שינוי שיטות הטיפול לבזבוז תסמונת מרמוסט עם חומצה טרנקסמית ואמצעים תומכים

Summary

כאן, אנו מתארים את שיטות הטיפול שהשתנו לבזבוז תסמונת מרמוסט (WMS, הידועה גם בשם מחלת מעי דלקתית (IBD) כמו מחלה) עם חומצה טרנקסמית. כמו כן, אנו מציגים כיצד לתת את הסוכנים הטיפוליים דרך הפה, תת עורית ותוך ורידית.

Abstract

תסמונת מרמוסט בזבוז (WMS), מחלה קשה במושבות מרמוסט נפוצות בשבי (Callithrix jacchus), קשורה לשיעור תמותה גבוה. הגורם הספציפי לזיכרון WMS עדיין אינו ברור ויש מעט טיפולים יעילים. בעבר, דיווחנו על טיפול בחומצה טרנקסמית עם אמצעים תומכים כטיפול שימושי עבור WMS. במחקר הנוכחי, אנו מתארים את השיטה שהשתנתה: שילוב של 0.1 מ"ל של 5% חומצה טרנקסמית תת עורית חמש פעמים בשבוע, 2.0 מ"ל של ניסוח חומצות אמינו תוך ורידי שלוש פעמים בשבוע, 5.0 מ"ל של לקטט רינגר עם 0.1 מ"ל של נוסחת ויטמין תת עורית שלוש פעמים בשבוע, ומתן אוראלי של 0.1 מ"ל של נוסחת ברזל חמש פעמים בשבוע. אנו גם מתארים כיצד לנהל את הפתרון תוך ורידי דרך הווריד הספנוס עם קצה של ריסון החיה, כמו גם את השיטות המפורטות למתן אוראלי תת עורי. לשיטות ששונו יש יעילות דומה לשיטת הטיפול המקורית ב- WMS.

Introduction

תסמונת מרמוסט בזבוז (WMS) היא מחלה קשה הייחודית למושבות מרמוסט נפוצות בשבי. הסימפטומים העיקריים הם ירידה במשקל, ירידה במסת שריר, אנמיה, היפואלבומינמיה ודלקת מעיים כרונית 1,2,3,4. כמה מחקרים דיווחו כי 60.5% של מרמוסטים בשבי המתת חסד היו עדות דלקת מעיים כרונית⁵, ו 31-44% ממקרי המוות היו מעורבים במחלה זו⁶. שכיחותה הגבוהה של מחלה זו חייבה טיפול יעיל בה.

בשנת 2016, דיווחנו כי חומצה טרנקסמית עם אמצעים תומכים היה טיפול יעיל עבור WMS⁷. בנוסף, אובדן חלבון המעי של מרמוסטים מושפעי WMS נחלש באופן משמעותי עם טיפול זה⁸. למרות שפרוטוקול הטיפול המקורי היה בהחלט יעיל, הוא כלל כמות גבוהה למדי של הזרקה תוך ורידית, מינון גבוה של פורמולציית ויטמינים, וריסון יומי. מכיוון שמרמוסטים רגישים ללכידה ידנית וריסון, פעולות אלה חייבות להיות פחות תכופות. לכן, כיוונו להפחית את העומס הכבד על בעלי חיים עם שינוי מסוים.

במאמר זה, נספק את השיטות המתוקנות: הזרקה תת עורית של חומצה טרנקסמית לא מדוללת 5 פעמים בשבוע (במקום הזרקה תוך צפקית של תמיסת חומצה טרנקסמית מדוללת פי 5 7 פעמים בשבוע), 2.0 מ"ל של פורמולציה של חומצות אמינו להזרקה תוך ורידית (במקום 3.0 מ"ל), 0.1 מ"ל של פורמולציית ויטמין להזרקה תת עורית (במקום 0.5 מ"ל), ומתן אוראלי של ניסוח ברזל 5 פעמים בשבוע (במקום 7 פעמים בשבוע).

Protocol

המחקר הנוכחי בוצע באישור (W2023-2-041) של הוועדה לניסויים בבעלי חיים של RIKEN (סאיטאמה, יפן) ונערך בהתאם להנחיות המוסדיות לניסויים בבעלי חיים. במחקר הנוכחי נעשה שימוש בשש נקבות מרמוסטים (בגילאי 2-6 שנים).

1. קריטריונים לתחילת הטיפול

1. התחל טיפול כאשר אחד מהקריטריונים הבאים הוא ציין: i) משקל הגוף < 300 גרם או ירידה של >20 גרם במשקל הגוף לחודש; ii) hypoalbuminemia (אלבומין בסרום < 3.8 גרם / ד"ל); 3) אנמיה (המטוקריט < 35%); iv) שלשול כרוני ללא Clostridium difficile, enteropathogenic Escherichia coli, או פרוטוזואה מעיים; ו-v) ירידה לכאורה במסת השריר.
   הערה: בגלל התייבשות וריכוז המו לאחר מכן מלווה WMS, הערכים של אלבומין בסרום וההמטוקריט עשויים להיות גבוהים באופן מלאכותי בבעלי חיים מושפעים.

2. ניהול בעל פה

1. מערבבים 0.1 מ"ל של נוסחת הברזל (ראו טבלת חומרים) עם חתיכת עוגת ספוג.
2. נותנים את המחית למרמוסט המטופל.
   הערה: יש לוודא שהמרמוסט שטופל בלע לחלוטין את המחית.

3. ניהול תת עורי

1. תפסו את המרמוסט המושפע מ-WMS בכלוב הביתי על ידי החזקת הזנב בעדינות.
2. החזיקו את פלג הגוף העליון של החיה מאחור ביד השנייה.
3. הביאו את בעל החיים לחדר הטיפולים.
4. תנו לחיה להיצמד לחזה או לזרוע של העוזר.
5. נקו את אזור הגב של בעל החיים עם ספוגית אלכוהול.
6. הזריקו 0.1 מ"ל חומצה טרנקסמית (5% תמיסה, ראו טבלת חומרים) לגב באופן תת עורי באמצעות מחט 26 גרם 5 פעמים בשבוע.
7. הזריקו 5.0 מ"ל לקטט רינגר (ראו טבלת חומרים) 0.1 מ"ל של פורמולציית ויטמינים (ראו טבלת חומרים) תת עורית באמצעות מחט 26 גרם 3 פעמים בשבוע.
   הערה: כל זריקה צריכה להיעשות בכל נקודה שונה תוך דקה.

4. מתן תוך ורידי של ניסוח חומצות אמינו

1. תפסו את המרמוסט המושפע מ-WMS בכלוב הביתי על ידי החזקת הזנב בעדינות.
2. החזיקו את פלג הגוף העליון של החיה מאחור ביד השנייה.
3. הביאו את בעל החיים לחדר הטיפולים.
4. בקש מהעוזר לרסן את פלג גופו העליון של בעל החיים על ידי אחיזת בסיס שתי הידיים ולרסן את פלג הגוף התחתון על ידי החזקת בסיס שתי הרגליים ביד השנייה. בקשו מהעוזר להניח את האגודל המרסן את פלג גופו התחתון של בעל החיים על הצד הקדמי של ברכו של בעל החיים כדי למנוע ממנו להתכופף.
5. נקו את העגל של החיה עם ספוגית אלכוהול.
6. יש להזריק 2.0 מ"ל של פורמולציית חומצות האמינו (ראו טבלת חומרים) דרך הווריד הספנוס באמצעות מחט פרפר 27 גרם שלוש פעמים בשבוע.
   הערה: ההזרקה חייבת להיעשות לאט ככל האפשר עד 2 דקות.
7. לאחר ההזרקה, בקשו מהעוזר ללחוץ על האזור עם כותנה סופגת עד שהדימום ייפסק.

5. מדידת משקל גוף

1. לאחר הטיפול (הזרקה תוך ורידית ו/או תת עורית), יש לשקול את בעל החיים עם ארגז נשיאה אחת לשבוע כדי לעקוב אחר משקל הגוף.
   הערה: לשקול את המרמוסט בערך באותו זמן כי משקל הגוף מושפע מנוכחות של מזון.

6. ניתוח ספירת דם מלאה (CBC) ובדיקות כימיה בסרום

1. תפסו את המרמוסט המושפע מ-WMS בכלוב הביתי על ידי החזקת הזנב בעדינות.
2. החזיקו את פלג הגוף העליון של החיה מאחור ביד השנייה.
3. הביאו את בעל החיים לחדר הטיפולים.
4. בקש מהעוזר לרסן את פלג גופו העליון של בעל החיים על ידי החזקת בסיס שתי הזרועות ולרסן את פלג הגוף התחתון על ידי החזקת בסיס כל רגל ביד השנייה.
5. בקשו מהמתרגל להחזיק את רגלו של בעל החיים שאינה מרוסנת.
6. נקו את אזור המפשעה של בעל החיים בעזרת ספוגית אלכוהול.
7. לאסוף 0.4 מ"ל של דם מווריד הירך באמצעות מחט 26 G חודשי.
8. השתמש 0.05 מ"ל של דגימת הדם לניתוח CBC, כולל המטוקריט.
9. תן לשאר דגימת הדם לעמוד שעה אחת בטמפרטורת החדר וצנטריפוגה ב 1,800 × גרם במשך 20 דקות.
10. השתמש בסרום לבדיקות כימיה, כולל אלבומין.
    הערה: ניתן להקטין את נפח דגימת הדם על ידי מזעור מספר הפרמטרים לבדיקת הכימיה בסרום. התאימו את נפח דגימת הדם בהתאם למצבו של המרמוסט הבודד.

תוצאות

שיטות הטיפול ששונו הביאו לעלייה בהמטוקריט (איור 1A), אלבומין בסרום (איור 1B) ומשקל גוף (איור 1C) במרמוסטים שנפגעו מזיכרון העבודה. הבדלים משמעותיים בהמטוקריט (P < 0.05, Wilcoxon matched-pairs signed rank test), אלבומין בסרום (P < 0.05, Wilcoxon matched-pairs signed rank test) ומשקל גוף (P < 0.05, Wilcoxon matched-pairs signed rank test) נצפו בין לפני ואחרי הטיפול.

כמו כן נצפו השפעות הטיפול על המראה. איור 2 מראה את המראה של מרמוסט המושפע מ-WMS. לפני הטיפול נצפו טבפקציה, גב מקושת, פרווה גסה (איור 2A) והתקרחות (איור 2B), בעוד שלא נצפתה הופעה חריגה לאחר הטיפול (איור 2C,D).

איור 1: שינויים (לפני הטיפול לעומת אחריו) בהמטוקריט, אלבומין בסרום ומשקל הגוף במרמוסט שקיבל את הטיפול המתוקן. (A) ערכי המטוקריט, (B) ערכי אלבומין בסרום, ו-(C) משקל גוף. הקווים המקווקווים מציינים את ערכי הקריטריונים. קיצורים: HTC = המטוקריט; Alb = אלבומין בסרום; BW = משקל גוף. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 2: מראה מייצג של מרמוסט המושפע מ-WMS. (A) מראה של בעל חיים לפני הטיפול: נצפתה טבילה, גב מקושת ופרווה גסה. (B) זנב של בעל חיים לפני הטיפול: נצפית התקרחות. (ג) הופעתו של בעל חיים לאחר הטיפול. (D) זנב של בעל חיים לאחר טיפול. קיצור: WMS = בזבוז תסמונת מרמוסט. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Discussion

