיה להתקרב או משך זמן האינטראקציה עם אדם^69,70.

מגבלות

אנו מודעים לכך שכל הארנבים במכלאה/חדר, לא רק זה שמשתתף באימון יכולים לשמוע את הקליק (כלומר, המחזק המותנה) במהלך האימון והשפעתו המחזקת עלולה להיחלש מכיוון שתגמול המזון (כלומר, המחזק הטבעי/הבלתי מותנה) אינו מוצג. אם ארנב מחוץ לזירת האימונים מראה התנהגות מאומנת ושומע את הקליק, אך לא מוצג מזון (ותרחיש זה מתרחש מספר פעמים), ההתנהגות המאומנת עלולה להיכחד. תופעה זו מכונה הכחדה^64,71. עם זאת, מכיוון שכל התנהגויות המטרה של הפרוטוקולים הנוכחיים תלויות במטרה המוצגת על ידי המאמן, לא סביר שתתרחש הכחדה במסגרת האימונים שלנו.

מכיוון שקירות זירת האימונים היו שקופים וזירת האימונים הייתה ממוקמת במכלאה, יכלו הארנבים לראות, לשמוע ולהריח זה את זה במהלך האימונים, דבר המהווה יתרון מובהק הקשור לרווחה. יתר על כן, ייתכן שהארנבים צפו בחברי הקבוצה שלהם במהלך האימונים ולמדו זה מזה. בחולדות, הוכח בעבר, שאנשים למדו לבצע התנהגות מטרה על ידי צפייה בחברם לכלוב מאומן על ידי PRT⁴⁵. עובדה זו עשויה להיחשב הן יתרון והן חיסרון. התקדמות הלמידה של בעלי החיים עשויה להיות מהירה יותר כאשר הם יכולים להתבונן זה בזה. עם זאת, הנתונים של בעלי החיים הבודדים עשויים להיות מושפעים מהביצועים של חברי הקבוצה ולא ניתן לייחס אותם אך ורק לאילוף של בעל החיים הבודד. לכן, אילוף בעלי חיים ללא כל מגע עם חברי הקבוצה שלהם או ארנבים בודדים יכול לקחת זמן רב יותר.

תצפיות התנהגותיות של הפרטים (במבחן הגישה הוולונטרית ולאחר יישום טכניקות הטיפול השונות) בוצעו בסביבה החברתית המוכרת שלהם ובקבוצה כדי למנוע מתח והסחת דעת הנגרמים על ידי סביבה חדשה והפרדה מקבוצתם, אשר בתורו היו משפיעים על התצפיות ההתנהגותיות. החיסרון הוא, עם זאת, שהארנבים עשויים להשפיע זה על התנהגותו של זה במהלך מפגשי התצפית.

ההשפעות של טכניקות הטיפול נחקרו רק בשבעה בעלי חיים שבהם היה מעורב המאלף כאדם המטפל בבעלי החיים. המחברים מתכננים מחקר המשך הכולל חישוב גודל מדגם א-פריורי כדי לשחזר את הממצאים עם מטפלים אחרים ולבחון עוד יותר את ההבדלים בין טכניקות הטיפול.

כל בני האדם שהיו מעורבים בהכשרה, בטיפול ובמבחן הגישה הוולונטרית היו נשים. לא נחקר אם ביצועי האילוף של הארנבים או התנהגותם ישתנו אם מדובר בזכרים.

פרוטוקולי האילוף הנוכחיים אמורים לתת לקורא מושג על מה ניתן לאלף ארנבים, אך אינם כוללים את כל התנהגויות המטרה הפוטנציאליות שיועילו לאילוף ארנב מעבדה. לדוגמה, סימון ארנב כפי שהוצע בסעיף הפרוטוקול על דרישות כלליות יהיה שווה גם הכשרה באמצעות PRT.

כפי שצוין לעיל, הבחירה בתגמול הנכון אינה טריוויאלית. בשל מגבלות היגיינה, השימוש בעשבי תיבול טריים כתגמולי מזון אסור בחלק ממתקני חיות המעבדה, ולכן יש להשתמש בתגמולי מזון פחות מתאימים כגון גרעיני חמניות או פינוקי ליקוט מבוססי דגנים. ביחס להחלטה על תגמול המזון, כמה כללים ותקנות של נוהלי המעבדה הנוכחיים מזיקים לרווחת בעלי החיים ולהכשרה יעילה, ולכן ייתכן שיהיה צורך לשקול אותם מחדש בכל מקרה לגופו. ייתכן שניתן יהיה גם להשתמש בחלופות לתגמולי מזון, כגון נגיעות עדינות או אינטראקציות עם המאמן או פריטי העשרה. עם זאת, המאלף חייב לוודא עבור כל חיה בנפרד כי האלטרנטיבה היא לתגמל את החיה כי פרס הוא רק פרס אם הארנב באמת מעדיף את זה. במיוחד נגיעות לא יכול להתקבל כמתגמל על ידי כל הארנבים.

מסקנות

לסיכום, המחקר הנוכחי היווה צעד ראשון להשלמת פער הידע על פרוטוקולי אילוף מתאימים לארנבי מעבדה. נקבות ארנבות לבנות מניו זילנד יכולות להיות מאומנות להליכי גידול שגרתיים באמצעות PRT ולהכליל את התנהגויות המטרה שנלמדו לאנשים אחרים, אם כי יש לשמור זמן נוסף לתהליך ההכללה. התנהגויות מטרה ללא מגע פיזי נראו קלות יותר ללמידה מאשר התנהגויות שדרשו מגע פיזי עם בני אדם. לאחר שהחיות סיימו בהצלחה את האימון של התנהגות מטרה, היה מספיק לשלוף אותן פעם בשבוע במסגרת הבדיקה הכללית וניקוי העט. פרוטוקולי אילוף הנחשבים מיושמים בדרך כלל על כל הארנבים נוחים, אך על המאלף להיות מודע לכך שבמקרים מסוימים, יש להתאים אותו לצרכי החיה. התוצאות על טכניקות הטיפול הראו כי להרים את הארנבים עם ארגז ההובלה במקום לרסן אותם על ידי קשקוש הצוואר שלהם ולהרים אותם על הזרוע היה פחות מרתיע. בסך הכל, הפרוטוקולים הנוכחיים מספקים הוראות אפשריות לתהליך ההרגלה והאילוף של ארנבים ויכולים לשמש כעידון במתקני חיות מעבדה.

אסור לבעלי חיים לסבול עקב חיסכון בעבודה, זמן או כסף (לפחות על פי חוק צער בעלי החיים הגרמני⁷²). חשוב לטפל ולטפל בכל בעלי החיים בצורה העדינה ביותר האפשרית. מאחר שבעלי חיים לא מאומנים סובלים במידה רבה יותר מחרדה ומצוקה הנגרמים על ידי הליכי גידול ניסיוניים ושגרתיים מאשר עמיתיהם המאומנים¹³, אילוף הוא אמצעי חידוד פשוט כדי למנוע מהם לחוות מצבים רגשיים שליליים.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bed-r’Nest	The Andersons, Inc., Maumee, USA		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Finger Clicker	ASCO		https://ascoshop.de/products/fingerclicker
G*Power		version 3.1.9.7
Heu-Proppen	Ssniff Spezialdiäten GmbH, Soest, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
IBM Corp. Released 2020. IBM SPSS Statistics for Windows,  Armonk, NY: IBM Corp	IBM Corp	Version 27.0.	in the manuscript referred to as "software for advanced statistical analysis"
Kaninchen Haltung + 25 mg/kg Salinomycin-Natrium-Sondermischung	Ssniff Spezialdiäten GmbH, Soest, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Lignocel block	Lignocel J. Rettenmaier &Söhne GmbH + Co KG, Rosenberg, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Lillebro geschälte Sonnenblumenkerne”, Martina GmbH, München, Germany) and Rainbow Foraging Bits (Bio-Serv, Flemington, USA)	Martina GmbH, München, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Microsoft Excel for Microsoft 365 MSO	Microsoft Corporation	Version 2305	in the manuscript referred to as "spread sheet"
New Zealand White rabbits	Charles River Laboratories France
Plattformwaage DE 35K5DL	KERN & SOHN GmbH, Balingen-Frommern, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Premium scientific bedding (fine & flake)	SAFE, Augy, France		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Rainbow Foraging Bits	Bio-Serv, Flemington, USA		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Snackball für Kaninchen – 7 cm	TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Target stick with integrated clicker	TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Trixi Transportbox Capri Open Top	TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.
Weiden-Heuball	JR FARM GmbH, Holzheim-Pessenburgheim, Germany		The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.