A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פרוטוקול זה מתאר את היישום של הטכניקה הכירורגית המשמשת להעברת עוברי חזירים משובטים באמצעות laparotomy בזהבים.

Abstract

פרוטוקול זה נועד להדגים את הטכניקה הכירורגית להעברת עוברי חזירים משובטים לאובידוקט, שיטה הנמצאת בשימוש נרחב בייצור חזירים מהונדסים גנטית למחקר ביו-רפואי. תשעה זהובים עברו סנכרון הורמונלי ולפרוטומיה להחזרת עוברים משובטים המיוצרים על ידי העברה גרעינית של תאים סומטיים (SCNT) בשלבים של עד 4 תאים ביום השני לאובידוקט. אבחון ההריון בוצע באמצעות בדיקת אולטרסאונד 30 יום לאחר ניתוח ההעברה. שישה מתוך תשעת הזימים שנותחו הראו סימני הריון בבדיקת אולטרסאונד. עם זאת, מכיוון שלא הייתה התקדמות בהתפתחות העובר כפי שהוערכה על ידי האכוגרפיה, הזימים עברו נקרופסיה בגיל 60 יום לאיסוף החומר הביולוגי והערכת מערכת הרבייה. הידבקויות נצפו בקרני הרחם, בשחלות ובביציות. מלומן הרחם של שניים מהזהובים המורדמים, התקבלו מבנה עוברי אחד וארבעה עם גילאי הריון הנעים בין 12 ל -20 יום. למרות היעדרם של חזירונים חיים, המיוחס ככל הנראה ליעילות נמוכה של החזרת עוברי חזירים משובטים, המושפעת מגורמים שונים, כולל מספר ואיכות העוברים המוחזרים, הטכניקה הכירורגית שהוצגה הוכחה כמהירה ובטוחה.

Introduction

חזירים הם מודל ניסיוני מצוין למחקר ביו-רפואי בשל הדמיון האנטומי, הפיזיולוגי והגנטי שלהם לבני אדם1. בעלי חיים אלה שימשו לעתים קרובות במחקר הקשור להשתלת קסנו, מתוך כוונה לייצר איברים, תאים או רקמות המקדמים סיכון נמוך לדחייה כאשר הם מושתלים בבני אדם. מחקר ההשתלות נועד להגדיל את אספקת האיברים להשתלה אנושית, ובכך לצמצם את רשימת ההמתנה של חולים2.

ייצור חזירים להשתלת קסנו כרוך במספר שלבים, כולל ייצור שיבוטים מתאי חזירים ערוכים גנטית. לאחר ייצור במבחנה של עוברים משובטים מהונדסים גנטית, העוברים מועברים למערכת הרבייה של זרע עם מחזור ייחום ....

Protocol

מחקר זה אושר על ידי ועדת האתיקה לשימוש בבעלי חיים במחקר של המכללה לרפואה וטרינרית ומדעי בעלי חיים של אוניברסיטת סאו פאולו, פרוטוקול מספר 6088030523. תשעה זהובים בני שבעה חודשים מגרעין החזירים Água Branca, הממוקם בעיר איטו, מדינת סאו פאולו, ברזיל, שימשו מיד לאחר גילוי הייחום השני9. פרטי הריאגנטים והציוד ששימש במחקר מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנת בעלי חיים

  1. מהר את בעלי החיים במשך 12 שעות והגביל את הגישה למים במשך 4 שעות לפני ההליך הכירורגי.
  2. באמצעות מחט 40 מ"מ x 12 מ"מ, לצייר 10 מ"ג / ק"ג של קטמין ו 0.2 מ"ג / ק"ג של midazolam באותו מז....

תוצאות

מאמר זה נועד להדגים את ניתוח הלפרטומיה להחזרת עוברים משובטים לאובידוקט של זהבים. כל בעלי החיים נשארו במישור הרדמה מתאים, ללא אירועים תוך ניתוחיים או סיבוכים במהלך ההתאוששות מההרדמה. לזהובים נדרשו, בממוצע, 2-3 שעות לעמוד לאחר סיום הניתוח.

כל ההליכים הכירורג?.......

Discussion

השיטה הכירורגית המתוארת בוצעה בעבר על ידי קבוצות מחקר אחרות העובדות עם ייצור חזירים משובטים או חזירים משובטים מהונדסים גנטית, עם דיווחים על לידות לאחר יישום טכניקה זו 15,16,17,18,19,20........

