כדי להתחיל בהערכה ציטולוגית לאישור סנכרון מחזור אסטרה, יש לאסוף בעדינות את תאי הנרתיק מעכבר CD1 על ידי גלגול המקלון על דופן הנרתיק באמצעות מקלון קטן טרום לח למרוח את תאי הנרתיק שנאספו לתוך טיפה של 20 מיקרוליטר מים סטריליים על מגלשת מיקרוסקופ ולייבש באוויר. תחת מיקרוסקופ, השתמש בהגדלה של 100X עם תאורת שדה בהירה כדי להעריך את נוכחותם של תאי אפיתל קרניים. לצורך מניפולציה של צוואר הרחם, הניחו את הנקבה המושתלת על ראש כלוב עם מתלה תיל כ-0.5 שעות לפני ההזרעה ואפשרו לעכבר לתפוס את משטח מוט הכלוב בסמוך לבסיס זנב העכבר באמצעות האגודל והאצבע ולסובב את הזנב כלפי מעלה תוך ייצוב החיה.
הכנס את הקצה הקהה של מוט פלסטיק קטן לנרתיק כדי ליצור מגע עם צוואר הרחם ולרטוט במשך 30 שניות על ידי מגע עם הגוזם . כדי לבצע העברת זרע לא ניתוחית להזרעה מלאכותית, הניחו את מכשיר ההזרעה על פיפטה P200 המוגדרת ל-40 מיקרוליטר והסירו את כיסוי המגן. מוציאים אליקוט של דגימת הזרע הקיבול מהצלחת הממוקמת ב 37 מעלות צלזיוס ו -5% פחמן דו חמצני ומעבירים אותה לצלחת תרבית רקמה 35 מ"מ ללא שמן ב 37 מעלות צלזיוס, לוחצים על הבוכנה של פיפטה לתחנה הראשונה.
הורידו את קצה הצנתר לתוך דגימת הזרע וטענו באיטיות 40 מיקרוליטר מהדגימה למכשיר ההעברה. יש להסיר שאריות שמן מחלקו החיצוני של מכשיר ההזרעה באמצעות רקמה סופגת לפני הנחת פיפטה בצד. לאחר מכן הניחו את נקבת הנמען על ראש כלוב מתלה התיל.
החזיקו את נקבת העכבר במקומה על ידי אחיזה קרוב לבסיס הזנב, באמצעות האגודל והאצבע וזווית הזנב כלפי מעלה תוך ייצוב החיה. הכניסו את הספקולום הקטן לנרתיק והכניסו את צנתר מכשיר ההזרעה לתוך הספקולום דרך צוואר הרחם ולתוך הרחם. ברגע שרכזת המכשיר יוצרת קשר עם הספקולום, שחררו את הזרע על ידי לחיצה על בוכנה פיפטה לתחנה הראשונה.
לאחר שתסיים, הסר את המכשיר ואת ספקולום.