בשנת 2016, דיווחנו כי חומצה טרנקסמית עם אמצעים תומכים הייתה טיפול יעיל עבור WMS, וזה היה הדו"ח הראשון שהדגים טיפול ב- WMS ללא שימוש בגלוקוקורטיקואידים. בבני אדם, גלוקוקורטיקואידים נחשבים לטיפול היעיל ביותר ב- IBD. עם זאת, predonizolone, אחד glucocorticoids הנפוצים ביותר, אינו מתאים לטיפול WMS בגלל ההשפעות השליליות שלה. למרות שבודזוניד, גלוקוקורטיקואיד, דווח עבור טיפול WMS⁹, הטיפול היה יחסית לא יעיל בבעלי חיים עם צורות חריפות של WMS. חומצה טרנקסמית היא מעכב פלסמין בעל השפעות אנטי דלקתיות, ולא נצפו תופעות לוואי בולטות בשיטות המקוריות שלנו. עם זאת, למרות שפרוטוקול הטיפול המקורי היה בהחלט יעיל, הוא הטיל עומס כבד על בעלי חיים ומטפלים.

במחקר הנוכחי, שיטות הטיפול המותאמות עבור WMS נערכו כדי להפחית הן את העומס הפיזיולוגי של בעל החיים והן את עומס העבודה של המטפלים. בשיטות ששונו, מסלול הניהול של חומצה טרנקסמית השתנה (מ intraperitoneal ל תת עורית), אשר תרם להפחתת הסיכון לפגיעה באיברי הבטן. תמיסת החומצה הטרנקסמית לא דוללה בפרוטוקול זה כדי להפחית את הסיכון לזיהום ואת זמן ההכנה. בשיטות המקוריות, 3.0 מ"ל של ניסוח חומצת אמינו הוזרקו לווריד. עם זאת, הנפח היה גדול במקצת מכיוון שמומלץ לתת 5.0 מ"ל/ק"ג כבולוס¹⁰. לכן, נפח הופחת בשיטות שונה.

נוסחת הוויטמינים המשמשת בפרוטוקול זה מכילה ויטמינים B ו- C. בשיטה המקורית, 0.5 מ"ל של פורמולציית הוויטמין מכילה 2.5 מ"ג של תיאמין כלוריד הידרוכלוריד, שהיה פי 2.5 מהדרישה של פרימטים לא אנושיים ששוכנו במעבדה לאחר הגמילה¹¹. בשיטה הנוכחית, 0.1 מ"ל של ניסוח ויטמין ניתנה, אשר מכיל 1.0 מ"ג של הידרוכלוריד כלוריד תיאמין. תדירות מתן פורמולציית הברזל ותמיסת החומצה הטרנקסמית הופחתה בשיטות המתוקנות, מה שתרם להפחתת הנטל על בעלי החיים כמו גם על המטפלים.

כפי שנכתב בסעיף התוצאות המייצגות, היו השפעות טיפוליות משמעותיות בשיטות ששונו. משך הטיפול הממוצע היה 37.8 ±-25.34 ימים, שהיה קצר מזה של השיטות המקוריות (56 ימים). מכיוון שמרמוסטים רגישים ללחץ נפשי, לטיפולים ממושכים יש השפעה הפוכה על בעל החיים כמו תיאבון מופחת. לכן, אנו ממליצים למטפלים להחליט באופן מקיף על עיתוי הפסקת הטיפול בהתבסס לא רק על הערך של כל פרמטר אלא גם על התנהגות החיה.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.0 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-01T	For subcutaneously injection of Tranexamic acid
10 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-10SZ	For Intravenous Administration of Amino acid formulation
26 G Needle	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	NN-2613S	For subcutaneously injection
27 G Butterfly Needle Type D	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SV-27DL	For Intravenous Administration of Amino acid formulation
5 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-05SZ	For subcutaneously injection of Ringer's lactate and Vitamin formulation
Aminoleban Injection	Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan	1942	For subcutaneously injection of Ringer's lactate and Vitamin formulation
C-PARA	Takata Pharma Co., Ltd., Saitama, Japan	120-31960-0	Vitamin formulation
FCV Liquid	Minerva Corporation, Saitama, Japan		Iron formulation
Lactec Injection	Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan	0714	Ringer’s lactate
Vasolamin Injection	Meiji Seika Pharma Co., Ltd., Tokyo, Japan	DBASOS	Tranexamic acid