מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN
ניסויים בבעלי חיים רבים מסתמכים על נקודות זמן איסוף נתונים סופיות שנאספו מקציר ובדיקה של איברים ורקמות. השימוש בשיטות מתאימות לאיסוף איברים ורקמות יכול להשפיע על איכות הדגימות וניתוח הנתונים שלקט לבדיקת הרקמות. שיטת המתת החסד של החיה יכולה גם להשפיע על איכות הדגימות. כתב יד זה יתווה טכניקות נמק מתאימות לחולדות.
שיטת המתת החסד הנפוצה ביותר לעכברים וחולדות היא מנת יתר של גז פחמן דו חמצני (CO2). בהתאם לאיגוד הרפואי הווטרינרי האמריקאי (AVMA), השימוש בפחמן דוחמצני מקובל בתנאים הממזערים סלידה ומצוקה. 1 בעלי החיים נשארים בכלוב הביתי שלהם, אשר ממוקם לתוך תא. CO2 הוא הציג בהדרגה לתוך התא בשיעור עקירה מ 10% עד 30% של נפח התא / דקה, מה שגורם לבעלי החיים לאבד את ההכרה לפני תפיסת הכאב הקשורים הפעלת nociceptor על ידי חומצה פחמתית. לאחר מכן הזרימה נשמרת בתא לאחר התרחשות דום נשימה כדי להבטיח שהחיה מתה. מנת יתר של הרדמה במשאף מקובלת גם, במיוחד עבור פרויקטים הדורשים שימוש ברקמת ריאה, כמו CO2 גורם נזק לרקמת הריאה. הדממה של החיה עשוי להידרש גם עבור כמה ניסויים כדי להפחית את נפח הדם ברקמות.
הקלטה מדויקת של כל הממצאים חיונית במהלך נמק. יש ליזום טופס המתעד היסטוריה מלאה של החיה, כולל זיהוי בעלי חיים, מין, תנאי דיור, תאריך לידה, תאריך מוות, מספר מחקר /מספר פרוטוקול, ואת שמו של החוקר העיקרי. בדיקה פנימית גסה מתבצעת כאשר חללי הגוף נחשפים לחשוף את האיברים הפנימיים. יש לציין כל חריגה ברורה. 2
נקרופסיה וקציר רקמות חייבים להתחיל מיד לאחר המתת חסד של החיה, כמו דליפת חיידקים ממערכת העיכול יכול לבלבל כמה בדיקות. יש לראות את האיברים הפנימיים החל מחלל הבטן ועובר לחלל בית החזה. לפני הסרת כל דגימות רקמה, חשוב להתבונן באיברים במקום. 2 קציר איברים ורקמות לבדיקה היסתולוגית דורש כי הרקמות מוכנות כראוי. דגימות רקמה עבור היסתולוגיה צריך להיות 0.5-1 ס"מ בעובי כדי לאפשר חדירה מספקת של הפתרון הקיבוינטיבי. הקיבעון משמר רקמות ביולוגיות המונעות ריקבון, אוטוליזה ותיקון. זה גם עוצר כל תגובות ביוכימיות מתמשכות ועלול להגביר את הכוח המכני או היציבות של הרקמות המטופלות. המטרה הרחבה של קיבוע רקמות היא לשמר תאים ורכיבי רקמות כדי לאפשר הכנת חלקים דקים ומוכתמים. אלא אם צוין אחרת, הקיבעון הנפוץ ביותר הוא 10% פורמלין ניטרלי." פורמרין מוכן לשימוש של 10% עם אגירה נייטרלית זמין מסחרית מספקים גדולים. 3
איור 1. איברי בטן ובית החזה של חולדה נקבה.
איור 2. איברי בטן ובית החזה של חולדה זכרית.
1. בחינה חיצונית
בדיקה חיצונית גסה של הגוף, הכוללת בדיקה חזותית של הגוף עבור נגעים ומסות, צריכה להתבצע כשלב ראשוני בנקרופסיה. יש לבדוק את מעיל השיער עבור אזורים של נשירת שיער. השיניים והציפורניים מוערכים לצמיחה מוגזמת או ללבוש. יש לציין כל כתמים של הפרווה בפה, nares, עיניים, anal, ופתחים איברי המין יש לציין. בדיקות סרט, גירוד העור ובדיקות פרווה יש לבצע כדי לזהות טפילים חיצוניים (ראה נהלים להלן).
2. בדיקה פנימית ברוטו של חלל הבטן
3. איברי בטן
4. חלל בית החזה
5. ראש
השלב האחרון בפרויקטים מחקריים רבים הוא הנמק של בעלי החיים הניסיוניים. תצפית מפורטת על מבנים חיצוניים ופנימיים ואחריה איסוף רקמות לניתוח נוסף מספקת כמות גדולה של נתוני מחקר. טכניקות מתאימות להסרת רקמות ושימור עם פתרונות הקיבעון המתאימים חיוניות לפרשנות נכונה של הממצאים.
Skip to...
Videos from this collection:
Now Playing
Lab Animal Research
58.4K Views
Lab Animal Research
175.5K Views
Lab Animal Research
28.1K Views
Lab Animal Research
35.9K Views
Lab Animal Research
55.0K Views
Lab Animal Research
25.7K Views
Lab Animal Research
101.2K Views
Lab Animal Research
35.1K Views
Lab Animal Research
31.6K Views
Lab Animal Research
52.0K Views
Lab Animal Research
172.5K Views
Lab Animal Research
73.7K Views
Lab Animal Research
50.9K Views
Lab Animal Research
22.5K Views
Lab Animal Research
35.0K Views
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved