מודל מפרצת אבי העורקים הבטני של עכבר על ידי Periadventitial סידן כלורי והסננת אלסטאז

Summary

כתב יד זה מציג פרוטוקול לביסוס מודל מפרצת אבי העורקים הבטני של עכבר באמצעות סידן כלורי ואלסטאז, המשלב את היתרונות של שיטות מידול קודמות. מודל זה יכול לשמש לחקר המנגנונים הפתופיזיולוגיים העומדים בבסיס מפרצת אבי העורקים הבטני.

Abstract

מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) היא מחלה מסכנת חיים הקשורה לשיעורי תמותה גבוהים. הוא מאופיין על ידי התרחבות קבועה של אבי העורקים הבטן עם לפחות 50% עלייה בקוטר העורקים. מודלים שונים של בעלי חיים של AAA הוצגו כדי לחקות את השינויים הפתופיזיולוגיים ולחקור את המנגנונים הבסיסיים של AAA. בין המודלים הללו, מודלים של סידן כלורי (CaCl₂) ואלסטאז AAA נפוצים בעכברים. עם זאת, שיטות אלה יש מגבלות מסוימות. זילוח אלסטאז לבלב תוך-לומינלי מסורתי (PPE) קשור לקושי טכני גבוה ושיעור קרע גבוה, בעוד מתן פריאדוונטיאלי של PPE מניב תוצאות לא עקביות. בנוסף, מודל ה-AAA המושרה על ידי CaCl₂ חסר תכונות AAA אנושיות, כגון אטרוטרומבוזיס וקרע מפרצת. לכן, היישום המשולב של CaCl₂ ו- PPE הוצע כגישה לשיפור שיעורי ההצלחה ולגרום לעליות קוטר גדולות יותר במודלים של בעלי חיים AAA. כתב יד זה מציג פרוטוקול מקיף לביסוס מודל AAA עכברי באמצעות הסננה פריאורטית של PPE ו- CaCl₂ במקטע האינפרא כלייתי של אבי העורקים הבטני. על ידי ביצוע פרוטוקול זה, אנו יכולים להשיג שיעור היווצרות AAA של כ -90% עם פשטות טכנית ויכולת שחזור. ניסויים נוספים באולטרסאונד והיסטולוגיה מאשרים כי מודל זה משכפל ביעילות את השינויים המורפולוגיים והפתולוגיים שנצפו ב- AAA האנושי.

Introduction

מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) מוגדרת כהגדלת קוטר של יותר מ -50% או קוטר אבי העורקים המרבי העולה על 3 ס"מ באבי העורקים הבטני. מצב זה מהווה סכנת חיים משמעותית, עם שיעור תמותה של כ-90% מקרע מפרצת ^1,2,3. נכון לעכשיו, תיקון כירורגי פתוח ותיקון אבי העורקים האנדוסקולרי (EVAR) הם ההתערבויות היחידות הזמינות עבור חולי AAA ^4,5,6. עם זאת, אין מספיק ראיות התומכות ביעילות הטיפולים הרפואיים בעיכוב היווצרות מפרצת או האטת קצב הצמיחה של אבי העורקים הבטני בחולים שאין ל....

Protocol

פרוטוקול הניסויים בבעלי חיים תואם את מדריך המכון הלאומי לבריאות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (NIH Pub No. 86/23, 1985) ואושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (אישור מספר 202311300012). במחקר זה נעשה שימוש בעכברים זכרים C57/B6J בני שמונה עד עשרה שבועות. פרטי הריאגנטים והציוד בהם נעשה שימוש מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנה טרום ניתוחית

1. להשיג את בעלי החיים ולהאכיל אותם דיאטה צ'או רגיל עם מים נקיים בתנאים סטנדרטיים (טמפרטורה 24 ° C, לחות 40%-50%, 12 שעות מחזור אור-כהה).
2. חתכו כרית כותנה לרצועות בגודל 40 מ"מ....

תוצאות

במחקר זה, סך של 24 עכברים נכללו וחולקו באופן אקראי: 12 בקבוצת Sham ו -12 בקבוצת PPE + CaCl₂ , בהתאמה. כל הנתונים מוצגים כאמצעי ± סטיות תקן, אלא אם צוין אחרת. זמן הפעולה הממוצע היה 55.67 דקות ±-4.08 דקות. לא היו מקרי מוות תוך ניתוחיים או קרעים במפרצת, ושיעור ההישרדות תוך 21 יום לאחר הניתו.......

Discussion

מחקר המנגנונים המולקולריים של AAA דורש מודל יציב של בעלי חיים. כתוצאה מכך, מודלים רבים של בעלי חיים AAA הוקמו מאז הפיתוח הראשוני שלה על ידי Economou et al. בשנות השישים²⁹. בין דגמים אלה, CaCl₂ משמש לעתים קרובות מכרסמים בשל עלות-תועלת, פשטות טכנית, ויכולת שחזור אמינה. ?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anesthesia Machine	RWD	R550
Butorphanol	Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd	220608BP	1ml: 1mg
C57BL/6JGpt Male Mice	GemPharmatech	N000013
Calcium Chloride	Sigma Aldrich	C4901	100 g
Carprofen	MCE	HY-B1227	100 mg
Chow Diet	Dossy Experimental Animals Co.Ltd
Digital Caliper	Greener	IP54
Ethanol	Jinhe Pharmaceutical Co.Ltd	539682	75%/500 mL
EVG Staining Kit	Solarbio	G1597
GraphPad Prism	Graphpad		Ver 9.0.0
H&E Staining Kit	Servicebio	G1076
Insulin Syringe	BD	2143420
Isoflurane	RWD	R510-22-4	100 mL
Masson Staining Kit	Servicebio	G1006
Normal Saline	Servicebio	G4702	500 mL
Paraformaldehyde	Biosharp	BL539A	4%/500 mL
PBS, 1x	Servicebio	G4202	500 mL
Porcine Pancreatic Elastase	Sigma Aldrich	E1250	100 mg
Povidine Iodine	Yongan Pharmaceutical Co.Ltd		5%/100 mg
Prolene Polypropylene Suture	Ethicon LLC	8709H
Rodent Ultrasound System	Fujifilm	Vevo 3100LT
Stereo Microscope	Olympus	SZ61
Ultrasonic Couplant	Keppler	KL-250	250 g