Disclosures

אף אחד מהכותבים לא חושף ניגוד עניינים כלשהו

Acknowledgements

ברצוננו להודות לבית החולים הווטרינרי לסוסים ולבית החולים הווטרינרי מעלי גירה של המכללה לרפואה וטרינרית, אוניברסיטת סאו פאולו (FMVZ / USP), סאו פאולו, ברזיל, FAPESP (מענק 2022/11459-3, קרן המחקר של סאו פאולו), EMS Pharma, CNPq (מענק 405254/2022-9), וחקלאות חזירים Água Branca, איטו, סאו פאולו, ברזיל.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
0.25 mL strawgeneric-Surgical material
1 mL syringeDescarpack341001Surgical material
10 mL syringeDescarpack324601Surgical material
20 mL syringeDescarpack324801Surgical material
3 mL syringeDescarpack324201Surgical material
5 mL syringeDescarpack324401Surgical material
60 mL syringeDescarpack323201Surgical material
9 mm endotracheal tubeRusch112482-000090Surgical material
Allis forcepsgeneric-Surgical instrument
Amox LAJA Saúde AnimalMAPA registration: 8.781/2004Pharmaceutical drug
Bakhaus forcepsgeneric-Surgical instrument
Catheter 20GDescarpack362401Catheter for intravenous access
CetaminAgener UniãoMAPA registration: SP-000292-5.000011 Anesthetic
Conductive clinical gelRMCANVISA registration: 80122200013Surgical material
Dipyrone D-500ZoetisMAPA registration: SP0000728-46Pharmaceutical drug
Disposable scalpel n. 22WiltexANVISA registration: 10150470565Surgical instrument
Disposable sterile sponge-brushRioquimica7.89778E+12Surgical asepsis
Easy-Scan:GoIMVESCG01Ultrasound
Endozime AW PlusRuhof34514Detergent for surgical instruments
Fentanil (Fentanest)CristáliaANVISA registration: 1029800810159Anesthetic
Gosset retractorgeneric-Surgical instrument
Halstead-mosquito hemostatic forcepsgeneric-Surgical instrument
Healing ointment - Unguento PearsonPearson SAMAPA registration: SP0000094-16Pharmaceutical drug
hydrogen peroxide solutionRioquimicaANVISA registration: 218690015Surgical material
IsofluoraneBiochimicoANVISA registration: 100630222Anesthetic
IV Drip set extensorgeneric-Fluid therapy
IV Macro drip setDescarpack410301Fluid therapy
Lactofur (ceftiofur)Ourofino SAMAPA registration: SP0000051-50Pharmaceutical drug
Laringoscope--Surgical instrument
Maxicam 2%Ourofino SAMAPA registration: SP0000051-69Pharmaceutical drug
Micropore adhesive 5 cm x 10 cm generic1530Surgical material
MidazolamHipolaborANVISA registration: 1134301430035Anesthetic
Multi-Way IV Infusion SetDescarpack413201Fluid therapy
Needle 40 mm x 1.2 mmDescarpack353601Sterile needle for applying medicines and anesthetics.
Needle 40 mm x 1.6 mmWiltexANVISA registration: 10150470664Sterile needle for applying medicines and anesthetics.
Needle holdergeneric-Surgical instrument
Nylon 2 suture trheadShalon MedicalN502CTI40Surgical material
Ordinary pengeneric-Regular pen for taking notes
Physiological solution 0.9% 500 mL bagJP FarmaMS:1.0491.0070Fluid therapy
Polyglycolic acid 2 suture threadAtramatG4099-75HSurgical material
Potassium chlorideSamtecANVISA registration: 1559200010139Parenteral drug
Procedure glovesDescarpack122401Personal Protective Equipment (PPE)
Propofol (Provive)União QuímicaANVISA registration: 1049714490057Anesthetic
Ringer lactate solution 500 mL bagJP FarmaMS:1.0491.0061Fluid therapy
Riohex 0.5% clorexidine alcohol solutionRioquimica218690356Surgical asepsis
Riohex 2% clorexidine solution with surfactantRioquimica218690356Surgical asepsis
Scalp 21 GDescarpack421201Surgical material
Shoe coversgeneric-Personal Protective Equipment (PPE)
Sterile compressesCremerANVISA registration: 10071150065Surgical material
Sterile gauze padProcitexANVISA registration: 80245210083Surgical material
Sterile surgical drapes 140 cm x 90 cm Venkuri7010003Surgical material
Sterile surgical drapes 150 cm x 190 cm PolarFixF00208Surgical material
Sterile surgical glovesMucamboCA: 39.317Personal Protective Equipment (PPE)
Stethoscopegeneric-Surgical equipment
Surgical capDescarpack93201Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical gownDescarpack231101Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical maskDescarpack110701Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical scissors blunt-bluntgeneric-Surgical instrument
Surgical scissors sharp-sharpgeneric-Surgical instrument
Surgical staplerTradevet-Surgical material
Tekbond super glueTek Bond78072720030Surgical material
Thermometergeneric-Surgical equipment
Three Way StopcockSolidor374Surgical material
Tramadol hydroclorideAgener UniãoMAPA registration: SP-000292-5.000002Anesthetic
Transparent film dressingSkinupperANVISA registration: 82307460014Surgical material
Waterproof adhesive 10 cm x 4.5 cm generic364828Surgical material

References

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved