הכנת תמיסות נוגדנים חד-שבטיים (mAb) להעשרת חלבון התא המאכסן

התחל על ידי דילול מתאים של מוצרי תרופות נוגדנים חד שבטיים להעשרת חלבון התא המארח. כדי לדלל מוצרי תרופות עם ריכוזים מעל 50 מיליגרם למיליליטר להוסיף מים deionized 15 מיליגרם של נוגדן חד שבטי בצינור מיקרו צנטריפוגה שני מיליליטר. עבור מוצרי תרופות עם ריכוזים מתחת 50 מיליגרם למיליליטר להעביר 20 מיליגרם ממנו למכשיר מסנן צנטריפוגלי 10 קילודלטון.

צנטריפוגה את התוכן ב 14, 000 G במשך 25 דקות בטמפרטורת החדר להשאיר כ 100 מיקרוליטר של פתרון נשאר בצינור. לאחר מכן להוסיף 350 מיקרוליטר של חיץ היסטידין 10 מילימולרי, בעל pH של שישה לתוך המסנן ולאחר מכן מערבל את הצינור לפני צנטריפוגה אותו ב 14, 000 גרם במשך 25 דקות בטמפרטורת החדר. הפוך את המסנן והנח אותו בשפופרת איסוף הדגימות.

צנטריפוגה את הדגימה ב 1000 G במשך חמש דקות בטמפרטורת החדר, אחזור התמיסה כולה בצינור האיסוף. הוסף 200 מיקרוליטר של חיץ היסטידין 10 מילימולרי למסנן וצינור למעלה ולמטה כדי לשחזר את דגימת החלבון שנותרה. העבר את הפתרון כולו לאותו צינור איסוף.

מערבולת וסיבוב למטה כפי שהודגם בעבר. לאחר מדידת ריכוז הדגימה על ידי ננו טיפה, להתאים אותו ל 50 מיליגרם למיליליטר על ידי הוספת חיץ היסטידין. לבסוף, להעביר 300 מיקרוליטר של הדגימה לתוך צינור מיקרו צנטריפוגה שני מיליליטר.