דיסקציה ובידוד של רקמת שומן פריווסקולרית מורין (PVAT)

התחל על ידי ריסוס העכבר המסומת כראוי עם 75% אלכוהול כדי לחטא את העור. לאחר מכן הנח את העכבר במצב שכיבה. להרים את העור של אזור הבטן של החיה, ובאמצעות מספריים כירורגיים, לעשות חתך קטן בו.

לאחר מכן באמצעות המספריים, להפריד בבוטות את העור ואת שרירי הבטן מן האגן לצוואר, לאורך קו האמצע הגחוני. חשוף את הלב והריאות על ידי חיתוך הסרעפת והצלעות לאורך שני צידי קו האמצע. לאחר מכן, בזהירות להסיר את הכבד, הטחול, המעיים, ואת הכליה, הימנעות נזק לדופן המעי.

לאחר מכן, להסיר את הריאות ואת הוושט. כעת הרימו בעדינות את הלב באמצעות מלקחיים המוחזקים ביד אחת והפרידו את אבי העורקים מעמוד השדרה בעזרת מספריים כירורגיים המוחזקים ביד השנייה. לאחר מכן הניחו את הלב ואבי העורקים בצלחת פטרי 60 מ"מ, המכילה PBS בתוספת אנטיביוטיקה.

שלפו את המלקחיים המיקרוכירורגיים והמספריים המיקרוכירורגיים מהאלכוהול, ושטפו אותם ב-25 מיליליטר של PBS כדי להסיר אלכוהול עודף. עבודה תחת מיקרוסקופ סטריאו, להסיר את בלוטת התימוס ורקמות אחרות מהלב ואבי העורקים. לאחר מכן להסיר את הלב, עוזב את אבי העורקים עם רקמות שומן perivascular או PVATs.

מעבירים את אבי העורקים יחד עם ה-PVAT לצלחת פטרי נקייה בקוטר 60 מ"מ המכילה תוספת אנטיביוטיקה PBS. באמצעות זוג אחד של מלקחיים מיקרוכירורגיים, להחזיק את אבי העורקים, ובאמצעות זוג אחר, למשוך את רקמות השומן המחוברות כדי להפריד את PVAT מן אבי העורקים. הסר כמה שיותר רקמת כלי דם תוך גרימת נזק מינימלי ל- PVATs.

לבסוף, להעביר את PVAT שנאספו לתוך צינור מיקרוצנטריפוגה של שני מיליליטר, המכיל תוספת אנטיביוטיקה, גלוקוז גבוה, DMEM, ממוקם על קרח.