מיקום פריאורביטלי של בדיקת דופלר לייזר לניטור זרימת דם מוחית לפני חסימת עורק מוחי אמצעי במודלים של מכרסמים

Summary

כאן מוצג הליך כירורגי זעיר פולשני, הכולל הנחת בדיקת דופלר לייזר על הגולגולת מעל האזור הדיסטלי של עורק המוח האמצעי (MCA), מיקום פריאורביטלי המתאים לחולדות ועכברים, כדי להעריך את זרימת הדם במהלך חסימת MCA חולפת.

Abstract

חסימת עורק מוחי אמצעי (MCAO) היא שיטת תקן הזהב למידול פרה-קליני של שבץ איסכמי במכרסמים. עם זאת, חסימה מוצלחת אינה מובטחת אפילו על ידי הידיים הכירורגיות המיומנות ביותר. טעויות מתרחשות בעיקר כאשר חוט הלהט אינו ממוקם בעומק הנכון וכוללות מקרים של אי אוטם או ניקוב כלי דם, אשר יכול לגרום למוות. מד זרימה דופלר לייזר (LDF) היא טכניקה אמינה המספקת משוב בזמן אמת על זרימת דם מוחית אזורית (CBF) במהלך הליך MCAO. כאן אנו מדגימים טכניקה מהירה למיקום פריאורביטלי של גשושית דופלר לייזר למדידת CBF הן בעכברים והן בחולדות. הרציונל שלנו היה לפשט את יישום LDF, לעודד שימוש נרחב לשיפור אמינות הניתוח. הטכניקה מבטלת את הצורך בדילול גולגולת ובציוד מיוחד, עם מיקום באזור הפריאורביטלי ולא במיקום גבי, מה שמקדם יעילות וקלות אימוץ. הפרוטוקול המתואר כאן כולל תכשירים טרום ניתוחיים, מיקום בדיקת דופלר פריאורביטלית וטיפול לאחר ניתוח. התוצאות המייצגות כוללות תיאורים חזותיים של אלמנטים פרוצדורליים יחד עם מעקב LDF מייצג הממחיש ניתוחי MCAO מוצלחים, עם מקרים של מיקום חוטים לא מוצלח המוביל לסיבוכים. הפרוטוקול מדגים LDF באישור מיקום נכון של חוטי הלהט ומציע הליך פשוט בהשוואה לשיטות חלופיות.

Introduction

שיטת חסימת עורק המוח האמצעי (MCAO) נמצאת בשימוש נרחב במכרסמים מאז הוצגה לקהילה המדעית ליישום בחולדות בשנת 1986¹ עם הסתגלות לונגה שתוארה בשנת 1990², והתאמות לעכברים זמן קצר לאחר^{מכן 3}. אף על פי שלא תואר בפרסום של לונגה, השימוש באות זרימה דופלר לייזר (LDF) כדי לאשר את מיקום חוט הלהט תואר עד מהרה בספרות⁴. העסקת LDF במהלך הליך MCAO מוצגת באופן בולט בספרות, אך מוגדרת כשלב אופציונלי בהליכים האופרטיביים הסטנדרטיים (SOPs) הנוכחיים של רשתות הערכה פרה-קליניות לשבץ מוחי (SPAN)⁵.

השימוש ב- LDF מאשר מיק....

Protocol

עכברים בוגרים וחולדות שימשו להמחשת פרוטוקול זה (25 גרם, C57BL/6J, מעבדות ג'קסון; 250 גרם, Sprague Dawley, Envigo). הטיפול בבעלי חיים וההליכים הניסיוניים בוצעו באישור ובהתאם לוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת אריזונה, חוקים לאומיים, ועל פי עקרונות הטיפול בחיות מעבדה¹¹. חולדות ועכברים שוכנו עם לוח זמנים של 12 שעות אור / חושך (7 בבוקר - 7 בערב) עם מזון ומים זמינים עד ליברטום.

1. הכנה טרום ניתוחית

הערה: בדרך כלל, ניתוח MCAO במכרסם מבוצע כניתוח הישרדות, המחייב שימוש בטכניקה כירורגית אספטית או בטיפים בלבד, כמתואר בפרוטו....

תוצאות

המיקום של גשושית דופלר לייזר באזור MCA מתואר באופן חזותי באיור 1, המציע תמונה של כלי הדם ומשמש כמדריך חזותי מנקודת מבט של קשת וגב. איור 2 מסכם את השלבים הקריטיים למיקום ותוצאות של גשושית דופלר לייזר בעכבר. איור 2A מציג תמונה של.......

Discussion

MCAO הוא הליך תקן הזהב למידול חסימת עורק מוחי ורפרפוזיה במכרסמים והיה אבן הפינה של מחקר שבץ פרה-קליני, המאפשר השראת איסכמיה מוקדית במכרסמים כדי לחקות פתופיזיולוגיה של שבץ אנושי. זהו הליך כירורגי קפדני עם שונות משמעותית בין המנתחים ואפילו תוך מנתח. אמנם אין ראיות לכך שיישו?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
curved spring scissors	Castroviejo	1501710
forceps #5	Fine science tools	11250-20
forceps #5/45	Fine science tools	1151-35
Forcepts Cautery tool	Conmed	M18019-01
Laboratory tape	Fisherbrand Labeling Tape	15-950
Laser Doppler Monitor	Moore Instruments	MOORVMS-LDF
LDF software	Perisoft for Windows or moorSOFT	NA
Mouse clippers	Philips Norelco	MG7910
Periflux System 4000, probe 407	Perimed	equipment no longer available
plastic wrap	Glad	press n seal
Rat clippers	oster	A5 or similar
Small rodent anesthesia	JD Medical	custom order
small scissors	excelta	362 Sissors or similar
Temperature monitor system with probe	Physitemp	TCAT-2AC Controller